重组人血管内皮抑制素对荷瘤裸小鼠的治疗作用

观察了重组人血管内皮抑制素(YH-16)对人肝癌Bel7402细胞系、人宫颈癌Hela细胞系和人胃癌SGC7901细胞系在裸小鼠体内的抑制作用。试验采用每日尾静脉注射给药，YH-16的剂量分别为1.5、0.75、0.4mg/kg，共给药14次。结果表明YH-16对上述三种人癌细胞系有明显抑制作用，其抑制率Bel7402为45.67、43.08和40.00％；Hela为40.70、30.15和24.12％；SGC7901为51.89、44.34和35.85％。YH-16各给药组动物健康状况良好，无明显毒副反应。     

重组人血管内皮抑制素对荷瘤裸小鼠的治疗作用

观察了重组人血管内皮抑制素 (YH - 16 )对人肝癌Be174 0 2 细胞系、人宫颈癌Hela细胞系和人胃癌SGC790 1细胞系在裸小鼠体内的抑制作用。试验采用每日尾静脉注射给药 ,YH - 16的剂量分别为 1.5、0 .75、0 .4mg/kg ,共给药 14次。结果表明YH - 16对上述三种人癌细胞系有明显抑制作用 ,其抑制率Be174 0 2 为 45 .6 7、43.0 8和 40 .0 0 % ;Hela为 40 .70、30 .15和2 4.12 % ;SGC790 1为 5 1.89、44 .34和 35 .85 %。YH— 16各给药组动物健康状况良好 ,无明显毒副反应     

血管内皮抑制素的研究进展

实体瘤当生长到一定的体积时必然伴随着血管生成。 1971年 ,Ｆｏｌｋｍａｎ[1] 最早提出肿瘤生长是血管依赖性的。他认为肿瘤血管生成是肿瘤生长和转移的形态学基础。它不仅向肿瘤提供充足的营养 ,同时也向机体输出肿瘤细胞 ,导致肿瘤细胞的恶性生长和转移。因此 ,Ｆｏｌｋｍａｎ[2 ] 提出抗血管疗法 ,设想抑制肿瘤血管生成 ,使肿瘤细胞因缺血、缺氧而大部分死亡 ,从而可延缓晚期肿瘤生长 ,延长病人带瘤生存期 ,并可抑制亚临床转移灶生长 ,推迟复发。这一设想为越来越多的证据所支持 ,并使这一领域成为肿瘤研究的热点及肿瘤治疗的新策略。人…     

重组人血管内皮抑制素抗肿瘤效应的应用研究

目的探讨基因工程人血管内皮抑制素(endostatin)抑制黑素瘤在小鼠体内生长和转移的作用及其作用机制。方法接种黑素瘤细胞悬液(2×10     

重组人血管内皮抑制素可抑制兔耳增生性瘢痕

背景：增生性瘢痕局部血流量明显增高,微血管密度明显高于萎缩期及成熟的正常瘢痕。 目的：观察重组人血管内皮抑制素对新西兰大耳兔兔耳增生性瘢痕的抑制作用及其对瘢痕中血管内皮生长因子的作用。 方法：建立兔耳增生性瘢痕动物模型。随机分为2组,实验组局部注射重组人血管内皮抑制素,对照组局部注射生理盐水。 结果与结论：药物干预后30 d实验组兔耳瘢痕较对照组颜色变淡、质地柔软、厚度薄。苏木精-伊红染色实验组真皮层较对照组薄,单位面积内成纤维细胞数较对照组少,呈平行排列,毛细血管管径较对照组细;实验组瘢痕增生指数显著低于对照组(P < 0.01)。实验组瘢痕组织血管内皮生长因子阳性表达量显著低于对照组(P < 0.01)。说明重组人血管内皮抑制素注射液可能通过降低血管内皮生长因子蛋白的表达,从而抑制兔耳增生性瘢痕组织增生。     

血管抑制素和内皮抑制素的协同作用

血管抑制素和内皮抑制素是内源性的血管生成抑制剂,对肿瘤有明显的抑制作用,具有良好的应用前景,近年来,对于它们之间协同作用的研究已经成为新的热点。本文除对两者做了结构、性质、功能等方面的一般性介绍外,重点介绍了它们之间的协同作用。与血管抑制素和内皮抑制素单体的作用相比,它们之间的联合使用具有更强的抑制血管生成和肿瘤生长的作用。     

