NO与脊髓水平伤害性信息调控

一氧化氮（NO）作为一种新型的信使分子,在生理和病理过程中起着重要作用。近年来发现NO与脊髓水平的伤害性信息调控密切相关,许多证据表明NO在脊髓内促进痛觉过敏的形成和发展,抑制NO的生成具有明显的抗伤害作用,但也有一些不同的观点。本文对此作一综述。     

下尿路NO信号通路及其在脊髓损伤中的意义

一氧化氮（NO）是一种广泛的信号分子,在人体大多数器官系统的生理、病理过程中发挥着重要作用.目前对NO的研究较多.现就其在下尿路NO信号通路及其在脊髓损伤中的意义作一综述.     

一氧化氮与脊髓痛觉传导通路

通过比较一氧化氮合成酶(NOS)抑制药和N-甲基-D-天门冬氨酸盐(NMDA)受体拮抗药对各种疼痛模型的镇痛效果,概述了NO在脊髓的痛觉传导通路,特别是与脊髓的可塑性作用的关系。此外,简要介绍了NO与毒蕈碱受体的关系。     

异氟烷于脊髓NMDA受体甘氨酸位点的镇痛作用及与NOS/NO的关系

目的 分析异氟烷于脊髓NMDA受体甘氨酸位点的镇痛作用及该作用与NOS/NO的关系.方法 在甩尾法实验中,观察鞘内注射NMDA受体甘氨酸位点的激动剂D-丝氨酸对异氟烷镇痛作用的影响及腹腔预注射NOS抑制剂L-NAME后的变化.用分光光度法进一步观察异氟烷及给工具药对小鼠脊髓NOS活性及NO产量的影响.结果 鞘内D-Ser(0.025ng、0.05 ng、0.1 ng)可拮抗甩尾实验中异氟烷镇痛作用(P＜0.05,P＜0.01),而腹腔预注射NOS抑制剂L-NAME(0.5 mg/kg,1 mg/kg)后,鞘内D-Ser的拮抗作用减弱或消失(P＜0.05,P＜0.01).异氟烷抑制小鼠脊髓NOS活性、减少NO产量(P＜0.05),鞘内D-丝氨酸(1 ng)可拮抗异氟烷对异氟烷小鼠脊髓NOS活性、NO产量的影响(P＜0.01),而预注射L-NAME取消鞘内D-丝氨酸的拮抗作用.结论 脊髓NMDA受体甘氨酸位点介导异氟烷的镇痛作用,而该作用可能与脊髓NOS/NO有关.     

脊髓损伤后一氧化氮含量及一氧化氮合酶活性的变化与脊髓水肿的关系

目的 :为了探讨脊髓损伤后一氧化氮 (NO)含量及其合酶 (NOS)活性与脊髓水肿的关系。方法 :测定不同程度脊髓损伤后NO含量及NOS活性的变化 ,同时测定脊髓组织含水量。结果 :随着损伤程度的增加 ,NO含量及NOS活性均增加 ,脊髓组织水肿增加。结论 :脊髓损伤后NO含量及NOS活性增加 ,与脊髓组织的水肿密切相关 ,提示NO参与了脊髓伤后的病理生理改变。     

一氧化氮神经化学重塑在脊髓损伤后下尿路功能障碍中的作用及意义

腰骶段以上水平脊髓损伤的下尿路功能障碍主要表现为逼尿肌过度活动( detrusor overactivity,DO)及逼尿肌括约肌协同失调(detrusor sphincter dyssynergia,DSD).腰骶段初级排尿中枢的完整是损伤后自主排尿反射建立的基础,而位于初级排尿中枢的某些神经化学物质在下尿路病理改变的过程中起主要作用.一氧化氮( nitric oxide,NO)是一种重要的神经递质和细胞信号传导分子,其调节平滑肌舒张的作用已经被广泛认同[1],在尿道横纹肌中的表达也得到证实[2].由于NO化学性质活泼,半衰期仅5 s,所以目前的NO研究大多通过NO生成的关键酶一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)来进行.NO参与某些下尿路疾病的病理和生理过程[3-6].有研究表明,脊髓损伤后膀胱感觉传入神经及运动神经细胞NOS表达均增强[7-8].口服NO供体可使脊髓损伤患者的DSD症状得以缓解[9].因此调控初级控尿中枢NOS的表达成为治疗脊髓损伤后下尿路功能障碍的新思路.     

