钙化防御早期诊治进展

钙化防御(calciphylaxis)是一种严重的血管性疾病,主要特征为系统性小动脉钙化合并内皮破坏和血栓形成[1]。损伤部位通常伴有顽固性疼痛,可进展为溃疡和周围组织缺血性坏死,多见于接受透析治疗的终末期肾病患者,因此,也称为钙性尿毒症性小动脉病(calcific uremic arteriolopathy, CUA)。近年来,随着人们对钙化防御认识的提高,发现其并非罕见,预后极差,常导致患者死于心血管意外、     

钙性尿毒症性小动脉病(附3例报告)

目的：通过3例钙化防御（钙性尿毒症性小动脉病）病例总结，介绍钙化防御的诊断、预防及治疗。方法：回顾性总结3例尿毒症继发性甲旁亢并发的钙化防御。结果：例1在手部、双肘、头部及背部出现网状紫斑及多发性皮下肿块。例2在脚趾根部出现痛性网状紫斑及皮肤溃疡。例3表现为足跟部及脚趾痛性网状紫斑和干性坏死。X线照片3例均显示病变附近软组织钙化或血管钙化。例1接受甲状旁腺内酒精注射治疗后，继发性甲旁亢得到控制，皮下肿块及软组织钙化基本消失。例2应用低钙透析液透析后溃疡面缩小，例2和例3作了坏死组织切除，最后死亡。结论：钙化防御一旦发生，预后不良，值得国内同道加以注意。     

转化生长因子β与血管钙化

血管壁上钙过量沉积称为血管钙化。动脉粥样硬化、慢性肾功能衰竭、糖尿病、高血压等疾病过程中均有血管钙化，其程度与疾病的严重性呈正相关，并随年龄的增长而逐渐恶化。目前研究表明，血管钙化是一个主动的细胞调控过程。许多因素都参与了这一过程的调节，但血管钙化的调控机理尚不清楚。转化生长因子β（Transforming growth factor β，TGF-β）是一组多功能的多肽类生长因子，可由多种细胞分泌，广泛存在身体各组织，通过细胞表面的受体信号转导途径发挥其广泛的生物学作用，参与许多重要的生理和病理过程。目前关于TGF—β与血管钙化关系的研究不多，TGF-β对血管钙化作用也存在争议。     

大鼠血管钙化模型炎症因子及其受体的表达

目的观察血管钙化大鼠模型血清炎症因子[C反应蛋白（C-reactive protein,CRP）、白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）和单核细胞趋化蛋白-1（monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1）]表达的变化,以及大鼠主动脉组织中与血清炎症因子相对应的受体表达的变化,以探讨炎症因子在血管钙化中的作用和意义。方法实验动物按电脑随机数字表法分为正常组和钙化组,每组8只,钙化组采用维生素D3（300 000 U/kg1次肌肉注射）和尼古丁（25 mg/kg溶于花生油中,早、晚各灌胃1次）诱导大鼠血管钙化模型,用Von Kossa染色检测血管钙化程度,用钙离子测试盒、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）试剂盒测定大鼠主动脉钙含量和ALP活性,用放射免疫法检测大鼠血清炎症因子含量,用免疫组织化学法检测血管组织炎症因子受体表达。结果Von Kossa染色可见血管钙化模型大鼠主动脉有大量黑色颗粒沉淀。钙化组血管钙含量、ALP活性明显高于正常组,差异有统计学意义[分别为（0.42±0.05）μmol/g蛋白vs.（0.23±0.02）μmol/g蛋白,P〈0.01;（170.70±14.04）U/g蛋白vs.（110.30±14.05）U/g蛋白,P〈0.01]。钙化组血清炎症因子（CRP、IL-6和MCP-1）的表达比正常组明显上调,差异有统计学意义[分别为（2.20±0.14）mg/L vs.（1.69±0.24）mg/L,P〈0.01;（182.80±4.48）ng/L vs.（153.10±4.28）ng/L,P〈0.01;（83.07±2.37）ng/L vs.（70.52±2.12）ng/L,P〈0.01]。与正常组相比,血管钙化模型大鼠主动脉组织中的炎症因子相应受体（IL-6受体和MCP-1受体）的表达亦同步上调。结论钙化大鼠血清炎症因子和主动脉相应受体表达上调,提示炎症因子参与血管钙化的发生和发展过程。     

