HPLC法同时测定食品中的4种黄曲霉毒素

目的：建立测定食品中的4种黄曲霉毒素含量的HPLC方法。方法：采用高效液相色谱仪（附荧光检测器）,Zor-bax Zebax-C18色谱柱（250 mm＊4.6 mm,5μm）,流动相为水和乙腈,流速1.0 ml/min,激发波长：360 nm,发射波长：440 nm作为分析条件,以正己烷和三氟乙酸为衍生剂来测定食品中的4种黄曲霉毒素含量。结果：黄曲霉毒素AFB1、AFG1在0～100μg/kg范围内线性关系良好,AFB2、AFG2在0～25μg/kg范围内线性关系良好,相关系数均大于0.999;4种黄曲霉毒素回收率均在75%～104%之间;按取样量20 g计算,则AFB1、AFB2、AFG1、AFG2在样品中的检出限分别为0.20、0.05、0.20、0.05μg/kg。结论：该法具有准确、灵敏、重复性好等优点,适合食品中的4种黄曲霉毒素含量的检测。     

免疫亲和柱净化-光化学柱后衍生-HPLC法检测茶叶中黄曲霉毒素

目的建立免疫亲和柱净化-光化学柱后衍生-高效液相色谱(HPLC)-荧光法测定茶叶中黄曲霉毒素AFB1、AFB2、AFG1、AFG2的检测方法。方法样品经甲醇-水(7∶3,V/V)提取,提取液经过滤、稀释后,滤液经过免疫亲和色谱柱纯化,以甲醇-水(45∶55,V/V)为流动相洗脱,Cloversil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)分离,采用光化学衍生器衍生,荧光检测器在激发波长360 nm、发射波长440 nm处测定。结果 AFB1、AFG1在0.50μg/L~20μg/L时具有良好的线性关系,检出限为0.50μg/kg,AFB2、AFG2在0.15μg/L~6.0μg/L时具有良好的线性关系,检出限为0.20μg/kg,其相关系数均0.999 2,回收率为82.6%~94.4%,相对标准偏差10%。结论该方法具有快速、灵敏、简便、准确等优点,适用于测定茶叶中的黄曲霉毒素AFB1、AFB2、AFG1、AFG2。     

中国部分地区玉米中4种黄曲霉毒素污染调查

目的了解中国玉米中黄曲霉毒素B1(AFB1)、黄曲霉毒素B2(AFB2)、黄曲霉毒素G1(AFG1)和黄曲霉毒素G2(AFG2)的污染状况。方法从吉林、河南、湖北、四川、广东、广西采集玉米样品,用HPLC测定黄曲霉毒素含量。结果共测定279份玉米,黄曲霉毒素阳性率为75.63%,阳性样品平均浓度为44.04μg/kg,浓度范围0.20～888.30μg/kg。四川、湖北、广西、河南、广东和吉林样品的阳性率依次为90.48%、93.75%、87.50%、36.96%、91.84%和52.17%,平均浓度依次为107.93、70.98、39.65、8.06、3.70和1.15μg/kg。4种毒素中AFB1阳性率和平均浓度最高,分别为74.55%和39.64μg/kg;AFB2、AFG1和AFG2的阳性率和平均浓度依次降低,阳性率分别为58.42%、41.22%和19.71%,平均浓度分别为3.81、3.47和0.51μg/kg。结论玉米的黄曲霉毒素污染比较普遍;调查的各地样品均有不同程度污染,总体上南方地区高于北方;4种毒素中以AFB1污染为主。     

