异丙酚对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑细胞凋亡经时反应进程的影响

目的 观察异丙酚对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑细胞凋亡经时反应进程的影响。方法 雄性sD大鼠60只,随机分为对照组和异丙酚组,每组30只,采用大脑中动脉线栓法诱发局灶性脑 缺血再灌注模型,缺血90 min,异丙酚组于缺血前即刻腹腔注射异丙酚80 mg·kg-1,对照组给予等量生 理盐水。分别于再灌注3 h、6 h、24 h、3 d、5 d、7 d时各处死5只大鼠,取脑组织,采用末端脱氧核酸转移 酶介导的三磷酸去氧鸟苷生物素原位刻痕标记技术,结合电镜观察检测细胞凋亡情况,计算TUNEL 阳性率、凋亡细胞阳性率和凋亡细胞比率。结果 对照组TUNEL阳性率再灌注6 h达高峰(P< 0．01)。对照组凋亡细咆阳性率再灌注6 h以后升高,24 h达高峰(P<0．01)。异丙酚组再灌注各时间 点TUNEL阳性率、凋亡细胞阳性率和凋亡细胞比率再灌注6 h～3 d时低于对照组(P<0．05或0．01)。 结论 异丙酚可减轻局灶性脑缺血再灌注诱发的脑细胞凋亡,最显著效果出现在再灌注6 h～3 d。     

大鼠肝缺血/再灌注后肝细胞凋亡的评价及异丙酚对细胞凋亡的影响

目的 观察大鼠肝脏缺血再灌注后肝窦内皮细胞凋亡及异丙酚对肝脏细胞凋亡的影响。方法 选用健康SD雄性大鼠24只,随机分为三组(n=8):A组,肝脏缺血30 min再灌注6 h,再灌注即刻从股静脉输入生理盐水10ml·kg-1·h-1 60 min;B组,再灌注即刻静脉注射异丙酚20 mg/kg,继之输入5％异丙酚50 mg·kg-1·h-1 h;C组,给予假手术处理,未予缺血,余处理同A组。再灌注6 h后取肝组织标本行病理组织学观察,同时测定血浆ALT活性和肝组织MDA含量的变化。采用DNA琼脂糖凝胶电泳、TUNEL染色观察细胞凋亡的情况。结果与C组相比,A组凋亡的肝细胞和肝窦内皮细胞明显增加,且凋亡的细胞主要是肝窦内皮细胞,肝细胞凋亡和坏死则较少。与A组相比,再灌注6 h B组TUNEL阳性肝细胞和肝窦内皮细胞数明显减少(p<0.01),肝组织DNA片段形成也明显减少。同时,B组肝组织坏死程度、血浆ALT活性和肝组织MDA含量均明显低于A组(JD<0.01)。电镜显示B组肝细胞和肝窦内皮细胞损伤也明显轻于A组。结论 细胞凋亡是再灌注早期肝脏细胞死亡的重要机制,肝窦内皮细胞凋亡是再灌注早期肝脏细胞死亡的主要特征。异丙酚可以减少再灌注后的肝脏细胞凋亡和坏死,其抗氧化作用是其减少再灌注后的肝脏细胞凋亡的机制。     

异丙酚对脊髓缺血再灌注损伤大鼠脊髓细胞凋亡的影响

目的 探讨异丙酚对脊髓缺血再灌注损伤大鼠脊髓细胞凋亡的影响。方法成年雄性清洁级Wiser大鼠60只，体重200～250g，随机分为异丙酚组（A组）和缺血再灌注组（B组），每组30只，采用改进的Zivin等的方法制备脊髓缺血再灌注模型，缺血的同时A组腹腔注射异丙酚100mg/kg，B组注射等量生理盐水。每组分别于再灌注6h、1d、2d、3d、7d时处死6只大鼠。根据Tador评分评价大鼠后肢神经功能损伤情况，电镜下观察脊髓的病理学变化，用免疫组化法测定脊髓cyclinD1阳性细胞表达，原位末端标记法（TUNEL法）检测凋亡细胞，计算凋亡指数。结果A组脊髓损伤及后肢神经功能损伤均较B组轻，A组脊髓神经细胞凋亡指数及cyclinD1表达均低于B组（P〈0．05或0．01）。结论异丙酚对脊髓缺血再灌注损伤有一定的保护作用，其机制与下调脊髓cyclinD1表达，抑制神经细胞亡有关。     