C型钠尿肽在大鼠血管钙化中的作用

目的探讨C型钠尿肽（C-type natriuretic peptide，CNP）在血管钙化中的作用。方法用肌注维生素D3和尼古丁灌胃诱导大鼠血管钙化（VDN组大鼠），背部皮下埋泵CNP[500ng／（ks．h）]持续释药4周。进行Von Kossa染色、钙含量及碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）活性测定。放射免疫法测定血浆和血管组织CNP含量；半定量RT-PCR方法测定血管CNP、钠尿肽受体（NRB、NPR-C）及骨桥蛋白（osteopontin，OPN），     

血管钙化大鼠模型的肾脏损伤研究

目的观察血管钙化大鼠模型肾脏损伤及其病理变化。方法采用维生素D3（300000U／kg）和尼古丁（25mg／kg,溶于花生油）诱导大鼠血管钙化模型,以钙离子测试盒、碱性磷酸酶试剂盒测定钙含量和碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）活性,以Von Kossa染色检测血管钙化程度;以肌氨酸氧化酶法检测大鼠血清肌酐浓度;苏木素伊红染色观察肾脏结构,Masson染色观察肾组织胶原的增生情况。结果血管钙化大鼠Von Kossa染色可见主动脉有大量黑色颗粒沉淀,表明有大量钙盐沉积;血管钙含量[（0．410±0．0166）μmol·g^-1 vs.（0．270±0．019）μmol·g^-1,P〈0．05]、ALP活性[（186．900±10．960）U·g^-1 vs.（119．100±8．646）U·g^-1,P〈0．05]、血清肌酐浓度[（48．330±0．989）μmol／L憾（35．000±1．155）μmol／L,P〈0．05]较正常组升高,差异有统计学意义。苏木素伊红染色可见肾脏病理改变;Masson染色可见胶原增生。结论钙化大鼠肾功能和病理改变可能与肾脏纤维化、肾小球硬化及炎症因子等有关。     

第四届南方长城心脏会议

动脉硬化是一类以动脉壁增厚、变硬、弹性丧失为特征的疾病。因血管通道发生扭曲变形，狭窄，导致心脏负荷增加，表现出全身性血液和氧供应不足症状。从病理变化特征上包括三种疾病：(1)动脉粥样硬化(atherosclerosis)，主要累及大、中型动脉；(2)门克伯格中膜钙化性硬化(Me‘nckeberg medial calcificsclerosis)，主要病理特征为中等肌性动脉钙化；(3)微(小)动脉硬化(arteriolosclerosis)，主要病变为小动脉和微动脉透明样变和增生。     

同型半胱氨酸对血管钙化的促进作用

目的 在体外血管钙化模型基础上探讨同型半胱氨酸（HCY）对血管钙化的影响。方法 建立牛主动脉平滑肌细胞体外钙化模型（钙化BASMCs)。检测HCY对细胞层钙含量。培养上清骨钙素浓度及碱性磷酸酶活性的影响。并检测骨钙素，骨桥蛋白及Ⅰ型胶原（ColⅠ)mRNA表达的变化及抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸对HCY促钙化作用的影响。结果 HCY剂量依赖性促钙化BASMCs钙沉积，但不促进非钙化的BASMCs钙沉积；N-乙酰半胱氨酸抑制HCY对钙化BASMCs钙沉积的促进作用。但在钙化BASMCs中单纯加入等剂量的N-乙酰半胱氨酸对钙沉积无影响；HCY促钙化BASMCs培养上清骨钙素含量增加，且使骨桥蛋白，骨钙素，ColⅠmRNA表达分别增加56.33%,86.48%及110.64%。但对正常培养的BASMCs培养上清骨钙素含量及骨桥蛋白，骨钙素mRNA表达无影响。仅使ColⅠmRNA表达增加108.33%;HCY不影响正常及钙化BASMCs碱性磷酸酶活性。结论 （1）HCY是钙化的促进因子，而非启动因子；（2）HCY的促钙化作用可能部分是通过细胞外基质途径实现的；（3）N-乙酰半胱氨酸阻断HCY的促钙化作用。间接提示氧化反应参与此过程；（4）HCY的促钙化作用与碱性磷酸酶活性无关。     