血管生成抑制素对胃癌细胞的影响

目的探讨血管生成抑制素对胃癌细胞增殖和游走的影响及对胃癌细胞分泌血管内皮生长因子A和C(VEGF-A和VEGF-C)的影响并分析其作用机制。方法采用MTT法和划线法观察0、0.5、1.0、1.5μg/ml浓度的血管生成抑制素对胃癌细胞增殖和游走的影响。免疫组化的方法检测0、0.5、1.0、1.5μg/ml浓度的血管生成抑制素对胃癌细胞内血管内皮生长因子(VEGF)-A和VEGF-C的影响。结果 MTT法显示不同浓度的血管生成抑制素对胃癌细胞增殖无明显影响(p0.05),同样,划线法测得的胃癌细胞迁移距离同对照组相比无明显差异(p0.05)。但免疫组化法结果显示,0.5、1.0、1.5μg/ml浓度的血管生成抑制素组胃癌细胞VEGF-A和VEGF-C的表达同对照组相比明显减少(p0.05)。结论血管生成抑制素明显减少胃癌细胞内的VEGF-A和VEGF-C的分泌,但对胃癌细胞的增殖和游走无明显作用。     

环磷酰胺节拍化疗联合重组人血管内皮抑制素对非小细胞肺癌移植瘤裸鼠的影响及其机制研究

 目的：本研究观察环磷酰胺（cyclophosphamide, CPA）节拍化疗（metronomic chemotherapy,MET）联合重组人血管内皮抑制素（recombinant human endostatin,Endostar）用于非小细胞肺癌（non-small-cell lung cancer, NSCLC）维持治疗的疗效和抗血管形成机制,探索一种新的晚期NSCLC维持治疗模式。方法：建立人肺腺癌细胞系A549裸鼠皮下移植瘤模型,以最大耐受剂量（maximum tolerated dose,MTD）CPA化疗4个周期后随机分组,转换成以下治疗：生理盐水（control组）、MET CPA维持治疗（MET CPA组）、Endostar维持治疗（Endo组）和MET CPA联合Endostar维持治疗（MET CPA+Endo组）。记录模型动物的移植瘤体积和总生存期。流式细胞术测定外周血循环内皮细胞（circulating endothelial cells, CECs）和存活的CECs（viable CECs）,共聚焦显微镜测定肿瘤微血管密度（microvessel density,MVD）和管周细胞覆盖率。结果：在维持治疗第6周时,MET CPA和Endo组肿瘤体积显著小于control组（P<0.05）,MET CPA+Endo组肿瘤体积又显著小于单药维持治疗组（P<0.05）。MET CPA和Endo组小鼠生存期显著长于control组（P<0.05）,MET CPA+Endo组小鼠生存期则进一步延长（P<0.05）。与control组比较,MET CPA和Endo组显著下调了外周血CECs和存活CECs水平（P<0.01）,并降低了移植瘤MVD（P<0.01）。Endo组显著下调了移植瘤血管管周细胞覆盖率（P<0.05）。在上述血管形成相关指标上,MET CPA+Endo组又显著低于单药维持治疗组（P<0.05）。结论：MET CPA联合Endostar用于NSCLC肺腺癌维持治疗能延缓移植瘤生长,改善荷瘤鼠生存期,这可能与联合用药具有抗血管形成的增效作用有关。本研究为晚期NSCLC维持治疗提供了新的治疗思路,值得进行临床研究。     

血管抑制素和内皮抑制素在大肠杆菌中的融合表达与鉴定

血管抑制素（AS）和内皮抑制素（ES）是两种具有较强活性的内源性血管抑制剂，联合应用具有协同作用。本研究通过大肠杆菌表达AS-ES融合蛋白，观察其对血管生成的抑制作用。首先用RT-PCR方法分别获得AS和ES基因，通过基因拼接获得融合基因，构建了含有该融合基因的原核表达质粒——pET-42（b）／AS-ES。表达菌株经IPTG诱导后目的蛋白以包涵体形式表达，表达量为14％，分子量约65KD。Western blotting检测表明表达产物可分别与AS和ES抗体产生特异的免疫反应。经复性、肝素亲和层析柱纯化的表达产物对鸡胚尿囊膜血管有明显抑制作用。本研究获得了AS、ES在大肠杆菌中的融合表达．目的蛋白具有特异的免疫反应性和血管抑制活性。     

