饮用水中二溴乙酸遗传毒性研究

二溴乙酸 (DBA)是饮用水氯化消毒副产物中的一种 ,属于氯乙酸类 ,臭氧消毒也可产生。本次试验采用Ames试验、程序外DNA合成 (UDS)试验、小鼠体内微核试验、NIH3T3细胞微核试验对其遗传毒性进行了研究。在Ames试验中 ,TA10 0菌株在加与不加S9的情况下均表现出致突变性。在大鼠肝细胞UDS试验中 ,DBA表现出明显的DNA损伤作用 ,导致程序外合成增加。在小鼠体内微核试验中 ,DBA在一定剂量范围内可引起染色体损伤。在NIH3T3细胞微核试验中 ,DBA可诱导细胞微核数增加。上述结果表示 ,DBA具有明确的DNA损伤作用。     

苯致小鼠淋巴细胞DNA、RNA损伤作用

目的研究苯对小鼠淋巴细胞DNA、RNA损伤作用。方法采用单细胞凝胶电泳方法和3H-胸腺嘧啶1、4C-尿嘧啶掺入技术检测不同剂量苯[100,200,400 mg/(kg.bw)]经腹腔注射染毒对小鼠外周血、脾脏、胸腺淋巴细胞DNA、RNA损伤情况。结果除了苯染毒为100 mg/(kg.bw)剂量组外,小鼠外周血淋巴细胞DNA彗星细胞率、彗星尾长均高于阴性对照组(P<0.05),3H-胸腺嘧啶和14C-尿嘧啶掺入计数每分钟衰变数(dpm)值明显低于阴性对照组(P<0.01)。结论苯可致外周血淋巴细胞DNA损伤,明显影响小鼠脾脏、胸腺淋巴细胞DNA和RNA合成而产生遗传毒性作用。     

不同剂量维生素C对DNA氧化损伤影响的研究

目的 :　探讨补充不同剂量维生素 C(VC)对细胞 DNA损伤和诱导氧化损伤的影响。方法 :　在细胞培养液中分别加入 0 .1、0 .2 5及 0 .5mmol/L VC,观察 Hela (human trans-formed epithelial)细胞生长情况 ,给予低剂量 H2 O2 (0、5、1 0、2 5μmol/L)诱导 DNA氧化损伤 ,采用“彗星”电泳技术分析 DNA损伤。结果 :　VC为 0 .1、0 .2 5及 0 .5mmol/L三个剂量组的 Hela细胞经过 41 h培养后自发性 DNA损伤与对照组相比没有明显增加。当给予低剂量 5、1 0、2 5μmol/LH2 O2 诱导 DNA氧化损伤时 ,则在 0 .1 mmol/L和 0 .2 5mmol/L两组的 Hela细胞 DNA损伤率明显低于对照组 (无 VC培养 ) ;相反在浓度为 0 .5mmol/L VC培养的 Hela细胞 H2 O2 诱导的 DNA损伤率明显高于对照组。结论 :　在 0 .1和 0 .2 5mmol/L VC剂量下 ,能明显降低 Hela细胞氧化损伤 ,而过高剂量 VC对 H2 O2 诱导的 DNA损伤具有明显的增强作用。因此 ,VC的营养作用、抗氧化作用及毒性作用与其剂量有着密切的关系 ,适量摄入 VC有利于健康     

钇对大鼠外周血淋巴细胞DNA损伤作用

目的 研究长期摄入稀土Y3 对大鼠外周血淋巴细胞DNA的损伤作用,为明确稀土的遗传毒性提供数据.方法 刚断乳大鼠分别饮用含稀土Y3 为0,53.4,5 340mg/L的饮用水,子代饮水同亲代.子代喂饮6个月后采用单细胞凝胶电泳(SCGE)技术观察大鼠外周血淋巴细胞DNA的损伤状况.结果 53.4和5 340 mg/L组大鼠淋巴细胞DNA形成的彗星尾部DNA含量、尾长、彗星长、Olive尾矩等指标均高于对照组.其中,低剂量组的彗星长(28.80±5.01)、高剂量组尾长(3.04±0.20)和彗星长(28.52±5.18)比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 稀土 Y3 可造成大鼠外周血淋巴细胞DNA的损伤,有一定的遗传毒性.     

