急性胰腺炎肺组织中巨噬细胞移动抑制因子的表达及意义

目的:探讨急性胰腺炎(AP)肺组织中巨噬细胞移动抑制因子(MIF)的表达及其与核因子-κB(NF-κB)的关系。方法:30只SD大鼠随机分为正常对照组、急性水肿型胰腺炎(AEP)组和急性坏死性胰腺炎(ANP)组。以不同浓度牛磺胆酸钠液逆行胰胆管插管注射造成大鼠AEP和ANP两种模型。6 h后检测相关指标。应用免疫组化染色检测肺组织NF-κB的表达;采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,对肺组织MIF的表达水平进行半定量测定;生化法检测髓过氧化物酶(MPO)活性;行肺、胰腺组织病理学检查并评分。结果:正常对照大鼠肺组织中MIF mRNA和NF-κB呈低表达。AP模型组大鼠肺组织中MIF mRNA的表达显著增强,NF-κB、MPO活性和病理学评分也显著增高,且在ANP组增高尤为明显;两个模型组间各项指标具有显著性差异(P<0.05)。MIF mR-NA的表达与NF-κB的活性密切相关。组织学评分显示,随着胰腺损伤的加重,肺损伤也加重。结论:MIF参与了AP肺损伤的发病过程,其机制可能与激活NF-κB有关。     

趋化细胞因子MIP-2在急性胰腺炎大鼠胰外脏器损伤中的作用

目的探索趋化细胞因子MIP-2在急性胰腺炎（AP）大鼠胰腺病变和胰外脏器损伤中的意义。方法免疫组化（S-P法）观察和分析制模后3、6 h胰腺、肺和肝组织中MIP-2的表达。结果模型组制模后3、6 h时,MIP-2的表达均明显高于对照组（均P〈0.05）;模型组制模后6 h时MIP-2在胰腺、肺和肝脏中的表达均明显高于模型组制模后3 h时的MIP-2表达（均P〈0.05）。结论大鼠AP并发肺损伤时,血清中的MIP-2可能来源于胰腺组织;AP时MIP-2在大鼠肝脏高表达,在肝脏损伤中起重要的上调作用;AP时MIP-2在肺的表达明显增加,趋化中性粒细胞,造成肺部的损害。     

急性胰腺炎大鼠血清TNF-α 、VEGF的变化及意义

目的 探讨急性胰腺炎(AP)大鼠血清中肿瘤坏死因子-α (TNF-α)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)的变化及意义.方法 60只SD雄性大鼠随机分成2组:急性胰腺炎组(AP组)和假手术组(SO组),每组分为3个时间点(6h、12h、24 h),每个时间点10只大鼠;AP组经胰胆管注入3.5％牛磺胆酸钠(1mL/kg)制作动物模型,SO组仅开腹后翻动胰腺.各组于相应时间点抽血并留取胰腺组织,检测血清TNF-α、VEGF、淀粉酶(AMY)含量,并观察各组胰腺组织病理变化.结果 AP组血清TNF-α、VEGF、AMY以及胰腺组织病理学评分较相同时间点SO组均显著升高(P＜0.05);AP组各时间点血清VEGF与血清TNF-α及病理学评分均成正相关(P＜0.05).结论 TNF-α、VEGF在AP早期即开始升高,且与胰腺组织病理评分正相关,在AP过程中起重要作用,可作为AP早期的评测指标.     