一氧化氮对脊髓背角疼痛的调制作用

NO对脊髓背角疼痛调节的机制.一氧化氮（NO）作为信息传递物质,在周围及中枢伤害性感受传递中发挥着重要作用.研究表明,伤害性刺激引起脊髓背角神经元释放NO;NO在脊髓水平主要参与痛觉过敏的形成和发展,在一些伤害性刺激条件下,NO可作为第二信使诱导c-fos表达.NO是一种广泛存在的信息传递分子,是细胞内重要的第二信使.其作用的具体过程是：神经元突触前膜去极化使谷氨酸（Glu）等释放到突触间隙与N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）等受体结合,受体通道开放,Ca2＋内流与钙调蛋白（CaM）偶联,在还原型辅酶Ⅱ（NADPH）的协助下激活一氧化氮合酶（NOS）,催化L-精氨酸（LArg）,生成NO,激活可溶性鸟苷酸环化酶（sGC）,促进环鸟苷酸（cGMP）合成,作用于cGMP门控离子通道,cGMP调节的磷酸二酯酶（PDE）,cGMP依赖性蛋白激酶（PKG）等效应靶分子,参与中枢神经系统（CNS）伤害性刺激信息传递,神经元兴奋性维持等生理过程.     

在大鼠切口疼痛模型中鞘内新斯的明对脊髓NO/cGMP信号转导系统的影响

目的 了解大鼠切口疼痛模型中鞘内（IT）新斯的明（NEO）对脊髓一氧化合酶（NOS）活性、一氧化氮（NO）产量和环鸟苷酸（cGMP）含量的影响。方法 雄性64只,随机分为四组,每组16只：假手术组（组I0、术前30minIT0．9％氯化钠20μl组（组Ⅱ）、术后30minITNEO10μg组（组Ⅲ）和术前30minITNEO10μg组（组Ⅳ）。按Brennan法制成切口疼痛模型,以累积疼痛评分确定疼痛行为。在术后2h断头取腰段脊髓,以分光光度法测定NOS活性、NO产量;放射免疫法测定cGMP含量／结果 组Ⅲ和组Ⅳ大鼠的累积评分均明显低于组Ⅱ（P＜0．01）。组Ⅱ的脊髓NOS活性、NO产量和cGMP含量均较组Ⅰ明显升高（P＜0．01）。组Ⅳ的脊髓NOS活性、NO产量和cGMP含量均较组Ⅰ明显升高（P＜0．01）。组Ⅳ的脊髓NOS活性、NO产量和cGMP含量均较组Ⅱ明显降低（P＜0．05或0．01）。而两用药组上述指标比较以及用药组与组I比较均无明显差别（P＞0．05）。结论 在大鼠切口疼痛模型中,术前IT NEO的抗伤害作用可能与NO／cGMP信号转导系统有关。     

缺血预处理对兔主动脉阻断后脊髓一氧化氮、后肢神经功能和肌电图的影响

目的　探讨缺血预处理 (IPC)对缺血预处理对兔主动脉阻断后脊髓功能和一氧化氮(NO)的影响。方法　 2 4只日本大白兔随机分为假手术组 (A组 )、缺血再灌注组 (B组 )和IPC保护组 (C组 ) ,每组 8只。分别于首次预处理即刻 (C 40 )、缺血即刻 (I0 )、缺血 45min(I45)、再灌注后 60min(R60 )和术后 7d处死动物前即刻 (R7d)采血检测血清和R7d脊髓组织NO的浓度。术后观察后肢神经功能的评分、后肢针电极肌电图 (EMG)和脊髓组织病理学的改变。结果　缺血再灌注损伤后B组血清NO浓度较缺血前和A、C组对应时点值显著升高 (P <0 .0 1)。C组R7d血清NO浓度明显低于其他时点及A组R7d测定值 (P <0 .0 5或 0 .0 1)。B组脊髓组织NO浓度显著高于A、C组(P <0 .0 1)。B组后肢神经功能和脊髓病理学评分均显著性低于A、C组 (P <0 .0 5或 0 .0 1) ,其后肢EMG亦较C组有显著性病理改变 (P <0 .0 1)。结论　IPC对家兔主动脉阻断后脊髓缺血再灌注损伤有良好的保护作用 ,其保护作用机制与抑制NO的生成有关。     

