梗阻性肾病大鼠肾组织periostin的表达及意义

目的 研究梗阻性肾病大鼠肾组织periostin表达的变化及其与肾间质纤维化的相关性.方法 18只SD雄性大鼠按随机数字法分成3组:假手术组、模型组和贝那普利组,每组6只.用单侧输尿管结扎法建立梗阻性肾病大鼠模型.RT-PCR检测各组大鼠肾组织periostin和转化生长因子(TGF) β1的mRNA表达;ELISA检测各组大鼠肾组织periostin、血管紧张素Ⅱ( AngⅡ)、TGF- β1的蛋白水平;HE及Masson染色观察肾间质变化;免疫组化检测肾组织Ⅰ型胶原蛋白.结果 与假手术组比较,模型组大鼠肾组织periostin、TGF-β1、AngⅡ蛋白表达显著升高(均P＜0.05).与模型组比较,贝那普利组上述蛋白表达显著降低,差异有统计学意义(均P＜0.05).与假手术组比较,模型组大鼠肾组织periostin和TGF- β1的mRNA表达显著上调,差异有统计学意义(均P＜0.05),而贝那普利组periostin和TGF- β1的mRNA表达则显著下调(均P＜0.05).肾组织periostin蛋白表达与AngⅡ、TGF-β1和Ⅰ型胶原的蛋白表达以及肾间质纤维化积分均呈正相关(r值分别为0.652、0.781、0.776和0.825,均P＜0.05).结论 梗阻性肾病大鼠肾组织periostin呈高表达,其可能参与了梗阻性肾病肾间质纤维化进程.     

化瘀解毒汤对TGF-β1及MMP1mRNA表达作用的探讨

目的：探讨化瘀解毒汤抑制肾间质纤维化的可能作用机制。方法：采用单侧输尿管梗阻（UUO）法诱导肾间质纤维化动物模型,以免疫组化和原位杂交方法分别检测大鼠肾间质组织ECM成分（Ⅰ、Ⅲ型胶原）、TGF－β1mRNA及MMP1mRNA表达,并作尿α1－MG检测以及相关肾组织学检查。结果：模型组和各治疗组大鼠肾组织Ⅰ、Ⅲ型胶原、TGF－β1mRNA的面积比显增加（P＜0．05）,MMP1mRNA面积比显降低（P＜0．05）;各治疗组大鼠Ⅰ、Ⅲ型胶原、TGF－β1mRNA面积比较模型组减少（P＜0．05）,MMP1mRNA面积比较模型组增加（P＜0．05）;治疗组中以中药预防组鼠Ⅰ、Ⅲ型胶原、TGF－β1mRNA面积比最低、MMP1mRNA面积比最高（P＜0．05）。经治疗后肾脏组织病理检查有明显改善。结论：化瘀解毒汤通过下调TGF－β1mRNA表达、上调MMP1mRNA表达、以抑制肾间质ECM的增生和积聚,防止肾间质的纤维。此外还可减轻肾小管病理性损伤。     

EPO对马兜铃酸刺激的肾小管上皮细胞TGF-β1、Ang-Ⅱ mRNA表达的影响

目的探讨促红细胞生成素（E]PO）对马兜铃酸（AA）刺激的肾小管上皮细胞转化生长因子β1（TGF-β1）、血管紧张素-Ⅱ（Ang-Ⅱ）mRNA表达的影响。方法以10、20μg／ml AA刺激LLC-PK1细胞株,同时加入不同浓度的EPO（5、10U／m1）,另设对照组和EPO组（10U／m1）。各组细胞培养24h后,RT-PCR检测细胞TGF-β1、Ang-ⅡmRNA的表达情况。结果与对照组比较,经AA刺激后,TGF-β1、Ang-Ⅱ mRNA表达明显上调,EPO可明显下调TGF-β1 mRNA的表达并抑制Ang-Ⅱ mRNA的过高表达。结论EPO可以抑制AA所刺激的肾小管上皮细胞TGF-β1和AngⅡ mRNA的过高表达。     

