HO-1介导黄芪甲苷抗原代心肌细胞缺氧/复氧损伤作用研究

[目的]研究黄芪甲苷(AS-Ⅳ)对乳鼠原代心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的保护作用及机制。[方法]培养乳鼠原代心肌细胞,以缺氧4 h,复氧4 h建立心肌H/R损伤模型。四甲基噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力。检测细胞培养液中心肌肌钙蛋白(cTnT)、乳酸脱氢酶(LDH)含量,炎症细胞因子超敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)浓度。分别以聚合酶链式反应逆转录(RT-PCR)、蛋白免疫印迹(Western blot)法检测心肌细胞血红素氧化酶1(HO-1)mRNA及蛋白表达水平。[结果]与H/R组比较,AS-Ⅳ、HO-1激动剂原卟啉氯化钴(CoPP)均可显著降低细胞上清中cTnT、LDH含量(P0.01),降低炎症因子hs-CRP、TNF-α水平(P0.01),而HO-1拮抗剂原卟啉Ⅸ锌(Ⅱ)络合物(ZnPP)作用趋势则相反。与H/R组比较,CoPP组及AS-Ⅳ组HO-1 m RNA、蛋白表达水平显著升高(P0.01),ZnPP组则显著下降(P0.01)。[结论]AS-Ⅳ对心肌细胞缺氧/复氧损伤具有显著的保护作用,其机制与诱导具有保护作用的HO-1表达有关。     

康莱特注射液与化疗药合用对裸鼠移植人肺癌A549抑瘤作用的研究

目的比较康莱特注射液与几种化疗药合用对裸鼠移植人体肺癌A549的抑瘤增效作用.方法96只裸鼠皮下接种人体肺癌A549,7 d后成型随机盲法分为16组(n=6),按文中方案给抗肿瘤药,另设正常对照组(n=12).康莱特注射液组给药剂量分别为1.25 g/kg,2.5 g/kg,5.0 g/kg,自接种后第7天起连续给药10次,iv;顺铂(1.5/kg,3 mg/kg)和健择(30 mg/kg,60 mg/kg)在接种后10日1次腹腔给药,顺铂给药后4 h再给予健择;泰素帝(25 mg/kg)在接种后7日1次腹腔给药.接种后19日脱颈处死动物,称体重,解剖取瘤块,称瘤重,计算抑瘤率.结果康莱特注射液1.25、2.5、5.0g/kg 3个剂量分别合并顺铂(3 mg/kg)和健择(60mg/kg)对人体肺癌A549的生长有很强的抑制作用,抑瘤率高于康莱特注射液、顺铂和健择单独给药;康莱特注射液3个剂量分别合并顺铂(1.5 mg/kg)和健择(30 mg/kg)对人体肺癌A549的生长也有很强的抑制作用,抑瘤率不仅高于康莱特注射液、顺铂和健择单独给药,且有一定的协同作用;康莱特注射液3个剂量分别合并泰素帝(25 mg/kg)对人体肺癌A549的生长有明显的抑制作用,抑瘤率高于康莱特注射液、泰素帝单独给药.结论康莱特注射液与顺铂和健择或泰素帝联合用药可明显缩小肿瘤体积,有抑瘤增效的协同作用.     

