匹罗卡品点眼试验对有机磷中毒的诊断价值

匹罗卡品点眼试验对有机磷中毒的诊断价值山东省单县中心医院急救中心张德莪，杨秀玮，张守林山东省单县卫生学校内科教研组宋伯涛我们用匹罗卡品点左眼试验，观察７１例轻、中、重度有机磷中毒患者左、右眼瞳孔变化后直径的比值，同时以３６例非有机成类中毒患者为对照组...     

拉莫三嗪和乙琥胺对颞叶癫痫的神经可塑性实验研究

目的 探讨拉莫三嗪和乙琥胺对匹罗卡品诱导颞叶癫痫模型的行为学、脑电图以及苔藓纤维发芽的影响.方法 使用氯化锂-匹罗卡品制作慢性癫痫模型,随机分为6组,正常组,模型组,拉莫三嗪低高、低剂量组,乙琥胺低、高剂量组,通过对各组进行行为学观察,脑电图记录,苔藓纤维发芽的方法 评价两种药物对匹罗卡品诱导的颞叶癫痫的预防作用.结果 拉莫三嗪高、低剂量组可以有效地减少自发性癫痫发作次数,改善慢性期脑电图表现(减少尖波、棘波的频率和降低痫性波的波幅),抑制苔藓纤维的发芽.拉莫三嗪各组与模型组相比,差异有统计学意义(P<0.05),高、低剂量组间比较差异也有统计学意义(P<0.05);乙琥胺各组与模型组相比,差别无统计学意义(P>0.05),高、低剂量组间比较差异也无统计学意义(P>0.05).结论 拉莫三嗪可以预防匹罗卡品诱导的颞叶癫痫发生,减少慢性期自发性癫痫发作次数,改善脑电图,抑制苔藓纤维发芽;乙琥胺不能预防匹罗卡品诱导的颞叶癫痫发生,不能减少慢性期自发性癫痫发作次数,不能改善脑电图以及抑制苔藓纤维发芽.     

匹罗卡品和噻吗心安眼药水对组织培养人成纤维细胞的影响

采用组织培养人结膜成纤维细胞，观察了匹罗卡品和噻吗心安眼水及其分别所含防腐剂尼泊金和新洁尔灭对细胞生长的影响。结果显示，０．５％匹罗卡品眼水、０。０１５％尼泊金溶液、０．２５％噻吗心安眼水、０．００５％新洁尔灭液作用于细胞３０分钟即有变性变化，２４小时左右大部分细胞死亡；而无防腐剂的药液，０．５％匹罗卡品液、０．２５％噻吗心安液及对照组则细胞生长良好。药物作用２４小时后的活细胞计数表明，防腐剂对细胞生长显著抑制。提示应用眼药水治疗眼前节原发性疾病时，不能忽略药液中某些成分对眼组织细胞的毒性作用。     

cox-2抑制剂塞来昔布对氯化锂-匹罗卡品诱发大鼠癫痫持续状态后脑内cox-2、Glu表达的影响

目的 观察环氧化酶-2(cox-2)抑制剂塞来昔布对氯化锂-匹罗卡品诱发大鼠癫痫持续状态后脑内cox-2、谷氨酸(Glu)表达的影响,探讨其抗癫痫的作用机制.方法 采用免疫组化法对氯化锂-匹罗卡品诱发癫痫大鼠模型脑内cox-2和Glu的表达进行测定,并研究塞来昔布对癫痫影响及可能的作用机制.结果 癫痫模型组大脑皮质及海马区cox-2和大脑皮质Glu免疫反应较空白对照组明显增多(P<0.05), 给药组免疫反应较模型组明显减少(P<0.05).结论 癫痫持续状态后脑内cox-2、Glu表达明显增加;塞来昔布能够有效减轻脑内cox-2、Glu的表达,塞来昔布可能具有减轻癫痫发作和保护神经元的作用.     