马兜铃酸促进肾小管上皮细胞转分化的发生及温阳活血方干预作用研究

目的：探讨马兜铃酸（aristolochic acid,AA）在大鼠近端肾小管上皮细胞（NRK-52E）转分化中的可能作用,及温阳活血方拮抗转分化机制。方法：（1）MTT法检测不同浓度温阳活血方含药血清对NRK-52E细胞增殖的影响。（2）免疫细胞化学法检测不同浓度AA（0、5、10、20、40μg/ml）对NRK-52E细胞表达α-平滑肌肌动蛋白的影响。（3）ELISA法检测AA刺激下Col-Ⅰ的表达及温阳活血方对其调控作用。（4）Real-Time PCR法检测温阳活血方对TGF-β1mRNA、ET-1mRNA、VEGF mRNA等肾间质纤维化相关因子的调控作用。结果：（1）AA5μg/ml、AA10μg/ml、AA20μg/ml、AA40μg/ml均可刺激NRK-52E表达α-平滑肌肌动蛋白,AA10μg/ml浓度下α-平滑肌肌动蛋白表达较强。（2）AA刺激NRK-52E细胞12h、24h、48h后,Col-Ⅰ的表达水平随着时间的延长而增强。（3）马兜铃酸刺激NRK-52E细胞24h后,TGF-β1mRNA表达上调（P〈0.05）,VEGF mRNA表达显著下调（P〈0.01）,ET-1mRNA的表达显著上调（P〈0.01）,Col-Ⅰ表达水平显著高于正常对照组（P〈0.01）,温阳活血方干预下,TGF-β1mRNA表达下调（P〈0.05）,VEGF mRNA表达显著上调（P〈0.01）,ET-1mRNA有下调趋势,Col-Ⅰ表达水平显著下调。结论：（1）马兜铃酸可促进肾小管上皮细胞转分化的发生。（2）温阳活血方具有拮抗肾小管上皮细胞转分化作用。     

慢性马兜铃酸肾病肾间质纤维化发病机制的初步探讨

目的制作大鼠慢性马兜铃酸肾病模型,初步探讨该模型肾间质纤维化的发病机制。方法雄性SD大鼠随机分为2组,模型组给关木通浸膏水溶液间断灌胃,对照组仅给自来水灌胃。灌胃后第4、8和12周每组各处死6只大鼠,留取两侧肾脏,应用实时定量反转录聚合酶链反应(realtimequantitativeRT-PCR)和免疫组织化学方法研究两组大鼠肾脏Ⅰ型胶原(ColⅠ)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子((CTGF)、纤溶酶原激活物抑制物-1(PAl-1)和金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)的mRNA及蛋白质表达。结果模型组大鼠用药后第4周肾实质ColⅠ、TGF-β1、CTGF、PAI-1及TIMP-1mRNA表达显著上调,分别达对照组的9.31倍、5.16倍、1.79倍、8.66倍及2.54倍(P<0.01或P<0.05);第8周除TIMP-1有所升高外其余指标mRNA表达均有所下降,但与对照组比较差异仍有统计学意义(P<0.01或P<0.05);第12周全部指标mRNA表达继续下降,除CTGF外其余指标与对照组比较差异仍有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。模型组大鼠用药后第4周ColⅠ、TGF-β1、CTGF、PAI-1及TIMP-1在肾小管间质的阳性染色面积显著扩大,分别达对照组的2.24倍、1.43倍、1.13倍、1.17倍及1.24倍(P<0.01),第8周和第12周全部指标阳性染色面积持续扩大(P<0.01)。结论慢性马兜铃酸肾病大鼠肾间质     

地黄提取物对Smads信号通路影响的实验研究

目的：探讨中药地黄对大鼠肾纤维化的作用及可能的机制。方法：将实验动物分成正常对照组、模型组、地黄组,采用一次性尾静脉注射阿霉素复制大鼠肾病模型。治疗8周后观察尿蛋白、尿素氮、血肌酐及肾脏病理改变;同时观测肾皮质中转化生长因子β受体Ⅰ（TβRⅠ）、转化生长因子β受体Ⅱ（TβRⅡ）和Smad2、7的表达。结果：地黄组各项指标与模型组相比,均有统计学差异,形态学观察也显示其组损害轻于模型组。且模型组肾组织TβRⅠ、Smad2 mRNA显著上调,地黄组肾组织TβRⅠ、Smad2 mRNA显著下调,而模型组肾组织Smad7蛋白表达显著下调。同时TβRⅡ mRNA的表达无明显变化。结论：在阿霉素肾病大鼠模型中,地黄提取物对大鼠肾脏有一定的保护作用,其信号转导机制至少部分与它能下调TβRⅠ、Smad2及上调Smad7的表达有关。     

