双苯氟嗪对脑缺血再灌注损伤后细胞凋亡的影响

目的研究双苯氟嗪对局灶性脑缺血再灌注损伤后细胞凋亡的影响。方法采用endothelin1诱导的大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,流式细胞术检测大脑皮层和纹状体神经细胞凋亡百分率、Bcl2和Bax蛋白表达量。结果假手术组皮层和纹状体细胞凋亡率低,分别为(1.26±0.15)%和(2.50±0.35)%,溶剂组细胞凋亡率明显增高,分别为(9.34±1.22)%和(10.58±1.44)%;双苯氟嗪可以降低皮层和纹状体细胞凋亡率,并呈现明显的剂量依赖关系〔皮层:10mg·kg-1组(7.92±0.76)%,20mg·kg-1组(6.78±0.77)%,40mg·kg-1组(6.00±0.71)%,r=0.9559,P<0.01;纹状体:10mg·kg-1组(9.76±1.47)%,20mg·kg-1组(8.52±0.60)%,40mg·kg-1组(7.22±1.39)%,r=0.9845,P<0.01〕。Flu20mg·kg-1组可以降低缺血后大脑皮层的细胞凋亡百分率(8.12±0.94)%(P<0.05),但对纹状体细胞凋亡百分率无明显影响(P>0.05)。对Bcl2和Bax蛋白表达量的测定结果显示,假手术组皮层和纹状体均显示高水平的Bcl2表达,Bcl2和Bax比值最高,分别为:皮层1.30±0.08,纹状体1.64±0.10;溶剂组皮层和纹状体Bax表达增加,Bcl2和Bax比值明显低于假手术组,为1.03±0.12和1.00±0.04;Dip20、40mg·kg-1可以明显增加Bcl2表达,皮层和纹状体的Bcl2和Bax比值均高于溶剂组,而Dip10mg·kg-1组和Flu20mg·kg-1组不能对抗Bcl2和Bax比值的降低。结论双苯氟嗪可以明显抑制脑缺血再灌注损伤后神经细胞凋亡,其抗凋亡作用与增加Bcl2表达有关。     

双苯氟嗪对大鼠全脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的研究双苯氟嗪(D ip)对大鼠急性全脑缺血再灌注损伤的保护作用,并初步探讨其作用机制。方法采用Pu lsinelli等的四动脉结扎法(4-VO)造成大鼠全脑缺血再灌注损伤模型,观察大鼠全脑缺血再灌注损伤后早期脑组织水分的变化、生化指标的改变,再灌注后期行为学和组织形态学的改变。结果缺血30 m in再灌注1 h脑组织水分及丙二醛(MDA)含量升高,乳酸脱氢酶(LDH)和超氧化物歧化酶(SOD)活性下降;缺血20 m in再灌注5 d后海马CA1区椎体细胞层破裂,胞核固缩或溶解,间质也变得疏松。行为学实验表明大鼠记忆力明显受损。D ip可不同程度地抑制上述变化,能对抗自由基损伤和脑水肿,并能保护海马CA1区神经元免受缺血损伤,提高大鼠对空间辨别的记忆能力。结论D ip对大鼠全脑缺血再灌注早期损伤有明显的保护作用,并能保护海马CA1区神经元免受缺血损伤,提高大鼠对空间辨别的记忆能力,对迟发性神经元死亡有一定的保护作用。这可能与其抗脂质过氧化产物产生有关。     

MC-002对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织及血清中NO及NOS的影响

目的 研究MC-002对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织及血清中一氧化氮（NO）、一氧化氮合酶（NOS）含量的影响,探讨其对脑缺血再灌注损伤保护作用的机制.方法 采用改良线栓法,建立大鼠大脑中动脉栓塞（MCAO）脑缺血再灌注模型.将雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、奥扎格雷钠组（18mg/kg）和MC-002高、中、低剂量组（30、18、10.8mg/kg）.缺血再灌注24h后检测脑组织及血清中NO含量、NOS活性.结果 与假手术组相比,模型组脑组织和血清中NO含量和NOS活性明显升高;与模型组相比,MC-002高、中、低剂量组脑组织和血清中NO含量和NOS活性均明显降低（P＜0.01、0.05）.结论 MC-002对大鼠脑缺血再灌注损伤具有明显的保护作用,其机制可能与降低NOS活性,减少NO含量有关.     