重组人血管内皮抑素联合放疗对Lewis肺癌小鼠肿瘤生长及VEGF表达的影响

目的:研究重组人血管内皮抑素(rh-Endostatin,YH-16,恩度)对不同放射剂量治疗的Lewis肺癌小鼠肿瘤生长及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:制作Lewis肺癌细胞接种肿瘤的动物模型,并将60只模型小鼠随机分为5组:A,空白对照组(不予任何治疗);B,小剂量多次放疗组(1Gy/f,隔日一次,共4次);C,大剂量单次放疗组(4Gy/f,共1次);D,小剂量多次放疗联合恩度组(放疗前4天起每天右侧腹股沟区皮下注射恩度0.1ml,共15天,放射剂量为1Gy/f,隔日一次,共4次);E,大剂量单次放疗联合恩度组(放疗前4天起每天右侧腹股沟区皮下注射恩度0.1ml,共15天,放射剂量为4Gy/f,共1次)。分别给予上述处理后计算抑瘤率,并用免疫组化SP法测定各组VEGF的阳性表达率。结果:与C、E组比较,B、D组的抑瘤作用及VEGF表达下降明显(P<0.05),尤以D组抑瘤更强(P<0.05)、VEGF下降最多(P<0.05)。结论:放疗前使用恩度可使Lewis肺癌小鼠对放疗的敏感性增加,其机制可能与下调VEGF的表达有关。     

长周期应用恩度治疗老年晚期前列腺癌的疗效分析

目的 评估长周期应用重组人血管内皮抑制素（恩度）联合激素及放疗治疗晚期前列腺癌的临床疗效及不良反应.方法 分析了28例经组织学确诊符合人组条件的晚期前列腺癌患者,分成实验组和对照组,实验组18例,对照组10例,实验组采用恩度联合同步激素治疗及放疗,对照组采用激素治疗及放疗,观察两组的疗效及不良反应.结果 ①在不同治疗、不同时间中,实验组及对照组治疗前后FPSA、TPSA均降低,P＜0.01,提示两种治疗对前列腺癌均有效;②实验组及对照组FPSA及rPSA均在前两月降低幅度较大,并同其后各月份比较均有统计学意义,P均＜0.01;实验组在不同时间FPSA、TPSA水平均低于对照组,P均＜0.01,提示联合恩度优于只用激素治疗及放疗;③骨髓抑制程度实验组明显高于对照组,以白细胞降低为著,差异有统计学意义（Z=3.099,P=0.002）.结论 联合恩度治疗前列腺癌优于只用激素治疗及放疗,表现为FPSA、TPSA下降幅度迅速,维持水平较低、持续时间较长.     

人内皮抑素基因改造、表达、纯化及活性检测

目的克隆诱变的人内皮抑素(human endostatin,hES)氨基端基因,并检测其活性。方法双酶切已诱变的人内皮抑素基因,电泳回收氨基端片段,与质粒pTYB-2重组,转化E．coli BL-21(DE3)。通过鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)实验,MTT实验,HE染色及流式细胞术检测重组小分子人内皮抑素对新生血管生成、细胞增殖和细胞凋亡的影响。结果基因重组小分子内皮抑素对鸡胚尿囊膜新生血管生成具有明显的抑制作用;对脐静脉内皮细胞和肝癌细胞增殖的抑制存在量效关系;作用24h后,观察到细胞凋亡现象;与对照组相比,细胞凋亡数增加。结论成功构建了人内皮抑素氨基端基因工程菌,得到了具有生物活性的氨基端小分子内皮抑素,为便利临床应用奠定了基础。     

