“恐伤肾”与即早基因表达的相关性研究

为观察“恐伤肾”与即早基因表达Ｃ－ｆｏｓ的相关性，采用惊恐刺激大鼠，制造“恐伤肾”大鼠模型，通过免疫组织化学方法，测定大鼠大脑各部位Ｃ－ｆｏｓ的活性，结果，惊恐刺激可引起大鼠在脑马与丘脑的Ｃ－ｆｏｓ表达明显的增高，揭示“恐伤肾”的微观机理之一可能与脑部即早基因表达相关。     

加味金匮肾气丸对糖尿病大鼠脑海马CA1区nNOS表达的影响

目的:探讨加味金匮肾气丸对糖尿病大鼠脑海马CA1区nNOS表达的影响.方法:腹腔内注射链脲佐菌素(STZ)制作糖尿病大鼠模型,造模后以免疫组化法观察加味金匮肾气丸对大鼠脑海马CA1区神经元nNOs表达的影响.结果:加味金匮肾气丸治疗组比糖尿病大鼠nNOS表达增加(P＜0.05).结论:加味金匮肾气丸可以有效防治糖尿病大...     

蜕皮甾酮对大鼠脑内c-fos表达的影响

目的观察大鼠海马内给予Aβ25-35后c-fos基因在不同脑区表达的变化以及蜕皮甾酮的影响.方法 用立体定位仪向大鼠双侧海马内微注射Aβ25-35,免疫组织化学染色观察c-fos基因的蛋白表达情况,采用BI 2000图象处理系统中的免疫组化模块进行c-fos表达的定量分析.结果对照组的c-fos在海马、丘脑及大脑皮层均有较高的表达;海马内注射Aβ25-35后,各脑区c-fos基因的表达均明显降低(P＜0.01);而蜕皮甾酮治疗组c-fos基因的表达相对增加:低剂量组,海马P＜0.05,丘脑P＜0.05;高剂量组,海马P＜0.01,丘脑P＜0.01,皮层P＜0.01.结论海马内注射Aβ25-35后可明显降低海马、丘脑及大脑皮层c-fos基因的表达;蜕皮甾酮可抑制Aβ25-35的作用,使海马、丘脑及大脑皮层的c-fos基因表达相对增加.     

金匮肾气丸抗自由基和细胞凋亡的作用

目的　探讨中药经方金匮肾气丸的抗衰老作用及其机制 .方法　 15 mo龄 SD大鼠被随机分为 2组 ,实验组大鼠口饲金匮肾气丸浓缩制剂 3 mo.以大鼠血液 SOD活性水平和 MDA含量以及肾上腺和脑垂体组织的细胞凋亡率作为检测指标进行检测 .结果　连续用药 2 4d后 ,实验组大鼠血液SOD活性水平明显高于对照组 (P<0 .0 5 ) .实验组大鼠血液MDA水平在用药 32 d后明显低于对照组 (P<0 .0 5 ) .以上变化随用药时间的延长呈更显著趋势 (至 48d时均为 P <0 .0 1) .用药 90 d后实验组大鼠肾上腺、脑垂体组织细胞凋亡率明显低于对照组 (肾上腺 :P<0 .0 1;脑垂体 :P<0 .0 1) .结论　金匮肾气丸能够显著提高大鼠血液 SOD活性 ,抑制自由基生成并降低 MDA水平 ,细胞凋亡率显著降低 .这些作用可能是金匮肾气丸抗衰老作用的重要的机制之一     

金匮肾气丸对糖尿病复合脑缺血模型大鼠认知功能障碍的影响及其机制研究

目的探讨金匮肾气丸对于糖尿病复合脑缺血模型大鼠认知功能的影响及其机制。方法将SD大鼠随机分为正常对照组和模型组。正常对照组用普通基础饲料饲养,模型组用高脂高糖饲料饲养,30 d后建立2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠,对糖尿病大鼠施以双侧颈动脉缺血再灌手术诱导糖尿病脑病模型。将模型组大鼠随机分为糖尿病模型组、金匮肾气丸组及二甲双胍组,采用Morris水迷宫实验对动物行为学进行评价,处死大鼠后取脑海马组织,采用Western blot法检测各组大鼠海马神经元Ng和mGluR5蛋白表达情况。结果水迷宫实验结果显示,与糖尿病模型组比较,金匮肾气丸组及二甲双胍组大鼠逃避潜伏期和探索距离缩短(P0.05或P0.01),目标象限游泳时间显著延长,站台穿越次数显著增加(P0.05);大鼠海马神经元中Ng和mGluR5蛋白表达恢复,并且呈剂量依赖性。结论金匮肾气丸可明显改善糖尿病脑病模型大鼠认知障碍,并增强其大脑海马区Ng和mGluR5蛋白表达。     

