内源性CO/NO在内毒素休克大鼠主动脉低收缩反应中的介导作用

目的：探讨血红素－HO－CO－cGMP和L－精氨酸－NOS－NO－cGMP通路对内毒素休克（ES）大鼠主动脉血管张力的影响。方法：SD大鼠12只，分为LPS组和对照组，用离体血管环张力测定技术，观察胸主动脉环（TARs）对苯肾上腺素（PE）累积收缩反应，并分别用正铁血红素（He),L-精氨酸（L－Arg),锌原卟啉（ZnPP-IX)，氨基胍（AG），N－硝基－L－精氨酸（L－NNA）或亚甲蓝（MB）与TARs共同孵育20min后，比较两组对PE的收缩反应，动脉组织中CO／NO的含量，HO－1和NOS活性。结果：LPS组主动脉对PE累积收缩反应明显降低，用ZnPP-IX或AG孵育后，可部分逆转低血管反应性，经L－NNA或MB孵育，可完全逆转低血管反应，而且He或L－Arg孵育可不同程度加重低血管反应状态，LPS组动脉组织中CO／NO的含量明显上升，HO－1／NOS活性显著增加，结论：LPS可激活HO－1和iNOS，大量增加CO／NO合成，cGMP水平上升，共同介导ES大鼠主动脉低收缩反应。     

一氧化氮对高热惊厥大鼠海马血红素氧合酶/一氧化碳体系的影响

目的　研究一氧化氮合酶(NOS)抑制剂Nω硝基L 精氨酸甲酯(L-NAME)对反复高热惊厥(FS)大鼠海马血红素氧合酶1(HO- 1)mRNA和蛋白表达及一氧化碳(CO)含量的影响,以探讨一氧化氮(NO)对HO/CO体系的调节作用。方法　采用热水浴诱导大鼠FS。将发育期大鼠随机分为3组:对照组,FS组和FS+L- NAME组。分光光度计间接测定血浆NO和CO含量;核酸原位杂交法检测海马神经元HO- 1mRNA表达;Western印迹方法检测海马神经元HO -1蛋白含量。结果　与对照组比较,反复FS后海马神经元HO -1mRNA表达明显增高,HO -1蛋白含量升高208% (P<0 .01),血浆CO含量增高94 .57% (P<0. 01)。用L NAME干预FS,血浆NO含量下降13 79% (P<0. 05),海马HO 1mRNA表达明显下降,HO .1蛋白表达下降30 .19% (P<0 .01),血浆CO含量下降16 14% (P<0. 05)。结论　反复FS时,外源性给予NOS抑制剂可降低NO含量,同时引起HO 1的基因表达及CO含量下降。     

DA1受体激动剂对大鼠离体肺动脉内皮依赖性舒张反应的影响

目的 :探讨多巴胺 1(DA1)受体激动剂非诺多泮 (FODA)对大鼠离体肺动脉内皮依赖性舒张反应的反应机制。方法 :利用离体血管微量生物反应检测技术 ,分别观察FODA对离体肺动脉内皮依赖性舒张反应以及N L 精氨酸甲硝基酯 (L NAME)、甲烯兰 (MB)、优降糖、左旋精氨酸 (L arg)对FODA引起肺动脉内皮依赖性舒张反应的影响。结果 :①L NAME明显降低完整内皮的肺动脉环对FODA的舒张反应 ;②L NAME对FODA引起肺动脉内皮依赖性舒张反应的抑制反应能够被L arg翻转 ;③MB亦可明显减弱FODA对肺动脉的舒张反应 ;④ATP钾离子通道阻滞剂优降糖则不影响FODA引起肺动脉内皮依赖性舒张反应。结论 :DA1受体激动剂对肺血管的内皮依赖性舒张反应主要是通过内皮舒张因子 (EDRF)NO引起的 ,而内皮超极化因子 (EDHF)不参与这一过程。     