细胞凋亡与脑缺血／再灌注损伤

细胞凋亡与脑缺血/再灌注损伤关系密切。本文介绍了调亡的基本特征，脑缺血/再灌注后神经元的凋亡发生情况，并着重就神经元发生凋亡的机制作一综述。     

异丙酚对大鼠肠缺血再灌注时肠粘膜细胞凋亡的影响

目的评价异丙酚对大鼠肠缺血再灌注（I／R）时肠粘膜细胞凋亡的影响。方法24只SD大鼠随机分为3组（n=8），假手术组（S组）仅分离肠系膜上动脉（SMA）；肠缺血再灌注组（I／R组）阻断SMA1h；异丙酚组（P组）阻断SMA前30min腹腔注射异丙酚100mg／kg。于再灌注3h处死大鼠，取回肠末端组织，电镜及TUNEL法观察肠粘膜上皮细胞凋亡情况，并计算肠粘膜上皮细胞凋亡指数；测定肠粘膜超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）及神经酰胺（CER）含量，RT-PCR法测定肠粘膜鞘磷脂酶（SMase）mRNA表达。结果与S组比较，I／R组肠粘膜SOD活性降低，MDA含量、CER含量、肠粘膜上皮细胞凋亡指数及SMasemRNA表达升高（P〈0．05或0．01）；与I／R组比较，P组MDA含量、CER含量、肠粘膜上皮细胞凋亡指数及SMasemRNA表达降低，S01）活性升高（P〈0．05或O．01）。I／R组肠粘膜SOD活性与CER含量呈负相关（r＝-0．775，P〈0．01），肠粘膜上皮细胞凋亡指数与CER含量呈正相关（r=0．852，P〈0．01）；P组肠粘膜上皮细胞凋亡指数与CER含量呈正相关（r=0．782，P〈0．01）。结论异丙酚可抑制大鼠肠缺血再灌注时肠粘膜上皮细胞凋亡，可能与清除氧自由基、下调SMasemRNA表达、减少CER生成有关。     

大鼠全脑缺血再灌注细胞凋亡的观察

本实验采用大鼠全脑缺血再灌注模型，观察缺血后不同时间点的神经元凋亡，以研究大鼠全脑缺血再灌注后脑组织的形态学改变。材料与方法一、动物分组健康、雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠４３只，体重２００～２５０ｇ，随机分成七组；假手术组（Ａ组，ｎ＝５），缺血组：分成缺血１０分钟组Ｂ组、缺血６小时组Ｃ组（各组ｎ＝５），缺血再灌注组：缺血１０分钟再灌注１天组Ｄ组、２天组Ｅ组、４天组Ｆ组、７天组Ｇ组（各组ｎ＝７）。二、脑缺血模型的制备采用Ｐｕｌｓｉｎｅｌｌｉ法［１］，制备大鼠全脑缺血模型。假手术组只分离出翼小孔、双侧颈总动…     

异丙酚对肺缺血再灌注损伤大鼠肺上皮细胞凋亡的影响

目的拟通过观察肺上皮细胞凋亡的变化,探讨异丙酚减轻大鼠肺缺血再灌注损伤的作用机制。方法雄性SD大鼠136只,随机分为3组:假手术组(S组,n=24)、缺血再灌注组(I/R组,n=56)、异丙酚组(P组,n=56)。I/R组、P组制备大鼠肺原位热缺血模型,缺血1h。P组于缺血前30min静脉输注异丙酚20mg·kg~(-1)·h~(-1)至再灌注4h。S组除不作缺血处理外,其余处理与I/R组相同。分别于再灌注0.5、1、2、4h随机处死大鼠(S组每个时点处死6只,I/R组、P组每个时点分别处死14只大鼠),每组每个时点的一半大鼠用于测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中中性粒细胞百分比、蛋白浓度,另外一半大鼠用于测定肺组织丙二醛(MDA)含量、湿,干重比(W/D)及肺上皮细胞凋亡指数(TUNEL法),并在光镜下观察肺组织的病理学改变;I/R组、P组肺上皮细胞凋亡指数与W/D进行直线相关分析。结果与S组相比,I/R组和P组再灌注各时点BALF中中性粒细胞百分比、蛋白浓度及肺组织MDA含量、W/D、肺上皮细胞凋亡指数均增加(P<0.05或0.01);与I/R组比较,P组上述指标均降低(P<0.05或0.01),肺组织病理学损伤减轻;I/R组、P组肺上皮细胞凋亡指数与W/D之间的相关系数分别为0.784、0.830(P<0.01)。结论异丙酚抑制肺上皮细胞凋亡可能是减轻大鼠肺缺血再灌注损伤的机制之一。     