应用RNA干扰技术抑制人胃癌细胞环氧合酶-2基因的表达研究

目的 研究应用RNA干扰技术进行抑制胃癌SGC-7901细胞COX-2的表达研究。方法 依据siRNA设计原则,针对人COX-2的mRNA序列,设计并合成3条21bp的双链RNA,瞬时转染人胃癌细胞SGC-7901,Western blot验证基因沉默效率以筛选合适的siRNA序列;根据筛选出的有效序列,合成编码短发卡RNA的双链寡核苷酸,定向克隆到含有U6 RNA聚合酶Ⅲ启动子的pSilencer? 2.1-U6 neo 真核表达载体,稳定转染胃癌细胞SGC-7901中,经G418筛选,获得克隆细胞。 结果 筛选出一条有效的干扰序列,位于291-311bp,成功构建表达载体,COX-2在蛋白水平的表达明显被抑制。结论：利用化学合成siRNA进行初筛,再构建shRNA表达载体,可快速实现目的基因的表达抑制。     

胃癌患者外周血及癌组织中上皮细胞黏附分子和存活素的表达及意义

目的:观察胃癌患者外周血及癌组织中上皮细胞黏附分子(EP-CAM)及存活素的表达水平及探讨其在胃癌发生及发展中的临床意义。方法:采用RT-PCR检测正常对照组和胃癌组患者外周血EP-CAM及存活素mRNA水平;免疫组化法观察癌旁上皮组织和胃癌组织中EP-CAM及存活素蛋白表达。结果:正常对照组外周血EP-CAMmRNA相对表达水平为0.05±0.01,存活素mRNA相对表达水平为0.02±0.01,胃癌组EP-CAM相对表达水平为0.82±0.02,存活素相对表达水平为0.61±0.04,两者均显著高于正常对照组(P<0.01);癌旁上皮组织中EP-CAMMOD为0.005±0.001,存活素MOD为0.004±0.001,胃癌细胞EP-CAM的MOD为0.309±0.054,存活素MOD为0.331±0.066,两者均显著高于癌旁对照组织(P<0.01)。结论:EP-CAM及存活素mRNA和蛋白高表达可能参与了胃癌的发生发展。     

重组人血管内皮抑素对人多发性骨髓瘤细胞RPMI 8226增殖和相关蛋白表达的影响

 目的： 研究重组人血管内皮抑素（恩度）在体外对人多发性骨髓瘤细胞株RPMI 8226细胞增殖、细胞周期及细胞相关蛋白表达的影响。方法： 用CCK-8检测恩度对RPMI 8226细胞增殖的影响;流式细胞术检测凋亡和细胞周期的改变;Western blotting检测凋亡相关蛋白Bcl-2和caspase-3表达变化;以实时定量PCR和Western blotting检测RPMI 8226细胞血管细胞粘附因子 1（VCAM-1）、白细胞介素 6（IL-6）和血管内皮生长因子（VEGF）mRNA以及蛋白表达变化;ELISA检测细胞上清液中细胞因子IL-6和VEGF水平。结果： 恩度对RPMI 8226细胞有增殖抑制作用,250 mg/L恩度对RPMI 8226细胞 72 h增殖抑制率为（59.5±5.6）%（P<0.05）,细胞G1期比例增加（P<0.05）,但对细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bcl-2和caspase-3表达无显著影响;经恩度作用后RPMI 8226细胞 VCAM-1表达下降（P<0.05）,IL-6和VEGF表达及分泌降低（均P<0.05）。结论： 恩度能通过改变细胞周期变化抑制RPMI 8226细胞增殖,并能减少VCAM-1表达及IL-6、VEGF分泌,对细胞凋亡无明显改变。     

人内皮抑素抗肿瘤相关肽基因的克隆表达及活性研究

目的克隆并表达人内皮抑素抗肿瘤相关肽,检测其生物活性。方法人工合成人内皮抑素1~30位氨基酸(30肽,序列25~31由RGIRGAD改为RGDRGD)所对应的核苷酸序列,连接到质粒pTYB2中,再转化至大肠埃希菌BL21(DE3)中表达,几丁质亲和层析树脂一步纯化30肽。通过MTT法、鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)实验、小鼠体内抑瘤实验比较30肽和内皮抑素抗肿瘤活性。结果MTT证实30肽体外对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)、胃癌7901细胞(SGC-7901)半数抑制浓度IC50为36μg/ml、47μg/ml,显著低于内皮抑素IC50179μg/ml、202μg/ml。CAM实验中30肽对血管的抑制作用更强。30肽在小鼠体内抑瘤率47.8%,效果优于内皮抑素28.7%。结论30肽具有更强抗肿瘤活性,有可能成为治疗肿瘤的一种新药物。     