烟台市售食品黄曲霉毒素污染状况及膳食暴露评估

目的 了解烟台市售食品黄曲霉毒素污染状况及居民膳食来源暴露风险水平。方法 免疫亲和层析高效液相色谱法测定样品中黄曲霉毒素,点评估方法估算人群黄曲霉毒素暴露量。结果 检测的市售食品中AFB1检出率为4.19%（19/453）,超标率为0.22%（1/453）,均值为0.86 μg/kg。AFB2、AFG1、AFG2和AFM1检出率分别为2.13%（9/423）、1.65%（7/423）、0.95%（4/423）和41.90%（44/105）,均值分别为0.29、0.64、0.33和 0.03 μg/kg。食品中存在AFB1、AFB2、AFG1和AFG2多重污染情况。AFB1的检出均值占到黄曲霉毒素(AFB1、AFB2、AFG1和AFG2)均值总和的47.18%。AFB1、AFB2、AFG1、AFG2和AFM1的日膳食暴露量分别为4.326、1.733、3.143、2.423和0.168 ng/（kg·bw·d）。AFB1、AFB2、AFG1、AFG2和AFM1的膳食暴露贡献率分别占到总体的36.69%、14.70%、26.65%、20.55%和1.42%。谷类及其制品的膳食暴露贡献最大,食用植物油的贡献次之。结论 AFB1总体检出率和均值均高于AFB2、AFG1和AFG2,是主要的污染品种。谷类及其制品和食用植物油是主要的AFB1、AFB2、AFG1和AFG2膳食暴露来源。乳制品是主要的AFM1的膳食暴露来源。烟台市居民AFB1和AFM1膳食暴露导致肝癌发病率为0.101/10万人和0.004/10万人。     

中国部分地区花生中4种黄曲霉毒素污染调查

目的了解中国花生中黄曲霉毒素B1(AFB1)、黄曲霉毒素B2(AFB2)、黄曲霉毒素G1(AFG1)和黄曲霉毒素G2(AFG2)的污染状况。方法从吉林省、河南省、湖北省、四川省、广东省和广西自治区采集花生样品,用高效液相色谱测定黄曲霉毒素含量。结果共测定197份花生,115份阳性,平均浓度为91.74μg/kg;四川省、吉林省、广东省、广西省、湖北省和河南省样品阳性率依次为53.12%(17/32)、66.67%(22/33)、63.64%(21/33)、61.76%(21/34)、60.00%(21/35)和43.33%(13/30),平均浓度依次为244.96、136.74、94.11、44.30、22.20和0.33μg/kg;4种毒素中AFB1阳性率和平均浓度最高,分别为58.38%和77.77μg/kg;AFB2、AFG1和AFG2的阳性率和平均浓度依次降低。结论花生的黄曲霉毒素污染比较普遍,调查的各地样品均有不同程度污染;4种毒素中以AFB1污染为主。     

福建省市售花生及花生制品中4种黄曲霉毒素污染调查

目的:了解福建省花生中黄曲霉毒素B1(AFB1)、黄曲霉毒素B2(AFB2)、黄曲霉毒素G1(AFG1)和黄曲霉毒素G2(AFG2)的污染状况。方法:从福建省九个地区采集花生和花生制品,用高效液相色谱测定黄曲霉毒素含量。结果:共测定62份花生,40份花生酱,20份花生油。以国家标准规定的黄曲霉毒素B1限值20μg/kg计,超标率分别为17.7%、37.5%和0。4种毒素中AFB1阳性率和平均浓度最高,AFB2、AFG1和AFG2的阳性率和平均浓度依次降低。结论:福建省花生和花生制品的黄曲霉毒素污染比较普遍,4种毒素中以AFB1污染为主。     