慢性肾脏病血管钙化机制的研究进展

慢性肾脏病（chronic kidney disease, CKD）是世界公认的健康问题,我国CKD的患病率约为10.8%,并且CKD的死亡率也很高。心血管疾病（cardiovascular disease, CVD）是CKD最常见的死亡原因,而血管钙化（vascular calcification, VC)是导致CVD的重要危险因素。因此本文对CKD血管钙化的流行病学现状、病理学特点、危险因素、发病机制等方面进行综述,希望能为血管钙化的防治提供新的思路。     

血管钙化的调节机制

血管钙化是动脉粥样硬化、糖尿病、肾病、衰老、收缩性高血压等多种疾病的病理生理基础，是心血管疾病的主要危险因子。最近研究发现血管钙化是一种类似于骨质疏松的主动的调节过程。然而，目前血管钙化的确切机制尚不清楚。可能与基质小泡、向钙性激素、钠依赖的磷酸转运系统、血管平滑肌细胞表型改变、血细胞、巨噬细胞和细胞凋亡等机制有关。     

碱性成纤维细胞生长因子在低氧性肺动脉高压大鼠肺内表达及分布变化的观察

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）在慢性低氧性肺动脉高压中的作用。方法建立慢性低氧性肺动脉高压大鼠模型，测定肺血流动力学及肺小动脉显微形态计量学，用免疫组化方法观察ｂＦＧＦ在大鼠肺组织的表达和分布。结果缺氧组大鼠平均肺动脉压（ｍＰＡＰ）、肺小动脉壁厚度占血管外径的百分比（ＭＴ％）分别为３．９６±０．４７ｋＰａ、３４±４％，明显高于对照组（Ｐ＜０．０１）；肺小动脉壁ｂＦＧＦ染色明显强于对照组（Ｐ＜０．０１），并和ＭＴ％呈正相关。结论（１）慢性缺氧能导致肺小动脉重建及肺动脉高压。（２）ｂＦＧＦ参与了慢性低氧性肺动脉高压肺血管重建的调控。     

钙化性主动脉瓣疾病的诊疗进展

随着社会老龄化进程的加快,钙化性主动脉瓣疾病发病率逐渐升高,相关的心力衰竭（心衰）等不良事件显著增加,给社会带来沉重负担,同时,目前对于严重的钙化性主动脉瓣的治疗方法和效果有限、并发症多,其原因是钙化性主动脉瓣疾病的发生机制不明确、缺少预防其发生发展的有效手段。因此,深入探究钙化性主动脉瓣疾病的发生机制,寻找干预其发生进展的分子靶点,对于降低钙化性主动脉瓣疾病的发生具有重要意义。本文针对钙化性主动脉瓣疾病的流行病学、发病机制和临床治疗的现状及进展进行综述。     

姜黄素对维生素D3和尼古丁诱导血管钙化大鼠血管中组织蛋白酶D表达的影响

目的研究组织蛋白酶D(CTSD)在大鼠动脉钙化模型中的表达以及姜黄素对其表达的影响。方法将30只雄性SD大鼠随机分成3组,每组10只,即对照组、钙化组和干预组。对照组大鼠给予等量生理盐水处理,钙化组大鼠用维生素D3和尼古丁处理,干预组大鼠在钙化组处理的基础上加用姜黄素干预。用von Kossa染色检测血管钙化,试剂盒检测血管钙含量和碱性磷酸酶活性,Western blot检测骨形态发生蛋白2(BMP-2)、Runx2和CTSD的蛋白表达,用免疫组织化学染色观察CTSD在血管中的表达及分布。结果维生素D3和尼古丁能够诱导经典大鼠钙化模型,von Kossa染色结果显示钙化组大鼠胸主动脉有大量黑色颗粒沉积,血管钙含量和碱性磷酸酶活性升高,Western blot检测结果显示BMP-2和Runx2表达显著上调;使用姜黄素干预后,与钙化组相比,大鼠胸主动脉钙化程度明显减轻,血管钙含量和碱性磷酸酶活性下降,BMP-2和Runx2表达下调。免疫组织化学染色结果显示钙化组CTSD表达上调且大量分布在细胞外基质中,姜黄素能够显著下调CTSD的表达并减少其在细胞外基质中的分布。结论姜黄素具有抑制血管钙化的作用,可能与其能够减少CTSD在细胞外基质中的表达有关。     

