CK20mRNA和hTERTmRNA表达与大肠癌患者外周血微转移的临床研究

目的：检测大肠癌患者外周血中细胞角蛋白20（CK20）mRNA和人端粒酶逆转录酶（hTERT）mRNA的表达,探讨其能否作为判断大肠癌患者外周血微转移及预后的分子生物学指标．方法：采用RT-PCR技术检测大肠癌32例、肠道良性病变11例和健康体检者20例的外周血中CK20mRNA和hTERTmRNA的定性和半定量表达．以人胃腺癌细胞株SGC-7901作阳性对照．实验数据采用SPSS13．0forWindows软件包统计分析．结果：①CK20mRNA和hTERTmRNA在大肠癌患者外周血中的阳性表达率分别为50．0％和56．2％,相对系数分别为0．89±0．17和0．88±0．17;在肠道良性病变患者外周血中阳性表达率分别为9．1％和0％,相对系数分别为0．11和0;在健康体检者外周血中阳性表达率及相对系数均为0．大肠癌患者与肠道良性病变患者、健康体检者相比,CK20mRNA和hTERTmRNA的表达均有统计学差异（P〈0．05）．②CK20mRNA和hTERTmRNA阳性表达率和相对系数与临床分期、远处转移均有关（P〈0．05）;其阳性表达率与浸润深度、淋巴结转移无关,但相对系数与之均有关（P〈0．05）．阳性表达者生存率低于阴性者（P〈0．05）．结论：大肠癌患者外周血中存在CK20mRNA和hTERTmRNA的表达,与临床分期及患者生存密切相关,提示CK20mRNA和hTERTmRNA的表达能预测大肠癌患者外周血微转移,可判断预后．     

CK20 mRNA在大肠癌患者外周血微转移中的表达

目的检测大肠癌患者外周血中细胞角蛋白20（CK20）mRNA的表达,探讨其能否作为判断大肠癌患者外周血微转移及预后的分子生物学指标。方法采用RT—PCR技术检测32例大肠癌患者、11例肠道良性病变患者和20例健康体检者外周血中CK20 mRNA定性和半定量表达。结果（1）CK20 mRNA在大肠癌患者中的阳性率为50．00％,相对系数为（0．89±0．17）;在肠道良性病变患者中阳性率为9．09％,相对系数为0．11;在健康体检者中阳性率及相对系数均为0。大肠癌患者与肠道良性病变患者、健康体检者相比,CK20 mRNA明显增高（P〈0．05）。（2）CK20 mRNA阳性率和相对系数在不同临床分期、远处转移中差异有统计学意义（P〈0．05）;其阳性率在浸润深度、淋巴结转移中无统计学意义,但相对系数有统计学意义（P〈0．05）。阳性者生存率低于阴性者（P〈0．05）。（3）CK20 mRNA与癌胚抗原（CEA）、糖链抗原199（CA199）表达呈正相关（P〈0．05）。结论CK20 mRNA的表达能预测大肠癌患者外周血微转移,可判断预后。     

胃癌患者外周血hTERT mRNA的表达及意义

目的分析hTERT mRNA是否可以作为预测胃癌患者外周血微转移的分子生物学指标。方法RT—PCR法检测40例胃癌患者、20例慢性萎缩性胃炎患者和20例健康体检者外周血中hTERT mRNA的表达。结果hTERT mRNA在胃癌患者外周血中阳性表达率明显升高;hTERT mRNA与CEA、CA199的表达呈正相关（P〈0．05）;hTERT mRNA阳性表达率高于CA199（P〈0．05）。结论RT—PCR技术检测外周血hTERT mRNA表达可作为胃癌患者外周血微转移的预测指标。     

大肠癌患者外周血微转移的分子诊断

目的 探讨大肠癌患者外周血微转移的分子诊断方法。方法 以非同位素RT-PCR方法，检测21例大肠癌患者术前和术后外周血中大肠癌细胞的标志物细胞角蛋白20(cytokemtin，CK20)，同时检测10例健康者外周血作对照。结果 21例病人外周血中查出CK20阳性表达14例，阳性率66．67％，10例健康者外周血均无CK20表达。结论 检测大肠癌患者外周血微转移癌细胞有助于早期诊断大肠癌肝脏微转移。     

肺癌患者外周血CK19 mRNA和CEA mRNA表达的检测及临床意义

目的探讨CK19 mRNA、CEA mRNA能否作为判断肺癌血源性微转移的参考指标.方法取67例肺癌患者及37例健康体检者外周血,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测上述两个指标的表达.结果肺癌组外周血中CK19 mRNA阳性率(57.6%)及CEA mRNA阳性率(52.2%)均显著高于健康对照组的2.7%和5.4%(均P＜0.01),两个指标联合检测能将对肺癌微转移诊断的灵敏度提高至76.1%;CK19 mRNA的表达与临床分期相关(P＜0.01),CEA mRNA的表达与组织类型相关(P＜0.05).结论 CK19 mRNA和CEAmRNA可作为判断肺癌血源性微转移的参考指标,两者联检可提高诊断价值.     