Cinaciguat对高糖损伤血管内皮细胞功能的影响

目的 糖尿病状态下，一氧化氮(NO)与可溶性鸟苷酸环化酶(soluble guanylatecyclase,sGC)均被氧化，使NO-sGC-环磷酸鸟苷(cGMP)信号通路传导异常，NO-sGC-cGMP信号通路异常是糖尿病血管内皮功能障碍的重要病理基础。可溶性鸟苷酸环化酶激活剂(cinaciguat，CIN)可激活失活的sGC进而起到保护血管内皮细胞功能的作用。本研究通过体外实验制造高糖内皮细胞损伤模型，观察CIN对人脐静脉内皮细胞功能的影响。 方法 培养人脐静脉内皮细胞，并将细胞分为正常对照组、高糖组、CIN干预组，每组6例。高糖组及CIN干预组均加入33.3 mmol/L的葡萄糖制造高糖细胞损伤模型，而CIN组同时加入0.1 μmol/L CIN干预。各组细胞在培养6、24、48 h时，检测上清液中的NO水平及细胞内一氧化氮合酶(NOS)浓度；培养48 h后RT-PCR检测细胞内诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA的表达；培养48 h后Western blotting检测细胞间粘附分子-1(ICAM-1)及血管粘附分子-1(VCAM-1)蛋白的表达。 结果 与正常对照组相比，高糖组NO、NOS含量呈现早期升高晚期下降的趋势，而CIN组上述趋势消失；与正常组比较，高糖组内皮细胞的eNOS mRNA表达水平降低(P＜0.05)，iNOS mRNA、ICAM-1与VCAM-1蛋白表达明显升高(P＜0.05)，而CIN组eNOS mRNA表达水平较高糖组明显升高(P＜0.05)，iNOS、ICAM-1与VCAM-1蛋白的表达水平明显降低(P＜0.05)。 结论 CIN可平衡NOS的活性，调节NO的生成及ICAM-1与VCAM-1的表达，改善高糖状态下内皮细胞的功能。      

Effects of Nephritis No.3 Recipe on Nitric Oxide,Nitric Oxide Synthase Secreted by Cultured Mesangial Cells in Rats and the Gene Expression of Inducible Nitric Oxide Synthase

Objective:To explore the effect of the Nephritis No.3(N-3)recipe on nitric oxide(NO),nitric oxide synthase(NOS)secreted by cultured mesangial cells(MC)and its gene expression of the in-ducible nitric oxide synthase(iNOS).Methods:The drug(nephritis No.3)-containing serum was preparedwith serum pharmacological technique,and then was applied to react on mesangial cells cultured In fetalcalf serum(FCS)and cells cultured in FCS plus lipopolysaccharide.To observe the secretion of NO andNOS and the gene expression of iNOS by means of RT-PCR.Results:Under the two kinds of culture con-ditions,the content of NO and NOS in the groups with drug-containing serum were higher than thosewithout drug-containing serum(P<0.05,P<0.01),and the expression of iNOS mRNA was up-regula-ted too.Conclusion:The N-3 could significantly promote the secretion of NO and NOS and the mRNA ex-pression of iNOS in rats.     

小檗碱对Ang Ⅳ诱导血管平滑肌细胞增殖的影响

目的研究小檗碱(BBR)对血管紧张素Ⅳ(AngⅣ)诱导大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的作用及机制。方法体外培养大鼠胸主动脉VSMCs,采用BCA法测细胞总蛋白含量和MTT法观察VSMCs的增殖;Real-time RT-PCR方法检测内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA的表达;比色法和硝酸还原法分别检测细胞培养液中一氧化氮合酶(NOS)活性和一氧化氮(NO)含量。结果 BBR(10、30、100μmol/L)呈浓度依赖性地抑制AngⅣ(0.1nmol/L)诱导的VSMCs的增殖和蛋白含量的增加(P<0.05);并上调AngⅣ所致eNOS mRNA表达的减少(P<0.05),同时升高AngⅣ降低的NOS活性和NO浓度(P<0.05)。L-精氨酸也有类似作用(P<0.05),而NG-硝基-L-精氨酸甲酯可以抵消BBR和L-精氨酸的上述作用(P<0.05)。结论 BBR可抑制AngⅣ诱导的VSMCs增殖,该作用可能与其激活eNOS mRNA的表达,增加NOS活性,促进NO释放有关。     