麻醉剂量异丙酚对大鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用

目的：研究异丙酚对脑缺血／再灌注损伤的保护作用,方法采用改良Longa法制成大鼠脑缺血／再灌模型,随机分为模型组、异丙酚组、 尼莫地平组对照组,观察麻醉剂量的异丙酚对脑缺血／再灌注损伤的保护作用并研究其机制。结果：麻醉剂量的异丙酚能明显降低大鼠局灶性脑缺;知／再灌注死亡率,明显缩小脑梗范围,抑制脑缺血／再灌注后血清乳酸脱氢产肌酸激酶的升高程度,改善电镜下细胞超微结构的损害,明显升高脑组织超氧化物歧化酶的活性,减少脑组织细胞内钙离子含量,减少丙二醛的生成,结论麻醉剂量的异丙酚对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制与抑制钙离子超载和抑制脂质过氧化反应有关。     

缺血后处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的影响

目的探讨缺血后处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的影响。方法36只雄性SD 大鼠随机分为3组(n=12),对照组:即单纯缺血再灌注组;缺血后处理15s组(I-15 s组):大脑中动脉线栓阻闭(MCAO)90 min后,再灌注15 s,缺血15 s,反复3次;缺血后处理30 s组(I-30 s组):MCAO 90 min后,再灌注30 s,缺血30 s,反复3次。再灌注24 h后对所有动物行神经功能障碍评分(NDS),然后取大脑测定脑梗死容积。结果再灌注24 h后I-15 s和I-30 s组NDS与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。再灌注24 h后脑梗死容积I-15s组为(271±97)mm3,I-30 s组为(217±85)mm3,小于对照组[(378±103)mm3](P<0.01),I-15 s和I-30 s组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论缺血后处理可减轻局灶性脑缺血再灌注大鼠脑的病理性损伤。     

异丙酚对家兔脑缺血/再灌注期血清白介素-8的影响

目的观察异丙酚对家兔全脑缺血／再灌注(I／R)期血清白介素-8(IL-8)的合成和释放的影响，并探讨其脑保护机制。方法利用“六血管”阻断建立全脑缺血模型，24只家兔随机分为假手术组(A组)，I／R组(B组)和异丙酚组(C组)，每组8只，C组缺血30min再灌注4h，缺血前静注异丙酚5mg·kg-1，随后静滴20mg·kg     

异丙酚预先给药对大鼠脑缺血再灌注时内质网应激性细胞凋亡的影响

目的 评价异丙酚预先给药对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤时内质网应激性细胞凋亡的影响.方法 健康成年雄性SD大鼠80只,体重240～280 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为4组(n=20):假手术组(S组);局灶性脑缺血再灌注组(FCIR组)采用阻塞大脑中动脉4h恢复灌注的方法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型;异丙酚预先给药组(P组)于缺血前30 min股静脉泵注异丙酚12mg·kg-1·h-1至缺血15min;脂肪乳预先给药组(Ⅰ组)给予脂肪乳1.2 ml·kg-1·h-1.于再灌注6h时各组随机取10只大鼠采用Longa评分法行神经功能缺陷评分(NDS),处死取左侧大脑,用干湿重法测定脑含水量,余10只大鼠处死后取左侧海马,采用Western blot法检测C/EBP环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白(CHOP)、Bcl-2和活化型caspase-3蛋白的表达水平.结果 与S组比较,FCIR组再灌注6h时NDS评分和脑含水量升高,CHOP和活化型caspase-3蛋白表达上调,Bcl-2蛋白表达下调,P组NDS评分升高(P＜0.05);与FCIR组比较,P组再灌注6h时NDS评分和脑含水量降低,CHOP和活化型caspase-3蛋白表达下调,Bcl-2蛋白表达上调(P＜0.05),Ⅰ组各指标差异无统计学意义(P＞0.05).结论 异丙酚可通过抑制内质网应激介导的细胞凋亡减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤.     