脂质体介导的p65反义寡核苷酸减轻急性出血坏死性胰腺炎大鼠的炎症损伤

目的 观察脂质体介导的p65反义寡核苷酸(ASODN)预处理对大鼠急性出血坏死性胰腺炎(ANP)的抗炎作用.方法 通过胰胆管的注射法诱导大鼠出血坏死性胰腺炎.其中72只大鼠分成假手术组,胰腺炎组、脂质体组、ASODN组(20 OD/mL)、ASODN＋脂质体组、随机ODN组,观察各组大鼠术后6 h及12 h胰腺病理、血清淀粉酶、胰腺组织髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)及NF-κB活性的变化.结果 同假手术组相比,各处理组的血清淀粉酶活性、MDA、MPO水平、胰腺组织NF-κB活性明显升高(P＜0.01).各处理组间的血清淀粉酶的差别无统计学意义.同胰腺炎组相比,脂质体组和随机ODN组的胰腺病理评分、MDA、MPO、胰腺组织NF-κB活性的差别无统计学意义(P＞0.05),而ASODN组、ASODN＋脂质体组的胰腺病理评分,MPO、MDA、胰腺组织NF-κB活性下降(P＜0.05),其中ASODN＋脂质体组下降更为明显.结论 脂质体介导的p65反义寡核苷酸能减轻ANP大鼠的炎症发展,NF-κB参与了AP的发病机制,其p65 ASODN对AP可能具有治疗效应.     

急性胰腺炎肺组织中巨噬细胞移动抑制因子的表达及意义

目的：探讨急性胰腺炎（AP）肺组织中巨噬细胞移动抑制因子（MIF）的表达及其与核因子-κB（NF-κB）的关系。方法：30只SD大鼠随机分为正常对照组、急性水肿型胰腺炎（AEP）组和急性坏死性胰腺炎（ANP）组。以不同浓度牛磺胆酸钠液逆行胰胆管插管注射造成大鼠AEP和ANP两种模型。6 h后检测相关指标。应用免疫组化染色检测肺组织NF-κB的表达;采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术,对肺组织MIF的表达水平进行半定量测定;生化法检测髓过氧化物酶（MPO）活性;行肺、胰腺组织病理学检查并评分。结果：正常对照大鼠肺组织中MIF mRNA和NF-κB呈低表达。AP模型组大鼠肺组织中MIF mRNA的表达显著增强,NF-κB、MPO活性和病理学评分也显著增高,且在ANP组增高尤为明显;两个模型组间各项指标具有显著性差异（P〈0.05）。MIF mR-NA的表达与NF-κB的活性密切相关。组织学评分显示,随着胰腺损伤的加重,肺损伤也加重。结论：MIF参与了AP肺损伤的发病过程,其机制可能与激活NF-κB有关。     

卡托普利在大鼠重症急性胰腺炎肺损伤中的保护作用

目的 研究卡托普利对大鼠重症急性胰腺炎(SAP)肺损伤的保护作用,并探讨其可能机制.方法 72只健康雄性SD 大鼠随机分为假手术组(SO组),重症急性胰腺炎组(SAP组),卡托普利干预组(CAP组).在术后1,6,12h动态观察大鼠胰腺、肺组织病理学改变以及血清淀粉酶,肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性变化.ELISA法检测肺组织匀浆TNF-a,Ang Ⅱ活性.结果 卡托普利千预组胰腺及肺组织病理学改变较SAP组明显减轻,MPO活性6h,12h明显低于SAP 组(P<0.05),各时点血清淀粉酶较SO组升高,卡托普利干预组肺组织TNF-a,Ang Ⅱ各时点较SO组明显升高(P<0.01),但其与SAP组相比6,12h明显降低(P<0.05).结论 卡托普利对大鼠重症急性胰腺炎导致的肺损伤的具有一定的保护作用.     

大承气汤对急性胰腺炎致急性肺损伤-腹内高压的作用

目的通过研究大承气汤(Dachengqi tang,DCQT)在实验性急性胰腺炎治疗腹内高压以缓解急性肺损伤的机理,初步阐释肺与大肠相表里的现代科学研究依据及科学内涵。方法将30只SD雄性大鼠随机分成:假手术模型组(sham operation,SO组),坏死性胰腺炎组(acute necrosis pancreatitis,ANP组)和大承气汤组(DCQT组),每组10只。术前检测大鼠腹内压,麻醉大鼠后胆胰管内逆行泵入5%牛磺胆酸钠溶液制备急性坏死性胰腺炎模型。术后2 h前二组灌喂生理盐水,DCQT组灌喂大承气汤1次;造模后24 h采集动脉血、胰腺组织,肺组织,计算肠推进率;取胰腺、肺组织做病理切片并分别按病理学评分标准进行评分,计算干湿重比,ELISA法检测髓过氧化物酶(MPO)。结果 DCQT组治疗后腹内压力、胰腺及肺组织病理评分、胰腺与肺组织MPO、胰腺与肺组织含水量均较ANP组降低(P<0.05)。DCQT组肠推进率、氧分压高于ANP组(P<0.05)。DCQT组存活率高于ANP组,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论大承气汤能通过降低腹内压以减轻重症急性胰腺炎肺损伤程度。     