CK19和CEA mRNA表达与乳腺癌外周血微转移的相关性研究

目的 检测乳腺癌患者外周血中细胞角蛋白19(CK19)和癌胚抗原(CEA)mRNA的表达,探讨其表达是否可作为判断外周血微转移及预后的分子生物学指标.方法 采用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)技术检测45例术前乳腺癌患者及30例乳腺良性病变患者外周血中CK19和CEA mRNA的表达情况.结果 CK19和CEA mRNA在乳腺癌患者血清中阳性率分别为62.2%和53.3%,在30例乳腺良性患者血清中CK19 mRNA阳性率为3.3%,无CEA mRNA表达.乳腺癌患者和良性肿瘤患者血清中CK19、CEA mRNA表达阳性率比较差异有统计学意义(P＜0.01).CK19和CEA mRNA阳性率与临床分期、淋巴结转移均有关,二者表达呈正相关(P＜0.01).结论 乳腺癌患者外周血中CK19和CEA mRNA表达与临床分期密切相关,提示两项指标有望预测乳腺癌外周血微转移和判断预后.     

大肠癌淋巴结中CEA、CK20和MMP-7mRNA表达诊断肿瘤微转移的意义

目的探讨大肠癌淋巴结中癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白(CK20)和基质金属蛋白酶-7(MMP-7)mRNA的表达及其与肿瘤微转移的关系。方法分别用RT-PCR技术检测CEA、CK20、MMP-7基因的mRNA在106例大肠癌患者628个淋巴结及18例良性肠道疾病患者45个淋巴结中的表达情况,并与常规病理学检查进行比较。结果大肠癌患者淋巴结中CEA、CK20、MMP-7mRNA表达阳性率分别为41.6%(261/628)、42.7%(268/628)和56.1%(352/628),病理学检查转移阳性率为22.3%(140/628);CEA、CK20、MMP-7mRNA的阳性检出率均明显高于病理学阳性检出率(均P<0.01)。而18例良性肠道疾病患者45个淋巴结三者表达均阴性。结论RT-PCR技术检测淋巴结CEA、CK20、MMP-7mRNA的表达可用于诊断大肠癌的微转移,其结果较常规病理学检查敏感,对临床分期、预后评估具有重要意义。     

改良巢式逆转录聚合酶链反应检测大肠癌血中微转移

目的探讨改良巢式RT-PCR法检测大肠癌患者外周血中CK20mRNA的表达情况,并分析其与微转移的关系,建立一种简便、快速的检测血中癌细胞微转移的方法。方法采用改良的巢式RT-PCR技术检测大肠癌患者及正常对照组外周血CK20mRNA的表达。结果CK20mRNA在正常对照组中均无表达,在大肠癌患者中阳性表达率为55.4%（62/112）。不同细胞分化程度大肠癌患者其外周血中CK20mRNA阳性表达率无显著性差异（P〉0.05）;而不同Dukes分期大肠癌患者其外周血中CK20mRNA阳性表达率有显著性差异（P〈0.05）。结论改良的巢式RT-PCR技术检测血中微转移大肠癌细胞的CK20mRNA具有简便、快速、灵敏的优点,有助于癌细胞微转移的早期诊断,有助于指导辅助化疗和监测疗效。     

定量RT-PCR检测结直肠癌患者外周血CK20 mRNA的表达

目的:检测结直肠癌患者外周血中细胞角蛋白20(CK20)mRNA的表达水平,并探讨其临床价值.方法:采用实时荧光定量RT-PCR法检测51例经病理学确诊的结直肠癌患者和30例健康对照者外周血CK20 mRNA的表达水平.结果:结直肠癌患者中CK20 mRNA阳性率为27.45%,而健康对照组阳性率为6.67%,两者相比差异有统计学意义(P<0.025).随着临床分期的提高,患者外周血中CK20 mRNA的表达率随之提高,但各分期间阳性率相比无显著统计学意义(P>0.05).Dukes'C期与D期患者中>10拷贝/ml者高于A期与B期患者.结论:检测结直肠癌患者外周血CK20 mRNA的表达水平可发现早期脱落的肿瘤细胞,对肿瘤微转移的诊断有一定的提示意义.     