血管钙化对血管组织内皮素表达的影响

通过观察血管钙化大鼠血管组织和钙化血管平滑肌细胞内皮素含量的变化 ,探讨血管钙化对血管组织内皮素表达的影响。用维生素D3加尼古丁诱导大鼠血管钙化模型 ,β 磷酸甘油制备钙化血管平滑肌细胞 ,采用VonKossa染色、钙含量测定、4 5Ca聚集及碱性磷酸酶活性测定判断钙化程度 ,放射免疫分析法测定血浆、血管和血管平滑肌细胞培养基中内皮素含量 ,用竞争性定量逆转录聚合酶链反应方法测定血管和血管平滑肌细胞中内皮素mRNA水平。结果发现 :钙化血管平滑肌细胞VonKossa染色见有大量黑色颗粒沉积 ,钙化细胞的钙含量、4 5Ca2 + 摄入及碱性磷酸酶活性分别较正常平滑肌细胞增加 1 1 8%、1 74 %和 7倍 (P均 <0 .0 1 ) ;钙化细胞培养基中内皮素含量较对照组增加 35 % (P <0 .0 5 ) ,内皮素mRNA水平较对照组高 1 2 0 % (P <0 .0 5 ) ;钙化组大鼠血管组织VonKossa染色见血管中层有大量黑色颗粒沉积 ,主动脉钙含量、4 5Ca2 + 沉积及碱性磷酸酶活性分别较对照组高 5 .0倍、1 .4倍和1 .4倍 (P均 <0 .0 1 ) ;钙化大鼠血浆和血管内皮素含量分别较对照组增加 1 0 2 %和 1 0 3% (P均 <0 .0 1 ) ;钙化血管内皮素mRNA水平较正常对照组高 2 2 % (P <0 .0 1 ) ;波生坦处理的大鼠血管钙含量、4 5Ca2 + 聚集及碱性磷酸酶活性较单     

新的内源性保护物质Intermedin抑制大鼠血管平滑肌钙化

背景与目的Intermedin（IMD）是2004年发现的降钙素基因相关肽超家族的新成员，具有舒张血管、降低血压和增强心肌收缩力的作用。本工作在整体大鼠血管钙化模型上观察内源性IMD及其受体系统的变化及外源性IMD对血管钙化的影响。方法用尼古丁灌胃和肌肉注射维生素D3的方法建立了大鼠血管钙化模型，原子吸收分光光度法测定组织和细胞钙含量，von Kossa染色鉴定钙结节。实时聚合酶链反应检测IMD及其受体-降钙素受体样受体和受体活性修饰蛋白mRNA水平。     

老年钙化性心瓣膜病的超声和临床研究

目的：观察老年钙化性心瓣膜病的超声和临床表现。方法：回顾性研究１１０６例中老年的心脏超声心动图检查。结果：检出老年钙化性心瓣膜病１２３例（１１．１％）,其中主动脉瓣钙化和硬化６８例,主动脉瓣及二尖瓣环钙化２１你,二尖瓣环钙化３２例。结率：心脏瓣膜钙化的发生率随年龄增长而增加,主要累及左侧心脏瓣膜,以主动脉瓣膜钙化发展较早。     

HGF 介导 Ox-LDL 诱导的血管平滑肌细胞钙化

目的研究肝细胞生成因子（hepatocyte growth factor,HGF）在氧化型低密度脂蛋白（oxidized low density lipoprotein,Ox-LDL）诱导的血管平滑肌细胞钙化中的作用。方法本研究采用细胞钙化体外模型,检测HGF的浓度和细胞钙化程度。结果Ox-LDL能促进血管平滑肌细胞钙化,同时上调HGF的表达水平。抑制HGF能减轻Ox-LDL诱导的细胞钙化。结论HGF参与了Ox-LDL诱导的血管平滑肌细胞钙化。     