急性胰腺炎中性粒细胞、炎性介质的动态变化及其与胰腺病理改变的相关性研究

目的探讨急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)中性粒细胞、炎性介质的动态变化以及在急性胰腺炎中的相互作用.方法SD大鼠分为对照组和AP组,每组18只,胰胆管逆行注射4%牛磺胆酸钠建立AP模型.按随机原则在制模后3,6,12h分批处死,留取胰腺(体部)组织甲醛固定,HE染色光镜观察胰腺病理改变程度并进行病理学评分、免疫组织化学染色进行胰腺中性粒细胞特异性表面抗原Mac--1测定,心脏取血分离血清,供IL-1和TNF测定.结果随着制模后时间的延长胰腺病变程度加重,AP组在不同时间段胰腺中性粒细胞阳性细胞率、血清TNF及IL-1浓度均比对照组明显升高;随着时间的延长中性粒细胞阳性细胞率、血清TNF及lL-1浓度逐渐升高,3,6,12 h各时间段之间比较差异有显著性.在制模后3 h,Mac--1与TNF及IL-1为正相关(P＜0.05),其余各指标之间无相关关系;在制模后6,12 h,各指标之间均为正相关关系.结论AP大鼠胰腺病变程度加重与中性粒细胞浸润加重、TNF及IL-1释放增加同步发生,并且呈密切正相关.中性粒细胞和炎性介质两者相互作用,互为因果共同加重急性胰腺炎病情发展.     

Caspase-3激活在实验性重症急性胰腺炎肺损伤中的作用

目的 探讨重症急性胰腺炎大鼠血清IL-2,IL-10及IL-2/IL-10动态变化以及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)在肺组织的表达及意义。方法 SD大鼠64只,随机分对照组、胰腺炎组。经大鼠胰腺被膜下均匀注射0.5 %牛磺胆酸钠制作重症急性胰腺炎模型,对照组仅胰腺被膜下注射等量生理盐水。通过肠系膜上静脉取血用于血清IL-2,IL-10及Caspase-3水平的测定,并计算IL-2/IL-10比值。分别对胰腺损伤、肺损伤程度进行病理评分,免疫组化方法检测肺组织内Caspase-3蛋白的表达水平。结果 0.5 h后血清IL-2水平胰腺炎组较对照组明显升高（P＜0.01）,并于6 h达到最高点。胰腺炎组6 h后血清IL-10水平较对照组明显升高（P＜0.01）,12 h血清IL-10水平较6 h降低。胰腺炎组的IL-2/IL-10先降低后升高,0.5 h后即开始下降,6 h时达到最低点然后开始升高,显著低于对照组（P＜0.01）,12 h接近对照组（P＞0.01）。胰腺炎组的IL-2/IL-10先升高后降低,0.5 h后即开始升高,6 h时达到最低点然后开始升高,显著低于对照组（P＜0.01）,12 h接近对照组（P＞0.01）。与对照组比较,胰腺炎组各时相胰腺及肺组织病理改变明显加重。免疫组化结果显示在正常的肺组织未见明显表达。 造模0.5 h后, 大鼠肺组织内Caspase-3表达增加, 至12 h达最高水平。结论 Caspase-3参与了胰腺炎肺损伤的病理过程,其机制可能与其介导的Th细胞凋亡有关。 【关键词】胰腺炎 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 白细胞介素-2 白细胞介素-10 肺损伤     