肺癌患者外周血BJ-TSA-9,LUNX和CK19 mRNA的检测及其临床意义

目的 观察肺癌患者外周血循环中BJ-TSA-9,LUNX和CK19mRNA的表达情况,并探讨BJ-TSA-9,LUNX和CK19mRNA联合检测的临床意义.方法 采用巢式逆转录聚合酶链反应(Nested-RT-PCR)技术检测84例肺癌患者、32例肺良性病变患者和20例健康人.结果 肺癌患者外周血中BJ-TSA-9,LUNX和CK19 mRNA阳性率分别为59.5%,40.4%和22.6%.32例良性病变者外周血中BJ-TSA-9,LUNX和CK19mRNA阳性率分别为9.3%,12.5%和6.3%.20例健康志愿者外周血中无BJ-TSA-9,LUNX和CK19mRNA表达.Ⅳ期肺癌患者BJ-TSA-9,LUNX和CK19mRNA阳性率明显高于Ⅱ期和Ⅲ期(P<0.05).结论 BJ-TSA-9,LUNX和CK19 mRNA均可作为RT-PCR法检测肺癌患者外周血微转移的肿瘤标志物.BJ-TSA-9mRNA在有效率上优于LUNX mRNA和CK19 mRNA,肺癌患者外周血中检测出BJ-TSA-9 mRNA提示可能有血循环转移.     

乳腺癌患者外周血中角蛋白19 mRNA,乳腺小粘蛋白mRNA和泌乳素诱导蛋白mRNA的检测及其临床意义

目的:研究乳腺癌患者外周血中角蛋白(CK)19mRNA,乳腺小粘蛋白(SBEM)mRNA和泌乳素诱导蛋白(PIP)mRNA的表达,并探讨三者在微转移检测中的意义。方法:用RT-PCR检测乳腺癌患者50例、结直肠癌20例、乳腺良性肿瘤21例、健康者20例外周血中的CK19mRNA、SBEM mRNA、PIP mRNA。结果:CK19mRNA在乳腺癌组的阳性率(36.0%)明显高于乳腺良性肿瘤组(0.0%,P<0.05)与健康者(0.0%,P<0.05)。SBEM mRNA、PIP mRNA在乳腺癌组的阳性率(28.0%、18.0%)明显高于其它3组(0.0%,P<0.05)。联合检测3个基因,可将阳性率提高到62.0%。结论:乳腺癌患者外周血中的SBEM mRNA、PIP mRNA均可能作为微转移标志物;而CK19mRNA作为乳腺癌微转移标志物的特异性尚待探讨;联合检测三者可提高乳腺癌外周血微转移的检出率。     

大肠癌患者外周血CK20表达及p53基因突变的研究

目的建立高效,快速的外周血Cytokeratin20(CK20)表达的检测方法,探讨大肠癌患者外周血中CK20的表达与微转移的关系,研究大肠癌与P53基因突变的关系.方法,运用荧光监测技术结合RT-PCR,检测36例大肠癌患者术前后不同时间外周血中的CK20的表达,用SSCP技术对大肠癌患者进行P53基因突变检测.结果36例患者术前的外周血中检出CK20表达的有27例,阳性率为75%手术后24h患者外周血中检出CK20表达的有30例,阳性率为83.3%,术后早期化疗结束后仅13例为阳性,阳性率为36%.36表达可以监测癌症微转移的发生,简便快速,检出率高.     

