晚期糖基化终末产物对表皮角质形成细胞功能的影响及其机制

目的研究晚期糖基化终末产物（AGEs）对表皮角质形成细胞（KCs）功能的影响及其生物学机制。方法分离培养正常SD大鼠KCs，加入不同浓度AGEs干预48h，选择细胞反应敏感，差异显著的100μg／ml AGEs干预组进行以下实验：用二甲基噻唑二苯基四唑溴盐（MTT）法测定细胞增殖速度；检测KCs周期和凋亡，观察细胞核中NF—κB的活化状态；检测KCs迁移能力。结果100μg／ml AGEs可以明显抑制KCs的增殖和分裂；诱导细胞进入早期凋亡状态；促进KCs迁移。抑制NF—κB的活性后，部分恢复细胞的增殖能力；逆转细胞的早期凋亡；使细胞的迁移能力趋于正常。结论AGEs可以通过NF—κB途径影响KCs迁移、增殖和凋亡。     

糖基化终末产物对人表皮角质形成细胞周期调控的影响机制

目的通过体外试验探讨糖基化终末产物（AGEs）对表皮角质形成细胞周期调控的影响机制。方法体外培养的人表皮角质形成细胞经AGEs（150mg／m1）作用后,用噻唑兰（MTT）法研究其增殖活力、流式细胞仪研究细胞周期和凋亡率。用小片断RNA干扰（siRNA）的方法阻断细胞中AGEs受体（receptor of AGEs,RAGE）mRNA的表达,realtime PCR鉴定其阻断效率。RT-PCR法检测RAGE阻断前后各组细胞内RAF-1、黏着斑激酶（FAK）、周期素（cyclin）D1、cyclinBl、周期表依赖性激酶4（CDK4）的核酸水平表达差异。结果经AGEs干预后表皮角质形成细胞增殖活性下降,凋亡率升高,细胞周期G2期的比例显著增高,而细胞周期调控相关因子及信号因子RAF．1、cyclinDl、cyelinBl、CDK4的核酸表达较对照组却明显升高,用RAGE阻断以上因子后表达则与对照组相比无差异。结论在上述体外模型下,表皮角质形成细胞的周期调控因子升高,而增殖却下降且凋亡增加,可能是AGEs干预后细胞内启动内源性代偿调控机制,且这种调控机制与其受体（RAGE）途径相关;AGEs也可能还通过以上细胞周期调控因子以外的其他途径或机制影响细胞生物学功能。     

NF-κB在大鼠颅脑损伤后表达水平与细胞凋亡的关系

目的 探讨颅脑损伤后不同阶段NF-κB及其下游炎症因子与神经元凋亡的共变关系及可能的机制. 方法采用随机数字表法将大鼠分为颅脑损伤组、颅脑损伤+吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)组和假手术对照组,并在处理后6,24,168 h分别用免疫组化、RT-PCR、TUNEL法测定脑组织NF-κB、TNF-α和神经元凋亡水平. 结果在颅脑损伤后急性、亚急性期,颅脑损伤组损伤灶周围脑组织中NF-κB、TNF-α较假手术对照组和PDTC组表达明显增高,与神经元凋亡指数呈正相关;在颅脑损伤晚期颅脑拟伤组损伤灶周围脑组织中NF-κB、TNF-α表达有所下降,但仍高于假手术对照组和PDTC组,与神经元凋亡指数呈负相关. 结论 NF-κB和下游炎症因子可能在颅脑损伤后急性、亚急性期有促进神经元凋亡作用,在慢性期有抑制神经元凋亡作用.     