罗格列酮对重症急性胰腺炎的保护作用

目的:探讨罗格列酮对重症急性胰腺炎(SAP)的保护作用及其作用机制。方法:72只健康SD大鼠随机分为3组:假手术组(SO组)、SAP组及罗格列酮处理组。采用经十二指肠胰胆管逆行注射5%牛磺胆酸钠诱导大鼠SAP模型,于模型制作前30min腹腔内注射罗格列酮(10mg/kg)进行预处理,各组于术后3h、6h和12h分批处死动物,观察各组大鼠血浆淀粉酶、TNF-α、IL-6、胰腺组织髓过氧化物酶(MPO)水平的变化以及胰腺组织病理改变,并进行病理学评分。结果:SAP组血浆淀粉酶、TNF-α、IL-6、胰腺组织MPO、胰腺组织病理学评分较SO组均明显升高(P<0.05),罗格列酮处理组各时间点血浆淀粉酶、TNF-α、IL-6、胰腺组织MPO水平均较SAP组显著降低(P<0.05),6h、12h胰腺组织病理评分均显著低于SAP组(P<0.05),各时间点胰腺组织病理损伤较SAP组明显减轻。结论:罗格列酮可能通过减少TNF-α、IL-6的产生,减轻胰腺组织损伤,从而改善SAP病情。     

L-精氨酸诱导急性胰腺炎小鼠肺损伤的实验研究

目的　建立大剂量 L-精氨酸诱导急性胰腺炎并发肺损伤的小鼠模型 ,并探讨 TNF- α和 ICAM- 1对该模型小鼠肺损伤的作用。方法　给胰腺炎组小鼠腹腔注射 L-精氨酸 (2 g/ kg) ,间隔 1h后同量再注射 1次 ,末次注射后 12 h采用比色法检测小鼠血清淀粉酶活性、放射免疫法测定肺组织 TNF- α的含量 ;2 4 h观察胰腺和肺组织病理变化并采用免疫组织化学染色法检测肺组织 ICAM- 1的蛋白表达。结果　胰腺炎组小鼠血清淀粉酶活性、肺组织 TNF- α的含量、ICAM- 1的表达均高于对照组 ,且差异有显著性 (P<0 .0 5 ) ;胰腺组织和肺组织 HE染色可见典型的炎性改变。结论　大剂量 L-精氨酸可成功诱导急性胰腺炎并发肺损伤的小鼠模型 ,TNF- α和 ICAM- 1可能参与了 L-精氨酸诱导的 AP小鼠的肺损伤机制。     

GM-CSF在急性胰腺炎肺损伤中的作用及药物干预实验

目的：旨在研究巨粒细胞-噬细胞集落刺激因子（Granulocyte - macrophage colony stimulating factor,GM—CSF）在急性胰腺炎相关肺损伤中的作用及中药胰炎合剂治疗肺损伤的作用机理。方法：健康Wistar大鼠120只,随机分为：模型组、胰炎合剂治疗组、乌司他丁治疗组及阴性对照组。通过向胆胰管内逆行注射5％的牛黄胆酸钠,制成急性坏死性胰腺炎肺损伤动物模型。分别予胰炎合剂和乌司他丁治疗,分析各组不同时间点肺湿干重比（W／D）、肺髓过氧化酶活性（Myeloperxidase,MPO）、肺组织GM—CSF水平变化。结果：模型组大鼠肺组织中GM—CSF,MPO及w／D明显升高（P〈0．01）,12～24h达高峰;除6h亚组外,胰炎合剂治疗组与乌司他丁治疗组GM—CSF、MPO和W／D相比无明显差异（P〉0．05）。模型组、胰炎合剂组和乌司他丁组肺组织中GM—CSF与MPO和W／D呈正相关（r分别为0．6661和0．7668,P值均小于0．01）。肺MPO与w／D亦呈正相关（r=0．5706,P〈0．01）。结论：GM—CSF在急性胰腺炎相关肺损伤的发病过程中起关键作用,其作用机理可能与其能促进中性粒细胞在肺内的聚集有关。胰炎合剂能减轻肺水肿或肺类症．能有效的抑制肺内GM-SCF会号．对急性胰腺炎相关肺捐伤有明显的治疗作用．     