开封市2015—2020年部分市售食品中黄曲霉毒素污染状况调查及膳食暴露风险评估

摘要：目的 了解2015—2020年开封市部分市售食品中黄曲霉毒素（AFT）的污染状况,评估居民膳食中AFT的暴露水平及潜在健康风险,为完善开封市食品卫生标准提供科学依据。方法 在开封市9个县、区的超市、农贸市场随机采集谷类及其制品、植物油、坚果及籽类、调味品、乳制品、酒、茶叶、豆及豆制品等食品共738份,采用液相色谱-荧光检测法对乳制品中黄曲霉毒素M1（AFM1）进行检测,采用免疫亲和柱净化-高效液相色谱法对其他样品中黄曲霉毒素B1（AFB1）、黄曲霉毒素B2（AFB2）、黄曲霉毒素G1（AFG1）、黄曲霉毒素G2（AFG2）进行检测,并对检测结果进行评价。采用食物频率法收集开封市居民上述食物消费量,采用简单分布评估和暴露限值( MOE) 法计算膳食中AFB1的暴露水平和致癌风险。结果 738份样品中共有267份样品检出AFT,检出率为36.2 %,总超标率为5.0%。花生中AFT超标率最高,为15.3%。4种AFT（AFB1、AFB2、AFG1、AFG2）中AFB1的检出率最高,为25.7%,花生中AFT及AFB1检出水平最高值最高,分别为43.700 ug/kg、36.400 ug/kg。开封市居民膳食中AFB1总暴露量为12.07 ng/kg BW,谷类及其制品、植物油、坚果类、调味品类、豆与豆制品类及酒类对AFB1的膳食暴露量贡献率分别为9.36%、22.29%、58.32%、6.46%、2.82%及0.99%。居民通过摄入被AFB1污染的食物引起肝癌的风险：0.025例/10万人（谷类及其制品）、0.059例/10万人（植物油）、0.154例/10万人（坚果类）、0.017例/10万人（调味品类）、0.007例/10万人（豆与豆制品类）及0.003例/10万人（酒类）。MOE值由低到高依次为：坚果类、植物油、谷类及其制品、调味品类、豆与豆制品类、酒类。结论 开封市市售食品存在AFT污染情况,坚果类及植物油在控制开封市居民膳食中AFT暴露水平和致癌发病风险中是不可忽视的重点食品,应加大监管及宣传力度,指导群众健康饮食。     

深圳粮油食品中4种黄曲霉毒素联合污染状况

目的调查分析深圳地区市售粮食和食用油中4种黄曲霉毒素(AFs)的污染状况。方法以分层随机抽样得到的238份粮油食品作为研究对象,采用免疫亲和层析净化超高效色谱法测定AFB1、AFB2、AFG1和AFG24种黄曲霉毒素含量。结果大米、米制品、小麦粉、玉米粉、食用油中总黄曲霉毒素阳性率分别为35.3%、33.8%、13.9%、46.7%和24.5%。其中定型包装大米AFs阳性率(26.5%)与散装大米AFs阳性率(56.3%)差异有统计学意义(χ2=11.6,P<0.05);长江以北地区出产的大米AFs阳性率(27.3%)与长江以南地区出产的大米AFs阳性率(41.4%)差异有统计学意义(χ2=7.257,P<0.05)。米制品、小麦粉和玉米粉仅检出黄曲霉毒素B1和B2。食用油中AFB1、AFB2、AFG1和AFG2阳性率分别为24.5%、24.5%、11.3%和3.8%。AFB1超标率为5.66%,超标样本全部为作坊生产的无牌散装自榨花生油。结论深圳市售大米、食用油存在4种黄曲霉毒素联合污染的状况,污染以黄曲霉毒素B1和B2为主。深圳市售南北两地产大米污染状况有差异,散装包装大米污染状况有差异。     