氯化锂-匹罗卡品诱发大鼠癫痫持续状态后脑内c-fos蛋白表达的动态观察

目的 在氯化锂-匹罗卡品诱发癫痫持续状态模型中观察C-fos蛋白表达的时程变化。方法 采用氯化锂-匹罗卡品诱发癫痫持续状态大鼠模型，观察大鼠的行为改变，并用免疫组化方法观察癫痫持续状态后不同时间点脑内C—fos蛋白表达的变化。结果 癫痫持续状态后6h，1d时脑内c-fos蛋白表达最高，3d时表达次之，7d时极少数表达并接近对照组表达水平。结论癫痫持续状态后脑内c—fos蛋白表达持续较长时间；在此时期应给予干预措施，以减低脑内神经元损伤可能。     

慢性颞叶癫痫大鼠钙/钙调素依赖性激酶Ⅱ活性变化的研究

目的研究慢性颞叶癫痫发生过程中钙/钙调素依赖性激酶(Ca2 /CaMK)功能的的变化,探讨其与慢性癫痫发生的关系。方法Wistar大鼠70只,正常对照组10只,致痫组60只,根据致痫后6h、1d、3d、7d、14d、30d随机分为6小组,每小组10只。根据Ca2 /CaMK依赖Ca2 /CaM分解[32P]ATP的原理,用液闪法计数,检测大鼠海马、小脑组织Ca2 /CaMK的活性。结果正常对照组大鼠Ca2 /CaMK活性[pmol/(min·mg)]海马处为243.7±11.4,小脑为105.3±8.5。氯化锂-匹罗卡品致痫后海马Ca2 /CaMK活性明显降低(P<0.01),并一直持续到匹罗卡品致痫的慢性期,致痫1月后与正常对照组大鼠相比仍降低(P<0.05);致痫后各时点小脑Ca2 /CaMK活性与正常对照组相比无统计学差异(P>0.05)。结论氯化锂-匹罗卡品致痫后海马Ca2 /CaMK功能持续长期降低,可能与慢性癫痫发作的诱导和维持有关。     

阿托品致青光眼急性发作2例

例1,男,57岁,以“慢性闭角型青光眼”收入院。术前测眼压时误将1%阿托品1滴滴入双眼内。随即发现,作结膜囊冲洗,滴1%匹罗卡品和0.5%依色林,服碳酸酐酶抑制剂,静滴高渗剂。1小时后瞳孔稍大,眼压指试稍高,3小时后,瞳孔直径4～5mm。眼压:右眼4.40kPa(32.97     

重组人生长激素对癫痫持续状态大鼠神经元凋亡及XIAP、 Caspase-3表达的影响

目的 探讨重组人生长激素对大鼠在癫痫持续状态(SE)后海马神经元凋亡的影响及其可能作用机制.方法 将大鼠随机分成对照组、模型组和重组人生长激素组.采用免疫组化法对氯化锂-毛果芸香碱(匹罗卡品)诱发癫痫大鼠模型脑内XIAP、Caspase-3及TUNEL阳性细胞的表达进行测定.结果 模型组海马区TUNEL、XIAP、Caspase-3较对照组明显增多(P＜0.05);重组人生长激素组TUNEL、Caspase-3较模型组明显减少(P＜0.05),而XIAP较模型组显著增加(P＜0.05).结论 重组人生长激素可能通过促进XIAP生成进而抑制Caspase-3表达,从而起到保护神经元的作用.     

PPARs激动剂罗格列酮对大鼠癫痫持续状态海马神经元的保护作用

目的探讨罗格列酮(RSG)对大鼠癫痫持续状态(SE)后海马神经元凋亡的影响及其可能作用机制。方法采用免疫组化法对氯化锂-匹罗卡品诱发癫痫大鼠模型脑内Bcl-2、Bax及TUNEL阳性细胞的表达进行测定,并研究RSG对癫痫影响及可能机制。结果模型组(M组)海马区TUNEL、Bcl-2、Bax较对照组(N组)明显增多(P0.05);RSG组Bax、TUNEL较M组明显减少(P0.05),Bcl-2阳性细胞、Bcl-2/Bax比率较M组明显增多(P0.05)。结论SE后脑内TUNEL、Bcl-2、Bax表达明显增加;RSG能够减轻海马TUNEL、Bax的表达,增加海马Bcl-2的表达从而增加Bcl-2/Bax比率。RSG可能具有减轻癫痫发作和保护神经元的作用。     