蛋白酶体抑制剂MG-132在大鼠重症急性胰腺炎及其肺损伤中的保护作用

目的观察蛋白酶体抑制剂MG-132在大鼠重症急性胰腺炎（SAP）中的保护作用,并探讨其可能机制。方法SD大鼠30只,5％牛磺胆酸钠逆行胆胰管注射制作重症急性胰腺炎（SAP）模型,观察各组大鼠胰腺、肺组织形态学改变,并测定血清淀粉酶及胰腺、肺组织髓过氧化物酶（MPO）活性。结果MG-132治疗组与胰腺炎组及假手术组比较,血清淀粉酶、胰腺及肺组织MPO活性下降（P〈0．05）,组织病理学改变均有不同程度的改善（P〈0．05）。结论制模前30min腹腔注射10mg／kg的MG-132可以明显减轻5％牛磺胆酸钠诱导的大鼠的肺损伤严重程度,并可减轻胰腺炎所致的肺损伤。     

N-乙酰半胱氨酸对急性坏死性胰腺炎大鼠趋化因子MCP-1、MIP-2表达的影响

目的 探讨趋化因子单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)与巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)在大鼠急性坏死性胰腺炎(ANP)早期发病机制中的作用,并观察N-乙酰半胱氨酸(NAC)对趋化因子表达的影响.方法 35只SD大鼠随机分为假手术组(SO)组,ANP 3 h、6 h、12 h组和NAC干预3 h、6 h、12 h组,每组5只.采用4%牛磺胆酸钠胰胆管逆行注射制备ANP动物模型,NAC组在诱导ANP前0.5 h腹腔注射NAC 500 mg/kg.检测血淀粉酶、髓过氧化物酶(MPO),观察胰腺病理组织学改哪变,采用RT-PCR检测胰腺组织中MCP-1与MIP-2 mRNA的表达.结果 ANP各组血淀粉酶较高,浸润到胰腺组织的白细胞明显较多,胰腺病理损伤依次加重.SO组胰腺MCP-1 mRNA与MIP-2 mRNA表达阴性或弱表达(0.1492±0.0036、0.1593±0.0117),ANP各组MCP-1 mRNA(0.3653±0.0213、0.5890±0.0225、0.7164±0.0275)与MIP-2 mRNA(0.3871±0.0286、0.6040±0.0448、0.7692±0.0620)的表达随ANP病变的加重逐渐增强(均P＜0.01).MCP-1与MIP-2 mRNA的表达与胰腺的病理损伤成正相关r=0.76和0.82,P＜0.05).经NAC干预后,趋化因子MCP-1、MIP-2 mRNA表达下调(0.2497±0.0168、0.4457±0.0097、0.6306±0.0423,0.2436±0.0099、0.4312±0.0221、0.6302±0.0288,均 P＜0.05),白细胞浸润减少(0.63±0.03 vs 0.89±0.03,0.88±0.05 vs 1.42±0.14,1.31±0.09 vs 1.94±0.07,均P＜0.05),组织损伤得到改善(3.50±0.61 vs 5.10±0.42,5.60±0.65vs 7.50±0.50,7.50±0.79 vs 9.90±0.96,均P＜0.05).结论 ANP早期趋化因子MCP-1、MIP-2在胰腺组织中过表达,并参与白细胞的趋化作用.NAC能显著下调胰腺组织中趋化因子MCP-1、MIP-2的表达.     

实验性急性胰腺炎大鼠肺内肿瘤坏死因子αmRNA的表达及其意义

为了解急性胰腺炎（ＡＰ）时,肺组织中肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）转录水平上调在肺损伤机制中的意义,作者以半定量逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术,检测了急性水肿性胰腺炎（ＡＥＰ）与急性坏死性胰腺炎（ＡＮＰ）两种模型的大鼠肺组织内ＴＮＦ－αｍＲＮＡ表达的状况,同时观察了它与内毒素（ＥＴ）血症及肺损伤的关系。结果表明,ＡＮＰ组血ＴＮＦ－α水平（１０７．４±４９．７ｐｇ／ｍｌ）显著高于ＡＥＰ组（５５．８±     

