4种细胞因子对K562/S及其耐药细胞株K562/A02积蓄柔红霉素的影响

目的通过检测４种常用细胞因子对白血病细胞株Ｋ５６２／Ｓ及其多药耐药细胞株Ｋ５６２／Ａ０２积蓄柔红霉素（ＤＮＲ）能力的影响,评价细胞因子在抗白血病细胞多药耐药性方面的应用前景。方法用流式细胞仪及荧光法检测重组人α－干扰素（ＩＦＮ－α）、白细胞介素２（ＩＬ－２）、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）、重组人粒－单集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）对Ｋ５６２／Ｓ及Ｋ５６２／Ａ０２积蓄柔红霉素能力的影响。结果ＩＬ－２、ＴＮＦ、ＧＭ－ＣＳＦ作用后Ｋ５６２／Ｓ及Ｋ５６２／Ａ０２细胞株对柔红霉素的积蓄无改变,而ＩＦＮ－α可显著提高耐药细胞系Ｋ５６２／Ａ０２细胞内ＤＮＲ浓度,在１５０ｍｉｎ时升高了４.０１倍（Ｐ＜０.０５）。结论小剂量（５００Ｕ／ｍｌ） α－干扰素作用后,多药耐药细胞株 Ｋ５６２／Ａ０２对抗肿瘤药物ＤＮＲ的积蓄作用大大提高,提示ＩＦＮ－α具有提高耐药细胞株细胞内药物浓度、恢复其药物敏感性、逆转多药耐药性的作用。     

环孢菌素A与细胞因子联合逆转白血病多药耐药性的体外研究

目的 探讨环孢菌素Ａ（ＣｓＡ）联合细胞因子对耐药细胞系Ｋ５６２／Ａ０２的逆转作用,方法 以甲基四唑蓝法测定柔红霉素（ＤＮＲ）的细胞毒性,用流式细胞仪技术测定细胞内罗丹明（Ｒｈ１２３）浓度,用ＲＴ－ＰＣＲ及ＪＳＢ－１抗体分别检测多药耐药（ＭＤＲ１）ｍＲＮＡ及其Ｐ糖蛋白的表达。结果 １μｍｏｌ／ＬＣｓＡ,５００Ｕ／ｍｌ干扰素２００Ｕ／ｍｌ白介素２（ＩＬ－２）均能增加ＤＮＲ对耐药细胞系Ｋ５６２／Ａ０２的     

冬凌草甲素诱导多药耐药细胞系K562／A02凋亡,逆转耐药性？…

目的：探讨冬凌草甲素诱导多药耐药细胞系Ｋ５６２／Ａ０２凋亡、逆转耐药性的作用。方法：以不同浓度的冬凌草甲素处理Ｋ５６２／Ａ０２及敏感株Ｋ５６２／Ｓ细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡率,四甲基偶氮唑盐（ＭＴＴ）比色法检测半数抑制率（ＩＣ５０）,分析冬凌草甲素对两种细胞柔红霉素（ＤＮＲ）、高三尖杉酯碱（ＨＨＴ）敏感性的影响,流式细胞仪检测冬凌草甲素对两种细胞内ＤＮＲ浓度的影响。结果：冬凌草甲素可诱导两种细胞     

硫化砷诱导K562细胞凋亡

研究硫化砷（Ａｓ２Ｓ２）对Ｋ５６２细胞凋亡的诱导作用。采用Ｋ５６２细胞体外培养，应用流式细胞仪（ＦＣＭ）分析细胞周期，鉴定凋亡细胞，检测线粒体膜蛋白Ａｐｏ２．７的表达。结果显示：Ａｓ２Ｓ２能够诱导Ｋ５６２细胞凋亡，使细胞周期中的Ｓ期细胞减少，Ｇ２／Ｍ期细胞升高，提示：Ａｓ２Ｓ２具有促凋亡效应。     