辛伐他汀对大鼠脑缺血再灌注后脑组织NOS表达的影响

目的观察辛伐他汀对大鼠脑缺血再灌注后脑组织eNOS、nNOS和iNOS表达的影响。方法24只Wistar大鼠随机分为假手术组(Sham)、缺血再灌注IR组(IR)、辛伐他汀预处理高、低剂量组,每组6只。高剂量组和低剂量分别以阿伐他汀6mg/kg和1.5mg/kg连续灌胃7天。用线栓法制备大脑中动脉缺血再灌注模型,缺血2h,再灌注22h,应用免疫组化法检测脑组织中eNOS、nNOS和iNOS的表达。结果与缺血再灌注组比较,辛伐他汀低剂量组eNOS表达差异无显著意义(P>0.05),高剂量组eNOS表达显著增加(P>0.05);高剂量和低剂量组nNOS和iNOS的表达显著降低(P<0.01,P<0.05)。结论辛伐他汀预处理能抑制大鼠脑缺血再灌注后脑组织iNOS、nNOS的表达、上调eNOS表达。     

双苯氟嗪抗大鼠全脑缺血再灌注所致海马CA1区神经元损伤的作用机制

目的研究双苯氟嗪抗大鼠全脑缺血再灌注损伤的作用机制。方法大鼠全脑缺血15 min再灌注3 d，再灌注开始后给予双苯氟嗪(20,40和80 mg·kg^-1,ig)。免疫组织化学方法观察Fas及Fas配体的分子定位，Western blotting和RT-PCR方法检测Fas，Fas配体，caspase 10 p20，caspase 8，I-κB-α和p-I-κB-α蛋白及mRNA表达。结果双苯氟嗪明显降低海马CA1区免疫阳性细胞数量及Fas，Fas配体，caspase 10 p20蛋白表达(P<0.01)，且呈剂量依赖性（20和40 mg·kg^-1组，r=0.92,P<0.01)；显著降低Fas及Fas配体mRNA表达(P<0.01)；caspase 8和I-κB-α蛋白表达在给药前后无显著变化(P>0.05)；未能检测出p-I-κB-α蛋白表达。结论双苯氟嗪通过抑制CD95分子启动的死亡信号转导通路发挥其抗脑缺血再灌注损伤作用；这一作用与转录因子NF-κB无关。     

双苯氟嗪抑制FasL分子表达的基因转录机制

研究双苯氟嗪对Fas配体分子表达抑制的基因转录机制的影响。通过四血管阻断法建立大鼠全脑缺血再灌注损伤模型， 所有实验动物缺血15 min， 再灌注72 h。实验大鼠随机分为4组： 假手术组、 缺血再灌注组、 双苯氟嗪组及环孢素A组。药物干预于再灌注后2 h内给药， 每日1次， 连续3 d。双苯氟嗪按20 mg·kg^-1灌胃给药， 环孢素A 10 mg·kg^-1腹腔注射。应用蛋白质印迹和电泳迁移率改变分析技术检测海马CA I区Fas配体(FasL)、 转录因子NFATc、 I-κB-α、 phospho-I-κB-α蛋白表达以及测定FasL分子启动子远端及FasL分子启动子近端NFAT FasL-DNA结合活性。结果表明， 双苯氟嗪明显降低FasL、 NFATc的蛋白表达并显著减少FasL分子启动子远端及FasL分子启动子近端NFAT结合位点的NFAT-DNA结合活性。各组之间I-κB-α蛋白表达无显著区别。未观察到各组phospho-I-κB-α蛋白表达。由此可见， 双苯氟嗪通过降低转录因子NFATc的FasL分子的基因转录功能， 从而抑制FasL分子的基因表达。     

双苯氟嗪对局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用(英文)

目的　评价双苯氟嗪 (Dip)和氟桂利嗪 (Flu)在大鼠局灶性脑缺血再灌注模型中的神经保护作用。方法　将内皮素 1(ET 1)灌注到大脑中动脉附近制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型 ,并于灌注ET 1后 30min和 4 .5h腹腔注射溶剂、Dip 10 ,2 0和4 0mg·kg- 1和Flu 2 0mg·kg- 1,采用氢清除法监测灌注ET 1前、后纹状体血流变化 ,并对缺血后 2 4h脑梗塞面积、血清中超氧化物歧化酶 (SOD)活性和丙二醛 (MDA)含量的变化进行了测定。结果　Dip 2 0和 4 0mg·kg- 1于灌注ET 1后 70和 10 0min明显改善缺血侧纹状体血流量下降 ;Flu 2 0mg·kg- 1的作用较弱 ,仅于灌注ET 1后 10 0min明显改善缺血侧纹状体血流量 ;Dip可以剂量依赖性的降低脑梗塞面积 (r =0 .9797,P <0 .0 1) ,同剂量Flu可产生相似的作用 ;各剂量组Dip和Flu均可增加血清中SOD活性、降低MDA含量。结论　Dip和Flu对脑缺血再灌注损伤有明显的保护作用 ,Dip改善脑血流的作用略强于Flu ,其保护作用的机制与改善脑血流和抗氧化作用有关。     