微粒皮种植对糖尿病足创面组织中AGEs、RAGE表达水平的影响

目的观察微粒皮种植治疗糖尿病足过程中创面组织中晚期糖基化终末产物(advanced glycation end products, AGEs)及晚期糖基化终末产物受体(receptor of advanced glycation end products, RAGE)的变化规律,进而探讨微粒皮种植对糖尿病足创面组织中AGEs及RAGE表达水平的影响。方法对2016年1月至2018年1月广州医科大学附属第五医院皮肤科及南方医科大学皮肤病医院皮肤外科收治的21例Wagner3～4级糖尿病足患者进行微粒皮种植治疗,分别于治疗前及治疗第7、14天测量创面面积并取创面组织进行酶联免疫吸附检测,对比观察各时间点创面组织中AGEs及RAGE的含量。结果 (1)治疗60 d后,18例患者创面完全愈合、3例患者创面明显缩小。(2)治疗过程中,21例患者创面组织中AGEs及RAGE的含量均呈逐渐下降的趋势,其中各时间点创面组织中AGEs的含量对比,P均0.01,差异具有统计学意义;RAGE的含量对比,除治疗前与治疗第7天对比,P0. 05,差异无统计学意义外,其余各时间点对比,P均0.01,差异具有统计学意义。结论微粒皮种植治疗可能能够降低糖尿病足患者创面组织中AGEs、RAGE的表达水平,促进创面愈合。     

核因子κB与修复细胞间的生物学关系

核因子KB(NF-KB)是一种重要的二聚体核转录因子，存在于多种细胞，参与细胞的黏附、炎性细胞的趋化、增殖等多种生理、病理过程的基因转录，具有重要的生理和病理意义。近年来的研究表明，NF-KB在修复细胞的生理或是病理性修复中可以起到枢纽性作用。     

帕立骨化醇对糖尿病大鼠肾脏保护作用的机制探讨

目的 观察维生素D受体激动剂帕立骨化醇对糖尿病大鼠肾脏保护作用的可能机制.方法 雄性Wistar大鼠随机分为对照组、糖尿病组、糖尿病组+帕立骨化醇治疗组.大鼠建立糖尿病模型.第10周测肾质量/体质量、空腹血糖、24h尿微量白蛋白排泄率;肾组织匀浆测定丙二醛含量、超氧化物歧化酶活性;RT-PCR检测肾组织肾素受体、nep...     

NF-κB在放射性损伤中的表达改变及作用机制的研究进展

随着肿瘤发病率的升高,需要接受放射治疗的人数也越来越多;而且由于放射治疗技术的不断发展,患者的长期生存期也在不断延长。因此,在长期生存的患者中防止放射性损伤的发生就尤为重要。NF-κB在各种基因转录的过程中承担着重要作用,并与放射性损伤的发生有着密切关系。笔者就NF-κB的结构、激活、功能作一介绍,并对放射性脑损伤及放射性肺损伤中NF-κB的表达变化、调节机制,以及NF-κB抑制剂的研究进展作一综述。     

黏着斑相关非激酶抑制肝癌细胞迁移及分子机制研究

目的用黏着斑激酶(FAK)磷酸化抑制剂黏着斑相关非激酶(FRNK)阻断FAK磷酸化,探讨FAK信号途径在肝癌细胞迁移中的作用、分子机制及FRNK对迁移的抑制效应。方法利用EGFPFRNK质粒转染培养的肝癌HepG2细胞,Transwell小室模型研究对细胞迁移能力的影响,Westernblot法检测FAK和磷酸肌醇3激酶(PI3K)的磷酸化水平,并通过激光共聚焦分析免疫荧光双染后转录因子核因子κB(NFκB)核转位的情况。结果EGFPFRNK重组质粒转染HepG2细胞后,外源性FRNK可显著抑制HepG2细胞的迁移能力,转染组的磷酸化FAK比未转染组下降约50.2%(P<0.01)。PI3K水平也较未转染组降低了39.5%(P<0.05)。代表NFκB核转位的细胞核区与胞质区绿色荧光比值分别为3.495±0.227和1.182±0.106,转染组显著低于未转染组(P<0.01)。结论外源性FRNK可抑制FAK磷酸化,从而降低抑制PI3K和NFκB的活化水平而减少细胞迁移,FAK可能是介导肝癌HepG2细胞迁移的重要信号途径。     

