二连浩特口岸鼠体寄生蜱感染病原体调查

目的 调查二连浩特口岸鼠体寄生蜱种群组成及自然感染病原体情况.方法 从捕获的鼠体上收集寄生蜱,提取单只蜱DNA基因组及总RNA,采用PCR或RT-PCR方法检测莱姆病螺旋体、Q热立克次体、巴贝西原虫、斑点热立克次体、无形体、森林脑炎病毒、布尼亚病毒、克里米亚-刚果出血热病毒.结果 共采集鼠体寄生蜱152只,分别为草原血蜱、银盾革蜱和亚东璃眼蜱,其中草原血蜱为优势种,占捕获总数的98.03％.从草原血蜱、银盾革蜱和亚东璃眼蜱中检测到斑点热立克次体19份,检出率为12.50％,其他病原体检测均为阴性.结论 二连浩特口岸地区存在斑点热立克次体自然疫源地.     

东北部分地区蜱携带几种病原立克次体的分子检测

目的为了解东北地区蜱中携带立克次体的情况。方法应用人工小时布旗法采集东北部分地区不同生境的游离蜱,采用PCR作斑点热立克次体、查菲埃立克体、人粒细胞无形体DNA检测。结果从东北地区全沟硬蜱和森林革蜱检出查菲埃立克体DNA,全沟硬蜱平均阳性率为3.29%,森林革蜱为1.88%;从全沟硬蜱检出人粒细胞无形体DNA,平均阳性率为2.98%;从嗜群血蜱检出斑点热立克次体DNA,其平均阳性率(6.67%)明显高于全沟硬蜱(1.69%)和森林革蜱(2.36%)。结论东北地区全沟硬蜱和森林革蜱可能是查菲埃立克体、人粒细胞无形体的主要携带媒介,嗜群血蜱主要携带斑点热立克次体,提示东北地区存在三种蜱媒立克次体病的自然疫源地。     

用PCR/RFLP技术对黑龙江沿岸蜱类和鼠类中北亚蜱传斑点热的检测

为了解黑龙江沿岸部分地区斑点热自然疫源地存在情况，作者用PCR／RFLP的方法检测该地区蜱类及鼠类中的斑点热群（spottedfevergroup，SFG）立克次体。结果从该地区的森林革蜱、嗜群血蜱、黑线姬鼠、东方田鼠、麝鼠及棕背中均扩增出了斑点热群立克次体的特异片段，而对斑疹伤寒立克次体、恙虫病立克欢体、Q热立克次体则为阴性。PCR产物经PstⅠ及RsaⅠ酶切后发现它们的酶切图谱与西伯利亚立克次体完全相同，而有别于其它斑点热群立克次体标准株。作者认为黑龙江沿岸调查点可能存在北亚蜱传斑点热的自然疫源地。     

淮安地区寄生蜱携带立克次体的检测及遗传进化分析

目的 了解淮安市南部丘陵地区寄生蜱中携带立克次体的分子流行特征,为立克次体病的防治提供依据。方法 采集宿主（羊、牛、犬）体表寄生蜱,形态学鉴定蜱虫种类,然后通过PCR扩增立克次体的外膜蛋白B基因(ompB),对立克次体ompB基因进行测序和生物信息学分析。结果 共调查210只（头）宿主动物,蜱携带率为31.43%（66/210）。捕获的83只蜱经形态学鉴定均为长角血蜱。PCR检测发现长角血蜱中立克次体的感染率为3.61%（3/83）。ompB基因G+C平均含量36.43%,平均核苷酸多样性(Pi)为0.00535。3株立克次体分离株ompB基因序列之间的一致性很高,并与GeneBank中立克次体属斑点热群立克次体R. hulinensis（AY260452.1）的同源性最高,分别为98.1%、97.6%和97.5%。结论 淮安市南部丘陵地区寄生蜱中存在斑点热群立克次体感染,应制定防控措施,以免危害动物及人类健康。     