盐酸法舒地尔对大鼠癫痫持续状态海马神经元的保护作用

目的 探讨盐酸法舒地尔对大鼠癫痫持续状态(SE)后凋亡的影响及其可能作用机制.方法 将大鼠随机分成3组,对照组(A组)、模型组(B组)和盐酸法舒地尔组(C组),对采用氯化锂-匹罗卡品诱发癫痫大鼠模型的海马神经元细胞,采用免疫组化法对TUNEL、XIAP及Caspase -9阳性细胞进行测定.结果 模型组海马神经元细胞TUNEL、XIAP及Caspase -9较对照组明显增多( P＜0.05);盐酸法舒地尔组TUNEL、Caspase -9较模型组明显减少(P＜0.05),XIAP较模型组显著增加(P＜0.05).结论 SE后海马神经元细胞内TUNEL、XIAP及Caspase -9表达均明显增加,盐酸法舒地尔能够减轻海马神经元细胞TUNEL、Caspase -9 的表达,促进海马神经元细胞XIAP的表达.盐酸法舒地尔可能通过促进XIAP生成进而抑制Caspase -9表达,从而起到保护神经元的作用.     

气道反应性亢进与哮喘

气道反应性亢进(hyperreactivity)是指气管一支气管树对物理、化学及药物等非抗原性刺激的过度反应性。自从1921年 Al-exander 等首次发现注射匹罗卡品可使哮喘病人呈现持续性呼气困难以来,众多研究已证明;组织胺、5-羟色胺、缓激肽、前列腺素F_2α口以及乙酰胆碱、乙酰甲胆碱、碳酰胆硷等胆碱能制剂均可使气道反应性亢进者发生支气管痉挛;运动、过度通气,吸入干冷空气、粉尘等刺激亦可使气道反应性亢进者形成哮喘发作。气道反应性亢进是哮喘的主要特征之一     

mir-134/Pum2信号通路在匹罗卡品致颠痫大鼠脑组织中的表达及作用

目的探讨micro-134(mir-134)/Pumilio2(Pum2)信号通路在癫痫大鼠模型脑组织中的表达变化及意义。方法建立氯化锂-匹罗卡品大鼠癫痫模型,用荧光定量PCR检测脑组织内mir-134在癫痫大发作后不同时间点的表达水平,用蛋白免疫印迹检测Pum2蛋白在相应时间点的表达并用双标免疫荧光技术对Pum2进行定位。结果 mir-134在癫痫大发作后的急性期(1 d和3 d)和慢性期(30 d和60 d)表达水平都较对照组显著升高(P0.05);与对照组相比,Pum2在癫痫模型中各时间点的表达水平均明显下降(P0.05),且Pum2主要表达于神经元胞质和树突中。结论 mir-134和Pum2在癫痫模型中异常表达,可能通过调节兴奋性环路的形成参与癫痫的发生发展过程。     

依达拉奉对大鼠癫痫持续状态神经元细胞凋亡的影响

目的:研究自由基清除剂依达拉奉对大鼠癫痫持续状态(SE)后神经元细胞凋亡的影响.方法:采用氯化锂-匹罗卡品大鼠癫痫持续状态模型,实验Wistar大鼠随机分为实验组(72只)和对照组(C组,6只),实验组分为模型组(M组)、依达拉奉单药治疗组(ED组)、联合地西泮治疗组(ED+DI),每组按照时间点分为4个亚组(12h、24h、72h、7d).免疫组化法检测大鼠脑组织的Bcl-2蛋白表达,及TUNEL法检测细胞凋亡的情况.结果:Bcl-2蛋白表达与对照组相比,M组12h达高峰,24h开始减少,7d减至基础水平(P<0.05).而依达拉奉单药和联合地西泮治疗组与之比较,变化趋势相同但Bcl-2表达增多(P<0.05);M组TUNEL染色阳性细胞极多,12h开始上升,48h达高峰,之后有下降趋势(P<0.01).ED组TUNEL染色阳性细胞数值变化趋势相同但低于M组(P<0.01),高于ED+DI组;ED+DI组与C相比仍有统计学意义(P＜0.05).结论:依达拉奉对氯化锂-匹罗卡品大鼠癫痫持续状态所致脑损伤具有保护作用,其机制可能通过清除自由基上调Bcl-2蛋白表达及减少神经元细胞凋亡,联合地西沣治疗效果更显著.     