玉屏风散对顺铂所致肝癌小鼠脏器氧化损伤的保护作用

目的探讨玉屏风散对顺铂所致Hepa1-6肝癌小鼠脏器氧化损伤的影响。方法在C57BL/6小鼠右腋皮下接种2×106个Hepa1-6肝癌细胞建立肝癌小鼠模型,并随机分为模型组、顺铂组及玉屏风散加顺铂组,每组5只。顺铂组和玉屏风散加顺铂组每3天腹腔注射1次顺铂(2.5mg/kg),模型组相应注射生理盐水;同时玉屏风散加顺铂组每天灌胃玉屏风散水煎液(25g/kg),顺铂组和模型组相应灌服蒸馏水。给药观察14天。计算抑瘤率;称重肾脏、肝脏和肺重量,并计算脏器系数;测定组织中超氧化物歧化酶(SOD)活力及丙二醛(MDA)含量;进行病理学观察。结果与模型组比较,顺铂组及玉屏风散加顺铂组瘤重明显下降(P<0.05,P<0.01)。使用顺铂干预后,肝癌小鼠肾脏、肝脏均存在明显的氧化损伤,肺存在一定的氧化损伤;玉屏风散能明显降低顺铂干预的肝癌小鼠肝脏组织中MDA含量和SOD活力(P<0.05),明显增加肺组织中SOD活力(P<0.01)。病理观察结果显示了相同的作用趋势。结论扶正方药玉屏风散对顺铂所致肝癌小鼠脏器(肾脏、肝脏、肺)损伤具有保护作用,抗氧化是其机制之一。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对顺铂诱导大鼠肾损伤的改善作用

目的考察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对顺铂诱导大鼠肾损伤的改善作用及其作用机制。方法 50只SD雄性大鼠(10只/组)随机分为空白对照组,肾损伤组,EGCG低、中、高剂量组(25、50、100 mg/kg)。肾损伤组及给药组腹腔注射7.5 mg/kg顺铂制备肾损伤模型,空白对照组腹腔注射生理盐水。给药14 d后,观察各组大鼠一般状况,HE染色法观察肾组织形态学变化;ELISA试剂盒法检测血清中尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、胱抑素C(Cys-c)的含有量和尿液中白介素-18(IL-18)、肾损伤分子-1(KIM-1)的含有量;试剂盒法检测肾皮质中丙二醛(MDA)、抗氧化酶体系谷胱甘肽(GSH)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)的含有量;Western blot法检测肾皮质胞浆、胞核中核因子2相关因子2(Nrf2)蛋白的含有量及血红素氧合酶1(HO-1)蛋白的表达水平。结果 EGCG干预可以改善顺铂诱导大鼠肾损伤病理结构改变,肾指数降低,血清中Cr、Cys-c含有量降低,尿液中IL-18、KIM-1含有量降低,肾皮质中MDA浓度降低,GSH浓度、T-SOD活性升高。同时,肾皮质中胞浆Nrf2含有量降低,胞核Nrf2、总细胞HO-1含有量升高。结论 EGCG可通过激活Nrf2/HO-1信号通路,发挥对顺铂诱导大鼠肾损伤的改善作用。     

银杏叶提取物诱导血红素氧合酶-1表达抗缺血再灌注损伤后心肌细胞凋亡的研究

目的探讨银杏叶提取物(EGb761)诱导血红素氧合酶-1(HO-1)表达抗缺血再灌注损伤(IRI)后心肌细胞凋亡的效果及其机理。方法48只兔随机均分为单纯IRI组、EGb761组、EGb761 ZnPPⅨ组,分别预先给予等容积的生理盐水,EGb761,EGb761 ZnPPⅨ腹腔内注入。24 h后,每组任选8只处死,检测心肌细胞内HO-1表达及活性,余兔结扎冠脉左前降支使心肌缺血40 min,再灌注4 h,取缺血心肌检测中性粒细胞浸润、丙二醛(MDA)含量、Bax蛋白与Bcl-2蛋白表达及心肌细胞凋亡指数(AI)。结果与单纯IRI组及EGb761 ZnPPⅨ组比较,EGb761组HO-1表达及活性均明显升高,中性粒细胞浸润及MDA含量明显降低,Bax增加而Bcl-2降低,心肌细胞AI显著减少(均为P<0.01)。与单纯IRI组比较,EGb761 ZnPPⅨ组HO-1表达增加但活性降低(P<0.05),MDA含量明显升高(P<0.05),其余指标均无显著差异。结论EGb761能明显诱导心肌细胞内HO-1表达,并通过HO-1的抗炎、抗氧化等作用下调Bax表达,上调Bcl-2表达,从而显著抑制IR损伤后心肌细胞凋亡。     

