蛋白激酶Cα对浅表膀胱癌分化及阿霉素内源性耐药的作用

目的探讨蛋白激酶C(PKC)α与浅表膀胱癌细胞分化及内源性耐药的关系。方法采用蛋白印迹法检测76例临床标本(浅表膀胱癌及正常组织)中PKCα的表达水平,对所有患者行标准化疗后随访4～24个月,分析PKCα表达及活化与复发的关系。应用人浅表膀胱癌细胞系RT4细胞,建立能够稳定表达PKCα绿色荧光蛋白(GFP)的人膀胱癌细胞系RT4/PKCαGFP。用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)测定RT4/PKCαGFP和亲代细胞对阿霉素的敏感性。分别检测PKCα激活和抑制状态下RT4/PKCαGFP对阿霉素敏感性的差异。结果在癌组织中,PKCα总体表达水平和胞膜、胞浆中表达水平的比值(M/C值),均显著高于正常组织(癌组织为正常组织的2.2倍,t=1.98,P<0.05;M/C值癌组织为0.84±0.12,正常组织为0.23±0.11,t=2.62,P<0.01)。随着肿瘤分级的升高,胞膜中PKCα的相对表达的水平显著升高(P<0.01),胞浆中的相对表达水平显著下降(P<0.01),PKCα的M/C值显著升高(P<0.01),总体PKCα相对表达水平显著升高(P<0.01)。70例获随访,共复发38例。多因素分析表明,高PKCαM/C值是影响化疗后近期复发的独立预后因素(相对危险度3.98,95%可信区间1.22～5.68,P=0.03)。转染PKCα基因后,RT4细胞对阿霉素的耐药性增强(耐药指数6.97,t=3.24,P<0.01)。PKCα的激活显著提高了RT4细     

蛋白激酶C活性及δ亚型在肾透明细胞癌的表达

目的　探讨蛋白激酶C(PKC)、PKC δ在肾透明细胞癌中的表达及其临床意义。方法　采用PKC比活性测定和WesternBlotting方法检测 38例肾透明细胞癌和 5例正常肾组织中PKC比活性和PKC δ的表达。结果　癌组织和正常组织胞浆PKC比活性值分别为 ( 6 .97± 2 .6 5 )10 - 2 pmol·ml- 1 ·min- 1 和 ( 14 .16± 5 .6 7) 10 - 2 pmol·ml- 1 ·min- 1 ;而胞膜中的比活性值分别为( 2 7.90± 7.5 8) 10 - 2 pmol·ml- 1 ·min- 1 和 ( 5 7.0 6± 18.13) 10 - 2 pmol·ml- 1 ·min- 1 ;PKC δ在癌组织细胞胞浆中的相对灰度值小于 1,在胞膜中则大于 1,各病理分期和细胞分级间差异均有显著性 (P<0 .0 5 )。结论　PKC活性在肾透明细胞癌中下降 ,PKC δ表达与病理分期、细胞分级相关 ,是判断肾细胞癌预后的指标。     