NO参与AngⅡ诱导心肌成纤维细胞胶原含量的变化

目的：探讨NO前体L-Arg和NOS抑制剂L-NAME在血管紧张素Ⅱ诱导CFs胶原合成中的作用。方法：用胰酶消化法分离、纯化、培养新生SD大鼠CFs,采用CFs羟脯氨酸含量测定、以羟脯氨酸标准曲线求出样本中羟脯氨酸含量,胶原含量以羟脯氨酸含量×7.4表示。结果：（1）在培养液中加入AngⅡ10-9～10-5mol/L,CFs胶原含量呈明显的剂量依赖性;（2）分别给予Saralasin和PTX对CFs胶原含量均无明显影响,但可明显抑制AngⅡ增强CFs胶原含量的作用;（3）预先给予NO前体L-Arg,再加入AngⅡ,AngⅡ增加CFs胶原含量的效应明显减弱;（4）加入NOS抑制剂L-NAME后,再加入L-Arg和AngⅡ,明显减弱L-Arg对AngⅡ的抑制作用;（5）在用L-NAME抑制NOS的基础上,再加入AngⅡ,其AngⅡ促心脏CFs的作用进一步增强,而单纯应用L-NAME对基础状态CFs胶原含量无明显影响。结论：AngⅡ能剂量依赖性增加CFs胶原含量,此效应是通过AngⅡ受体实现的,可能部分依赖于PTX敏感的G蛋白;NO明显抑制AngⅡ增加CFs胶原含量的作用,CFs内可能存在L-Arg-NO通路,该通路在调控AngⅡ增加CFs胶原含量中有重要作用。     

一氧化氮对人精子三磷酸腺苷水平及其活力的影响

目的探讨一氧化氮(NO)在男子不育发病机理中的作用。方法取正常精液标本，与不同浓度的NO释放剂硝普钠(SNP)、NO合酶抑制剂N^W-硝基-L-精氨酸甲脂(L-NAME)混合培养。计算机辅助精子分析法和分光光度法检测精子活力和ATP含量。结果L-NAME组ATP含量显著高于SNP组和对照组，且高浓度L-NAME组ATP含量、精子总活率和Ⅲ级活率显著高于对照组。结论NO合酶抑制剂通过对精子ATP水平的提高而改善精子活力。     

α-1抗胰蛋白酶对肝窦内皮细胞缺氧-复氧损伤保护作用的实验研究

目的 探讨α-1抗胰蛋白酶对人肝窦内皮细胞(LSEC)冷缺氧-复氧损伤的保护作用。方法 人LSEC在体外培养,通过低温、缺氧-复氧建立缺氧-复氧损伤实验模型,观察α-1抗胰蛋白酶对LSEC缺氧-复氧损伤的影响。细胞凋亡应用原位免疫组织化学和DNA梯状条带方法检测;产生基质金属蛋白酶(MMP)的活性应用酶谱方法分析;一氧化氮的产生通过检测亚硝酸盐含量进行分析;一氧化氮合酶的表达采用细胞免疫组织化学方法进行分析。结果 低温、缺氧-复氧引起LSEC凋亡,而α-1抗胰蛋白酶抑制LSEC的凋亡。应用一氧化氮的抑制剂N-ω-硝基左旋精氨酸(L-NAME)或MMP的抑制剂BB3103明显减少缺氧-复氧诱导的LSEC的凋亡,而应用外源性一氧化氮的供体S-亚硝基-N-乙酰青霉氨(SNAP)则明显增加LSEC的凋亡,表明一氧化氮和MMP在LSEC凋亡过程中是重要的介导物。在缺氧-复氧过程中,一氧化氮合酶表达增强,一氧化氮产生增多,产生MMP的活性增强。α-1抗胰蛋白酶明显抑制缺氧一复氧过程中MMP的释放,并通过抑制一氧化氮合酶的表达减少一氧化氮的产生。结论 α-1抗胰蛋白酶通过抑制一氧化氮和MMP的产生保护LSEC的冷缺氧一复氧损伤。     