抗人粒细胞集落刺激因子单克隆抗体的研制

应用杂交瘤技术，用重组人Ｇ－ＣＳＦ（ｒｈＧ－ＣＳＦ）免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，然后将其脾脏细胞与小鼠骨髓瘤细胞ＮＳ－１融合，成功地获得了多种能够分泌抗ｒｈＧ－ＣＳＦ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的杂交癌细胞。对其中的２株杂交瘤细胞２Ａ６和２Ｃ２分泌ＭｃＡｂ的研究表明，它们能够特异性地和ｒｈＧ－ＣＳＦ结合，而与重组的人ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－ＣＳＦ、ＩＬ－２、ＩＬ－２α和ＴＮＦ细胞因子无交叉反应，为抗Ｇ－ＣＳＦ特异性ＭｃＡｂ。这些杂交瘤细胞经反复冻存和复苏后，仍能稳定地分泌ＭｃＡｂ。     

K562多药耐药细胞株LRP,P—gP,bcl—2基因蛋白表达的观察

目的 探讨ＬＲＰ（肺耐药相关蛋白）、Ｐ－ｇＰ（Ｐ－糖蛋白）、ｂｃｌ－２在Ｋ５６２多药耐药细胞株中的蛋白表达情况。方法 应用ＬＲＰ－５６、Ｐ－ｇＰ（ＪＳＢ－１）、ｂｃｌ－２（１００）单克隆抗体,通过免疫组化法,对Ｋ５６２细胞株及Ｋ５６２多药耐药细胞株中ＬＲＰ、Ｐ－ｇＰ、ｂｃｌ－２的表达情况进行了测定。结果 Ｋ５６２细胞株中ＬＲＰ、Ｐ－ｇＰ表达阳性,ｂｃｌ－２表达阴性。结论 除Ｐ－ｇＰ是产生ＭＤＲ（多     

羟基脲联合干扰素-α对K562细胞生长及凋亡相关基因表达的影响

目的 观察羟基脲（ＨＵ）及ＨＵ联合干扰素－α（ＩＮＦ－α）对慢性粒细胞性白血病（ＣＭＬ）细胞株－Ｋ５６２细胞增殖、死亡及其相关基因表达的影响,进一步探讨化疗药物与细胞因子联合治疗ＣＭＬ的分子基础。方法 细胞计数及台盼蓝染色分析细胞增殖与存活率;逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）分析４８ｈ培养后的Ｋ５６２细胞中ｂｃｒ－ａｂｌ、ｂａｘ及ｃ－ｍｙｃ基因表达水平。结果 ＨＵ及ＨＵ联合ＩＦＮ－α均抑制细胞     

K562及K562／VCR对长春新碱诱导调亡的敏感性

目的 研究人类白血病细胞株Ｋ５６２长春新碱的Ｋ５６２变异株Ｋ５６２／ＶＣＲ对长春新碱诱导凋亡的敏感性的差异,以探讨抗凋亡在白血病多药耐药性（ＭＤＲ）中作用。方法 将Ｋ５６２及Ｋ６２／ＶＣＲ分别用浓度为０、０．００１、０．０１０μｇ／ｍｌ的长春新碱诱导２４ｈ,用流式细胞仪ＰＩ染色法、ＴＵＮＥＬ法及ＥＬＩＳＡ法分别进行细胞凋亡检测。结果 经浓度为０、０．００１μｇ／ｍｌ长春新碱诱导后,Ｋ５６２细胞凋亡     

异博定对白血病K562细胞耐药性的逆转作用

目的：研究异博定对Ｐ－糖蛋白（Ｐｇｐ）介导的人类白血病Ｋ５６２细胞多药药作用。方法：用台盼蓝拒染法检测药物敏感性及异博定对细胞耐药性的影响,用免疫组织化学法检测Ｐｇｐ的表达,用汉式细胞仪检测细胞柔红霉素（ＤＮＲ）积聚。结果：ＤＮＲ诱导的耐药细胞Ｋ５６２／Ｄ对ＤＮＲ,长春新碱（ＶＣＲ）、高三尖杉脂碱（ＨＨＴ）、鬼臼药物积聚增加,明显地逆转了Ｋ５６２／Ｄ细胞对ＤＮＲ、ＶＣＲ、ＭＩＴ、ＨＨＨＴ、ＶＰ－１     