兔坐骨神经火器伤后腰段脊髓一氧化氮和一氧化氨合酶的变化及其意义

目的　探讨兔坐骨神经火器伤后腰段脊髓一氧化氮 (NO)含量和一氧化氮合酶(NOS)活性变化规律及在细胞凋亡发生中的作用。方法　大耳白兔 94只 ,火器伤组致伤靶点为兔右后肢外侧坐骨神经体表投影线中点 ,切割伤组在同一致伤水平切断坐骨神经 ,应用DNA电泳、原位末端标记法 (TUNEL)进行腰段脊髓细胞凋亡定性检测 ,流式细胞术进行定量检测 ,同时对腰段脊髓NO含量和NOS活性进行检测。结果　火器伤组 1周和 2周时 ,运动神经元和胶质细胞发生了凋亡 ,切割伤组 4周时有少量运动神经元发生凋亡。火器伤组 1、3d、1、2周时 ,脊髓NO含量显著升高 (P <0 .0 1 ) ;3d、1周、2周时 ,NOS活性升高 (P <0 .0 5 ,0 .0 1 )。结论　火器伤组细胞凋亡发生早、数量多 ,NO和NOS变化是其发生原因之一。     

脊髓急性损伤时NO、IL-8、IL-6的表达及意义

目的 :研究脊髓急性损害早期白细胞介素 -8(IL 8) ,白细胞介素 -6(IL 6) ,一氧化氮 (NO)及一氧化氮合酶 (NOS)的变化。方法 :76例脊髓急性损害病人 ,根据Franked分类 ,分完全截瘫 (FrankedA)组 ,不完全截瘫 (FrankedB ,C和D)组 ,以ELISA法 ,硝酸还原酶法分别测IL 8、IL 6、NO、NOS的值 ,以健康体检人员作对照。结果 :IL 8、IL 6的值完全截瘫者和不完全截瘫者都显著升高 (P <0 .0 5 ) ,NO、NOS的值完全截瘫者和不完全截瘫者都显著降低 (P <0 .0 5 )。结论 :脊髓急性损害早期IL 8、IL 6显著升高 ,NO、NOS显著降低 ,脊髓急性损害早期IL 8、IL 6、NO参与了脊髓继发性损害。     

一氧化氮(NO)在脊髓缺血再灌注损伤中作用的实验研究

目的　研究一氧化氮 (NO)在脊髓缺血再灌注损伤中的作用。方法　夹闭大鼠腹主动脉制成缺血再灌注模型 ,随机分成L -NAME组和再灌注组 ,L -NAME组每日腹腔注射一氧化氮合酶(NOS)非特异性抑制剂L -硝基精氨酸甲酯 (L -NAME) 10mg/kg体重 ,两周时取大鼠脊髓做NOS免疫组织化学染色、组织学及超微病理观察。结果　脊髓缺血再灌注后前角运动神经元出现固有型一氧化氮合酶 (cNOS)阳性表达 ,同时伴随前角运动神经元损伤 ;应用L -NAME后可减少cNOS的异常表达 ,减轻前角运动神经元损伤。结论　局部组织中NO产生增多可能是脊髓再灌注损伤的机制之一。     

热休克蛋白27在脊髓缺血再灌注的防护作用

热休克蛋白27(heat shock protein,HSP27)属于热休克蛋白家族中的小分子量家族,本文在回顾收集大量相关文献的基础上,分析了HSP27在脊髓缺血再灌注损伤中的表达意义和机制,阐明了HSP27具有抑制NO的生成、维持细胞蛋白稳定和加速细胞损伤修护的功能,同时HSP27还具有抗细胞凋亡、保护线粒体、抑制核转录因子活化等相关作用。进一步表明了热休克蛋白27在脊髓缺血再灌注中的保护作用。     

吸入麻醉剂诱导c-fos基因和一氧化氮合成酶在大鼠中枢神经系统的共同表达

在笑气(N2O)被用于手术麻醉的100多年之后，另一种相关的性质不同的无机气体一氧化氮(NO)开始受到神经科学家的重视。最新研究表明，这种有毒气体分子可能是一种内源性神经递质[1]。NO由L-精氨酸通过一氧化氮合成酶(NOS)生成[2]。在中枢包括大脑皮层、海马、小脑和脊髓等不同水平均可找到NOS[3]。研究还表明NO在外周及中 枢的不同水平的痛觉调节中起一定作用，并推测与麻醉作用也有重要关系，但尚无明确的形态学实验证据。本研究将运用免疫组织化学双标方法，研究吸入麻醉剂对c-fos基因和NOS的关系，为进一步深入研究全麻机制提供形态学依据。     