1-硝基芘对人外周血淋巴细胞DNA的损伤

目的 探讨1-硝基芘对人外周血淋巴细胞DNA损伤作用.方法将健康成人的外周血淋巴细胞分为二甲亚砜对照组和50、100、200、500、800、1 000 μmol/L的1-硝基芘染毒组,采用单细胞凝胶电泳试验(SCGE,又称彗星试验)研究了1-硝基芘对人外周血淋巴细胞DNA的损伤作用.结果 50 μmol/L 1-硝基芘染毒组的淋巴细胞Olive尾矩与阴性对照组相比,差异无统计学意义(P＞0.05),100、200、500、800、1 000 μmol/L 1-硝基芘染毒组的淋巴细胞Olive尾矩大于阴性对照组,均有统计学意义(P＜0.001),且随着剂量的增加,1-硝基芘对人外周血淋巴细胞的DNA损伤随之增加,并表现出明显的剂量-效应关系(r=0.940,P＜0.01).结论 100 μmol/L以上剂量的1-硝基芘能显著引起人外周血淋巴细胞DNA损伤,具有遗传毒性.     

氯丙醇对小鼠淋巴细胞DNA损伤作用

目的观察1,3-二氯-丙醇(1,3-DCP)3-氯-1,2-丙二醇(3-MCPD)对小鼠外周血淋巴细胞DNA损伤。方法 56只昆明种小鼠随机分为正常对照组和1,3-DCP、3-MCPD各3组,剂量分别为10,20,40 mg/kg,灌胃染毒每d 1次,连续7d。染毒后,取外周血淋巴细胞进行彗星实验。结果染毒1,3-DCP,低、中、高剂量组小鼠淋巴细胞DNA损伤率分别为22.90%,46.75%和73.80%明显高于正常对照(P0.05);中、高剂量组淋巴细胞DNA迁移度分别为(8.056±2.291),(9.378±3.658)μm,均明显高于对照组(P0.05)。染毒3-MCPD,各剂量组小鼠淋巴细胞DNA损伤率与对照组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论 1,3-DCP对雄性小鼠外周血淋巴细胞具有DNA损伤作用,而3-MCPD则无明显影响     

含氯消毒剂对小鼠外周血淋巴细胞DNA损伤的研究

[目的]研究不同剂量含氯消毒剂对小鼠外周血淋巴细胞DNA的损伤作用。[方法]以样品(有效氯含量为34.9 mg/L)低(1/1 000 LD50)、中(1/200 LD50)、高(1/50 LD50)剂量进行小鼠灌胃,1次/d,同时设阴阳性对照组。7 d后采小鼠外周血以单细胞凝胶电泳法(SCGE)观察DNA损伤情况。[结果]3个剂量对小鼠外周血淋巴细胞DNA均有损伤(与阴性对照组比较2=920.33,P<0.01);低、中、高剂量有剂量-反应关系(2=210.6,P<0.01)。[结论]不同剂量含氯消毒剂对小鼠灌胃对其外周血淋巴细胞DNA有损伤作用,日常使用时应引起注意。     

CS2诱导人淋巴细胞DNA损伤的再研究

目的应用SCGE方法检测CS2体外染毒对人外周血淋巴细胞DNA损伤,探求损伤的剂量-效应关系.方法将未处理的人外周血淋巴细胞作为阴性对照组,用50μmol/L H2O2染毒的人外周血淋巴细胞作为阳性对照组,将不同浓度CS2染毒的人外周血淋巴细胞设为7个剂量组进行SCGE实验.结果只有2500μmol/L组及阳性对照组淋巴细胞存活率与对照组比较出现统计学差异(χ2=11.77,17.14;P=0.000,0.001).不同CS2染毒组及阳性对照组与阴性对照组比较,除250μmol/L组外,其余各染毒组淋巴细胞DNA损伤加重,表现在彗头直径变小,彗尾长度增加.DNA拖尾率在较低染毒剂量组逐渐增高,出现一定剂量-效应关系,较高剂量组(1000μmol/L以上)未见有随剂量增加拖尾率增加的趋势.结论CS2体外染毒对细胞存活影响不大;低剂量表现有淋巴细胞DNA损伤的剂量-效应关系;较高剂量染毒虽有较严重损伤,但损伤未表现出明显剂量-效应关系.     