某部驻区蜱传斑点热自然疫源地调查

目的了解某部驻区蜱传斑点热的自然疫源地情况。方法进行蜱类与啮齿动物调查，利用立氏立克次体190kD外膜蛋白A(R．rOmpA)基因序列设计引物，对683只蜱类标本和146个鼠类脏器标本进行PCR检测，随机抽取一株森林革蜱阳性扩增产物进行序列测定。结果调查地区存在3种蜱、5种啮齿动物；从森林革蜱、嗜群血蜱和啮齿动物脏器标本中检测斑点热立克次体DNA片段，阳性率分别为53．81％、7．41％和6．16％；所测序列与前苏联的DaS 14株的同源性为100％，与我国检测的BJ-90、HLJ-054的同源性分别为88％和86％。结论调查地区存在与DaS14株型别一致的斑点热立克次体株。     

逊克县火山熔岩地区蜱携带新发蜱传病原体及复合感染调查

目的调查黑龙江省逊克县火山熔岩地区蜱携带新发蜱传病原体及复合感染情况。方法 2015年4-6月采集活蜱样本257只,利用PCR方法分别扩增6种新发蜱传病原体的特异性核酸片段,通过基因测序进一步鉴定。结果共检出斑点热群立克次体、巴尔通体和嗜吞噬细胞无形体核酸阳性样本分别为86、5和11例,感染率分别为33.46%、1.94%和4.28%。伯氏疏螺旋体、巴贝西虫和埃立克体的DNA核酸检测结果均为阴性。森林革蜱、嗜群血蜱和全沟硬蜱体内共检出复合感染8例,感染率为3.11%,证实该地区森林革蜱中存在斑点热群立克次体及巴尔通体,嗜群血蜱和全沟硬蜱存在斑点热群立克次体及嗜吞噬细胞无形体复合感染的情况。结论应加强黑龙江省逊克县火山熔岩地区蜱的防控。     

吉林省珲春地区蜱中伯氏疏螺旋体与斑点热群立克次体复合感染研究

目的了解吉林省珲春地区伯氏疏螺旋体与斑点热群立克次体的复合感染情况.方法运用PCR方法对吉林省珲春地区采集的蜱标本,进行伯氏疏螺旋体5S～23S rRNA间隔区基因与斑点热群立克次体外膜蛋白A（ompA）基因的检测.测序并用PHYLIP软件进行序列分析.结果全沟硬蜱中伯氏疏螺旋体感染率为36.0%,在全沟硬蜱中检测到了斑点热群立克次体的感染,其感染率为2 0%.二者的复合感染率为2.0%;森林革蜱中伯氏疏螺旋体感染率30.9%,斑点热群立克次体感染率29.1%,二者的复合感染率16.8%.伯氏疏螺旋体的序列分析显示吉林地区的伯氏疏螺旋体都属于B.garinii基因型,同源性较高.对斑点热阳性片段序列分析表明新测序列与斯洛伐克新发现的IRS3株和IRS4株核苷酸序列同源性为97%.结论吉林省珲春地区全沟硬蜱及森林革蜱中检测到伯氏疏螺旋体与斑点热群立克次体的感染,并检测到2种病原体的复合感染情况.     

苏州丘陵景区蜱的分布及其病原体携带状况调查

【目的】调查苏州市丘陵山地风景区蜱的地理分布及其病原体携带感染率,旨在评估和预警该地区蜱传疾病的传播风险。【方法】利用人工布旗法和动物体表采集法采集游离蜱和寄生蜱,采用PCR方法检测蜱体内巴贝虫、斑点热群立克次体、伯氏疏螺旋体、蜱传脑炎病毒和发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒(SFTSV)核酸。【结果】共捕蜱148只,隶属于1科3属4种,分别为长角血蜱(占47.3%)、中华血蜱(占49.3%)、血红扇头蜱(占2.0%)及微小牛蜱(占1.4%)。蜱标本中巴贝虫、伯氏疏螺旋体、蜱传脑炎和发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒核酸检测均为阴性;斑点热群立克次体核酸检测阳性,最小感染率为2.8%。【结论】该地区蜱分布广泛,种类以长角血蜱和中华血蜱为主;部分蜱携带有斑点热群立克次体,应加强斑点热群立克次体的监控和研究。     