蛋白激酶C在异氟醚诱导原代培养大鼠心肌细胞分泌血管内皮生长因子中的作用

目的 探讨蛋白激酶C(PKC)在异氟醚诱导原代培养大鼠心肌细胞分泌血管内皮生长因子(VEGF)中的作用.方法 1～3 d SD新生大鼠,分离培养原代心肌细胞,随机分为6组(n=6):对照组(C组)培养后的细胞不经任何处理;不同浓度异氟醚组(Ⅰ1组～Ⅰ3组)细胞分别经0.7%、1.4%、2.1%异氟醚处理6 h;PKC抑制剂组(P组)细胞培养液中给予PKC抑制剂--calphostin C,终浓度50 nmol/L;PKC抑制剂+异氟醚组(PI组)心肌细胞培养液中加入calphostin C 50 nmol/L后,置入无菌密闭容器,持续输入1.4%异氟醚6 h.采用ELISA法测定细胞培养液VEGF浓度,Western blot法测定心肌细胞PKC亚型的表达.结果 与C组比较,Ⅰ2组和Ⅰ3组细胞培养液VEGF浓度升高,Ⅰ2组胞浆PKCε表达下调,胞膜PKCε表达上调(P＜0.01),胞浆和胞膜PKCα、PKCδ和PKCζ表达差异无统计学意义(P＞0.05),P组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05).与胞膜比较,C组和Ⅰ2组胞浆PKCα、PKCδ和PKCζ表达上调(P＜0.05).随异氟醚浓度升高细胞培养液VEGF浓度升高(P＜0.05).与Ⅰ2组比较,PI组细胞培养液VEGF浓度降低(P＜0.05).结论 异氟醚可通过PKCε从胞浆转位到胞膜的途径诱导心肌细胞分泌VEGF,是异氟醚心肌保护作用的机制之一.     

糖尿病大鼠肾脏蛋白激酶Cα亚型蛋白表达和转录水平的变化

目的研究糖尿病大鼠肾脏蛋白激酶(PK)Cα亚型蛋白表达和mRNA水平的变化.方法SD大鼠随机分为正常对照组和糖尿病组,成模5周后分别采用PAS染色、免疫组化、RT-PCR、Westem blot方法检测单个肾小球面积,肾皮质PKCα的定位和定量以及PKCα mRNA的水平.结果同正常组相比,糖尿病组大鼠单个肾小球面积增加,但细胞数并无明显变化;肾皮质PKCα的表达明显增强,并且有自胞浆向胞膜的转位;而肾皮质中PKCαmRNA的表达也增加了1.67倍.结论早期糖尿病大鼠肾脏中PKCα亚型表达和转录水平上调,提示PKCα可能与糖尿病肾病的发生发展有关.     

蛋白激酶C-α在调节人膀胱癌T24细胞多药耐药中的作用

目的探讨蛋白激酶C-α(PKCα)对人膀胱癌T24细胞多药耐药的调节作用。方法将载有PKCα基因的表达质粒GFP-PKCα导入人膀胱癌细胞系T24。应用噻唑蓝(MTT)比色法,检测T24/PKCα及亲本细胞对阿霉素的敏感性,以及在激活(10nmol/LPMA2h)和抑制(10nmol/LCalphostinC2h)PKCα的情况下,T24/PKCα细胞对阿霉素敏感性的变化。同时用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测多药耐药基因-1(MDR-1)、多药耐药相关蛋白(MRP)和肺耐药相关蛋白(LRP)基因的表达。结果转染了PKCα基因后,T24细胞对阿霉素的耐药性增强(耐药指数7.52,P<0.05)。PKCα的激活显著提高了T24细胞的耐药性(耐药指数153.78,P<0.01),而抑制PKCα活性则使耐药指数降至1.20(P>0.05)。T24/PKCα的MDR-1表达水平是亲本细胞的2.28倍(P<0.01)。激活PKCα可使MDR-1基因表达水平较亲本细胞升高12.80倍(P<0.01),抑制PKCα则MDR-1表达下降(P>0.05),而MRP和LRP基因表达水平并无明显变化(P>0.05)。结论PKCα可能通过上调MDR-1表达,在人膀胱癌的化疗耐药中起到了重要的作用。     

高迁移率蛋白-1在脓毒症大鼠肺中的表达

目的探讨脓毒症大鼠肺组织中高迁移率蛋白-1(HMG-1)的表达。方法 50只SD 大鼠随机分为对照组(10只)和试验组(40只),使用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肺与空肠组织HMG-1 mRNA的表达,采用Western blot法检测HMG-1蛋白的表达。结果试验组肺、空肠组织中HMG-1 mRNA表达量明显高于对照组(0．866±0．026 vs 0．232±0．009和0．859±0．053 vs 0．227±0．025,P<0．05),试验组肺组织中HMG-1蛋白表达量明显高于对照组(1．060±0．036 vs 0．360±0．006,P<0．05),但各亚组之间差异无统计学意义(P>0．05);空肠组织中HMG-1蛋白表达量与对照组比较,差异无统计学意义(P>0．05)。结论 HMG-1可能是炎症反应的重要介质,在炎症反应的持续发展过程中起一定作用。     