金匮肾气丸对大鼠肾阳虚症的干预研究

目的:探讨金匮肾气丸对生精功能障碍大鼠的影响及作用机理.方法:成年雄性SD大鼠100只随机分成5组:空白对照组(正常组)、高剂量组、中剂量组、低剂量组、模型组,除正常组外,其他组大鼠用氢化可的松注射液制造肾阳虚模型.在造模的同时分别对高、中、低剂量组用金匮肾气丸混悬液灌胃,连续用药30d.测血清睾酮含量,取附睾液镜下观察精子密度和活动百分率,光镜观察睾丸的显微结构.结果:金匮肾气丸可使生精功能障碍大鼠上述指标得到一定程度的改善,并趋近于空白对照组水平.结论:金匮肾气丸对大鼠肾阳虚模型有一定的治疗作用.     

金匮肾气丸对腺嘌呤致雄性不育模型大鼠精子质量与性激素含量的影响

目的:观察金匮肾气丸对腺嘌呤致雄性不育大鼠精子质量及性激素含量的影响。方法:30只SD大鼠随机分为空白对照组、腺嘌呤组、金匮肾气丸组。应用自动精子质量分析仪检测实验大鼠的精子质量(精子密度、活率及活动度);同时应用放射免疫法测定血清睾酮(T)、促黄体激素(LH)和促卵泡激素(FSH)的含量;透射电镜观察实验大鼠睾丸组织精子鞭毛密度,支持细胞、精原细胞、初级精母细胞等结构。结果:与腺嘌呤组比较,金匮肾气丸组大鼠肾阳虚症状显著改善,精子密度、活率及活动度明显提高(P<0.05);金匮肾气丸组大鼠血清T含量明显提高(P<0.05),LH、FSH含量降低(P<0.05);电镜下金匮肾气丸组大鼠精子数量明显增多,大鼠睾丸组织受损的支持细胞明显改善。结论:金匮肾气丸可提高腺嘌呤致不育模型大鼠的精子质量,其机制之一可能是通过提高血清中T的含量及保护受损的支持细胞这一间接作用实现的。     

金匮肾气丸对STZ糖尿病模型大鼠免疫功能的影响

目的 观察金匮肾气丸对糖尿病大鼠免疫功能的影响.方法 2月龄雌性SD大鼠分为4组,每组10只:对照组,模型组,金匮肾气丸低、高剂量组.采用STZ诱发大鼠糖尿病模型,测定各组大鼠体质量,血糖,血清TNF-α、IL-6水平,血CD4+、CD8+T细胞计数,以及体外巨噬细胞吞噬率,胸腺、脾指数.结果 与模型组比较,金匮肾气丸组大鼠体质量,血CD4+、CD8+T细胞计数,巨噬细胞吞噬率,胸腺、脾指数明显升高(P＜0.05或P＜0.01);血糖,血清TNF-α、IL-6水平明显下降(P＜0.05或P＜0.01).结论 金匮肾气丸具有增强糖尿病大鼠免疫功能的作用.     

金匮肾气丸温补肾阳药理作用的实验研究

目的 研究金匮肾气丸补肾阳药理作用.方法 检测60只大鼠血清激素,对比肾阳虚大鼠血清激素水平.结果 高剂量组(225.54±29.66)低于模型对照组(102.35±28.54),P<0.01;和正常对照组(239.55±25.66)对比,模型对照组血清T水平较低,和模型对照组对比,金匮肾气丸低剂量组(163.75±21.45)血清内T水平较高,P<0.05.结论 金匮肾气丸温补肾阳作用显著.     

金匮肾气丸治疗微波辐射性雄小鼠生殖功能障碍的疗效研究

目的 研究金匮肾气丸治疗微波辐射性雄小鼠生殖功能障碍的疗效.方法 将BALB/C小鼠随机分成7组并施加处理因素.平行对照组:不做辐射处理;基准辐射对照组、基准金匮肾气丸组:2 450 MHz连续微波,功率密度为10 mW/cm2,辐射18 d,每天辐射1h;加时辐射对照组、加时金匮肾气丸组:每天辐射时间增至4h;加功辐射对照组、加功金匮肾气丸组:功率密度增至40mW/cm2.对照组用生理盐水、金匮肾气丸组用金匮肾气丸分别灌胃.观察各组小鼠精子总活力(PR+ NP)、精子前向运动率(PR)、精子畸形率及睾体比和睾丸组织形态学改变.结果 微波辐射可使小鼠精子PR+ NP及PR显著降低,畸形率显著增加;增加辐射时间及强度可以使小鼠精子PR更加降低,而精子PR+ NP、畸形率未见显著改变.在基准微波辐射及加时微波辐射时睾体比没有显著改变,但增加微波辐射强度时,睾体比显著变小.金匮肾气丸能提高小鼠精子PR+ NP及PR,对微波辐射致小鼠精子PR+ NP及PR降低有明显的治疗作用,并且使之恢复了正常.金匮肾气丸降低精子畸形率,对微波辐射致小鼠精子畸形有明显的治疗效果,但没有恢复正常.基准微波辐射、加时微波辐射对小鼠睾丸重量没有显著影响,用药后仍然无显著差别;而加功微波辐射使小鼠睾体比显著降低,金匮肾气丸提高了微波辐射小鼠的睾体比,并且治疗后使之恢复正常.结论 金匮肾气丸治疗微波辐射性雄小鼠生殖功能障碍疗效显著.     