大肠癌组织血管生成与患者外周血CK20mRNA表达的临床研究

目的观察大肠癌组织中微血管密度、血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达与大肠癌患者外围血癌细胞微转移的关系.方法采用S-P免疫组织化学法检测了58例大肠癌组织中的微血管密度(MVD)和VEGF的表达,用巢式RT-PCR法检测了大肠癌患者外周血中癌细胞微转移情况并分析其与病理指标的关系.结果 58例大肠癌组织中35例高中分化MVD计数为30.2±12.7,低分化大肠癌23例MVD计数为86.6±19.1;26例大肠癌组织中VEGF呈阳性染色(44.8%).MVD计数及VEGF阳性表达与大肠癌分化程度、Dukes分期、有无区域淋巴结转移及远处转移密切相关(P<0.05或P<0.01).58例大肠癌患者外周血中32例CK20mRNA阳性表达(32/58),术后48 h有35例阳性表达(35/58),其中根治性切除组有21例阳性表达(21/44),非根治性手术组12例阳性表达(12/14),21例根治性切除患者术后7～14 d有11例转为阴性,12例非根治性切除患者术后7～14 d有11例阳性表达.CK20mRNA阳性表达与大肠癌病理分化程度无关,但与Dukes分期、区域淋巴结转移及远处转移情况相关(P<0.01).CK20mRNA阳性表达患者大肠癌组织中MVD计数(88.5±15.1)与VEGF阳性表达率(65.6%)明显高于CK20mRNA阴性表达患者的MVD计数(31.0±12.9)和VEGF阳性表达率(19.2%)(分别P<0.01,P<0.001).结论大肠癌组织中MVD和VEGF阳性表达与大肠癌的病理分化程度、Dukes分期、淋巴结及远处转移情况相关.大肠癌组织血管生成与周围静脉血中癌细胞微转移情况密切相关.CK20mRNA的检测对大肠癌预后判断、疗效评估及指导综合治疗有重要意义.     

巢式PCR检测胃癌患者外周血CK19 mRNA的临床意义

目的：对外周血CK19 mRNA基因表达的检测,探讨对胃癌患者微转移的诊断价值。方法：采用巢式RT-PCR方法检测63例胃癌患者,20例健康志愿者外周血CK19 mRNA的表达情况。结果：胃癌患者外周血中CK19 mRNA的阳性检出率为36.5%,并与肿瘤TNM分期、肿瘤浸润深度有关（P〈0.05）,而与年龄、性别、肿瘤分化程度、肿瘤大小、有无淋巴结转移无关（P〉0.05）,而健康志愿者外周血中CK19 mR-NA无1例阳性表达。结论：CK19 mRNA可以作为判断胃癌患者外周血微转移的肿瘤标志物。     

大肠癌患者外周血CK—20mRNA基因表达的初步研究

目的 探讨大肠癌患者外周血ＣＫ－２０ｍＲＮＡ（细胞角蛋白－２０ｍＲＮＡ）基因表达及其临床意义。方法 用ＲＴ－ＰＣＲ９志录－多聚酶链反应）法检测了３４例大肠癌患者外周血ＣＫ－２０ｍＲＮＡ的表达情况。结果 按Ｄｕｋｅｓ分期外周血ＣＫ－２０ｍＲＮＡ的表达率分别是：Ａ期２０％,Ｂ期３７．５％,Ｃ期５３．３％,Ｄ期８３．３％。结论 大肠癌患者外周血ＣＫ－２０ｍＲＮＡ的基因表达与Ｄｕｋｅｓ分期有一定关系,并且     

腹腔镜和开腹结直肠癌根治手术患者外周血中CK20mRNA的表达及意义

目的研究结直肠癌患者外周血角蛋白20(cytokeratin20,CK20)mRNA的变化,探讨腹腔镜在结直肠癌手术治疗中的应用价值。方法采用反转录-聚合酶链(RT-PCR)法检测37例行根治手术治疗的结直肠癌患者和8例非恶性病变腹部手术患者的外周血CK20mRNA的表达。结果8例良性病变腹部手术患者外周血CK20mRNA无明显表达。37例结直肠癌患者总的CK20mRNA阳性表达率为39.6%(44/111),且术前、术中和术后CK20mRNA的阳性表达率比较差异无统计学意义(P>0.05)。16例开腹手术组和21例腹腔镜组术前、术中、术后相比,各组间CK20mRNA阳性表达率差异亦无统计学意义(P>0.05)。结论开腹手术和腹腔镜手术2种手术方式对CK20mRNA在结直肠癌患者的外周血中的表达差异无统计学意义。     

结直肠癌患者外周血中人端粒酶逆转录酶mRNA的表达及其临床意义

目的探讨结直肠癌患者外周血中人端粒酶亚单位hTERTmRNA的表达及其意义。方法以hTERTmRNA为靶基因运用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测76例结直肠癌、22例良性大肠疾病患者和30例正常对照人群外周血中hTERTmRNA的表达。结果76例结直肠癌患者中有52例外周血hTERTmRNA表达阳性，阳性率为68.4％，22例良性大肠疾病患者中有1例外周血bTERTmRNA表达阳性，二者比较有显著性差异（P〈0．001）；30例正常对照人群外周血中均无hTERTmRNA表达。hTERTmRNA的阳性检出率与肿瘤分化程度和TNM分期密切相关，与其他因素无相关性。结论外周血细胞中hTERTmRNA的表达与肿瘤分期相关，有可能作为结直肠癌微转移的一个监测指标。