腹腔感染脓毒症时肺内主要模式识别受体表达变化及其与肺损伤的关系

目的观察腹腔感染脓毒症时肺组织内病原菌相关模式分子(内毒素、脂蛋白、DNA)的主要模式识别受体的表达变化及其意义。方法采用盲肠结扎穿孔(CLP)术建立30只昆明种小鼠腹腔感染脓毒症模型,将模型小鼠随机分为CLP组和假手术组,每组各15只鼠,分别于术后8,12和24h取5只鼠处死取右肺组织,采用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)法检测肺组织内毒素受体[清道夫受体(SR)、白细胞分化抗原14(CD14)、TLR4]及细菌脂蛋白受体(TLR2)、细菌DNA受体(TLR9)mRNA的表达,酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测肺组织内肿瘤坏死因子α(TNFα)含量,采用分光光度计法测定肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性。结果与假手术组比较,术后8hCLP组肺组织内CD14mRNA(1.143±0.139,t=0.022,P<0.05),TLR2mRNA(0.418±0.102,t=0.021,P<0.05),TLR4mRNA(0.595±0.052,t=0.0001,P<0.01)和TLR9mRNA(0.743±0.178,t=0.0023,P<0.01)表达上调,其中TLR9mRNA呈持续上调变化,SRmRNA(0.659±0.159,t=0.029,P<0.05)呈持续下调改变;肺组织CD14、TLR4、SR、TLR2和TLR9mRNA的表达变化分别与MPO和TNFα变化呈明显的相关关系(P<0.05或P<0.01)。结论脓毒症发病过程中,肺组织内主要模式识别受体表达变化与肺损伤相关,除LPS外,其他细菌成分也可能参与了肺损伤过程。     

双歧杆菌的完整肽聚糖对实验性结直肠癌信号转导的影响

目的 从信号转导上探讨分叉双歧杆菌完整肽聚糖的抑瘤机制。方法 以结直肠癌裸鼠移植瘤为动物模型,用膜结合法、激光共聚焦显微镜和免疫组织化学法检测结直肠癌移植瘤和肿瘤对照组各20只BALB/c(nu/nu)裸鼠的蛋白酪氨酸激酶(PTK)和蛋白激酶C(PKC)α、βⅠ、βⅡ、γ、ε、ζ的活性以及核转录因子(NF)-κB的阳性细胞密度。结果 结直肠癌棵鼠移植瘤经完整肽聚糖处理后,其PTK活性和PKCα的平均荧光强度以及NF-κB的阳性细胞密度均显著低于肿瘤对照组(P<0.01);而PKCβⅠ、βⅡ、γ、ε和ζ的平均荧光强度在两组间则差异无显著性意义(P<0.01)。结论 分叉双歧杆菌的完整肽聚糖体内能明显降低结直肠癌PTK和PKCα的活性,同时阻止NF-κB的活化。     