电针和福尔马林诱发大鼠脑c-fos基因表达研究

目的：从分子水平探讨电针镇痛的机理,方法：采用ＲＮＡ 斑点杂交技术比较电针与福尔马林刺激时大鼠脑内ｃ ｆｏｓ ｍＲＮＡ 表达的改变,并观察吗啡对ｃ ｆｏｓ ｍＲＮＡ 表达的影响。结果：电针刺激具有明显的镇痛作用。电针和福尔马林刺激后均可诱发ｃ ｆｏｓ ｍ ＲＮＡ表达增强。吗啡能明显抑制福尔马林诱导ｃ ｆｏｓ ｍＲＮＡ 表达,而对电针诱导的ｃ ｆｏｓ ｍ ＲＮＡ表达则无明显影响。结论：ｃ ｆｏｓ 基因可能参与痛觉调制,电针镇痛并不等同于伤害性刺激。     

用抑制消减杂交技术研究惊恐致肾虚小鼠差异表达基因

目的用抑制消减杂交技术研究惊恐致肾虚及中药金匮肾气丸治疗后小鼠的差异表达基因.方法实验分模型组、治疗组和对照组,通过"猫吓鼠"法与"水面悬吊应激"法相结合建立小鼠肾虚证动物模型,对治疗组小鼠进行中药金匮肾气丸的治疗.应用SMART(Switch Mechanism At 5 end of RNA Template)技术逆转录并扩增以获取造模及治疗前后小鼠血液的全长总cDNA;运用正向和反向抑制消减杂交技术获得正反2个方向、3种状态下(肾虚、治疗后以及正常生理状态)的6组差异表达cDNA片段,进而获得了6个cDNA文库.结果获得6个cDNA文库,为大规模鉴定、筛选靶基因奠定了基础.结论惊恐所致肾虚与一些基因的差异表达相关,而中药金匮肾气丸能影响这种改变,使其差异表达基因谱趋近于正常生理状态.     

艾灸对钩端螺旋体感染豚鼠延髓中c-fos表达的影响

选用３９ＫＤａ的钩端螺旋体外膜蛋白免疫豚鼠并施予艾灸,研究艾灸对伤害性刺激所和延髓中枢原癌基因ｃ－ｆｏｓ表达的影响。结果表明：灸加ＯｍｐＬ３９,单用ＯｍｐＬ３９和单纯艾灸均能使豚鼠体内出血程度减轻,抑制内部伤害所致ｃ－ｆｏｓ表达的中枢积累,且灸加ＯｍｐＬ３９组作用最强,单用ＯｍｐＬ３９组次之,单纯艾灸组再次之。     

清开灵对谷氨酸神经毒性脑损伤脑组织c-fos基因表达的影响

采用免疫组织化学方法及放射配体结合分析法,观察清开灵及侧脑室注射c-fos反义寡核苷酸阻断c-fos基因表达后脑组织蛋白激酶C(PKC)表达量和Glu的N_甲基_D_天门冬氨酸(NMDA)受体的数目、亲和力变化的影响.结果:清开灵可有效地抑制Glu所致的脑组织c-fos蛋白及PKC蛋白的表达增强,并下调Glu的NMDA受体数目;而c-fos反义及正义寡核苷酸对Glu的NMDA受体数目及Glu所致的脑组织PKC蛋白表达增多均无明显影响.结论:清开灵抗Glu神经毒性的脑保护作用的机制与其抑制c-fos和PKC蛋白基因的表达及下调NMDA受体数目有关.     

芦笋多糖对衰老小鼠c-fos基因表达的影响

目的：研究芦笋多糖对衰老小鼠c-fos基因表达的影响,探讨芦笋多糖的抗衰老机制。方法：用D-半乳糖建立衰老小鼠模型,以芦笋多糖水煎剂治疗,RT-PCR法和免疫组化法观察小鼠脑海马c-fos的表达。结果：芦笋多糖治疗后,c-fos基因mRNA表达和蛋白表达均升高（P〈0.01）。结论：芦笋多糖能增加D-半乳糖衰老小鼠c-fos基因mRNA及蛋白表达,从而起到抗衰老的作用。     

Thermal injuries induce gene expression of endogenous c-fos, c-myc and bFGF in burned tissues