通心络对血管紧张素Ⅱ诱导的血管内皮细胞活力及组织因子的影响

目的:研究通心络对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)细胞活力(cell viability)及组织因子(tissue factor,TF)的影响和其作用机制.方法:分别用5%,10%,20%的通心络含药血浆预处理内皮细胞30 min后加入AngⅡ 10-6 mol/L孵育HUVECs 24 h,观察细胞活力变化的量效关系.选择一个最佳浓度的通心络含药血浆预处理内皮细胞30 min后加入AngⅡ 10-6 mol/L孵育HUVECs 24 h观察TF,AngⅡ1型受体(AT1)mRNA水平,一氧化氮合酶(NOS)活性及一氧化氮浓度(NO),并予NOS抑制剂(L-NAME)预处理内皮细胞30 min后,再加入通心络含药血浆和AngⅡ,观察孵育24 h细胞活力,TF,AT1,NOS及NO变化.结果:通心络能显著提高AngⅡ诱导的血管内皮细胞活力,以10%浓度作用最明显,通心络能降低TF及AT1水平及提高NOS活性和NO浓度;L-NAME可明显抑制通心络对血管内皮的作用.结论:通心络可能通过上调NOS-NO通路提高AngⅡ诱导的内皮细胞活力及抗血栓能力.     

黄芪注射液调节一氧化氮合酶抗再灌注损伤作用

目的:研究黄芪注射液抗培养乳鼠心肌细胞再灌注损伤的作用与一氧化氮合酶(NOS)表达的关系。方法:采用培养的SD乳鼠心肌细胞缺氧复氧模型,实验分为5组:A组为正常对照组,B组、C组、D组、E组均为缺氧-复氧组。各组培养液组成:B组缺氧液,C组缺氧液加黄芪,D组缺氧液加NOS抑制剂L-NAME,E组缺氧液加黄芪加L-NAME。缺氧4 h,复氧2 h。比较缺氧-复氧后培养液中心肌酶含量,并进行心肌细胞NOS蛋白表达检测。结果:复氧2 h后,B组、C组、D组、E组与A组比较心肌酶谷草转氨酶(GOT)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)均有升高(P<0.05)。C组与B组比较GOT升高减轻(P<0.05),但无统计学意义。黄芪增强缺氧-复氧引起的心肌细胞NOS表达增加,L-NAME对黄芪引起的NOS表达增加有一定抑制作用。结论:黄芪能够减轻缺血再灌注损伤,其机制涉及了NOS信号转导途径。     

膜雌激素受体介导的NO途径对EPCs增殖和凋亡的影响

 【目的】 观察一氧化氮(NO)信号途径在膜雌激素受体介导的内皮祖细胞(EPCs)增殖和凋亡中的作用&;#65377; 【方法】 在培养的EPCs上,分别使用E2-BSA&;#65380;或加雌激素受体阻断剂ICI 182,780&;#65380;PI3K抑制剂LY294002和NOS抑制剂l-NAME,利用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性(10组,n = 9),利用化学比色法测定NO的含量(6组,n = 6),Hoechst 33258染色观察EPCs凋亡(8组,n = 5)以及免疫印迹法检测EPCs磷酸化eNOS蛋白表达的情况(4组,n = 4)&;#65377;【结果】 与对照组相比,E2-BSA 可以促进EPCs的增殖,ICI 182,780可以抑制其增殖作用,表明膜雌激素受体介导的信号通路参与雌激素对EPCs的增殖作用;NO合成和细胞凋亡结果显示,E2-BSA可以促进一氧化氮的合成和抑制血清撤退诱导的凋亡,PI3K抑制剂LY294002&;#65380;NOS 抑制剂l-NAME以及和ICI 182,780可以抑制上述作用;免疫印迹结果显示,E2-BSA可以促使eNOS的磷酸化,而LY294002可抑制上述作用&;#65377;【结论】 膜雌激素受体可通过PI3K/Akt/eNOS信号途径抑制EPCs的凋亡从而促进其增殖&;#65377;     

促红细胞生成素与一氧化氮合酶抑制剂对肝硬化大鼠高动力循环 …

目的 观察促红细胞生成素或一氧化氮合酶（ＮＯＳ）抑制剂Ｎ－硝基－Ｌ－精酸甲酯（Ｌ＿ＮＡＭＥ）对肝硬化大鼠高循环状态的影响。方法 制造肝硬化大鼠模型,用Ｌ－ＮＡＭＥ胃管内注入或促红素（１００Ｕ／ｋｇ）皮下注射治疗２周;用＾５７Ｃｏ标记微球技术,观察大鼠血流动力学指标;用荧光比色法测血清一氧化氮（ＮＯ）含量。结果 肝硬化大鼠全部出现高动力循环状态,血清ＮＯ含量显著高于正常对照组,促红素和Ｌ－ＮＡＭＥ治     