丹参注射液对大鼠梗阻性肾间质纤维化的保护作用

目的：探讨丹参注射液对梗阻性大鼠肾间质纤维化的影响。方法：30只雌性SD大鼠，随机分为假手术组，造模组和丹参组，以单侧输尿管结扎术建立输尿管梗阻的动物模型。术后第10d取术侧肾组织做HE，PAS染色及TFG-β1，α-SMA，I型胶原免疫组化检测并以反转录-PCR（RT-PCR）方法对肾皮质TGF-β1mRNA表达作半定量分析。结果：丹参组显改善梗阻侧肾组织病理变化。下调TGF-β1mRNA及蛋白表达，减少α-SMA表达及Ⅰ型胶原沉积，结论：丹参注射液对梗阻性大鼠肾间质纤维化有保护作用。     

三七总皂苷对大鼠肾小球系膜细胞结缔组织生长因子表达的影响

目的：观察三七总皂苷（total panax notoginseng saponins,tPNS）对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）介导的体外培养SD大鼠肾小球系膜细胞（mesangial cells,MCs）结缔组织生长因子（CTGF）表达的影响,探讨tPNS抗肾小球纤维化可能的分子机制。方法：分离培养SD大鼠MCs,用10-6mol/LAngⅡ刺激MCs,将培养的大鼠MCs分为5组（n=8）：空白对照组、AngⅡ刺激组、AngⅡ和3种不同浓度的tPNS干预组。分别采用RT-PCR、Western Blot、ELISA、RIA法,检测大鼠MCs CTGF mRNA及CTGF蛋白表达及培养细胞上清TGF-β1、FN、LN及Ⅳ型胶原含量。结果：tPNS呈量效依赖性下调AngⅡ介导的大鼠MCsC TGF mRNA及蛋白表达;减少培养细胞上清TGF-β1、FN、LN及Ⅳ型胶原含量。结论：三七总皂苷可通过抑制CTGF mRNA及蛋白的表达,减少细胞外基质沉积,防止肾小球纤维化的产生。     

虫草菌液拮抗马兜铃酸对人近端肾小管上皮细胞的作用

目的 探讨虫草菌液能否拮抗马兜铃酸诱发的人近端肾小管上皮细胞系(HKC)的促纤维化效应。 方法 马兜铃酸钠盐(AA-Na，40 mg/L)加或不加虫草菌液(10 mg/L)与HKC孵育(孵育12 h检测mRNA表达，孵育36 h检测蛋白质表达)，然后检测HKC中转化生长因子-β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)、金属蛋白酶1组织抑制物(TIMP-1)以及纤溶酶原激活物抑制物1(PAI-1)的mRNA(RT-PCR法)和相应蛋白质(CTGF表达采用免疫印迹法，其余采用ELISA方法)表达。结果 AA-Na能显著上调HKC对TGF-β1、CTGF、TIMP-1、PAI-1的表达，与对照组比较，mRNA表达分别上调1.24、1.31、1.27及1.36倍，蛋白质表达分别上调2.50、1.75、2.13及1.46倍，P均<0.05。加虫草菌液后，上述TGF-β1、CTGF及TIMP-1的高表达被显著抑制，与AA-Na组比较，mRNA表达的抑制率分别为12%、20%及17%；蛋白质表达的抑制率分别为25%、20%及37%，P均<0.05，但未能抑制PAI-1的高表达(P > 0.05)。结论 虫草菌液可下调AA-Na刺激的HKC促细胞外基质(ECM)合成因子(TGF-β1、CTGF)及抗ECM降解因子(TIMP-1)的表达。     