在大鼠切口疼痛模型中鞘内吗啡对脊髓NO/cGMP信号转导系统的影响

目的：了解大鼠切口疼痛模型中鞘内（IT）吗啡对脊髓一氧化氮（NO）／环鸟苷酸（cGMP)信号转导系统的影响。方法：雄性SD大鼠64只，随机分为两组，每组16只：假手术组（组I);术前30minIT0．9％氯化钠20μl组（组Ⅱ，对照组）；术后30minIT吗啡5μg组（组Ⅲ，术后吗啡治疗组）和术前30minIT吗啡5μg组（组Ⅳ，术前吗啡治疗组）。按Brennan法制成切口疼痛模型，以累积疼痛评分确定疼痛行为。在术后2h断头取腰段脊髓，以分光光度法测定NOS活性、NO产量；放射免疫法测定cGMP含量。结果：术后吗啡治疗组和术前吗啡治疗组大鼠的累积评分均明显低于对照组（P＜0．01）。在对照组，脊髓的NOS活性、NO产量和cGMP含量均较手术组明显升高（P＜0．01）。术前吗啡治疗组的脊髓NOS活性、NO产量和cGMP含量均较对照组明显降低（P＜0．05或O．01）。上述指标两用药组比较以及用药组与假手术组比较均无明显差别）。结论：在大鼠切口疼痛模型中，术前IT吗啡的抗伤害作用可能与NO／cGMP信号转导系统有关。     

一氧化氮在神经病理性痛大鼠脊髓敏化中的作用

目的 评价一氧化氮(NO)在神经病理性痛大鼠脊髓敏化中的作用.方法 成年雄性Wistar大鼠32只,体重200～300 g,随机分为4组(n=8):假手术组(S组)、假手术预先给药组(S-N组)、坐骨神经慢性压迫性损伤(CCI)组和CCI预先给药组(CCI-N组).建立CCI致神经病理性痛模型,S-N组和CCI-N组分别于模型制备前鞘内注射10 μl(250 μg)NC-硝基-L-精氨酸-甲基酯,分别于术前和术后3 d测定热痛阈,于术后4、7 d各处死4只大鼠,取L4,5脊髓,测定脊髓背角磷酸化环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(pCREB)表达水平.结果 各组术后3 d热痛阈较基础值均降低(P＜0.05);与S组和S-N组比较,CCI组热痛阈降低,脊髓背角pCREB表达上调(P＜0.05),CCI-N组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05);与CCI组比较,CCI-N组热痛阈升高,脊髓背角pCREB表达下调(P＜0.05).结论 NO参与神经病理性痛大鼠脊髓敏化,其作用机制与促进脊髓背角pCREB释放有关.     

乙酰胆碱介导的脊髓水平的镇痛

乙酰胆碱参与了脊髓水平的疼痛调节。本文介绍了阿片类药物、胆碱酯酶抑制剂、α2激动剂镇痛与ACH、NO的关系及胆碱酯酶抑制剂和α2激动剂对血流动力学和脊髓血流的影响。     

乙酰胆碱介导的脊髓水平的镇痛

乙酰胆碱参与了脊髓水平的疼痛调节。本文介绍了阿片类药物、胆碱酯酶抑制剂、α2激动剂镇痛与ACH、NO的关系及胆碱酯酶抑制剂和α2激动剂对血流动力学和脊髓血流的影响。     

一氧化氮在下尿路的研究进展

下尿路中NO的合成主要由神经元型NOS(nNOS)调节 ,其分布以膀胱颈和尿道为主。尿道平滑肌细胞和膀胱间质细胞可能是NO主要的靶细胞。除参与尿道、膀胱颈平滑肌的松弛调节外 ,NO还参与脊髓感觉、运动信号的传递 ,或通过调节cGMP间接发挥作用。NO也能作为损伤因子、兴奋性或抑制性递质参与人和动物下尿路的多种病理变化。     

诱导型一氧化氮合酶反义核酸对脊髓损伤后神经功能的影响

目的　观察诱导型一氧化氮合酶反义核酸 (ASODN iNOS)对大鼠脊髓损伤 (SCI)后神经功能恢复的影响。方法　设计并合成ASODN iNOS ,微量注入大鼠蛛网膜下腔后制备成脊髓压迫伤动物模型 ,伤后 6h用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测iNOSmRNA表达变化 ,2 4h后用分光光度法测定组织中一氧化氮 (NO)含量和一氧化氮合酶 (NOS)活性 ,4周后用电生理、动物行为学和病理学等指标评价神经功能的恢复情况。对照组为正常组、损伤对照组和无义核酸对照组 (NSODN)。结果　SCI后组织中存在iNOS的表达 ,应用ASODN iNOS可以抑制相应酶的表达 ,并可以降低组织中的NO含量和NOS活性 ,改善神经传导功能 ,与损伤对照相比差异有显著性 ,NSODN没有上述作用。结论　脊髓损伤后应用iNOS反义核酸可以使伤后神经功能得到改善。