缺氧诱导因子-1对肾微血管内皮细胞缺氧再复氧损伤免疫调节作用

目的探讨低氧诱导因子1(HIF1)在肾微血管内皮细胞(HGMECs)缺氧再复氧损伤中的免疫调节作用。方法建立HGMECs缺氧再复氧模型,应用特异性脯氨酰羟化酶抑制剂3,4DHB和环氧酶2阻断药物NS398预处理HGMECs,设对照、缺氧复氧、3,4DHB和NS398四组。采用逆转录聚合酶链反应、免疫印记和酶联免疫吸附试验等方法检测各组细胞HIF1α、血红素氧合酶1(HO1)的mRNA和蛋白的表达及上清中可溶性细胞间黏附因子1(sICAM1)的水平;将各组HGMECs与异体淋巴细胞混合培养(MELR),检测淋巴细胞增殖程度和MELR上清中白细胞介素2(IL2)的表达水平。结果与对照组相比,HGMECs经缺氧复氧损伤后HIF1α蛋白和HO1mRNA表达水平显著增高(P<0.01),上清中sICAM1(14.55±1.13vs7.90±1.61)ng、异体淋巴细胞增殖率(0.191±0.053vs0.069±0.032)和MELR上清中IL2(40.0±5.0vs18.0±3.0)pg水平均有显著增高(P<0.01)。与缺氧复氧组比较,3,4DHB干预组HIF1α蛋白和HO1mRNA表达水平显著增高(P<0.05),而淋巴细胞增殖率(0.079±0.038,P<0.01)及IL2(25.7±6.1pg,P<0.01)和sICAM1(8.71±1.32ng,P<0.01)水平则显著下调。与缺氧复氧组比较,NS398干预组HIF1α蛋白和HO1mRNA表达水平显著减低(P<0.01),而淋巴细胞增殖率(0.268±0.079)及IL2(51.0±11.0)pg和sICAM1(20.33±3.05)ng表达水平则显著增高(P<0.05)。结论缺氧复氧会对HGMECs造成免疫学损伤,HIF1α稳定表达可起到保护性作用。     

肺鳞癌中葡萄糖易化扩散转运蛋白-1过度表达与18 氟脱氧葡萄糖摄取的关系

目的　了解葡萄糖易化扩散转运蛋白 1(Glut1)在肺鳞癌组织中过度表达与肿瘤对18氟脱氧葡萄糖 (FDG)摄取之间的关系。　方法　 1999年 4月～ 2 0 0 1年 3月对 2 3例肺鳞癌患者行全身正电子发射体层显像 (PET)检查 ,测定肿瘤对FDG的最大与平均标准摄取值 (SUVmax与SUVmean)及健侧正常肺组织的标准摄取值 (SUVlung)。所有肿瘤均手术切除。应用标准链霉菌抗生物素蛋白 过氧化物酶亲和 (SP)免疫组织化学方法 ,对肿瘤及正常支气管肺组织的Glut1表达情况进行检测 ,以染色阳性细胞率与染色强度 (染色强度 1～ 5 )表示。　结果　 2 3例肺癌组织均有Glut1过度表达 [阳性细胞率 (6 9± 18) % ,染色强度 4 6± 0 7],正常支气管肺组织无Glut1过度表达。肿瘤FDG摄取高于相应的正常肺组织 ,SUVmax、SUVmean与SUVlung分别为 8 33± 4 14、6 10± 3 0 0与 0 38± 0 13(P <0 0 1)。Glut1过度表达程度、FDG摄取、肿瘤大小之间呈正相关性 (P <0 0 1)。结论　肺鳞癌组织中的Glut1过度表达与其FDG摄取有直接的关系。     

氟伐他汀对糖尿病大鼠肾脏组织蛋白激酶C活性作用的影响

目的:观察氟伐他汀对实验性糖尿病大鼠肾脏组织蛋白激酶C(PKC)活性的影响。方法:建立雄性SD 大鼠糖尿病动物模型,分为正常对照组(A组)、糖尿病组(B组)、氟伐他汀治疗组(C组),分别于第4、6周末收集24h 尿液、血清及肾脏组织标本,测定血胆固醇、甘油三酯、尿白蛋白、肾重/体重、肾脏细胞膜及细胞浆PKC活性,并进行 形态学观察。结果:C组大鼠血胆固醇、甘油三酯、肾重/体重、尿白蛋白及细胞膜PKC活性均高于同期A组,但低于 同期B组(P<0.05);C组大鼠细胞浆PKC活性高于同期B组,但低于同期A组(P<0.05);细胞膜PKC活性与肾重/体 重、尿蛋白排泄率呈正相关(r=0.772,P<0.01;r=0.353,P<0.05);肾脏组织学观察B组银染区及PAS红色染区 明显扩大,基底膜不规则增厚,足突部分融合,系膜区基质增多,C组较B组减轻。结论:氟伐他汀具有降脂、下调PKC 进而保护肾脏的功能。     