细胞因子及4℃保存对脐血造血干／祖细胞的影响

应用体外半固体培养方法,研究了粒巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）、白细胞介素３（ＩＬ－３）、白细胞介素６（ＩＬ－６）和促红细胞生成素（Ｅｐｏ）的不同组合及４℃保存对脐血造血干／祖细胞ＣＦＵ－ＧＭ和ＨＰＰ－ＣＦＣ产率的影响。结果表明：在琼脂半固体培养体系中,在不同组合的细胞因子作用下,脐血ＣＦＵ－ＧＭ产率有是明显差异;以ＧＭ－ＣＳＦ组最低、ＧＭ－ＣＳＦ＋ＩＬ－３＋ＩＬ－６＋Ｅｐｏ组最高。脐血置４     

K562及K562/VCR对长春新碱诱导凋亡的敏感性

研究人类白血病细胞株Ｋ５６２及耐长春新碱的Ｋ５６２变异株Ｋ５６２／ＶＣＲ对长春新碱诱导凋亡的敏感性的差异,以探讨抗凋亡在白血病多药耐药性（ＭＤＲ）中的作用。方法将Ｋ５６２及Ｋ５６２／ＶＣＲ分别用浓度为０、０．００１、０．０１０μｇ／ｍｌ的长春新碱诱导２４ｈ,用流式细胞仪ＰＩ染色法、ＴＵＮＥＬ法及ＥＬＩＳＡ法分别进行细胞凋亡检测。结果经浓度为０、０．００１μｇ／ｍｌ长春新碱诱导后,Ｋ５６２细胞凋亡率分别为（４．１０±０．１７）％、（１３．３０±３．７４）％,而Ｋ５６２／ＶＣＲ细胞凋亡率分别为（３．６１±０．６９）％、（９．０６±４．２４）％,统计学显示两者差异无显著性（ｎ＝３,Ｐ＞０．０５）。而长春新碱浓度达０．０１０μｇ／ｍｌ时,Ｋ５６２及Ｋ５６２／ＶＣＲ细胞凋亡率分别为（３６．４８±６．７０）％、（１０．４５±３．７１）％,两者差异有极显著意义（ｎ＝３,Ｐ＜０．０１）。ＴＵＮＥＬ及ＥＬＩＳＡ检测结果与此类似。结论Ｋ５６２及Ｋ５６２／ＶＣＲ对长春新碱诱导细胞凋亡的敏感性不同,耐药细胞对药物诱导细胞凋亡的抵抗性增强可能在白血病ＭＤＲ发生中有重要作用。     

细胞因子对人胃癌细胞胃癌相关抗原MG7Ag表达的调节

探讨细胞因子对人胃癌细胞胃癌相关抗原ＭＧ７Ａｇ表达的调节作用。用基因重组干扰素α（ＩＦＮ－α），干扰素γ（ＩＦＮ－γ），白细胞介素２（ＩＬ－２）和肿瘤坏死因子γ（ＴＮＦ－γ）体外诱导三株人胃癌细胞系ＳＧＣ７９０１，ＭＧＣ８０３和ＭＫＮ４５胃癌相关抗原ＭＧ７Ａｇ表达。ＩＦＮ－α和ＩＦＮ－γ对胃癌细胞ＭＧ７Ａｇ有促表达作用。ＩＬ－２对三株细胞ＭＧ７Ａｇ无调节作用；ＴＦＮ－α对细胞ＭＧ７Ａｇ表达调节是随     