Isoprenaline Induces Periostin Expression in Gastric Cancer

PurposePeriostin mediates critical steps in gastric cancer and is involved in various signaling pathways. However, the roles of periostin in promoting gastric cancer metastasis are not clear. The aim of this study was to investigate the relevance between periostin expression and gastric cancer progression and the role of stress-related hormones in the regulation of cancer development and progression.ResultsPeriostin is expressed in the stroma of the primary gastric tumors and metastases, but not in normal gastric tissue. In addition, we observed that periostin is located mainly in pericryptal fibroblasts, but not in the tumor cells, and strongly correlated to the expression of α-smooth muscle actin (SMA). Furthermore, the distribution patterns of periostin were broader as the clinical staging of tumors progressed. We also identified a role of stress-related signaling in promoting cancer development and progression, and found that isoprenaline upregulated expression levels of periostin in gastric cancer cells.ConclusionThese findings suggest that the distribution pattern of periostin was broader as the clinical staging of the tumor progressed and found that isoprenaline upregulated expression levels of periostin in gastric cancer cells.     

重组人内皮抑素通过激活Dll4/Notch通路抑制大鼠动脉粥样硬化斑块内血管新生

目的:观察重组人内皮抑素(rh ES)对大鼠动脉粥样硬化(AS)斑块内新生血管的抑制作用,探讨Dll4/Notch信号通路在其中的调控机制。方法:雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(N组)、AS组和AS+rh ES组,每组10只。N组始终喂基础饲料,其余2组采用高脂喂养、维生素D3负荷及球囊损伤动脉内膜建立大鼠AS模型。AS+rh ES组以10 mg·kg~(-1)·d~(-1)的rh ES腹腔注射4周,另2组注射等量生理盐水。采血检测各组的总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-1(IL-1)和肌钙蛋白I(Tn I)等;免疫组化CD31染色观察新生血管密度;Western blot法检测主动脉内Dll4、Notch1蛋白表达。结果:与N组比较,AS组和AS+rh ES组的TC、TG、LDL-C、CRP和L-1水平均显著升高(P0.05),但上述指标在AS组和AS+rh ES组之间差异无统计学显著性。CD31染色结果显示,AS组的新生血管表达最丰富;与AS组比较,AS+rh ES组的新生血管密度显著下降(P0.05)。AS组的Dll4和Notch1蛋白水平显著低于N组(P0.05);相比AS组,AS+rh ES组的Dll4和Notch1蛋白水平显著升高(P0.05)。结论:rh ES能够抑制大鼠AS斑块内血管新生,Dll4/Notch通路的激活可能是rh ES抑制斑块内的血管新生的信号机制。     

重组人促红细胞生成素治疗胃肠道恶性肿瘤化疗相关性贫血的疗效观察

目的 观察使用重组人促红细胞生成素治疗胃肠道恶性肿瘤化疗相关性贫血的临床效果。方法 选择我院2017年8月~2018年8月收治的80例胃肠道恶性肿瘤化疗相关性贫血患者作为研究对象,随机分为对照组和观察组,各40例。对照组患者进行常规治疗,观察组在此基础上采用重组人促红细胞生成素治疗,比较两组的临床疗效、并发症发生率,记录两组治疗前后血红蛋白、血细胞比容等指标和患者生活质量评分情况。结果 观察组治疗总有效率高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）;观察组血红蛋白、血细胞比容、血细胞计数和血小板计数水平均高于对照组,差异具有统计学意义（P＜0.05）;观察组患者生活质量评分高于对照组,差异具有统计学意义（P＜0.05）;两组患者的不良反应发生率比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 重组人促红细胞生成素治疗胃肠道恶性肿瘤化疗相关性贫血的效果较好,可显著提高患者的临床疗效,改善患者贫血状况,提高其生活质量。