兔脊髓空洞前状态蛋白激酶C对水通道蛋白4表达的调控作用

目的探讨PKC在脊髓空洞前状态中活性变化及其对AQP4调控作用。方法用新西兰兔56只制作模型,术后1、3、7、14、21d用免疫组织化学技术检测AQP4表达变化、应用底物磷酸化法测定胞膜、胞浆PKC活性。结果 Kaolin组动物AQP4于术后3 d开始减弱(IA 320．5± 44．2),7-14 d达到最低水平(IA 258．7±26．5),到21 d时有所回升(IA 321．5±46．1);胞膜PKC 活性术后1 d出现增加每分钟(5.67±0．26)pmol／mg,7-14 d达到最高水平每分钟(13．27±3．15 pmol／mg),21 d开始回落每分钟(8．85±1．56)pmol／mg,胞浆的PKC活性则呈相反趋势。结论脊髓空洞前状态形成中出现PKC移位激活,对AQP4进行磷酸化,参与了缺血、缺氧性脊髓水肿的形成。     

低温保护液肺动脉灌注对合并重度肺高压病儿术后肺组织eNOS和iNOS表达的影响

目的利用免疫组织化学技术研究低温肺保护液对体外循环(CPB)后内皮源型一氧化氮合酶(eNOS)和诱生型一氧化氮合酶(iNOS)在肺血管内皮细胞、支气管上皮和肺泡巨噬细胞表达的影响.方法 34例合并重度肺高压的先天性心脏病病儿在常规低温体外循环下行心内畸形矫治术.分为对照组(23例)和保护组(11例),保护组在主动脉阻断后肺动脉内灌注低温肺保护液.两组体外循环后取右下肺组织利用免疫组织化学技术观察肺血管内皮eNOS、支气管上皮iNOS和肺泡巨噬细胞iNOS的表达情况.结果术后肺血管内皮细胞eNOS表达,保护组为2.24±0.60,对照组为0.92±0.70(P＜0.01);支气管上皮iNOS表达,保护组为0.88±0.60,对照组2.08±0.64(P＜0.01);肺泡巨噬细胞iNOS表达,保护组10.6±4.0,对照组28.0±7.50(P＜0.01).结论低温保护液肺动脉灌注可以保持eNOS在肺血管内皮细胞的表达,防止肺泡巨噬细胞和气管上皮细胞iNOS的过度表达,减轻肺内炎症反应,从而减轻CPB后肺高压病儿的肺损伤.     

膀胱癌组织中蛋白激酶C及其抑制物活性的研究

目的　探讨蛋白激酶C(PKC)及其抑制物(PKCI)在膀胱移行细胞癌发生过程中的分子生物学机制。方法　采用Takai法检测20例膀胱移行细胞癌及癌周正常膀胱粘膜中PKC及其内源性抑制物(PKCI)的活性。结果　膀胱癌与癌周正常膀胱粘膜相比,胞膜（8.67±2.07,10.66±1.24）、胞浆（7.68±3.27,20.63±12.77）及总体（7.71±4.52,14.34±7.47）PKC活性(pmol     