蝉花菌丝对单侧输尿管结扎大鼠肾间质uPA、PAI-1蛋白及mRNA表达的影响

目的:探讨蝉花菌丝对单侧输尿管结扎大鼠肾间质uPA、PAI-1蛋白及mRNA表达的影响。方法:采用单侧输尿管结扎的方法制备单侧输尿管梗阻(UUO)肾间质纤维化大鼠模型。实验分组为正常组、模型组、假手术组、冬虫夏草组、蝉花高剂量组、蝉花中剂量组和蝉花低剂量组,实验周期为25 d。采用免疫组织化学和原位杂交方法,分别检测肾组织uPA、PAI-1蛋白及其mRNA表达,使用图像分析系统对结果进行处理,采用SPSS11.5统计软件统计分析。结果:模型组肾小管间质中PAI-1蛋白及mRNA的表达均明显高于正常组和假手术组(P<0.01);而uPA蛋白及mRNA的表达则与正常组和假手术组差异无统计学意义(P>0.05);虫草组和不同剂量的蝉花菌丝组的PAI-1蛋白及mRNA表达量明显低于模型组(P<0.05～0.01);而uPA蛋白及mRNA的表达量则明显高于模型组(P<0.05～0.01);蝉花菌丝大剂量组的PAI-1蛋白及mRNA的表达量又较蝉花小剂量组和虫草组为低(P<0.05～0.01)。说明蝉花菌丝能下调UUO大鼠肾小管间质PAI-1蛋白及mRNA的高表达,上调UUO大鼠uPA蛋白及mRNA的低表达,并呈明显的量效依赖关系。结论:本研究表明蝉花菌丝通过调节UUO大鼠肾小管间质uPA/PAI-1蛋白及mRNA的表达紊乱而发挥抗肾间质纤维化的药理作用。     

骨化三醇对糖尿病大鼠肾脏血管紧张素转换酶与血管紧张素转换酶2的影响

目的观察血管紧张素转换酶（angiotensinconvertingenzyme,ACE）和血管紧张素转换酶2（angiotensinconvertingenzyme2,ACE2）在糖尿病大鼠肾脏的表达及骨化三醇对其的影响。方法6～8周龄Wistar大鼠被随机分为3组,分别为对照组、糖尿病组、骨化三醇组（O．03μg·kg-1·d-1）。16周后处死各组大鼠,留取标本。放射免疫法检测尿胆微球蛋白（p2-microglobulin,p2-MG）、尿白蛋白（urinaryalbumin,Alb）、血全段甲状旁腺素（intactparathyrin,iPTH）;分光光度法检测尿肌酐（urinecreatinine,UCr）;苦味酸法检测血肌酐（serumcreatinine,SCr）;全自动生化仪检测血钙（Ca）和血磷（P）。PAS染色观察肾脏病理改变并进行半定量统计学分析。实时定量基因扩增荧光（quan—titativepolymerasechainreaction,QPCR）检测肾脏中ACE和ACE2mRNA表达。免疫组织化学法检测肾脏中ACE和ACE2蛋白表达。结果与糖尿病组相比,骨化三醇组尿陀一MG、尿Alb／UCr降低（P〈0．05）,内生肌酐清除率（endogenouscreatinineclearancerate,CCr）升高（P〈O．05）。各组大鼠血Ca、血P及iPTH差异无统计学意义（P〉0．05）。PAS病理染色及半定量分析结果提示,与糖尿病组相比,骨化三醇组大鼠肾脏肾小球硬化程度及肾小管间质纤维化程度有所减轻（P〈0．05）。与对照组比较,糖尿病组大鼠肾脏ACE与ACE2mRNA和蛋白表达均升高（P〈O．05）,ACE／ACE2升高（P〈0．05）。与糖尿病组比较,骨化三醇组大鼠肾脏ACEmRNA和蛋白的表达降低（P〈O．05）,ACE2mRNA和蛋白的表达升高（P〈（）．05）,ACE／ACE2降低（P〈0．05）。相关分析结果显示,尿82-MG、Alb／ucr与ACE／AcE2呈正相关（P〈0．05）,CCr与ACE／ACE2呈负相关（P〈0．05）。结论骨化三醇降低糖尿病大鼠蛋白尿、升高CCr,改善病理损伤,其肾脏保护作用可能与调节ACE和ACE2的表达有关。     

蝉花菌丝对糖尿病肾病大鼠的肾脏保护作用机制研究

目的：观察蝉花菌丝对糖尿病肾病（DN）大鼠肾小管沉默信息调节因子2相关酶1（SIRT1）表达及肾小管损伤的影响,探讨蝉花菌丝延缓 DN 进展的作用机制。方法：链脲佐菌素（STZ）诱导大鼠高血糖,糖尿病所致肾损伤的大鼠模型（DN）与正常大鼠一起随机分为4组：对照组、蝉花组、DN 组、DN ＋蝉花组,饲养24周。观察 DN 大鼠肾间质α- SMA、SIRT1表达及纤维化程度,检测血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、尿白蛋白、24 h 尿蛋白、尿白蛋白肌酐比（UACR）、肌酐清除率（Ccr）、肾脏指数。结果：DN 大鼠肾小管 SIRT1表达显著下降,α- SMA 表达明显上调,肾小管纤维化加速,BUN、尿白蛋白、尿白蛋白排泄率、24 h 尿蛋白等均显著增加;蝉花菌丝治疗能显著提高 DN 大鼠肾小管 SIRT1表达,延缓肾小管纤维化进程,降低 BUN、尿白蛋白、尿蛋白及尿白蛋白肌酐比;蝉花菌丝对非糖尿病大鼠上述指标无显著影响。结论：蝉花菌丝可改善DN 肾小管病理损伤、延缓 DN 进展,从而发挥肾脏保护作用,其机制可能与上调肾小管 SIRT1表达有关。     