苏州丘陵景区蜱的分布及其病原体携带状况调查

【目的】调查苏州市丘陵山地风景区蜱的地理分布及其病原体携带感染率?旨在评估和预警该地区蜱传疾病的传播风险?【方法】利用人工布旗法和动物体表采集法采集游离蜱和寄生蜱?采用PCR方法检测蜱体内巴贝虫、斑点热群立克次体、伯氏疏螺旋体、蜱传脑炎病毒和发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒(SFTSV)核酸?【结果】共捕蜱148只?隶属于1科3属4种?分别为长角血蜱(占47.3%)、中华血蜱(占49.3%)、血红扇头蜱(占2.0%)及微小牛蜱(占1.4%)?蜱标本中巴贝虫、伯氏疏螺旋体、蜱传脑炎和发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒核酸检测均为阴性?斑点热群立克次体核酸检测阳性?最小感染率为2.8%?【结论】该地区蜱分布广泛?种类以长角血蜱和中华血蜱为主?部分蜱携带有斑点热群立克次体?应加强斑点热群立克次体的监控和研究?     

北京郊区旅游景点北亚蜱传斑点热分子流行病学调查

用ＰＣＲ／ＲＦＬＰ技术对北京郊区１１个旅游景点的媒介蜱及小哺乳动物进行斑点热群立克次体的检测，并进行了病原体分离和鉴定。结果从北京航空博物馆附近地区收集的刺猬和其体表寄生的中华革蜱中分离出２株斑点热群立克次体，分别命名为ＢＪＨ－９５株和ＢＪ－９５株，经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ和ＰＣＲ／ＲＦＬＰ技术进行了鉴定认为是西伯利亚立克次体。结果证明了该立克次体在蜱和动物宿主间呈水平传播，并且表明在被调查的旅游景点中除航空博物馆附近地区外，大多数景点基本上是北亚热的安全区。在刺猬中分离出西伯利亚立克次体为国内、外首次报道     

吉林省长白山区斑点热立克次体自然疫源地调查

目的　了解吉林省长白山区蜱传斑点热的自然疫源地情况。方法　利用立氏立克次体[相对分子质量 (Mr) 190× 10 3 ]外膜蛋白A(R .rOmpA)基因序列设计引物 ,对 6 83只蜱类标本进行聚合酶链反应 (PCR)检测 ,并随机抽取一株森林革蜱阳性扩增产物进行克隆与序列测定。结果　从森林革蜱和嗜群血蜱标本中检测出了斑点热立克次体DNA片段 ,阳性率分别为 5 3.81%和 7.4 1% ;所测序列与前苏联的DnS 14株的同源性为 10 0 .0 0 % ,与DnS 2 8和RpA 4的同源性均为99.0 0 % ;而与国内所检测的BJ 90、HLJ 0 5 4的同源性分别为 88.0 0 %和 86 .0 0 %。结论　长白山区存在斑点热的自然疫源地 ,存在与DnS 14株型别一致的斑点热立克次体 ,在中国系首次发现。     

甘肃省崆峒山蜱类群落结构研究

目的研究崆峒山的蜱类群落结构。方法采用布旗法、畜诱法采集蜱类。结果共采获10种蜱，日本血蜱为崆峒山的优势蜱种，针阔混交林灌丛中，森林革蜱的指数最高；高山草甸与农作区，日本血蜱的指数最高。结论每种蜱在不同生态环境中的指数有明显的特点。     

Identification and distribution of nine tick-borne spotted fever group Rickettsiae in the Country of Georgia

Rickettsial pathogens cause diseases that vary in severity and clinical presentation. Rickettsia species transmitted by ticks are mostly classified within the spotted fever group of rickettsiae (SFGR) and are often associated with febrile diseases. Preliminary studies have detected three human-pathogenic SFGR from ticks in Georgia: Rickettsia aeschlimannii, Rickettsia raoultii, and Rickettsia slovaca. To more broadly assess the presence of tick-borne rickettsiae from Georgia we examined 1594 ticks, representing 18 species from five genera (Ixodes, Hyalomma, Haemaphysalis, Dermacentor, and Rhipicephalus), collected from eight regions of Georgia. A total of 498 tick DNA samples extracted from single ticks or pooled ticks were assessed by molecular methods. Genus-specific Rick17b and species-specific qPCR assays were used to identify six rickettsiae: R. aeschlimannii, R. raoultii, R. slovaca, Rickettsia conorii subsp. conorii, Rickettsia massiliae, and Rickettsia monacensis. Tick samples that were positive for Rickettsia, but not identified by the species-specific assays, were further evaluated by multi-locus sequence typing (MLST) using sequences of four protein-coding genes (gltA, ompA,ompB, sca4). Three additional Rickettsia species were identified by MLST: Candidatus Rickettsia barbariae, Rickettsia helvetica, and Rickettsia hoogstraalii. Overall, nine species of Rickettsia (six human pathogens and three species with unknown pathogenicity) were detected from 12 tick species of five different genera. A distribution map for the tick-borne rickettsiae revealed six newly identified endemic regions in Georgia.     