氯化汞对K562和HEL细胞株作用的实验研究

为探讨中药水银（Ｈｇ）和经粉（ＨｇＣｌ）的抗肿瘤作用,以三氧化二砷（Ａｓ２Ｏ３）及阿糖胞苷（Ａｒａ－ｃ）为对照,应用细胞形态学、流式细胞术、ＭＴＴ法和药物反应曲线等方法观察３种药物对Ｋ５６２和ＨＥＬ细胞株的作用。结果表明,ＨｇＣｌ２和Ａｓ２Ｏ３均能诱导Ｋ５６２细胞凋亡,而Ａｒａ－ｃ无此作用。ＨｇＣｌ２可使Ｋ５６２的Ｇ０／Ｇ１增高,揭示激活Ｐ５３基因可能是氯化汞诱导凋亡机制之一;ＨｇＣｌ２和Ａｓ２Ｏ     

K562细胞及K562／ADM耐药细胞内cAMP及cGMP含量的测定

测定正常人淋巴细胞内环磷腺苷（ｃＡＭＰ）、环磷鸟苷（ｃＧＭＰ）含量和人红白血病细胞株（Ｋ５６２）及其耐阿霉素细胞株（Ｋ５６２／ＡＤＭ）的增殖状况和细胞内ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ含量。结果Ｋ５６２与Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞内ｃＡＭＰ含量均低于正常人淋巴细胞内ｃＡＭＰ，但无显著差异，Ｋ５６２与Ｋ５６２／ＡＤＭ之间细胞内ｃＡＭＰ的含量有显著差异，ｃＧＭＰ含量均未见差异。Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞的增殖状况与ｃＡＭＰ含量     

重组人粒细胞集落刺激因子对K562细胞凋亡和其细胞毒药物敏感？…

目的 探讨重线人粒细胞集落刺激因子（ｒｈｕ Ｇ－ＣＳＦ）对Ｋ５６２细胞凋亡和其细胞毒药物敏感性的影响。方法 采用流式细胞术和ＭＴＴ法分别测定细胞凋亡和细胞毒药物敏感性。结果 在低血清培养条件下,ｒｈｕ Ｇ－ＣＳＦ对Ｋ５６２细胞的凋亡有抑制作用,其凋亡百分率与ｒｈｕ Ｇ－ＣＳＦ浓度呈负线性样;ｒｈｕ Ｇ－ＣＳＦ可增加Ｋ５６２细胞对Ａｒａ－Ｃ的敏感性,而降低其对ＤＮＲ的敏感性,在Ａｒａ－Ｃ和ＤＮＲ联合     

反义BCR/ABL寡核苷酸体外抑制K562细胞的研究

目的：探讨反义ＢＣＲ和ＡＢＬ融合基因（ＢＣＲ／ＡＢＬ融合基因）寡核苷酸体外抑制Ｋ５６２细胞的作用及机制。方法：采用Ｋ５６２细胞培养,观察反义ＢＣＲ／ＡＢＬ寡核苷酸体外对Ｋ５６２细胞数、台盼蓝拒染率及克隆形成等的影响。结果：经反义ＢＣＲ／ＡＢＬ寡核苷酸ｂ３ａ２（ＡＳｂ３ａ２）处理后培养８ｄ的Ｋ５６２克隆抑制率达６０６９％,液体培养中细胞数从２４ｈ开始较对照组减少,细胞存活率从８ｈ开始即较对照组明显下降,ＢＣＲ／ＡＢＬ寡核苷酸ｂ２ａ２（ＡＳｂ２ａ２）及无义寡核苷酸对Ｋ５６２细胞数和存活率无明显影响;３种寡核苷酸对ＨＬ６０细胞数和存活率也无影响。结论：ＡＳｂ３ａ２对Ｋ５６２细胞有序列特异性的抑制作用。ＡＳｂ３ａ２的这种抑制作用可能在于它诱导Ｋ５６２细胞的凋亡。     