玉米中四种黄曲霉毒素的关系

目的了解我国玉米中黄曲霉毒素B1（AFB1）、黄曲霉毒素B2（AFB2）、黄曲霉毒素G1（AFG1）和黄曲霉毒素G1（AFG1）污染的关系。方法用统计方法分析玉米中任意两种毒素污染率、污染浓度的相关性;计算AFB1与总黄曲霉毒素（AFs）的数量关系,分析AFB1在AFs中的构成1结果AFB1检出率最高,AFB1没有单独污染,均伴随AFB1。任两种毒素浓度呈正相关（P=0．000）,AFB1、AFB1、AFG1与AFG1的相关系数均大于0．951任两种毒素检出率有相关性（P=0．000）,AFB1和AFBz相关性最强1随AFB1浓度区间增高,AFB1检出率增高,AFG1和AFG1检出率先升高后降低;AFB1与AFs浓度比升高,AFs高于4μg／kg时,浓度比超过0．51结论AFB1和AFBz污染密切相关,AFBz伴随AFB1,二者污染率和浓度呈正向变化。当AFB1浓度较高时,对AFG1和AFG1呈现抑制作用1按照AFs限量是AFB1的两倍,当玉米中AFs限量在4μg／kg以上时,同时制定AFB1和AFs限量,与仅制定AFB1限量相比,不增加管理效力。     

超高效液相色谱法同时测定油炸食品中4种黄曲霉毒素

目的建立一种快速、灵敏、简便的超高效液相色谱法（UPLC）同时测定油炸食品中黄曲霉毒素B1（AFB1）、B2（AFB2）、G1（AFG1）、G2（AFG2）水平的方法。方法样品用乙腈水（84：16）提取液提取后过滤,滤液经黄曲霉毒素多功能净化柱（MFC）净化,纯化液经浓缩挥干后,加三氟乙酸（TFA）衍生后,用带有荧光检测器的超高效液相色谱仪测定。结果 4种黄曲霉毒素5 min完全分离,线性范围质量浓度分别为0.10~100.00μg/L（AFB1、AFG1）、0.05~50.00μg/L（AFB2、AFG2）,最低检出质量分数分别为0.04μg/kg（AFB1、AFG1）、0.02μg/kg（AFB2、AFG2）,油炸食品回收率为82.0%~101.2%,相对标准偏差〈5%,r≥0.999。结论该方法简单、快速、灵敏度高,适用于油炸食品中4种黄曲霉毒素水平的同时测定。     

柱后光化学衍生-高效液相色谱法测定食品中4种黄曲霉毒素方法研究

目的 建立一种定量检测食品中黄曲霉毒素的高效液相色谱方法.方法 样品经提取、免疫亲和柱净化,以甲醇-水(45:55,v/v)为流动相,C18柱分离后,经柱后光化学衍生并通过荧光检测器定量.结果 4种黄曲霉毒素在25min内得到良好的基线分离,检出限0.25 μg/kg,在1.0～10.0μg/KGg范围内,AFB1、AFB2、AFG1、AFG2加标回收率分别为94.2％～97.5％、95.3％～99.1％、84.5％～97.8％和88.4％～98.2％,相对标准偏差分别为3.6％～5.8％、3.5％～5.5％、4.6％～7.9％和4.3％～6.6％.结论 该方法准确、简便、重复性好、灵敏度高,能满足食品中黄曲霉毒素定性定量检测要求.     

HPLC柱后衍生同时测定黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的探讨

目的:建立黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的高效液相色谱柱后衍生检测方法。方法:样品通过高效液相色谱柱分离后,进入柱后衍生装置与碘溶液发生反应,最后进入荧光检测器进行检测。结果:该方法的检出限AFB1、AFG2为0.03μg/kg、AFB2为0.01μg/kg、AFG1为0.05μg/kg。结论:方法灵敏度高,准确度好,操作简单,实用性强,可用于黄曲霉毒素的检测。     