ATP酶与脑缺血及缺血再灌注损伤

在中枢神经系统疾病中。常伴有脑组织缺血、缺氧及缺血再灌注损伤,这些改变是病人致死、致残的主要原因[1]．脑组织氧储极少,当缺氧时,有氧代谢障碍,组织内可利用氧耗尽,三羧酸循环停止,ATP生成减少,ATP储存迅速耗竭;能量耗竭将导致一系列病理生理改变[2,3],如：乳酸酸中毒、钙代谢失调、离子和水异常分布、自由基产生等,加重原有损伤,其中包含ATPase的改变[4,5],脑组织中、ATPase活性的改变是神经元质股损害的标志,也是神经元．继发损伤的重要环节。如能预防或减轻因各种原因而引起性的ATPase活性改变,则有可能减轻脑…     

双苯氟嗪对大鼠缺血脑皮层诱发电位和氨基酸含量的影响

测定双苯氟嗪对大鼠缺血脑细胞内外氨基酸含量及皮层体感诱发电位的影响，在结扎双侧颈总动脉雌性Ｗｉｓｔａｒ大鼠，用ＨＰＬＣ法测定脑透析液和脑组织的氨基酸含量，用电生理技术测定ＳＥＰ。Ｄｉｐｉｐ５０ｍｇ．ｋｇ＾－１可防止缺血所致ＳＥＰ潜伏期的延长及其幅度的过分增大，降低脑透析液中的谷氨酸、天冬氨酸和甘氨酸浓度以及减轻脑组织中谷氨酸、天冬氨酸、甘氨酸、牛磺酸和γ氨基丁酸折消耗。Ｄｉｐ能够改善脑缺血所致的皮     

双苯氟嗪对大鼠局灶性脑缺血再灌注后E-选择素、P-选择素和细胞间黏附分子-1表达的影响

目的研究双苯氟嗪对大鼠脑缺血再灌注后E-选择素(E-selectin)、P-选择素(P-selectin)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达及中性粒细胞浸润的影响。方法采用Zea-Longa线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。采用HE染色、免疫组化、流式细胞术以及生化的方法，观察双苯氟嗪对大鼠缺血再灌注后脑组织形态学、P-选择素、E-选择素和ICAM-1表达以及髓过氧化酶(MPO)活性的影响。结果双苯氟嗪可改善缺血再灌注后脑损伤的形态学表现；降低P-选择素、E-选择素和ICAM-1的表达以及MPO的活性。结论双苯氟嗪减轻缺血再灌注后炎症反应，对缺血再灌注性脑损伤具有保护作用。     

右美托咪定对大鼠脑缺血-再灌注损伤的影响

目的 探讨不同剂量右美托咪定对大鼠脑缺血-再灌注(I-R)损伤的影响.方法 采用颈内动脉阻塞60 min的方法建立局灶性脑I-R损伤模型大鼠50只.随机均分为A、B、C、D和E组五组,分别静脉灌注右美托咪定0.01、0.1、1、10μg·kg-1·min-1和生理盐水.药物均于缺血前15 min经股静脉输注,再灌注后20 min停止输注.每10分钟记录平均动脉压(MAP)值,检测缺血前后血糖值.行再灌注24 h神经功能缺陷评分和脑梗死体积百分比测定.结果 A、B、C组神经功能缺陷评分和脑梗死体积百分比均较E组降低(P＜0.05).与E组相比,A组缺血10 min时MAP值降低,缺血期B组各时间点MAP值降低,而D组各时间点MAP值升高(P＜0.05);A、B、C、D组缺血前5 min及缺血60 min血糖均较E组升高(P＜0.05).结论 右美托咪定0.01、0.1和1μg·kg-1·min1预先静脉给药可减轻大鼠局灶性脑I-R损伤.     