重症急性胰腺炎器官损伤与内皮素-1mRNA表达的关系及丹参的影响

目的探讨重症急性胰腺炎(SAP)内皮素-1(ET-1)mRNA表达对胰腺及肺、肾损伤的作用机制,观察丹参注射液对ET-1mRNA表达及病情转归的影响。方法将Wistar大鼠随机分为模型组(n=15)、丹参组(n=15)、对照组(n=15)。建立SAP模型后,丹参组动物立即肌肉注射丹参注射液(每日2ml/kg体重),每6h1次,共给药4次。对照组仅行假手术。各组动物在术后24h测血淀粉酶、ET-1和腹水量。使用原位杂交和图像分析检测胰、肺、肾ET-1mRNA的表达强度,并观察胰、肺、肾病理变化。结果模型组血中淀粉酶(2156.05±355.87)U/L和腹水量(9.87±2.34)ml显著高于丹参组(1439.21±332.99)U/L、(5.27±2.81)ml和对照组(215.67±37.27)U/L、0ml(P<0.01)。模型组血中ET-1(185.47±20.80)ng/L高于丹参组(164.27±18.53)ng/L和对照组(72.90±17.27)ng/L(P<0.05,P<0.01)。模型组胰、肺、肾中ET-1mRNA表达显著高于丹参组(P<0.01)。丹参组胰、肺、肾病理改变较模型组减轻。结论SAP时胰腺的ET-1mRNA高表达导致ET-1过度生成并可能继发引起肺、肾病理损害。丹参能抑制胰腺的ET-1mRNA的过度表达,减轻血管内液体丢失,改善血流动力学,从而对胰腺及肺、肾组织起保护作用。     

肺腺癌病人血清蛋白质组构型与病理分期的关系

目的用表面增强激光解析离子化飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS)建立肺腺癌病人血清蛋白质组构型,筛选相对特异标记物,并探讨其与病理分期的关系。方法肺腺癌病人71例,均经手术病理证实;正常人71名,按照性别,年龄,吸烟史与71例肺腺癌病人配对。用WCX2芯片检测各血清标本,筛选肺腺癌相对特异性蛋白质峰,并分析肺腺癌相对特异性蛋白与病理分期的关系。结果与正常人比较发现5个肺腺癌显著高表达的潜在标记物,相对分子量分别为4047.79±1.60、4203.99±1.91、4959.81±2.13、5329.30±2.55和7760.12±4.11,其中分子量为4047.79±1.60和7760.12±4.11的肺腺癌相对特异性蛋白与病理分期呈正相关。结论SELDI-TOF-MS蛋白质质谱技术是一种快速、简便易行且高通量的分析方法,能直接筛选出肺腺癌病人血清中相对特异的潜在标记物。     

Smad1在青少年特发性脊柱侧凸患者骨髓间质干细胞中的表达及意义

目的:探讨Smad1在青少年特发性脊柱侧凸(AIS)患者骨髓间质干细胞(MSCs)中的表达及其在发病机制中的作用。方法:30例12～18岁志愿者分为两组:AIS组20例,同年龄正常对照组10例。分别从髂前上棘处骨穿刺抽取10ml骨髓,肝素抗凝。采用密度梯度离心法分离MSCs,体外培养并传至P2代行表型鉴定,分别采用RT-PCR及免疫蛋白印记法检测两组患者MSCs中Smad1的表达情况。结果:AIS组与对照组Smad1mRNA水平的平均表达率分别为4.48±0.58和1.03±0.22,蛋白水平的平均表达率分别为2.62±0.55和0.84±0.22。不论是核酸水平还是蛋白水平AIS组Smad1的表达均高于对照组(P<0.01)。结论:Smad1在AIS患者MSCs中表达强度异常,可能与AIS发病的分子机制相关。     