Caco-2细胞模型的建立及其在真菌毒素吸收率研究中的应用

目的构建Caco-2单层细胞转运5种毒素的吸收率模型并验证。方法以Caco-2细胞系为工具,以脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)、黄曲霉毒素B1(AFB1)、AFB2、黄曲霉毒素G1(AFG1)和AFG2为研究对象,通过对转运介质溶液中毒素的初始浓度、温度、p H值、抑制剂存在与否等实验条件的优化,构建Caco-2细胞转运DON和4种黄曲霉毒素的生理模型并进行验证。结果 DON、AFB1、AFB2、AFG1及AFG2透过Caco-2单层细胞的量和表观渗透系数(Papp)随着体系溶液中p H的升高有下降趋势。AFB1在p H 7.4~7.5溶液中的Papp值最高,AFB2、AFG1、AFG2及DON在p H 7.0~7.1溶液中的Papp值最高。随着体系温度的升高,DON、AFB1、AFB2、AFG1及AFG2的透膜能力均有所增加。无论体系中AFB1、AFG1及AFG2浓度低或高,均在60 min时透过率达到平台期并维持稳定;而AFB2及DON从高浓度到低浓度均在120 min时透过率达到平台期并维持稳定。结论所建5种毒素Caco-2单层细胞模型灵敏、稳定、可靠、有效。     

咸阳市2014年市售部分食品中真菌毒素污染状况分析

目的了解咸阳市市售部分食品真菌毒素的污染状况。方法分层随机抽取样品,不同样品进行有针对性指标的检测,将监测结果与国家标准限值进行对照,并进行统计学分析。结果共抽检样品63份,合格率为100.0%。不同食品中污染的主要真菌毒素不同,小麦粉和燕麦中分别为DON和3A-DON;玉米粉中为伏马菌毒素B1和玉米赤霉烯酮;花生油和玉米粉中为黄曲霉毒素(AFB1、AFB2);调料粉中为黄曲霉毒素(AFB1、AFB2、AFG1)。不同食品间真菌毒素检出率比较:谷物及其制品与花生油之间,差异无统计学意义(P0.05);调料粉与谷物及其制品和花生油之间,差异均有统计学意义(P0.05)。谷物及其制品和调料粉中,散装包装和定型包装,差异均无统计学意义(P0.05)。结论本市该6种食品真菌毒素污染状况相对较好,但根据检出率监测结果看,需要引起关注,应加强对这几类食品的监督管理,引导公众正确消费。     

ELISA法和HPLC法检测粮油食品中黄曲霉毒素B1含量的比较研究

〔目的〕研究和评价ELISA和HPLC两种方法检测粮油食品中黄曲霉毒素B1 之间的差异。〔方法〕用两种检测方法同时检测大量样品 ,并做加标回收试验。〔结果〕ELISA法和HPLC法相对误差平均值为 5 .2 5 %。在AFB1 浓度为0 .5～ 12 .5ppb时 ,ELISA法回收率为 3 5 .2 1%～ 15 5 .13 % ,HPLC回收率为 3 3 .74%～ 75 .70 %。〔结论〕ELISA法比HPLC法操作简便 ,快捷 ,回收率较理想     

免疫亲和柱净化-酶联免疫吸附法检测普洱茶中黄曲霉毒素B1

目的建立普洱茶中黄曲霉毒素B1(AFB1)的免疫亲和柱净化-酶联免疫吸附检测方法。方法粉碎后的普洱茶样品经三氯甲烷提取,水浴挥干后用甲醇-PBS溶解,样品液通过黄曲霉毒素B1免疫亲和柱净化洗脱,在450nm波长使用酶联免疫试剂盒(ELISA)定量检测黄曲霉毒素B1含量。结果该方法在2.0~100.0μg/kg浓度范围内百分吸光率和浓度对数呈良好的线性关系,相关系数达0.999 8,样品最低检出限为1.0μg/kg,重复测定相对标准偏差为4.72%,3个水平(1.0、10.0、50.0μg/kg)的样品加标回收率为83.00%~104.90%。结论本法具有简单、快速、高效等优点,适用于普洱茶复杂样品的AFB1定量检测。     