人脑外伤后皮层核因子-κB的表达

目的 探讨核因子-κB（nuclear factor—κB，NF—κB）在人创伤性脑损伤（traumatic brain injury，TBI）后挫伤皮层中的表达情况，包括表达位置、表达强度和表达时相。方法 挫伤区皮层的标本来自24例TBI患者，取样时间为伤后5h-5d，利用凝胶电泳迁移分析法（electrophoretic mobility shift assay，EMSA）和免疫组化技术测定NF—κB的活性和表达强度。结果 在人TBI后的挫伤区皮层中，NF—κB表达明显上调，表达高峰为伤后48—72h，NF—κBP65主要在血管内皮细胞和神经胶质细胞中表达，NF—κBP50主要在神经胶质细胞和少量神经元中表达，NF—κBP65的表达强度高于NF—κBP50。结论 NF—κB在人TBI后的挫伤区皮层中表达上调，提示其可能在TBI后的病理生理过程中起着重要作用。     

甲基硝基亚硝基胍对人正常胃黏膜GES-1细胞恶变的影响及其机制研究

目的 观察甲基硝基亚硝基胍(MNNG)对人正常胃黏膜GES-1细胞恶变的影响,并探讨其可能的机制.方法 采用不同浓度梯度MNNG作用于人正常胃黏膜GES-1细胞,培养24h后采用CCK-8法检测各组细胞增殖情况,Transwell小室检测细胞侵袭及迁移能力;48h后采用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡情况,实时荧光定量PCR及Western blotting检测细胞NF-κB p65 mRNA及蛋白表达情况.结果 选择诱导胃黏膜GES-1细胞恶变的MNNG浓度为2×10-4mol/L.MNNG能明显促进GES-1细胞的增殖和侵袭转移,并抑制其凋亡(P＜0.01);MNNG诱导胃黏膜GES-Ⅰ细胞后,细胞内NF-κB p65 mRNA及蛋白表达水平均上调(P＜0.05).结论 MNNG可促进人正常胃黏膜GES-1细胞的增殖及侵袭转移,抑制细胞凋亡,诱导细胞恶变,其机制可能与激活NF-κB有关.     

糖尿病大鼠视网膜NF-kB表达与其血流改变的实验性研究

目的:连续6个月,观察NF-kBp65在视网膜的表达,研究糖尿病大鼠视网膜中央动脉、静脉血流动力学的变化,并探讨分析两者的相关性。方法:采用右下腹腔内一次性注射Streptozotocin 60mg/kg诱导Wistar大鼠糖尿病模型35只,分别于成模后1、2、34、、5及6个月,行视阀膜NF-kBp65的免疫组织化学检测、视网膜血管消化铺片和彩色多普勒血流显像检查。结果:NF-kBp65在正常对照组大鼠视网膜的血管层有少许阳性表达,随糖尿病病程延长,NF-kBp65的阳性表达数目和范围增加,同时,视网膜中央动脉速度减低,博动指数、阻力指数增加,视网膜中央静脉流速增加,视网膜微血管出现狭窄闭塞。结论:NF-kBp65的表达随糖尿病病程延长、视网膜组织缺血缺氧的加重而显著增加。     

MRI spectrum of bone changes in the diabetic foot

Purposes

(1) To assess the prevalence of bone marrow changes in the diabetic foot and (2) to discuss the clinical significance of these changes.

Methods

85 patients with radiographic and magnetic resonance imaging (MRI) foot examinations were selected. Inclusion criteria were clinical diagnosis of diabetes and bone changes on radiographs and MRI. The material was selected from the image storage (PACS) system. We searched for vascular (infarct and necrosis), traumatic (bruise and occult fractures), destruction and debris, dislocation, osteochondritis, osteomyelitis. Five patients had bilateral examinations. A total of 90 feet were evaluated.