氦氖激光对小鼠小脑信息传递物质一氧化氮及环磷酸鸟苷含量的影响

目的：研究低功率氦氖激光对小鼠小脑信息传递物质的影响。方法：采用雄性BALB／C小鼠,随机分为对照组,辐射后即刻组、1h组、2h组,注入氮氖合酶（NOS）抑制剂的辐射后即刻组、副射后1h组,用波长632．8nm、功率密度5mW/cm^2连续氦氖激光每天局部辐射1次,每次1h,连续5d。对照辐射功率密度为0。结果：辐射组分别于辐射后即刻、1h小脑组织中一氧化氮（NO）代谢产物亚硝酸根（NO2^-)及环磷酸鸟苷（cGMP)含量均升高（P＜0．01）,辐射2h二者均降至正常,此增高效应可同时被NOS抑制剂阻断。结论：低功率氦氖激光可使小鼠小脑NO代谢产物NO2^-及cGMP含量短暂性升高,在氦氖激光辐射产生的生物学效应中涉及NO／cGMP信息传递机制。     

Expression of nitric oxide synthase in T-cell-dependent liver injury initiated by ConA in Kunming mice

To investigate whether nitric oxide synthase (NOS) is expressed in T-cell-dependent liver injury initiated by concanavalin A (ConA) in Kunming mice and study the possible effect of nitric oxide(NO) on liver injury models. Methods: Liver injury in Kunming mice was induced by administration of ConA through tail vein. Expression of NOS inthe liver was detected by NADPH diaphorase staining method. The possible effect of NO on liver injury models was obtainedby L-NAME injection to suppress synthesis of NO. Results: NOS has a strong expression in hepatocytes after ConA injection, especially in those close to the central vein, while only a weak expression was found in the epithelial cells in contrml group. Liver injury became more serious when NO symhesis was inhibited by L-NAME, accompanied by great malondlalde-hyde(MDA) increase in serum and severe intrahepatic vascular thrombosis. Conclusion: NOS markedly expressed in ConAinduced liver injury, which may subsequently promote nitric oxide synthesis. Increasement of nitric oxide has a protective ef-fect on ConA-induced liver injury.     

正常及患病心脏中的一氧化氮和一氧化氮合酶亚型(英文)

We have reviewed the role of nitric oxide synthase(NOS)isoforms and nitric oxide(NO)in the normal heart and in heart failure.NO is a highly reactive siganaling molecule produced normally in the heart and is an important modulator of myocardial function.NOS catalyzes the conversion of L-arginine to L-citrulline and NO.In the heart,three NOS isoforms are present:neuronal NOS(nNOS),and endothelial NOS(eNOS),are constitutively present enzymes in distinct subcellular locations within cardiomyocytes,whereas induc...     

Estrogen inhibits corticotropin-releasing hormone production in primary human placental cells

Objective: To study the inhibition effects of estrogen on the production of corticotropin-releasing hormonein human placental cells. Methods: Primary cultured placental cells were treated by ICI182, 780, a complete ER an-tagonist, and Tamoxifen, an ERα-mixed agonist/antagonist and ERβ antagonist for 24 h. The supernatant was havestedfor the radioimmunoassay of CRH. Results: 17β-estradiol inhibited the secretion of corticotropin-releasing hormone inhuman placental (P<0.05).ICI182, 780 stimulated the secretion of corticotropin-releasing hormone in human pla-cental(P<0.05). Conclusion: Estrogen represses the synthesis and secretion of corticotropin-releasing hormone inhuman placental, which is possibly mediated by ERα.     