老年钙化性心脏瓣膜病与动脉粥样硬化危险因素的关系

目的探讨老年钙化性心脏瓣膜病（SCVD）与动脉粥样硬化危险因素的关系。方法选择经超声心动图检查诊断为老年性心脏瓣膜钙化的94例患者为瓣膜钙化组,无瓣膜钙化的82例患者为对照组,比较2组患者的年龄、性别、高血压、冠心病、糖尿病、高脂血症,超声心动图、血脂、C反应蛋白（CRP）、血磷（P）、血钙（Ca）、碱性磷酸酶（ALP）,并分析SCVD发生的危险因素。结果瓣膜钙化组比对照组年龄增高,左心室舒张末期内径（LVEDD）增大,左心室射血分数（LVEF）减低,2组间高血压、冠心病、高脂血症、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）有显著差异（P〈0.01或P〈0.05）;年龄、高血压、高脂血症为SCVD发生的危险因素。结论 SCVD在老年患者多发,心功能衰退,有左心室重构倾向,年龄、高血压、高脂血症等动脉粥样硬化危险因素与SCVD发生有关。     

吡格列酮通过内质网应激致凋亡途径对大鼠血管平滑肌细胞钙化的影响

目的　探讨吡格列酮通过内质网应激致凋亡途径对大鼠血管平滑肌细胞钙化的影响及机制。方法　利用β-甘油磷酸钠联合丙酮酸钠制备钙化血管平滑肌细胞模型,予不同浓度（10、50、100　μmol/L）吡格咧酮干预。用Von　Kossa　染色、茜素红S染色测定钙含量以及碱性磷酸酶（ALP）活性观察细胞钙化程度。采用流式细胞术及Tunel法检测细胞凋亡率,实时荧光定量PCR及Western　Blot检测各组细胞GRP78、Caspase-12和Runx2的mRNA及蛋白表达。结果　钙化组其钙含量、ALP活性较对照组细胞增多（P<0.05）,而不同浓度吡格列酮呈剂量依赖性地减轻钙化大鼠血管平滑肌细胞的钙含量和ALP活性（P<0.05）;钙化组其细胞凋亡率较对照组明显升高,而不同浓度吡格列酮呈剂量依赖性地减轻钙化大鼠血管平滑肌细胞凋亡率（P<0.05）;钙化组GRP78、Caspase-12和Runx2　的mRNA及蛋白表达明显升高,而不同浓度吡格列酮呈剂量依赖性地下调钙化大鼠血管平滑肌细胞GRP78、Caspase-12和Runx2的mRNA及蛋白表达（P<0.05）。结论　吡咯列酮通过内质网应激致凋亡途径作用可减轻β-磷酸甘油诱导的血管平滑肌细胞钙化,其作用可能与GRP78、Caspase-12及Runx2表达下调有关。     

Salusin-β在血管钙化模型的表达变化及意义

目的在大鼠血管钙化模型上观察血浆和主动脉组织salusin-β表达。方法实验动物按电脑随机数字表法随机分为正常组和钙化组,每组8只。钙化组采用维生素D3(300 000 U/kg 1次,肌肉注射)和尼古丁(25 mg/kg溶于花生油中早、晚各灌胃1次)诱导大鼠血管钙化模型。常规饲养4周后取材,用Von Kossa染色检测血管钙化程度;用钙离子测试盒、碱性磷酸酶(ALP)试剂盒测定大鼠主动脉钙含量和碱性磷酸酶活性;用放射免疫法检测大鼠血浆和主动脉组织salusin-β含量。结果维生素D3和尼古丁能够诱导典型大鼠血管钙化模型,Von Kossa染色可见血管钙化模型大鼠主动脉有大量黑色颗粒沉淀。钙化组血管钙含量、碱性磷酸酶活性明显高于正常组,差异有统计学意义(P<0.05);同时,钙化组血浆和主动脉组织中salusin-β的表达明显上调。结论大鼠血管钙化模型中salusin-β的表达上调。