解毒祛瘀滋阴法防治SLE类固醇性高脂血症的实验研究

目的:探讨中医解毒祛瘀滋阴法对SLE类固醇性高脂血症动物模型防治作用.方法:60只小鼠分为6组,每组10只.Ⅰ组:昆明小白鼠,普通饲料饲养,生理盐水灌胃0.5ml/d;Ⅱ组:昆明小白鼠,中等含脂量饲料饲养,生理盐水灌胃0.5ml/d;Ⅲ组:MRL/lpr小鼠,中等含脂量饲料饲养,生理盐水灌胃0.5ml/d;Ⅳ组:MRL/lpr小鼠,中等含脂量饲料饲养,强的松混悬液灌胃0.5ml/d(6mg/kg);Ⅴ组:MRL/lpr小鼠,中等含脂量饲料饲养,分别灌胃强的松混悬液0.5ml/d(6mg/kg)和解毒祛瘀滋阴煎剂0.5ml/d(37.3g/kg);Ⅵ组:MRL/lpr小鼠,中等含脂量饲料饲养,分别灌胃强的松0.5ml/d(6mg/kg)、阿司匹林混悬液0.5ml/d(90mg/kg).8周后检测总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)含量.并用蛋白电泳技术对比分析胆固醇脂蛋白亚组分比率.结果:Ⅳ组TC、TG含量明显高于其它各组(P＜0.05);Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组间无明显差异(P＞0.05);Ⅴ、Ⅵ组TC、TG和LDL、VLDL、LP-a均明显低于Ⅳ组(P＜0.05),而HDL高于Ⅳ组(P＜0.05).结论:中等脂量饮食下,对MRL/lpr小鼠灌胃强的松能制作出SLE类固醇性高脂血症动物模型.中医解毒祛瘀滋阴法治疗SLE的同时,能有效防治类固醇性高脂血症.     

熊果酸对顺铂所致耳毒小鼠耳蜗3-NT及calpain 1表达的影响

目的:观察熊果酸对顺铂致毒小鼠耳蜗3-硝基酪氨酸及钙蛋白酶1表达的影响,探究熊果酸对顺铂引起的耳毒性的防护作用及其机制。方法:选用5周龄健康BALB/c小鼠,随机分成对照组、熊果酸组(80 mg/kg)、顺铂组(4.5 mg/kg)及顺铂(4.5mg/kg)联合熊果酸(80 mg/kg)组。各组动物均连续腹腔注射给药5天,每天1次。应用Western blot技术及显微图像分析观察小鼠耳蜗中3-硝基酪氨酸和钙蛋白酶1的表达,并结合听脑干反应(ABR)检测并观察用药前后小鼠听阈的改变。此外,采用Fluo-3/AM染色法检测小鼠耳蜗内Ca~(2+)的浓度改变。结果:熊果酸(80 mg/kg)联合顺铂小鼠听脑干反应阈移和耳蜗内Ca~(2+)浓度的升高以及耳蜗3-硝基酪氨酸和钙蛋白酶1的表达均明显低于顺铂组。结论:熊果酸(80 mg/kg)可通过显著抑制顺铂所致3-硝基酪氨酸、钙蛋白酶1的高表达以及细胞内Ca~(2+)浓度的升高,从而有效拮抗顺铂的耳毒性,改善听功能。     