表面活性蛋白A在大鼠急性肾盂肾炎动物模型中的表达

目的探讨表面活性蛋白A(SP-A)在肾组织中的表达部位及其表达变化与肾组织感染、肾间质炎症间的关系。方法21只大鼠随机分为3组:正常对照组、假手术组和肾盂肾炎组。利用膀胱内注射菌液的方法制作肾盂肾炎模型。用HE染色评价各组肾组织炎症程度。用逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测各组SP-AmRNA表达。用Western印迹法分析各组肾组织SP-A蛋白表达。用免疫组化技术检测各组肾组织中的SP-A的表达部位和强度并分析其表达强度与炎症程度的关系。结果肾盂肾炎组肾组织炎症程度显著高于正常对照组和假手术组(54.3±11.5比6.4±1.4、8.6±1.9,P<0.05);SP-AmRNA和蛋白表达均显著增加(各组mRNA水平:2.2±0.58、0.9±0.25、1.1±0.30,蛋白水平:0.45±0.09、0.24±0.05、0.26±0.05)。正常对照组和假手术组中,SP-A的表达主要见于外髓部的肾小管上皮细胞,集合管也有一定程度的表达。肾盂肾炎模型中,SP-A在内外髓的表达均明显增加。肾脏组织炎症程度与SP-A表达强度呈正相关(r=0.67,P<0.01)。结论急性肾盂肾炎模型肾组织中的SP-A表达显著增加。感染引起的肾间质炎症越重,SP-A的表达越明显。提示SP-A可能在肾盂肾炎的天然免疫及炎症调节中发挥重要作用。     

血管内皮生长因子在卵巢过度刺激综合征发病机理中的作用

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)在卵巢过度刺激综合征(OHSS)大鼠模型发病机理中的作用。方法OHSS组、控制性超排卵(COH)组和对照组每组6只未成年雌性大鼠。采用酶联免疫吸附试验方法测定大鼠血清和腹腔冲洗液VEGF水平;免疫组织化学方法和逆转录聚合酶链反应技术检测卵巢组织VEGF蛋白及其mRNA的表达。结果OHSS组、COH组和对照组大鼠的血清VEGF水平分别为(76.17±18.19)、(50.68±12.83)和(53.68±13.09)ng/L;其中,OHSS组的VEGF水平显著高于COH组和对照组(P<0.05),而COH组和对照组比较无显著性差异。OHSS组、COH组和对照组大鼠腹腔冲洗液VEGF水平分别为(17.12±1.71)(、9.38±5.88)和(6.68±1.86)ng/L;其中,OHSS组的VEGF水平显著高于COH组和对照组(P<0.05),而COH组和对照组比较无显著性差异(P>0.05)。OHSS组大鼠卵巢组织VEGF蛋白表达的平均灰度(97.23±7.26)显著高于对照组(78.55±8.48)和COH组(87.35±7.32)(P<0.05);COH组与对照组比较无显著性差异。OHSS组大鼠卵巢组织VEGF mRNA表达的灰度比(1.23±0.23)显著高于对照组(0.68±0.13)和COH组(0.92±0.07)(P<0.01),COH组也显著高于对照组(P<0.05)。结论VEGF在OHSS发病过程中发挥作用。     

降钙素基因相关肽对糖尿病性ED大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞表型转化的影响

目的:了解降钙素基因相关肽(CGRP)对糖尿病性ED大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞表型转化的影响。方法:利用链脲佐菌素建立糖尿病及糖尿病性ED大鼠模型。阴茎海绵体平滑肌细胞原代培养,并进行免疫细胞化学染色鉴定。实验分为2组:正常对照组和糖尿病性ED大鼠组。不同浓度(0、10,60,100 nmol/L)CGRP作用24h后,利用qRT-PCR检测各组细胞碱性调宁蛋白和骨桥蛋白mRNA的表达。结果:各组原代培养阴茎海绵体平滑肌细胞α-肌动蛋白阳性细胞率为(95.94±0.03)%。与正常对照组比较,糖尿病组ED大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞碱性调宁蛋白mRNA表达显著减少(4.41±0.29 vs 10.35±0.62,P<0.01),而骨桥蛋白mRNA表达水平显著上调(5.28±0.32 vs 1.32±0.24,P<0.01)。当CGRP作用的终浓度为100 nmol/L时,糖尿病组大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞经CGRP作用后,与未经其作用相比,碱性调宁蛋白mRNA表达显著上调(6.90±0.22 vs 4.41±0.29,P<0.01),而骨桥蛋白mRNA表达水平显著减少(3.26±0.31 vs 5.28±0.32,P<0.01)。结论:CGRP可使糖尿病性ED大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞表型从合成型向收缩型转化。