黑龙江省11个边境口岸蜱类调查

〔目的〕调查黑龙江省11个边境口岸蜱的种群组成。〔方法〕采用人工小时布旗法采集蜱。〔结果〕在黑龙江省11个边境口岸采获蜱3926只,计3属4种。林缘的优势种群为森林革蜱(95.9%);针阔混交林为全沟硬蜱(46.1%)和森林革蜱(31.8%)。不同口岸的蜱种组成有所不同。绥芬河口岸蜱密度指数最高(93.1%只/人工小时)。不同生境蜱密度指数有所不同。4种蜱的雌雄比:日本血蜱2.7:1,森林革蜱1.7:1,嗜群血蜱1.3:1,全沟硬蜱1.1:1。〔结论〕本次调查为黑龙江省边境口岸地区的蜱种群组成研究提供了依据。     

Novel PCR exclusion assay to detect spotted fever group rickettsiae in the lone star tick (Amblyomma americanum)

The lone star tick (Amblyomma americanum) is the most common and abundant human-biting tick in the southeastern United States where spotted fever rickettsioses frequently occur. However, the role of this tick in transmitting and maintaining pathogenic and non-pathogenic spotted fever group rickettsiae (SFGR) remains poorly defined. This is partially due to the high prevalence and abundance of Rickettsia amblyommatis in most populations of A. americanum. Many molecular assays commonly employed to detect rickettsiae use PCR primers that target highly conserved regions in the SFGR so low abundance rickettsia may not be detected when R. amblyommatis is present. It is costly and inefficient to test for low abundance rickettsial agents with multiple individual specific assays even when they are multiplexed, as most samples will be negative. Real time PCR assays may also be hampered by inadequate limits of detection (LODs) for low abundance agents. We exploited the absence of an otherwise relatively SFGR-conserved genome region in R. amblyommatis to design a hemi-nested PCR-assay which has a sensitivity of 10 copies in detecting the presence of most SFGR, but not R. amblyommatis in DNA of infected lone star ticks. This deletion is conserved in 21 isolates of R. amblyommatis obtained from multiple states. We demonstrated the assay’s utility by detecting a pathogenic SFGR, Rickettsia parkeri, in 15/50 (30 %) of field collected A. americanum ticks that were previously screened with conventional assays and found to be positive for R. amblyommatis. These co-infected ticks included 1 questing female, 6 questing nymphs, and 8 attached males. The high prevalence of R. parkeri among host-attached ticks may be due to several variables and does not necessarily reflect the risk of disease transmission from attached ticks to vertebrate hosts. This novel assay can provide accurate estimates of the prevalence of less common SFGR in A. americanum and thus improve our understanding of the role of this tick in the maintenance and transmission of the SFGR commonly responsible for human rickettsioses.     

北京市昌平区西伯利亚立克次体的分离和鉴定

目的 对北京市昌平区中国疾病预防控制中心园区内刺猬携带的中华革蜱进行斑点热群立克次体（SFGR）的分离和鉴定。方法 采用形态学和分子生物学方法对SFGR进行鉴定,并进行系统进化特征分析。结果 SFGR对DH82细胞产生明显细胞病变;Gimenez染色后,可见较多清晰的立克次体被染成紫红色;细菌16S基因测定后,西伯利亚立克次体246株和西伯利亚立克次体BJ-90株相应核苷酸序列的同源性均为100%;系统进化分析显示,SFGR位于西伯利亚立克次体进化分支内,确认其为西伯利亚立克次体。结论 北京市昌平区存在西伯利亚立克次体,该地区存在北亚热自然疫源地的可能性。