Renal angiotensin converting enzyme (ACE) expression in diabetic rats: the effect of ACE inhibitors]

Renal excreted angiotensin converting enzyme (ACE) inhibitor captopril, and renal.hepatic bile excreted ACE inhibitor temocapril, were compared by monitoring serum ACE and renal ACE expression (protein and mRNA) in streptozotocin-induced diabetic rats. Serum ACE levels did not change in untreated diabetic rats or in those treated with temocapril, compared with normal control rats. However, serum ACE levels significantly increased in diabetic rats treated with captopril after 3 months (153.8 +/- 23.0 vs. 43.5 +/- 5.5 IU/l/37 degrees C, p < 0.01) and 6 months (113.6 +/- 9.3 vs. 36.9 +/- 2.9 IU/l/37 degrees C, p < 0.01) compared with normal control rats. Compared with normal control rats (3.6 +/- 0.4), proximal tubular ACE protein expression significantly (p < 0.01) decreased in untreated diabetic rats (1.6 +/- 1.1), but significantly (p < 0.01) increased in diabetic rats treated with captopril (3.7 +/- 0.3) and temocapril (3.5 +/- 0.4). Renal ACE mRNA levels decreased in untreated diabetic rats (125.5 +/- 20.3 vs. 313.3 +/- 53.4, p < 0.01) compared with normal control rats for 6 months. Renal ACE mRNA levels tended to increase in diabetic rats treated with captopril (184.4 +/- 51.2 vs. 125.5 +/- 20.3) and temocapril (165.4 +/- 43.2 vs. 125.5 +/- 20.3) compared with untreated diabetic rats for 6 months. In conclusion, diabetic rats had lower proximal tubular ACE protein expression and lower renal ACE mRNA levels compared with normal control rats. Furthermore, both ACE inhibitors increased renal ACE protein and mRNA expression, but differed in their effect on serum ACE levels.     

蝙蝠蛾拟青霉Cs-4对阿霉素肾病大鼠致纤维化因子表达的影响

目的探讨蝙蝠蛾拟青霉Cs-4对阿霉素肾病大鼠肾脏的保护作用。方法选择雄性Wistar大鼠24只,采用单侧肾脏切除加尾静脉重复注射阿霉素的方法建立阿霉素肾病模型,随机分为正常对照组（N组）、模型组（M组）、蝙蝠蛾拟青霉素Cs-4治疗组（P组）和贝那普利治疗组（B组）,每组6只。于用药后第8周观察各组大鼠24h尿蛋白定量、尿素氮（BUN）、血肌酐（SCr）的水平,应用半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法测定肾脏组织骨调素（OPN）mRNA、金属蛋白酶组织抑制物1（TIMP-1）mRNA、转化生长因子β1（TGF-β1）mRNA的表达。结果M组OPN、TIMP1、TGF较N组表达明显升高（P〈0．01）,P组及B组较M组明显降低（P〈0．01）。结论蝙蝠蛾拟青霉Cs-4可下调阿霉素肾病大鼠肾组织中TIMP-1、OPN、TGF-β1的表达,调节细胞外基质的生成与降解,从而减轻肾脏纤维化,发挥其。肾脏保护作用。     