一氧化氮及一氧化氮合酶在遗传性癫痫易感大鼠惊厥发作中的作用

目的：探讨一氧化氮、一氧化氮合酶在遗传癫痫易感大鼠惊厥发作中的变化及作用。方法：选择惊厥评分在30－40的P77PMC大鼠35只，均分A－G7组，A组为对照组、G组预先30min腹腔注射一氧化氮合酶抑制剂L－NAME，分别于铃声刺激致惊后0．5、1、2、4,12h断头处死，取出脑组织分离双侧大脑皮层、海马等组织匀浆，测定一氧化氮及一氧化氮合酶，分别统计并进行t检验。结果：惊厥后0．5－1h皮层、海马一氧化氮、一氧化氮合酶逐渐升高，2h达峰值，4－12h恢复正常，应用L－NAME后，一氧化氮、一氧化氮合酶升高被抑制，但大鼠惊厥评分增高并致1例惊厥后死亡和明显延长惊厥持续时间。结论：惊厥后大鼠体内一氧化氮、一氧化氮合酶合成增加，给予合成酶抑制后能明显下降，但能加重惊厥程度和延长持续时间，提示一氧化氮于惊厥后升高，可能作为内源性抑制性性质，在惊厥发作自行终止机制中具有重要作用。     

一氧化氮对妊娠高血压综合征发病的影响

OBJECTIVE: We attempted to investigate the role of nitric oxide(NO) in pathogenesis of pregnancy-induced hypertension(PIH). METHODS: No-nitro-L-arginine-methyl ester(L-NAME) was used to inhibit nitric oxide synthase(NOS) in pregnant rats. Indices including blood pressure, urine protein concentration, pup weight, serum NO level and plasma ET-1 level were measured. Nitroglycerin, a nitric oxide donor, was used to observe its impact on the effect of L-NAME at the same time. RESULTS: Infusion of L-NAME elevated blood pressure, increased urine protein concentration, decreased pup weight, decreased serum NO level and raised plasma ET-1 level(P < 0.01, respectively); However in the L-NAME-treated animals nitroglycerin significantly lowered blood pressure, decreased urine protein concentration, increased pup weight, increased serum NO level and decreased plasma ET-1 level(P < 0.01, respectively). CONCLUSIONS: 1. Infusion of L-NAME, an inhibitor of NOS, causes decreased serum NO level and some signs similar to preeclampsia such as hypertension, proteinuria and intrauterine growth retardation(IUGR). Nitroglycerin can reverse the lesions induced by the treatment of L-NAME. These findings indicate that reduced level of NO may be a factor responsible for PIH. 2. NO can decrease the plasma ET-1 level. NO may regulate the process of PIH via ET-1 pathway. It may be one mechanism for NO. 3. An useful animal model for PIH is provided to test novel therapeutic and preventive strategies.     

一氧化氮合酶/一氧化氮介导人参皂苷Rb1对心肌细胞肥大的抑制效应

目的在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ,CoCl2)诱导乳鼠心肌细胞肥大基础上,探讨人参皂苷Rb1(ginsen-oside Rb1,Gs-Rb1)是否可通过一氧化氮合酶/一氧化氮(NOS/NO)系统减轻心肌细胞肥大。方法将乳鼠心肌细胞随机分为对照组、AngⅡ组、Gs-Rb1组、Gs-Rb1+L-NAME(NOS抑制剂)组、Gs-Rb1+AngⅡ+L-NAME组,AngⅡ、L-NAME和Gs-Rb1浓度分别是10μmol/L、1 mmol/L和200μmol/L;分别测定心肌细胞表面积、细胞培养液NO浓度和心肌细胞NOS活性。结果 (1)Gs-Rb1显著抑制AngⅡ所致的心肌细胞肥大(P=0.00),但不能使心肌细胞回复到正常大小;Gs-Rb1减小心肌细胞表面积的效应可被L-NAME显著抑制(P=0.00)。(2)AngⅡ降低心肌细胞NO浓度的效应可被Gs-Rb1显著抑制(P=0.00),但L-NAME可完全抑制Gs-Rb1对心肌细胞的NO分泌效应。(3)Gs-Rb1显著增加心肌细胞在AngⅡ干预时的NOS活性(P=0.00),该效应被L-NAME完全抑制。(4)心肌细胞表面积与NOS(r=0.59,P=0.00)、NO(r=0.62,P=0.00)均呈正相关。结论 Gs-Rb1显著抑制AngⅡ所致的心肌细胞肥大,此效应至少部分通过NOS/NO系统实现。