口服蒿甲醚片剂抑制小鼠结直肠癌生长的实验研究

目的:探讨口服蒿甲醚片(Artemether Tablet)对BALB/c小鼠CT-26结直肠癌的抑瘤作用。方法:BALB/c小鼠皮下接种CT-26结直肠癌细胞(2×106个/mL)48只,雌、雄各半;随机分为6组,每组8只,分别为Ⅰ组:蒿甲醚33.3mg/(kg.d)、Ⅱ组:蒿甲醚50mg/(kg.d)、Ⅲ组:蒿甲醚66.6mg/(kg.d)、Ⅳ组:蒿甲醚50mg/(kg.d) 硫酸亚铁1.5mg/(kg.d)组、Ⅴ组:阳性对照为卡培他滨片(83mg/kg.d)、Ⅵ组:空白对照组为等体积生理盐水;结果:口服蒿甲醚片33.3mg/(kg.d)、50mg/(kg.d)、66.6mg/(kg.d)以及蒿甲醚50mg/(kg.d) 硫酸亚铁1.5mg/(kg.d),对BALB/c小鼠CT-26结直肠癌的抑瘤率分别为:42.3%、51.4%、52.0%、53.5%,各实验组与生理盐水组比较,差异有显著性(分别P=0.024,P=0.006,P=0.007,P=0.004),各实验组间比较,差异无显著性(P>0.05)。各实验组与阳性对照组卡培他滨比较,除Ⅰ组:蒿甲醚33.3mg/(kg.d),差异有显著性(P<0.05)外,其余各组,统计差异无显著性(P>0.05)。结论:口服蒿甲醚片剂对小鼠CT-26结直肠癌有明显的抑制作用;蒿甲醚与硫酸亚铁合用能使抑瘤率增加。     

ErkⅠ/Ⅱ介导姜黄素对慢性脂多糖诱导的脊髓突触可塑性损害的拮抗作用

目的 探讨ErkⅠ/Ⅱ与姜黄素对慢性脂多糖(LPS)诱导的脊髓背角C-纤维诱发电位长时程增强(LTP)的作用.方法 在大鼠分别腹腔注射LPS(3 mg/kg)、姜黄素(300 mg/kg)、姜黄素(300 mg/kg)联合LPS(3 mg/kg)7 d后在脊髓腰膨大部记录背角浅层神经元C-纤维诱发电位,观察姜黄素对脊髓LTP的效应,并应用蛋白质印迹法检测不同条件下ErkⅠ/Ⅱ和NF-κB蛋白的表达.结果 ①慢性给予LPS可显著降低脊髓LTP,此效应可被姜黄素所抑制.②LPS可显著上调脊髓磷酸化的ErkⅠ/Ⅱ蛋白表达水平,该增强效应为姜黄素所显著抑制.③姜黄素可显著拮抗LPS上调脊髓磷酸化NF-κB的蛋白表达水平.结论 姜黄素对LPS诱导的脊髓LTP损害的拮抗作用可能是通过ErkⅠ/Ⅱ信号途径介导的.     

健脾养正消癥方通过激活PI3K/AKT信号通路减轻顺铂所致的肾毒性作用

目的:探讨健脾养正消癥方对顺铂肾毒性的防护作用及可能机制。方法:40只BALB/C小鼠,随机分为荷瘤组,顺铂组,健脾养正消癥方组,健脾养正消癥方和顺铂(联合用药)组,每组10只,按组别ig给药5 d后,将BALB/C小鼠右腋下注射H22腹水瘤,形成荷瘤小鼠模型并一次性注射顺铂20 mg·kg-1造成肾损害。造模后10 d,观察小鼠肾脏指数,血肌酐(SCr),血尿素氮(BUN),肾组织病理变化;并通过TUNEL,Western blot法检测健脾养正消癥方对顺铂损伤小鼠肾组织中凋亡及PI3K/AKT信号通路相关分子蛋白表达的影响。结果:与荷瘤组比较,顺铂组小鼠肾脏系数,SCr,BUN显著升高(P0.05),肾脏病理损伤明显,肾小管凋亡细胞增多,肾组织p-PI3K,p-AKT表达下调,Caspase-3表达上调(P0.05);与顺铂组比较,联合用药组肾脏指数降低,SCr,BUN下降(P0.05),肾脏病理损害减轻,肾小管凋亡细胞减少,肾组织p-PI3K,p-AKT表达上调,Caspase-3表达下调(P0.05)。结论:健脾养正消癥方能明显减轻顺铂引起的肾毒性,其作用机制与激活PI3K/AKT信号通路,减少细胞凋亡有关。     