Results

From 90 feet, 17 (18.9%) presented with vascular changes, from them, 11 feet had infarct and 6 feet had necrosis. Twenty (22.2%) feet had traumatic changes; of them, 10 (50%) had edema on MRI. Five (25%) cases had occult fracture on MRI; and 5 (25%) had visible fracture on both X-ray and MRI. Bone destruction was detected in 8 (8.9%) feet. Bony debris was visualized in three of them. Bone dislocation was visualized in 11 (12.2%) feet. There was evidence of osteochondritis in twenty-four (26.7%) feet. Osteomyelitis was diagnosed in ten (11.1%) feet.

Conclusion

Diabetic foot is a challenge for both clinicians and radiologists due to its complexity. The bone derangements inherent to the diabetic foot can be evaluated with high accuracy with MRI.     

hTERT基因修饰对人外周血树突状细胞生物学行为的影响

目的观察人端粒酶逆转录酶（hTERT）基因修饰对树突状细胞生物学行为的影响。方法用负载hTERT目的基因的复制缺陷型腺病毒（rAd—hTERT）感染原代培养的人树突状细胞（DC）以获取hTERT基因修饰的DC（DC—hTERT）,采用免疫组化及Westem blot法检测DC-hTERT内hTERT及增殖细胞核抗原（PCNA）的表达;采用流式细胞术检测DC-hTERT表面成熟标志的变化;采用MTT法检测DC-hTERT的增殖能力。结果rAd-hTERT感染DC后hTERT蛋白表达明显增加;流式细胞术检测显示,感染Ad-hTERT后DC表面成熟指标CD83及CD86无明显变化;成熟1312经hTERT修饰后的生长曲线显示,DC-hTERT在前2周数量稍有增加,但DC/PBS及DC/rAd-LacZ数量明显下降,在第3周三者数量均有下降趋势,但DC-hTERT组细胞数量仍明显多于其他两组;Western blot检测显示DC-hTERT内PCNA的表达明显增强。结论hTERT基因表达上调后,DC增殖能力明显增强,衰老速度延缓。     

Mechanisms underpinning exercise-induced changes in left ventricular function

Despite a growing body of evidence suggesting that prolonged strenuous exercise (PSE) is associated with a transient reduction in right (RV) and left ventricular (LV) performance, the exact mechanism(s) responsible for this phenomenon is not fully understood. As such, the primary objective of this article was to critically review the available literature (both animal and human) to provide insight into the potential mechanism(s) responsible for the development of "exercise-induced cardiac fatigue." We pay particular attention to the major mechanisms that have been linked to transient changes in systolic function after PSE including altered loading conditions, myocardial ischemia/damage, altered beta-receptor responsiveness, and altered cardiac autonomic modulation. We also examine the potential mechanisms that may contribute to transient changes in diastolic function often observed after PSE including changes in LV pressure gradients and alterations in intrinsic myocardial relaxation. Although further mechanistic investigations are clearly warranted, several key mechanisms have received support for at least a partial contribution to the transient changes in myocardial performance often observed after PSE.     

精氨酸对糖尿病大鼠伤口愈合的影响

目的 观察精氨酸对糖尿病大鼠伤口愈合的影响。方法 成年雄性Lewis大鼠，随机分为糖尿病组及正常对照组，前者以链脲佐菌素复制糖尿病模型，后者注射等鼙枸橼酸钠缓冲液；7d后住大鼠背部制作伤口，置入聚乙烯乙醇海绵，上述两组大鼠再随机分为精氨酸治疗组及盐水治疗组，每组10只大鼠；精氨酸治疗组每天腹腔注射L-精氨酸1g/kg，盐水治疗组每天注射等量等渗盐水；10d后大鼠处死取样，观察其伤口抗断张力、羟脯氨酸含量、前胶原mRNA表达。结果 与正常大鼠比较，糖尿病大鼠伤口抗断张力、羟脯氨酸含量、前胶原mRNA表达显著降低；与等渗盐水治疗组比较，精氨酸治疗组大鼠伤口抗断张力、羟脯氨酸含量、前胶原mRNA表达显著提高。结论 精氨酸可以有效促进糖尿病动物的伤口愈合。