辛硫磷对小鼠外周血淋巴细胞DNA损伤的研究

目的探讨辛硫磷对小鼠的遗传毒性。方法将60只健康SPF级昆明小鼠随机分为6组,分别为阴性对照(生理盐水)组和10、20、40、80 mg/kg辛硫磷染毒组以及阳性对照组(40 mg/kg环磷酰胺腹腔注射,每日1次,连续2 d),每组10只,雌雄各半。采用灌胃方式进行染毒,染毒容量为10 ml/kg,每日1次,连续染毒14 d。采用微核试验和单细胞凝胶电泳试验检测辛硫磷的遗传毒性。结果与阴性对照组比较,仅40和80 mg/kg辛硫磷染毒组小鼠的骨髓细胞微核率显著性升高,各剂量辛硫磷染毒组小鼠外周血淋巴细胞的拖尾率和DNA损伤专用单位均升高,差异有统计学意义(P<0.05)。随着辛硫磷染毒剂量的升高,小鼠骨髓细胞微核率、外周血淋巴细胞的拖尾率和DNA损伤专用单位均呈上升趋势。结论辛硫磷对小鼠具有遗传毒性。     

虾青素对辛硫磷所致小鼠DNA损伤的拮抗作用

目的 探讨虾青素对辛硫磷所致小鼠遗传毒性的拮抗作用.方法 将50只健康SPF级昆明小鼠随机分为5组,分别为对照组和80 mg/kg辛硫磷染毒组以及低、中、高剂量虾青素保护组(2mg/kg、4mg/kg、8 mg/kg),每组10只,雌雄各半.早晨低、中、高剂量虾青素保护组分别灌胃染毒2、4、8 mg/kg虾青素,对照组和辛硫磷染毒组灌胃染毒橄榄油,染毒容量为10 ml/kg;间隔约8h后,下午低、中、高剂量虾青素保护组和辛硫磷染毒组分别灌胃染毒80mg/kg辛硫磷,对照组灌胃生理盐水,染毒容量为10 ml/kg,连续染毒14d.采用微核实验检测小鼠骨髓细胞微核率,采用单细胞凝胶电泳实验检测小鼠外周血淋巴细胞的DNA损伤.结果 虾青素干预能抑制辛硫磷染毒所致的小鼠骨髓细胞微核率及外周血淋巴细胞拖尾率和DNA损伤专用单位的升高;且随着虾青素剂量的升高,小鼠的骨髓细胞微核率、外周血淋巴细胞的拖尾率和DNA损伤专用单位均呈下降趋势.结论 虾青素对辛硫磷所致小鼠骨髓细胞微核率性的升高及外周血淋巴细胞的DNA损伤具有明显的拮抗作用.     

白藜芦醇对60Coγ射线离体照射人周围血淋巴细胞保护作用研究

目的 探讨白藜芦醇(RES)对60Coγ射线离体照射人周围血淋巴细胞的保护作用.方法 采集男性健康志愿者周围血分离培养淋巴细胞,设不加RES的照射对照组,照射前30 min分别给予RES 0.1、0.2和0.4 mmol/L的3个照射前给药组,及照射后立即分别给予RES 0.1、0.2和0.4 mmol/L的3个照射后给药组.用4 Gy60Coγ射线进行照射,采用淋巴细胞胞质分裂阻滞(CB)法和Annexin V-FITC/PI双染法分析淋巴细胞微核率和凋亡率的变化.结果 ①3个照射前给药组的微核率及凋亡率比照射对照组低(P ＜0.01 ～P＜0.001);②0.2、0.4 mmol/L照射后给药组微核率比照射对照组低(P＜0.05,P＜0.01),3个照射后给药组凋亡率比照射对照组低(P＜0.05～P＜0.01);③3个照射前给药组微核率均比3个照射后给药组低(P＜0.01～P＜0.001),0.4 mmol/L照射前给药组在抑制凋亡率方面强于0.4mmol/L照射后给药组(P＜0.05).结论 RES可以通过抑制60Coγ射线离体照射引起的人周围血淋巴细胞的微核率和凋亡率的升高,对辐射诱导的淋巴细胞DNA损伤起到防护作用,其辐射防护效果与RES的给药时间及给药剂量有关.     

锌对镉致淋巴细胞DNA损伤的保护作用

目的探讨锌对镉致淋巴细胞DNA损伤的保护作用。方法小鼠经腹腔同时注射1．25,2．50,5．00mg／kg硫酸锌和2．50mg／kg氯化镉水溶液,染毒24h和48h后分别取外周血和胸腺,采用单细胞凝胶电泳（singlecell gel eletrophoresis,SCGE）技术观察不同浓度锌对镉致小鼠外周血和胸腺淋巴细胞DNA损伤的保护作用。结果与阴性对照组比较,镉组的淋巴细胞DNA平均迁移长度明显增加,且差异有显著性（P〈0．05）。不同剂量的锌和镉同时作用时,无论染毒24h还是48h,外周血和胸腺淋巴细胞的DNA平均迁移长度明显下降,与镉组比较,差异有显著性（P〈0．05）。结论锌对镉致淋巴细胞DNA损伤有保护作用。     