来氟米特对5／6肾切除大鼠肾皮质TGF-β1表达的影响

目的：探讨来氟米特对5／6肾切除大鼠转化生长因子-β1（TGF-β1）表达的影响。方法：将36只SD大鼠随机分为假手术组（A组）12只和手术组24只,术后3d再将手术组大鼠随机分为模型组（B组）12只和来氟米特组（C组）12只。第4,9周末各组随机选取6只大鼠处死并收集标本,记录血肌酐、尿素氮、胆固醇、三酰甘油、白蛋白及24h尿蛋白排泄量;取肾组织做病理检查,用RT-PCR方法测定肾皮质TGF-β1 mRNA的表达,免疫组化（SP法）检测TGF-β1在肾脏的表达。结果：（1）与A组相比,B组和C组大鼠造模成功后4周末尿素氮、肌酐、血脂等无明显变化（P〉0．05）;B组24h尿蛋白排泄量明显增加（P〈0．01）,血白蛋白下降（P〈0．01）,肾皮质TGF-β1 mRNA表达明显增加（P均〈0．05）。9周末B组肾皮质TGF-β1 mRNA表达量、尿素氮、肌酐、胆固醇明显增加（P〈0．05）,24h尿蛋白排泄量增加更为明显（P〈0．05）。（2）与B组相比,C组24h尿蛋白排泄量明显下降（P均〈0．01）;于9周末尿素氮、肌酐、胆固醇明显降低（P〈0．05）;血白蛋白升高（P〈0．05）,肾小球硬化指数下降（P〈0．01）,肾皮质TGF-β1 mRNA表达量明显下降（P〈0．01）。免疫组织化学染色：B组可见系膜区TGF-β1大量沉积,C组也可见TGF-β1沉积,但较B组明显减轻。结论：来氟米特能减少5／6肾切除大鼠尿蛋白排泄量,纠正其脂代谢紊乱,减轻肾脏的硬化程度,其机制可能与下调系膜细胞上TGF-β1 mRNA的表达量及功能活性有关,最终延缓慢性肾脏病的进展。     

酸味中药复方对2型糖尿病大鼠ET-1、NO及肾脏ICAM-1基因表达的影响

目的：观察酸味中药复方对2型糖尿病大鼠血浆内皮素-1（ET-1）、血清一氧化氮（NO）及肾脏细胞间黏附因子-1（ICAM-1）基因表达的影响,探讨该方保护糖尿病大鼠肾脏病变的作用机制。方法：Sprague-Dawley雄性大鼠采用链脲佐菌素（STZ）配合高热量饲料复制2型糖尿病模型,将成模大鼠分为中药组（SFCC组）、氨基胍组（AG组）、模型组（T2DM组）及正常组（NC组）,用药干预8周和12周后,采用放免法和硝酸还原酶法检测血浆ET-1和血清NO含量,原位杂交法检测大鼠肾脏ICAM-1的基因表达。结果：T2DM组ET-1含量及肾脏ICAM-1基因表达明显高于NC组（P〈0.05）,NO明显低于NC组（P〈0．05）;SFCC组和AG组ET-1含量及肾脏ICAM-1基因表达明显低于T2DM组（P〈0．05）,NO明显高于T2DM组（P〈0.05）。结论：酸味中药复方可能通过调节ET-NO,抑制ICAM-1基因表达实现其对糖尿病大鼠肾脏病变的保护作用。     

骨碎补总黄酮对急性肾衰竭大鼠ICAM-1基因表达的影响

目的：研究骨碎补总黄酮（AFFDR）对大肠杆菌脂多糖（LPS）诱导的急性肾衰竭大鼠肾组织细胞间黏附因子-1（ICAM-1）mRNA表达的影响。方法：用LPS（30mg/kg）腹腔注射建立急性肾衰竭大鼠模型,分模型组（LPS组）、骨碎补总黄酮治疗组（LPS＋AFFDR组）、正常对照组（Control组）和骨碎补对照组（AFFDR组）。实验第7天测定各组大鼠血清肌酐（Scr）的含量,观察肾脏的超微结构和ED-1阳性巨噬细胞的浸润,并用半定量RT-PCR方法检测AFFDR对肾组织ICAM-1 mRNA表达的影响。结果：LPS引起大鼠Scr明显升高,肾脏近曲小管出现明显病理改变。AFFDR有效降低LPS攻击大鼠Scr的含量,明显减轻近曲小管的损伤。LPS组肾组织ED-1阳性巨噬细胞浸润和ICAM-1 mRNA的表达明显高于对照组,而LPS＋AFFDR组肾组织ED-1阳性巨噬细胞的浸润和ICAM-1 mRNA的表达明显低于LPS组。结论：AFFDR防治内毒性急性肾衰竭的作用机制可能与其抑制肾组织ED-1阳性巨噬细胞浸润和ICAM-1的表达有关。     