阿米替林对局灶性脑缺血/再灌注损伤脑内单胺类神经递质的影响

目的研究阿米替林对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的作用。方法用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤模型,用TTC染色和图像分析系统测梗死体积;神经功能缺损采用0～5级评分;荧光分光光度法测定大脑皮层和纹状体多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)、5-羟色胺(5-HT)及5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)。观察阿米替林对大鼠局灶性脑缺血1h/再灌注2h时脑梗死体积、神经功能及大脑皮层和纹状体单胺类神经递质的影响。结果缺血1h/再灌注2h时,阿米替林可使脑梗死体积变小、神经功能缺损评分分值明显降低、单胺递质含量明显提高,与模型组相比差异有显著性。结论阿米替林对大鼠局灶性脑缺血/再灌注引起的神经损伤有保护作用。其机制可能与其减少缺血/再灌注期间单胺类神经递质的释放有关。     

钩藤碱对缺血-再灌注大鼠脑NOS变化的作用

目的：研究钩藤碱（Ｒｈｙ）对大鼠脑缺血－再灌注皮层和海马一氧化氮合酶（ＮＯＳ）变化的作用。方法：阻断大鼠双侧颈总动脉１５ｍｉｎ和再灌注２４ｈ建立脑缺血－再灌注损伤模型,用ＮＡＤＰＨ－ｄ组化技术检测脑ＮＯＳ阻性细胞数目的变化和Ｒｈｙ的影响。结果：脑缺血－再灌注２４ｈ后,皮层和海马ＮＯＳ阳性细胞数目显著增多,Ｒｈｙ（１２．５和２５ｍｇ／ｋｇ）缺血前３０ｍｉｎ腹腔注射,可显著抑制此增多,与ＮＯＳ拮抗剂Ｌ     

依达拉奉预处理对大鼠全脑缺血/再灌注损伤的保护作用

目的研究依达拉奉预处理对大鼠全脑缺血/再灌注损伤(I/R)大脑的保护作用,探讨其脑保护作用的可能机制。方法采用改良Pulsinelli法制作大鼠全脑I/R模型。依达拉奉(3mg·kg-1)腹腔内注射法进行预处理。35只健康雄性SD大鼠随机分为7组,每组5只:对照组(C)、缺血再灌注损伤组(I)、依达拉奉预处理组(E),根据再灌注时间(1d、3d、5d)I、E组依次分3个亚组。TUNEL法检测大鼠脑组织海马CA1区神经细胞凋亡数、免疫组织化学pv6001染色法检测Bcl-2、Bax及CytC(cytochromec)蛋白表达的变化。结果与相应I各亚组比较,E各亚组海马CA1区神经细胞凋亡数目显著减少;Bax、CytC蛋白的表达显著减少;Bcl-2蛋白的表达显著增加(P<0.05)。结论依达拉奉预处理可能通过调节凋亡相关调控基因Bcl-2、Bax、CytC的表达,明显减轻大鼠I/R的神经细胞凋亡,从而产生脑保护作用。     

甲钴胺对脑缺血-再灌注大鼠皮层神经细胞凋亡的预防作用

目的 探讨甲钴胺对缺血-再灌注(I-R )大鼠大脑皮层神经细胞凋亡的影响.方法Wistar大鼠135只随机均分为五组 :A组为空白对照 ;B、C、D和 E组分别用0.9% 氯化钠20 ml · kg-1 ·d-1 、尼莫地平1mg·kg-1 ·d-1 、甲钴胺50μg·kg-1 ·d-1和100μg·kg-1 ·d-1灌胃1周后建立脑I-R模型.观察再灌注24 h后神经功能缺损评分.再灌注6、12和24 h ,用T U N EL法检测大脑皮层细胞凋亡 ,Western blot检测大脑皮层半胱氨酸天冬氨酸酶3(Caspase-3)蛋白表达.结果 再灌注24 h后 ,C、E组神经功能评分低于B、D组( P＜0 .05或P＜0 .01 ).C、D和E组神经细胞凋亡数均少于B组 ,E组少于D组(P＜0 .01).C、D和E组大脑皮层Caspase-3表达均低于B组 ,D组高于C组(P＜0 .01).结论 预用甲钴胺对大鼠脑I-R损伤有保护作用 ,可能与抑制大脑组织Caspase-3蛋白表达有关.