外源脱氧核苷酸对淋巴细胞DNA辐射损伤修复的影响

目的探讨外源脱氧核苷酸对电离辐射损伤的人外周血淋巴细胞DNA修复的影响。方法用X射线照射人外周血淋巴细胞,诱导DNA损伤后分为2组培养:一组为对照组,另一组为脱氧核苷酸补充组(1和10 mmol/L)。结果核酸营养组与对照组相比,微核率和染色体畸变率无明显变化(P0.05),同时延长培养时间,微核率和染色体畸变率显著降低,但2组亦未表现出差异。结论体外单纯补充外源脱氧核苷酸并不能促进淋巴细胞DNA辐射损伤的修复。     

1,2-二氯乙烷对淋巴细胞DNA损伤的γH2AX识别抗体流式细胞术检测

目的 探讨γH2AX识别抗体流式细胞术(FCM)检测1,2-二氯乙烷(1,2-DCE)接触工人外周血淋巴细胞DNA损伤的可行性及1,2-DCE对健康人外周血淋巴细胞DNA的损伤.方法 提取某制鞋厂接触1,2-DCE的工人21例(接触组)和该厂未接触1,2-DCE的工人27例(内对照组)及某海岛非职业接触有害因素居民28例(外对照组)的外周血淋巴细胞,采用FCM法检测淋巴细胞DNA损伤情况;用不同浓度(5、10、20和30 μmol/L)的1,2-DCE分别对健康人外周血淋巴细胞体外染毒0.5、1.0 h,采用FCM法检测淋巴细胞DNA损伤情况.结果 接触组工人DNA损伤率(4.05%±2.55%)明显高于内对照组工人(1.97%±1.40%)和外对照组人群(0.23%±0.13%),内对照组明显高于外对照组,差异均有统计学意义(P＜0.01或P＜0.05);接触组工人外周血淋巴细胞的几何平均荧光强度(3.33±3.01)与内对照组(2.07±0.58)比较,差异有统计学意义(P＜0.05).接触组不同工龄工人DNA损伤率和外周血淋巴细胞的几何平均荧光强度比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).体外染毒0.5 h时,20、30μmol/L染毒组外周血淋巴细胞的几何平均荧光强度与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).体外染毒1.0 h时,20、30μmol/L染毒组的DNA损伤率与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01),10、20、30 μmol/L染毒组外周血淋巴细胞的几何平均荧光强度与阴性对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).结论 1,2-DCE具有遗传损伤作用,FCM法是一种检测外周血淋巴细胞DNA损伤的有效方法.

Abstract：

Objective To study DNA damage of human peripheral blood lymphocytes exposed to 1,2dichloroethane (1,2-DCE) with flow cytometry (FCM) assay. Methods The lymphocytes were obtained from 21 workers who are occupationally exposed to 1, 2-DCE (exposed group ) and 27 workers who were not exposed to 1,2-DCE in the same factory (inner control ) and 28 island residents who had never been occupationally exposed to adverse factors (external control ). FCM assay was adopted to detect DNA damage of the lymphocvtes of each group. Lymphocytes of the health people were incubated with 1 ,2 - DCE at different doses, and FCM assay was used to detect DNA damage. Results DNA damage rate (%) of the exposed group of exposed workers (4.05%±2.55%) was significantly higher than the inner control group of workers ( 1.97%± 1.40% ) and external control groups of island residents (0.23%±0.13%), and the DNA damage of inner control was higher than the external control, all the differences were statistically significant (P＜0.01 or P＜0.05 ).The geometric mean fluorescence intensity of the workers in the exposed group (3.33±3.01) was significantly higher than the (2.07±0.58) only (P＜0.05). There was no significant difference in the DNA damage rate as well as the geometric mean fluorescence intensity among the exposed group of workers with different years of working period (P＞0.05). In vitro, the fluorescence intensity at the dose of 20,30 μmol/L for 0.5 h exposure showed statistical significance compared with the negative control group (P＜0.01). The DNA damage rate at the dose of 20, 30μmol/L for 1.0 h exposure was statistically significant compared with the negative control group (P＜0.05,P＜0.01 ); The fluorescence intensity at the dose of 10,20,30 μmol/L for 1.0 h exposure was statistically significant compared with the negative control group(P＜0.05,P＜0.01 ). Conclusion 1 ,2-DEC can cause DNA damage. And γH2AX FCM assay can be a sensitive, objective and effective method of detecting DNA damage of peripheral blood lymphocytes.     