癫痫大鼠海马内神经干细胞移植的实验研究

取胎鼠海马进行神经干细胞(NSC)的培养、鉴定与标记,以氯化锂-匹罗卡品诱导制成大鼠急性癫痫模型,于发作后第4天将以5-溴-2'-脱氧尿苷(Brdu)标记的NSC移植入大鼠海马,检测移植后NSC在宿主体内的存活情况,移植细胞对癫痫大鼠齿状回苔藓纤维出芽(MFS)的影响.发现移植后2个月NSC在宿主体内能够存活,并向移植区周围迁移;NSC移植组大鼠海马齿状回内分子层Timm染色颗粒明显少于未移植组.认为NSC移植入癫痫大鼠海马后能够存活,并能显著抑制海马齿状回MFS.     

人工晶体植入术中卡米可林与匹鲁卡品前房用药缩瞳作用的对比观察

我们在后房型人工晶体植入后 ,分别于前房内注入小剂量卡米可林与匹鲁卡品缩瞳 ,对其缩瞳效果及副作用进行了对比观察。现报告如下。临床资料 :选择无其他眼病及全身病的老年性白内障患者 68例 70眼。男 36例 ,女 32例 ;年龄 55～ 71岁 ;右眼 2 6眼 ,左眼 4 4眼。随机分为卡米可林组 (卡组 )和匹鲁卡品组 (匹组 ) ,每组为 34例 35眼 ,双眼白内障患者则左、右眼分开于两组。方法 :均采用进口 Alcon后房型人工晶体。粘弹剂为其胜二代透明质酸钠。卡米可林由山东正大福瑞达公司生产 ,匹鲁卡品为北京医科大学第一附属医院生产。术前半小时患眼…     

长托宁对癫痫持续状态大鼠海马神经元保护作用研究

目的探讨长托宁干预对癫痫持续状态(SE)后大鼠海马神经元损伤的保护作用及其可能机制。方法54只Wistar大鼠随机分为A组(对照组)、B组(模型组)和C组(长托宁组),后两组又分为6h、12h、24h、48h亚组。应用氯化锂-匹罗卡品制备SE模型。TUNEL法检测大鼠海马细胞凋亡,免疫组化法检测Bcl-2和Caspase-3的表达。结果SE后6h海马组织可见TUNEL、Caspase-3和Bcl-2阳性细胞表达,TUNEL和Caspase-3表达高峰均在24h;Bcl-2表达高峰在12h。C组各时间点TUNEL、Caspase-3阳性细胞较B组减少(除6h外,均P0.05),而Bcl-2阳性细胞数增加(除6h外,均P0.05)。结论长托宁可以上调Bcl-2,下调Caspase-3,长托宁可能通过抑制SE后海马神经元凋亡的机制,减轻SE时脑组织损伤,起到脑保护作用。     

丙酮酸乙酯对癫痫持续状态大鼠神经元凋亡及XIAP、Caspase-3表达的影响

目的探讨丙酮酸乙酯干预对大鼠癫痫持续状态(SE)后导致神经元损伤的影响及其可能机制。方法雄性Wistar大鼠54只随机分为对照组(N组)、模型组(M组)和丙酮酸乙酯组(EP组),后两组再分为6h、12h、24h、48h亚组,每亚组6只。应用氯化锂-匹罗卡品制备SE动物模型,TUNEL法检测大鼠海马神经元凋亡,免疫组化法检测XIAP和Caspase-3蛋白的表达。结果 M组在SE后6h脑内可见TUNEL、XIAP和Caspase-3阳性细胞,TUNEL和Caspase-3表达高峰在24h;XIAP表达高峰在12h。EP组各时间点TUNEL和Caspase-3阳性细胞数较M组明显减少(除6h外,均P<0.05),而XIAP阳性细胞数则明显增加(除6h外,均P<0.05)。结论丙酮酸乙酯能够提高XIAP蛋白的表达,抑制Caspase-3蛋白的表达,对大鼠癫痫持续状态后神经元损伤具有保护作用。     