对《伤寒论》与《温疫论》的再思考

通过分析伤寒与温疫的证治特点、《伤寒论》与《温疫论》的篇章结构、张仲景与吴又可所处的时代背景,以及现代医学对出血热与鼠疫的认识,梳理热病证治的发展历史与脉络。     

浅议影响小儿头皮静脉穿刺的因素

头皮静脉穿刺是儿科护士必备的技术，其成功率的高低直接危机患儿的痛苦乃至生命，掌握这门过硬的技术，尽量做到一针见血，是儿科护士的天职，也是衡量合格护士的标准之一。本人从事儿科护理工作已多年，现将这方面的体会做一报告。     

中药蛇床子的研究进展

概述近年来有关蛇床子的化学成分、药理作用和临床应用和研究进展。     

百年以来《伤寒论》理论研究述评(之二)

从中华人民共和国建立到文化大革命爆发的近20年间,是新时期仲景学说研究队伍的形成———发展期。在这一时期,对《伤寒论》原著的注释和校正工作,揭开了新中国教材编写的序幕;对《伤寒论》中一些有代表性问题或关键性字词的考订,是一个特点;对《伤寒杂病论》方法论的研究,也是这一时期出现的新特点。此外,这一时期,对六经的研究逐渐深入;对方证的研究仍是热门话题;对伤寒方中用药规律的研究出现热潮;对张仲景治疗方法原理的研究开始活跃;比较性研究热度不减;专题性研究渐成趋势。     

基于效应的针刺穴位组学研究思考

根据“穴位组学概念”的提出,针对针刺机理进行深入研究。目的在于揭示针刺的生物学基础,阐明针刺的科学性,并对相关针刺处方进行优化,围绕临床针刺治疗手段中的关键技术进行标准化与规范化研究,实现针刺科学机理转化为实际应用,从而更好的服务于临床。     

百年以来《伤寒论》理论研究述评(之一)

近百年来,公开发表的研究《伤寒论》的学术论文约3万篇,内容涉及张仲景生平事迹、《伤寒论》版本传承、《伤寒论》学术思想和临床应用研究等多个方面。民国时期是近代仲景学术研究的萌芽——发动期,这一时期的文章具有以下时代特点:①期刊和作者群有明显的地域和社团性;②体现了中西医结合的研究方向;③研究空间不断扩大;④学术争鸣空前活跃。     

辨证施护喘证

喘证的一般护理注意调整病室环境、体位与休息、严密观察生命体征、饮食护理、情志护理;根据中医辨病与辨证相结合的方法,同病异护、异病同护,实施具有针对性、个性化的护理措施,保障治疗措施的实施,促进疾病康复。     

蛇床子素抗凝血作用

目的:研究蛇床子素的抗凝血作用。方法:通过测定小鼠凝血时间(CT)、大鼠的凝血酶原时间(PT)和优球蛋白溶解时间(ELT),观测蛇床子素的抗凝作用。结果:蛇床子素能显著处长CT、PT,缩短ELT。结论:蛇床子素具有明确的抗凝血作用。     

七情学说实验研究相关问题探讨

对近年来有关中医七情学说的实验研究现状进行了简要评述。指出实验研究对七情学说的创新和发展具有重要的意义，并着重对今后开展七情学说实验研究所要解决的关键问题以及七情学说实验研究所涉及的动物模型等问题进行了初步探讨。     

基于《伤寒论》引发古代伤寒学派思考

《伤寒论》这一中医经典著作,指导临床,疗效显著,活人无数,尤其是对外感热病的发展影响颇深.伤寒学派是以研究或阐述张仲景《伤寒论》辨证论治及理法方药为中心的医学学术群体,该学派学术璀璨,连绵千年.现就以古代此派的形成、发展、争鸣3个阶段进行初步探析,认为其形成于晋唐,发展于宋元,争鸣于明清.