香烟烟雾冷凝物诱导体外培养细胞程序外DNA合成的试验研究

采用程序外ＤＮＡ合成试验方法检测香烟冷凝物对体外培养的人表皮细胞和人全血淋巴细胞ＤＮＡ的损伤作用。结果表明，香烟冷凝物能引起培养的表皮细胞和淋巴细胞的ＤＮＡ损伤；在一定的作用物剂量范围内表现出剂量效应关系。由于在细胞培养环境中未加Ｓ９组分活化酶，提示冷凝物中含有不需代谢活化就能直接导致ＤＮＡ损伤的有害物质。     

几种中草药及绿茶抗香烟焦油的致突变作用

为了深入研究开发利用中药资源，本实验用人外周血淋巴细胞的非程序ＤＮＡ合成试验（ＵＤＳ试验），对几种中草药及绿茶抗香烟焦油的致突变作用进行了研究。结果表明，白花蛇舌草、半枝莲、绿茶、茶多酚及犀黄丸均有不同程度的抗突变作用。先提取香烟焦油凝聚物后，再加１２５ｇ／Ｌ的白花蛇舌草，１２５ｇ／Ｌ的半枝莲，７８ｇ／Ｌ的绿茶，２５ｇ／Ｌ的茶多酚及３２５ｇ／Ｌ的犀黄丸就可以明显地对抗香烟焦油凝聚物对淋巴细胞ＤＮＡ的损伤作用；将中草药及绿茶先注入香烟内，再提取香烟凝聚物（内含中草药或绿茶），结果显示以上各浓度的中草药及绿茶同样能保护淋巴细胞的ＤＮＡ，且保护作用较前者更强。这一结果与其他抗突变试验结果基本一致。     

VitC对二甲基甲酰胺致人肝细胞DNA损伤的保护作用

目的探讨二甲基甲酰胺(DMF)致人肝细胞DNA的损伤情况及不同剂量VitC的干预作用。方法取正常成人肝细胞DMF染毒,DMF剂量为1.56、6.25、25、100 mmol/L、同时设阴性组与H2O2阳性组;100mmol/L DMF染毒后VitC的干预剂量为0.025、0.05、0.10、0.25mmol/L,应用单细胞凝胶电泳技术观察肝细胞DNA的损伤。结果同一处理时间组内各DMF染毒组与阴性对照组间MTL值与MTM值差异均有统计学意义(P0.05)。不同剂量DMF处理肝细胞后,随着染毒剂量增加MTL值亦增加,最大MTL值出现于100mmol/LDMF组。各染毒组MTL值与MTM值与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论高浓度DMF能引起肝细胞DNA损伤,小剂量VitC对DMF致肝细胞DNA损伤具有明显的拮抗作用。     

卷烟烟气致人淋巴细胞细胞毒性和遗传毒性的体外试验

目的 用不同体外试验评价卷烟烟气粒相物提取液(CSCs)致人外周血淋巴细胞的细胞毒性和遗传毒性.方法 分别以25、50、75、100和125 ug/ml的CSCs在加或不加肝脏微粒体酶(S9)系统下作用于人外周血淋巴细胞3 h,然后用CCK-8试验检测细胞毒性,用彗星试验检测DNA损伤,用hprt和TCR基因突变试验检测体细胞突变;以75ug/ml的CSCs作用于人外周血淋巴细胞3 h,分别给予30、60、90、120和240 min的修复时间,然后用彗星试验评价淋巴细胞的DNA修复情况.结果 细胞活性随剂量增加明显降低,100、125 ug/ml CSCs加S9组细胞活性明显高于不加S9组,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);随CSCs暴露剂量增加,DNA损伤明显增加,并明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);各剂量加S9组DNA损伤明显低于不加S9组,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01).各剂量组TCR基因突变率明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01).中高剂量组hprt基因突变率明显高于对照,差异有统计学意义(P<0.01),中、高剂量加S9与不加S9两组间TCR和hprt基因突变率均存在明显差异,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01).加与不加S9两组DNA损伤均可基本修复至正常水平,但两者修复速度存在差异.结论 CSCs可在体外诱发人外周血淋巴细胞的细胞和遗传损伤,但S9可降低CSCs毒性的效应,并可影响人淋巴细胞DNA损伤的修复速率.