三种细胞因子对恶性肿瘤多药耐受影响的实验研究

通过体外转染多药耐受相关蛋白（ＭＲＰ）基因和化疗药物ＶＰ－１６、５－Ｆｕ诱导的方法分别建立了膀胱癌多药耐受（ＭＤＲ）细胞亚系ＥＪ／ＭＲＰ和鼻咽癌ＭＤＲ亚系ＬＣＥ／ＶＰ、ＣＬＥ／Ｆｕ,并观察了细胞因子ｒｈＧ－ＣＳＦ、ＩＦＮ－α１ｂ和ＩＬ－２对这些亚系ＭＤＲ水平的影响。结果发现ＩＦＮα１ｂ和ＩＬ－２可以一定程度地逆转３种ＭＤＲ细胞对ＶＰ－１６需受程度,逆转倍数在３．４与５．２之间,可以增加柔红霉素Ｄａ     

反义核酸逆转人白血病多药耐药细胞株的耐药性

目的采用一段人工合成的互补于人ｍｄｒ１基因的反义硫代硫酸脱氧寡核苷酸（简称反义核酸）转染白血病多药耐药细胞株Ｋ５６２／ＡＤＭ，来逆转白血病细胞的多药耐药。方法ＭＴＴ法检测Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞对阿霉素的ＩＣ５０，流式细胞仪分析细胞内的柔红霉素含量，免疫细胞化学染色方法确定Ｐ１７０的表达水平，ＲＴ－ＰＣＲ检测ｍｄｒ１－ｍＲＮＡ的相对水平（ｍｄｒ１／β２－ＭＧ）。结果浓度为２μｍｏｌ的反义核酸使Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞对阿霉素的ＩＣ５０从处理前的２５．７２μｇ／ｍｌ降至处理后的６．９７μｇ／ｍｌ，相对逆转效率为７３．０１％。反义核酸亦使Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞内的柔红霉素含量增加，Ｐ１７０表达阳性率从处理前的９８．６％±１．０％降至处理后的１８．３％±０．７％，ｍｄｒ１／β２－ＭＧ下降了０．５，ｍｄｒ１－ｍＲＮＡ相对水平有所下降。结论反义核酸通过下调ｍｄｒ１基因，阻断Ｐ１７０的表达，从而降低Ｋ５６２／ＡＤＭ的耐药性。     

哮喘患者是PBMC中Th1／Th2类细胞因子m—RNA的表达

为观察哮喘患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中Ｔ辅助上亚群的功能状态,采用ＲＴＰＣＲ技术,以ＩＬ－２和ＩＦＮ－γ代表Ｔｈ１类细胞因子,ＩＬ－４、ＩＬ－６、ＩＬ－１０代表Ｔｈ２类细胞因子,检测了１６例哮喘患者和１０列健康志原者ＰＢＭＣ中上述各种因子ｍ－ＲＮＡ的表达。结果表明,哮喘患者ＩＬ－４、ＩＬ－６、ＩＬ－１０的ｍ－ＲＮＡ阳性表达数分别为１３／１６、１３／１６和６／１６,ＩＬ－２和ＩＮＦ－γ的ｍ－Ｒ     

NKC,IL—2,IL—6和TNFα在海洛因依赖者戒毒过程中的变化及意义

为了解在强制戒毒过程中,外周血自然杀伤细胞（ＮＫＣ）活性及单个核细胞的分泌的ＩＬ－２活性变化,以及外周血清中ＩＬ－６及肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）水平的变化,对５１例吸毒成瘾者采用生物活性测定法（ＭＴＴ）测定了ＮＫＣ活性及ＩＬ－２活性,用ＥＬＩＳＡ法测定了外周血清中ＩＬ－６及ＴＮＦα水平。结果 海洛因依赖者ＮＫＣ３０．１１±５．２％;ＩＬ－２ ８．０６±１．６６ＩＵ／ｍｌ;ＩＬ－６１．１７±１２．０