异丙酚对大鼠局灶性脑缺血再灌住损伤时蛋白激酶B活性的影响

目的 评价异丙酚对大鼠局灶性脑缺血再灌住损伤时蛋白激酶B(Akt)活性的影响,以探讨异丙酚脑保护作用的机制.方法 健康SD大鼠90只,体重260～300 g,雌雄不拘,随机分为5组(n=18):假手术组(S组);局灶性脑缺血再灌注组(IR组)、P1-3组阻断大脑中动脉2 h,开放22 h,制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,分别于再灌注前3 min至再灌注5 min时经股静脉输注生理盐水2.5ml、异丙酚1、2、5 mg/kg(异丙酚采用生理盐水稀释至2.5 ml).于再灌注22 h时行神经行为学评分;测定大鼠脑梗死质量、免疫组化法检测大鼠脑组织caspase-3表达、Western blot法检测Akt活性.结果 与S组比较,再灌注22 h时IR组、P1-3组神经行为学评分、脑梗死质量比升高,脑组织caspase-3表达上调,P1组和P2组Akt活性升高,IR组和P3组Akt活性降低(P<0.05);与IR组比较,P1组和P2组大鼠神经行为学评分,脑梗死质量比降低,腩组织caspase-3表达下调,Akt活性升高(P<0.05).结论 静脉输注异丙酚1、2 mg/kg可通过升高Akt活性,抑制脑组织细胞凋亡,减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤.     

氟比洛芬酯后处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注时神经元凋亡的影响

目的 评价氟比洛芬酯后处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注时神经元凋亡的影响.方法 健康雄性Wistar大鼠64只,体重260～310 g,采用随机数字表法,将其随机分为4组(n＝16):假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)、脂微球溶剂组(LM组)和氟比洛芬酯10 mg/kg组(FB组).I/R组、LM组和FB组采用改良线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,缺血2h,再灌注24 h;S组仅分离血管.再灌注即刻FB组尾静脉注射氟比洛芬酯10 mg/kg,LM组尾静脉注射脂微球溶剂1ml/kg,S组和I/R组尾静脉注射等容量生理盐水.再灌注24h时行神经功能缺陷评分,然后处死大鼠,取脑组织,计数缺血侧凋亡神经元,计算神经元凋亡指数;采用Western blot法检测Bcl-2和Bax蛋白的表达,计算Bcl-2/Bax比率.结果 与S组比较,I/R组、LM组和FB组神经功能缺陷评分和神经元凋亡指数升高,I/R组和IM组Bcl-2蛋白表达下调,Bax蛋白表达上调,Bcl-2/Bax比率降低(P<0.05);与I/R组土土比较,LM组各指标差异无统计学意义(P＞0.05),FB组神经功能缺陷评分和神经元凋亡指数降低,Bcl-2蛋白表达上调,Bax蛋白表达下调,Bcl-2/Bax比率升高(P<0.05).结论 氟比洛芬酯后处理通过调节Bcl-2与Bax的失衡,抑制神经元凋亡,减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤.     

异丙酚及咪唑安定和硫喷妥钠对鼠局灶脑缺血/再灌注损伤的影响

目的 观察异丙酚、咪唑安定和硫喷妥钠对鼠局灶脑缺血／再灌注后的神经功能和病理结果的影响。方法 雄性SD大鼠,采用可逆性大脑中动脉内线栓法诱发局灶脑缺血。缺血3h,再灌注24h后,作神经功能缺陷评估,然后取脑,TTC染色,用Image软件系统作图像分析,计算脑梗塞和脑水肿容积,电镜下观察梗塞边缘组织的细胞超微结构。动物分五组：缺血组、再灌注组、用药组（异丙酚、咪唑定安和硫喷妥钠）结果 异丙酚和咪唑安定明显改善鼠神经功能缺陷程度,降低脑梗塞和脑水肿容积,并减少梗塞边缘组织细胞死亡。异丙酚的脑保护效应强于咪唑安定。结论 异丙酚和咪唑安定有拮抗鼠局灶脑缺血／再灌注损伤的作用。     