实验性急性胰腺炎大鼠肺内趋化因子基因的表达及其意义

为探讨急性坏死性胰腺炎 (ANP)大鼠模型肺组织单核细胞趋化性蛋白 1 (MCP 1 )mRNA的表达情况及其与肺损伤的关系 ,将 3 3只Wistar大鼠随机分为正常对照组和胰腺炎不同时间点 ( 1、4、1 2和 2 4h)各组 ,应用 3 .5 %牛磺胆酸钠逆行胰胆管注射制备ANP模型。采用RT PCR法检测肺组织MCP 1mRNA表达 ,同时测定肺组织湿 /干质量比率及病理改变。结果 :造模ANP 1h后肺组织MCP 1mRNA表达水平为 0 .40± 0 .0 8,较正常对照组表达水平( 0 .0 3± 0 .0 2 )明显增高 (P <0 .0 5 ) ,并持续升高至 2 4h( 1 .1 3± 0 .0 7) ,同时伴有肺组织病理损害 ,其严重程度与MCP 1mRNA表达及肺湿 /干质量比率与MCP 1mRNA表达均明显相关 (P <0 .0 5 )。提示 :大鼠ANP早期肺组织MCP 1即过度表达 ,MCP 1mRNA过度表达是ANP肺损害发生的原因之一 ,肺损伤严重程度与MCP 1mRNA表达的高低有关     

丙酮酸乙酯对急性坏死性胰腺炎大鼠肠黏膜的保护作用

目的探讨丙酮酸乙酯(EP)减轻急性坏死性胰腺炎(ANP)肠黏膜损伤及其治疗肠屏障功能障碍的机制。方法逆行胰胆管注射5%牛磺胆酸钠制作ANP模型。雄性Wistar大鼠随机分成3组,假手术组、ANP组和EP治疗组。测定血浆D-乳酸、肠组织髓过氧化物酶(MPO)水平,半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肠组织高迁移率族蛋白B1(HMGB1)mRNA表达,并观察肠组织形态学改变。结果ANP组血浆D-乳酸、肠组织MPO在建模后24h达高峰,48h仍维持在较高水平,EP治疗组血浆D-乳酸、肠组织MPO水平明显低于ANP组(P<0.05)。ANP组大鼠肠组织HMGB1mRNA表达水平在ANP后12h明显升高,至24h达峰,48h仍维持在高水平。EP治疗组肠组织HMGB1mRNA表达水平均明显低于ANP组(P<0.05)。结论EP能显著下调血浆D-乳酸、肠组织MPO水平并明显抑制HMGB1基因表达,改善肠黏膜屏障功能,对ANP肠黏膜损伤有明显保护作用。     

褪黑素对急性胰腺炎大鼠胰腺组织中趋化因子表达的影响

目的探讨单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）和巨噬细胞炎性蛋白-2（MIP-2）在急性胰腺炎（AP）早期发病中的作用,观察褪黑素（MT）对趋化因子MCP-1及MIP-2表达的影响。方法35只SD大鼠随机分为假手术（SO）组,AP 3、6、12 h组和MT 3、6、12 h干预组。采用4%牛磺胆酸钠胰胆管逆行注射制备AP动物模型,MT组在诱导AP前0.5 h给予腹腔注射MT 20 mg/kg。观察胰腺病理组织学改变,采用实时定量RT-PCR方法检测各组胰腺组织中MCP-1 mRNA、MIP-2 mRNA表达水平。结果AP大鼠胰腺组织中MCP-1 mRNA、MIP-2 mRNA表达显著高于SO组（P〈0.01）,且表达水平与胰腺病理严重程度成正相关（P〈0.05）。经MT干预后,胰腺组织中MCP-1 mRNA、MIP-2 mRNA表达下调（P〈0.05）,胰腺组织损伤得到改善。结论MCP-1及MIP-2在AP大鼠发病过程中具有重要作用,MT可能通过下调其在胰腺组织的表达,对AP具有一定的保护作用。