Ang-2和TM-1与糖尿病鼠肾新生血管生成关系的初步研究

目的：探讨糖尿病肾脏促血管生成素-2（angiopoietin-2,Ang-2）和血栓调节蛋白（thrombomodulin-1,TM-1）表达变化及其与新生血管生成的关系。方法：用雄性SD大鼠建立STZ诱导的糖尿病肾病模型,设正常对照和模型组,分别于2、4、8、12、16、20、24周清洁取肾,采用免疫组织化学染色,定量分析肾脏Ang-2和血栓调节蛋白TM-1表达变化,用逆转录聚合酶链式反应技术（RT-PCR）检测肾脏Ang-2 mRNA的表达。结果：糖尿病组仅于16周和20周时探及肾组织Ang-2 mRNA表达;免疫组化显示糖尿病肾脏12周时皮质区肾小管周围出现Ang-2着染微血管,16周表达最强;整个实验期间对照组未探及Ang-2 mRNA和蛋白表达;TM-1突出表达于肾小球,糖尿病组2~20周肾小球TM-1着染显著高于对照组（P〈0.001）,峰期在4~16周,24周时低于对照组,但无统计学意义（P〉0.05）,TM-1表达变化与肾重/体重、肾小球面积和体积呈正相关。结论：糖尿病肾脏中后期皮质区肾小管管周围存在Ang-2着染的新生微血管,Ang-2和TM-1的异常表达与肾脏新生血管生成有关。     

糖尿病肾病大鼠肾实质内小动脉钙化及其与骨基质蛋白的关系

目的：探讨糖尿病肾病（DN）大鼠肾内小动脉上核结合因子α亚单位1（Cbfa1）、骨钙素（OC）、骨保护素（OPG）的表达及其变化规律。方法：设对照组、糖尿病组两组,建立STZ诱导的DN大鼠模型。茜素红染色观察肾实质内小动脉周围钙盐沉积,并分别采用免疫组化及mRNA原位杂交法检测肾实质内小动脉上Cbfa1、OC、OPG的蛋白表达及基因定位。结果：（1）DN组肾内小动脉Cbfa1蛋白及mRNA表达明显高于对照组。（2）DN组第12周时出现OC mRNA弱表达,16周～24周出现OC蛋白弱表达,对照组无OC表达。（3）DN组OPG蛋白及mRNA在12周时达峰值,16周后下调,均明显高于对照组。结论：（1）DN大鼠肾内小动脉钙化前即已有Cbfa1、OC及OPG的表达。（2）Cbfa1是糖尿病血管钙化的重要转录因子,也是血管钙化的早期生物学标志。（3）OPG在DN时早期表达上调,后期表达下调。（4）肾内小动脉上Cbfa1、OC及OPG的表达变化可能参与DN进展。     

银杏叶提取物对实验性糖尿病大鼠肾组织HGF/c-met表达的影响

目的：研究银杏叶提取物（ginkgo biloba extract,EGb）对实验性糖尿病大鼠肾脏保护作用及其可能机制。方法：SD大鼠随机分为糖尿病对照组（DC）、银杏叶提取物（金纳多）治疗组（DG）和正常对照组（NC）,观察各组大鼠肾脏病理改变;应用免疫组化监测HGF、TGF-β1表达量,运用RT-PCR监测HGF、c-met的mRNA表达情况。结果：免疫组化显示：HGF在NC组微量表达于肾小球系膜区,DC组第2周表达明显增加,与NC组相比差异有统计学意义（P〈0.01）,第6周表达较前明显下降;DG组第2周表达明显增加,第6周表达较前有所下降,与NC组同期相比差异有统计学意义（P〈0.01）,与DC组相比差异有统计学意义（P〈0.05）;TGF-β1在NC组中无阳性表达,DC组表达明显升高,与NC组同期相比差异有统计学意义（P〈0.01）,DG组表达升高,但低于DC组（P〈0.01）,与NC组同期相比差异有统计学意义（P〈0.01）;RT-PCR结果显示：HGF/c-metmRNA在NC组中有一定量表达,第2周与第6周之间差异无统计学意义（P〉0.05）;DC组与NC组相比,在第2周表达量升高（P〈0.01）,第6周表达量较前明显下降;DG组与DC组平行相比表达量显著升高（P〈0.01）。结论：HGF在DN的病程进展中发挥着重要作用,EGb可以抑制ACE,下调TGF-β1的表达,上调HGF/c-met的表达,减轻肾小球系膜区增生,改善肾功能。