丙泊酚对大鼠局灶性脑缺血-再灌注时脑组织热休克蛋白70基因和蛋白表达的影响

目的观察丙泊酚对大鼠局灶性脑缺血-再灌注时脑组织热休克蛋白(HSP)70 mRNA和HSP70蛋白表达的影响,以探讨其脑保护的机制。方法采用大脑中动脉线栓法建立大鼠局灶性脑缺血-再灌注模型。60只雄性Wistar大鼠,随机分为假手术组(Sham组)、缺血-再灌注组(I-R组)和丙泊酚组(P组),每组20只。大鼠脑缺血2 h,然后进行再灌注。在再灌注3、6、24、72 h断头取脑组织,采用原位杂交法和免疫组织化学染色检测大鼠脑组织HSP70 mRNA和HSP70蛋白的表达。结果局灶性脑缺血-再灌注后,HSP70 mRNA和HSP70蛋白的表达增加(P<0.01),但HSP70 mRNA表达较早,分布范围较广泛,而HSP70蛋白表达以半暗带区为主。应用丙泊酚能显著地促进脑缺血-再灌注后脑组织中HSP70 mRNA和HSP70蛋白的表达(P<0.01),与脑缺血-再灌注组相比较,HSP70 mRNA和HSP70蛋白不仅表达增多、范围增加,而且还能延缓下降(P<0.05)。结论丙泊酚能促进大鼠局灶性脑缺血-再灌注时HSP70的表达,这可能是其脑保护作用的部分机制。     

亚低温对脑缺血/再灌注大鼠脑海马 CA1区细胞凋亡和Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的 研究亚低温对脑缺血,再灌注(I/R)大鼠脑海马CA1区细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。方法 采用双侧颈总动脉夹闭加静脉放血再回输法建立全脑I/R模型。24只雄性Wistar大鼠随机分成三组,每组8只。常温非缺血组(Sham组):未建立脑I/R模型,体温正常;常温缺血组(NT组):建立全脑I/R模型,体温正常;亚低温缺血组(HT组),建立全脑I/R模型,体温降至32.5-33.5℃,持续3 h。于再灌注72 h取脑组织,用原位末端标记法测定海马CA1区细胞凋亡、免疫组织化学法检测Bcl-2、Bax蛋白表达。结果 NT组和HT组细胞凋亡率明显多于Sham组(P<0.01),但HT组细胞凋亡率明显少于NT组(P<0.01);NT组和HT组的Bcl-2、Bax蛋白表达高于Sham组(P<0.01),但两组间差异无显著性(P>0.05)。结论 亚低温减少全脑I/R后海马CA1区细胞凋亡,但不改变Bel-2及Bax蛋白表达。     

异丙酚对大鼠局灶性脑缺血再灌注后Ca2+诱发神经元线粒体损伤的影响

目的 评价异丙酚对大鼠局灶性脑缺血再灌注后Ca2+诱发神经元线粒体损伤的影响.方法 健康雄性Wistar大鼠84只,体重250～300 g,随机分为4组(n=21),假手术组(S组)仅暴露颈内动脉但不结扎颈总动脉;缺血再灌注组(IR组)、CaCl2组和异丙酚组(P组)采用结扎颈总动脉的方法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,缺血2 h,再灌注24 h.缺血2 h时进行神经功能缺陷评分.再灌注24 h时处死大鼠,分离额叶皮质,提取神经元线粒体.CaCl2组加入CaCl2 200μmol/L于37 ℃下孵育5 min;P组加入异丙酚200 μmol/L于37℃下孵育2 min后,再加入CaCl2 200 μmol/L孵育5 min.透射电镜下观察线粒体超微结构.采用紫外分光光度法检测线粒体通透性转换孔(MPTP)的活性.结果 S组神经功能缺陷评分为0分,IR组、CaCl2组和P组神经功能缺陷评分为2～3分.CaCl2组线粒体明显肿胀,基质电子密度低,嵴大部分断裂,线粒体膜崩解;P组较CaCl2组病理学损伤减轻.与S组比较,IR组和CaCl2组MPTP活性升高,P组MPTP活性降低(P＜0.05);与IR组比较,CaCl2组MPTP活性升高,P组MPTP活性降低(P＜0.05);与CaCl2组比较,P组MPTP活性降低(P＜0.05).结论 异丙酚可减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注后Ca2+诱发的神经元损伤,与其抑制MPTP的开放有关.