5-HT1A受体对癫痫伴发抑郁的影响及神经保护研究

目的 通过建立氯化锂-匹罗卡品癫痫伴发抑郁的模型试验,评价5-HT1A受体激动剂8-OH-DPAT治疗癫痫伴发抑郁的疗效.方法 建立癫痫伴发抑郁大鼠模型,随机分为5组,生理盐水组、模型组、卡马西平组及卡马西加低、高剂量8-OH-DPAT组,分别给予相应药物,通过尼氏染色及胶质纤维酸性蛋白免疫组化的方法观察抗癫痫的疗效,通过强迫游泳,开放视野的行为学方法、荧光定量PCR方法测定5-HT1A受体表达量来评定抗抑郁的效果.结果 5-HT1A受体激动剂与卡马西平联合使用,且能明显的改善抑郁行为、可以增高5-HT1A受体mRNA的含量,同样也具有对抗神经元凋亡和胶质细胞活化的作用(P<0.05).结论 5-HT1A受体激动剂不仅具有抗癫痫和抑郁的作用,而且也具有神经保护的作用.     

低频重复经颅磁刺激对氯化锂-匹鲁卡品慢性癫痫大鼠海马CA3区PGP、MRP1、MVP表达的影响

目的研究低频重复经颅磁刺激(rTMS)对氯化锂-匹鲁卡品慢性癫痫大鼠海马CA3区P-糖蛋白(PGP)、多药耐药相关蛋白(MRP)1及主穹隆蛋白(MVP)表达水平的影响。方法 60只大鼠随机分为对照组,模型组,假刺激组,治疗组,每组15只。采用氯化锂-匹鲁卡品腹腔注射构建癫痫大鼠模型,治疗组采用rT MS治疗,比较各组治疗过程中癫痫发作次数及CA3区PGP、MRP1及MVP的表达水平。结果治疗组癫痫发作频率低于模型组及假刺激组(P0.05)。治疗组PGP、MRP1及MVP表达水平显著低于模型组及假刺激组(P0.05),较对照组显著升高(P0.05)。结论低频rTMS可抑制模型大鼠海马CA3区PGP、MRP1及MVP过度表达,低频rTMS的抗痫作用可能与之有关。     

诱导型一氧化氮合酶和精氨酸酶1在癫痫共病抑郁大鼠各脑区中的表达比较

目的 检测癫痫共病抑郁大鼠各脑区诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和精氨酸酶1(Arg-1)表达及神经元凋亡情况。方法 将20只大鼠随机分为对照组、癫痫组、抑郁组、癫痫共病抑郁组(共病组),每组5只。采用氯化锂-匹罗卡品法建立癫痫共病抑郁大鼠模型,采用慢性不可预见中等应激刺激结合孤养法建立抑郁大鼠模型。采用免疫组织化学检测iNOS和Arg-1表达,TUNEL染色检测神经元凋亡情况。结果 与对照组和癫痫组比较,共病组大鼠体质量、蔗糖偏好率、水平运动和垂直运动明显减少(P<0.05)。与对照组、癫痫组、抑郁组比较,共病组大鼠额前皮质、海马、杏仁核iNOS表达和TUNEL阳性细胞数明显增多,Arg-1表达明显减少(P<0.05)。共病组海马iNOS表达(0.480±0.028 vs 0.447±0.024,0.394±0.005)和TUNEL阳性细胞数(61.6±2.0 vs 46.0±1.5,30.0±1.5)明显高于额前皮质和杏仁核(P<0.05)。结论 癫痫共病抑郁大鼠海马M1型小胶质细胞活化及凋亡神经元较额前皮质及杏仁核明显增多,可能在癫痫共病抑郁发病中发挥了更大的作用...