Objective To investigate the expression sequence and distribution characteristics of the protooncogenes cfos,c-myc and endogenous basic fibroblast growth factor(bFGF) genes in burned tissues,and to explore the possible effects of changes in these genes‘ functions on wound healing.Methods Partial-thickness burns of 30% TBSA were esablished on backs of Wistar rats.In situ hybridization and histological methods were used to detect expression of c-fos,c-myc and bFGF genes in normal and burned tissue at 3h,6h,1d,3d,7d and 14 d postburn. Results Although expression of c-fos and c-myc genes and bFGF gene could be found in normal skin,the expression of all three were markedly induced by burn wounds and the expression models in sequence and distribution were quite different.Expression of c-fos gene increased and peaked at 6h.Signals were mainly localized in both nuclei of dermal fibroblasts and monocytes.The expression of bFGF gene increased at 6h and peaked at 1 d postburn,and was distributed in the cytoplasm of fibroblasts.C-myc gene peaked 3 d postburn and was also distributed in the cytoplasm of fibroblasts.Conclusions These results indicated that thermal injury could induce the expression of c-fos.c-myc and bFGF at gene level,showing phasic control and regional distribution.The phasic expression of these genes suggests that there is an interaction between protooncogenes and bFGF,which may play an important role in wound healing.The different expressions of c-fos and c-myc play an inducing role in regulating bFGF,and in turn affect wound healing.     

尼莫地平对下丘脑神经元内c-fos表达的影响

将尼莫地平用做钙通道阻断剂，Ｎ 甲基天门冬氨酸做为受体激活剂，诱导ｃ ｆｏｓ基因表达，探讨尼莫地平对ｃ ｆｏｓ基因表达的影响．结果发现，Ｎ 甲基天门冬氨酸受体能诱导下丘脑视上核及室旁核神经元中ｃ ｆｏｓ基因的表达，且ｆｏｓ阳性细胞占细胞总数的多数．Ｎ 甲基天门冬氨酸诱导的ｃ ｆｏｓ有自己的时程，３０ｍｉｎ开始表达，１～２ｈ达高峰，４～８ｈ消失．     

胰岛素对血管平滑肌细胞增殖及原癌基因c－fos，c－myc异常表达的实验研究

我们观察了不同浓度的胰岛素对体外培养人血管平滑肌细胞增殖的影响，及其该过程中原癌基因ｃ－ｆｏｓ，ｃ－ｍｙｃ的表达。结果表明，胰岛素能促进血管平滑肌细胞（ＳＭＣ）增殖，即：ＳＭＣ数目的增多，ＳＭＣＤＮＡ的合成；胰岛素能促进原癌基因ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｍｙｃ的异常表达；且以上作用均存在着剂量－效应关系。这些结果提示，高胰岛素血症促进动脉粥样硬化（ＡＳ）发生、发展可能是通过促进某些原癌基因异常表达，进而促进ＳＭＣ增殖而实现的。这也许是某些基因治疗ＡＳ的基础。     

氧化修饰高密度脂蛋白对培养人动脉平滑肌细胞原癌基因c-fos及PDGF受体基因表达的影响

动脉平滑肌细胞 (sm ooth muscle cell,SMC)的增殖在动脉粥样硬化 (atherosclerosis,AS)的形成过程中极其重要。利用体外培养的人主动脉 SMC,观察了天然高密度脂蛋白 (Native high density lipoprotein N-HDL)及氧化修饰 HDL(OX- HDL)对培养的人主动脉 SMC原癌基因 c- fos及 PDGF受体基因转录表达的影响。结果表明 :1 N- HDL 对 SMC c- fos,PDGF受体基因表达无影响 (P>0 .0 5 ) ;2 OX- HDL 对 SMC PDGF受体基因表达无影响 (P>0 .0 5 ) ;3OX- HDL使 SMC c- fos基因表达显著增强 (P<0 .0 1 ) .上述结果表明 ,OX- HDL的致 AS作用可能与刺激 SMC c- fos原癌基因表达增加有关     

钙调素及其依赖性激酶对即早基因c-fos表达的影响

目的 探讨钙调素及其依赖性激酶对脊髓灰质c-fos基因表达的影响.方法 用原位杂交方法分别观察高钙环境下离体培养脊髓组织在应用钙调素及其依赖性激酶拮抗剂(三氟啦嗪及KN-62)环境下30 min至12 h不同时间点c-fos基因的表达变化.结果 高钙浓度组信号明显较对照组、三氟啦嗪组及KN-62组强.高钙浓度组c-fos mRNA杂交信号在4～6 h时间点达高峰.三氟啦嗪组及KN-62组杂交信号在6 h时间点较对照组增高,但比高钙离子浓度组弱.结论 钙离子介导c-fos表达可能是与钙调素形成复合物激活CAM-PK实现的.