免疫亲和柱净化-酶联免疫吸附法检测普洱茶中黄曲霉毒素B_1

目的 建立普洱茶中黄曲霉毒素B1（AFB1）的免疫亲和柱净化-酶联免疫吸附检测方法。方法 粉碎后的普洱茶样品经三氯甲烷提取,水浴挥干后用甲醇-PBS溶解,样品液通过黄曲霉毒素B1免疫亲和柱净化洗脱,在450nm波长使用酶联免疫试剂盒（ELISA）定量检测黄曲霉毒素B1含量。结果 该方法在2.0~100.0μg/kg浓度范围内百分吸光率和浓度对数呈良好的线性关系,相关系数达0.999 8,样品最低检出限为1.0μg/kg,重复测定相对标准偏差为4.72%,3个水平（1.0、10.0、50.0μg/kg）的样品加标回收率为83.00%~104.90%。结论 本法具有简单、快速、高效等优点,适用于普洱茶复杂样品的AFB1定量检测。     

深圳市罗湖区居民食用油黄曲霉毒素风险评估

目的了解罗湖区食用油黄曲霉毒素B1(AFB1)污染状况,掌握辖区居民食用油的AFB1暴露水平,评估食用油中AFB1污染导致人群出现健康危害的风险。方法以分层随机抽样方法采集食用油样品50份,用液质谱联用方法 (LC-MS/MS)检测其中的AFB1含量。结合2008年深圳市居民总膳食调查数据和食用油AFB1含量数据,估计罗湖区居民食用油中AFB1的暴露水平。应用AFB1致肝癌平均危害程度公式对食用油中AFB1对居民可能造成的健康危害进行风险评估。结果食用油中黄曲霉毒素含量平均值为0.79μg/kg,超标率为0.0%。不同场所的食用油中黄曲霉毒素检出率差异无统计学意义(χ2=1.746,P=0.094)。估计膳食暴露摄入量为0.0229μg/d,植物油对于肝癌发病率的贡献为1.489/107人。结论经风险分析发现植物油黄曲霉毒素B1风险较低,总体安全性较好,但是其中花生油黄曲霉毒素含量相对较高,今后应针对花生及其制品进行长期的监测。     

市售花生、玉米中黄曲霉毒素与伏马菌素污染水平调查

[目的]了解南京市市售花生、玉米及其制品的黄曲霉毒素(aflatoxin,AFT)和伏马菌素B(FumonisinB,FB)的污染水平,就两者的联合污染水平进行探讨。[方法]收集南京市超市和农贸市场的部分花生、玉米及其制品,采用ELISA法测定FB与黄曲霉毒素B(1AFB1)的含量。[结果]超市所采集的19份样品AFB1的检出率为68%,平均含量为0.53μg/kg,FB的检出率为21%,平均含量为0.56mg/kg。农贸市场所采集的49份样品AFB1的检出率为59%,平均含量为6.98μg/kg,FB的检出率为76%,平均含量为9.89mg/kg。所有玉米及其制品样品AFB1和FB的联合污染率为33%,其中超市样品的联合污染率为21%,农贸市场样品的联合污染率为38%。[结论]南京市市售花生、玉米及其制品中存在AFB1和FB的污染,且玉米及其制品存在联合污染问题。     

湖北省市售坚果及籽类制品中4种黄曲霉毒素含量的监测质量评价

目的了解湖北省市售坚果及籽类制品中4种黄曲霉毒素的污染状况。方法采用高效液相色谱法对湖北省9个地市州的市售9种坚果及籽类制品中4种黄曲霉毒素的含量进行测定。结果采集样品256份,黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的检出率分别为76.17%、25.00%、62.11%、17.97%,4种毒素的检出率比较差异有统计学意义(χ2=247.393,P0.05),黄曲霉毒素B1的超标率为1.95%,黄曲霉毒素B2、G1、G2因无国家限量标准故不予评价;各地市州之间黄曲霉毒素的检出率比较差异无统计学意义(χ2=11.773,P0.05);在监测的9类坚果及籽类样品中,其检出率比较差异无统计学意义(χ2=12.941,P0.05)。结论湖北省坚果及籽类制品中存在黄曲霉毒素污染的现象,污染以AFB1为主,应引起相关部门的重视,并强化日常监督。