联合间期和中期荧光原位杂交确定成人急性白血病患者11q23/MLL异常

目的 探讨快速、敏感、有效揭示11q23／MLL基因重排的方法，确定11q23／MLL异常存成人急性白血病（AL）中的发生情况及其临床特征，指导AL风险治疗。方法112例成人AL患者骨髓细胞经24h短期培养按常规方法制备染色体标本，R显带行核型分析；LSIMLL双色分离信号DNA探针行间期荧光原位杂交（FISH）筛选异常信号，有异常信号者行中期FISH确定11q23／MLL基因重排。结果 112例AL患者FISH揭示9例11q23／MLL易位（检出率8．0％），其中常规细胞遗传学分析（CCA）只检出4例（检出率3．6％）。3例CCA示del（11）（q23）者FISH揭示2例为11q23／MLL易位，1例为11号染色体长臂末端缺失。在1例正常核型、1例11q＋和1例无11q23明显异常者，FISH揭示为11q23／MLL易位。除9例易何外，FISH揭示8例存在MLL基因扩增，包括多倍体、均匀染色区（hsr）和双微染色体（dmin）。AL伴11q23／MLL异常者多诊断为B系祖细胞急性淋巴细胞白血病（pro-B ALL）、急性单核细胞白血病（AMoL）或急性双表型白血病（BAL）。结论 使用MLL双色分离信号DNA探针行FISH确定11q23／MLL异常是快速敏感的方法，其检出率高于CCA，有效揭示11q23／MLL易位和扩增。临床诊断pro-B ALL、AMoL或BAL，尤其正常核型者应行FISH以确定11q23／MLL异常。     

常规细胞遗传学分析和荧光原位杂交方法检测白血病11q23/MLL基因重排

本研究比较常规细胞遗传学（conventional cytogenetics,CC）分析,间期荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization,FISH）技术及连续R显带后FISH（sequential R-banding and FISH）检测混合系列白血病（mixed lineage leukemia,MLL）基因重排的应用价值.应用常规细胞遗传学及间期FISH分析我院白血病患者37例,结果显示11q23＋/MLL＋患者10例,11q23^-/MLL＋患者2例（5.4%）,11q23^＋/MLL-患者3例（8.1%）,11q23^-/MLL-患者22例.部分病例CC与间期FISH方法检测11q23/MLL基因重排得到了不一致的结果.对6例患者进行连续R显带后FISH分析后,对照核型和FISH图都能清楚地看到MLL基因易位涉及的染色体.结论：为了给出准确的诊断,在检测11q23/MLL重排时需要进行常规细胞遗传学和间期FISH测定并结合两者结果来评定,必要时需做R显带后FISH或进一步的分子生物学分析.     

混合系白血病全长基因在AML-M4/M5患者中的突变检测

急性髓系白血病(AML)-M4、M5常有11号染色体异常,定位于11q23的混合系白血病(MLL)基因异常所形成的MLL-PTD和MLL融合基因在该病的发病机理中具有重要作用。但在该类白血病绝大多数未能检测出染色体水平异常,是否存在MLL基因的其他突变?本研究对MLL全长基因的外显子进行了测序分析。选取25例初发核型正常的AML M4、M5患者(排除MLL融合基因和MLL-PTD及M4eo),进行了MLL全长基因的外显子PCR扩增直接测序分析,对发现的突变在基因组DNA水平进行验证。利用Mass Array方法在正常对照样本和AML扩大样本中对发现的点突变进行检测。结果发现,在MLL的RD、PHD、TAD和SET功能域中存在着高频的缺失、插入及多个点突变;同时对照研究正常样本,发现也存在上述的变异,且突变频率无统计学差别(P>0.05)。结论:检测到的MLL基因发生在mRNA水平的缺失、插入和多个点突变,分别是MLL在转录水平的选择性剪接和MLL的单核苷酸多态性,它们共同构成了MLL的遗传多态性;这些MLL基因遗传多态性可能与AML M4、M5的发病不直接相关,对于治疗、预后及其他生物学表型的意义还有待进一步探讨。     

具有11q23染色体异常的急性髓系白血病的细胞生物学和临床生物学研究

为了研究伴11q23染色体异常的成人急性髓系白血病（AML）的形态学、免疫学、和临床特征,对210例初治AML患者进行了回顾性分析,包括细胞形态学、免疫表型、G带或R带核型分析和临床资料.结果表明：13例AML患者存在11q23易位和缺失（发生率为6.19%）,其中6例为M5a,4例为M5b,M4Eo、M3和M2各占1例,84.6%的病例为急性单核系白血病.免疫表型检测显示伴11q23异常的患者除了高表达造血干/祖细胞标志分子CD34和CD117等外,通常高表达单核系统相关标志分子,如CD14、CD15和CD11b.伴11q23异常组的化疗完全缓解率（CR）与正常核型对照组无明显差异（P=0.075）,但无病生存期（DFS）低于正常核型对照组（P＜0.001）.结论：伴11q23异常的AML占所有AML的6.19%,似与单核细胞的分化阻滞相关,临床预后不良.     

间期荧光原位杂交技术检测恶性血液病的11q23/MLL基因重排

目的分析伴有11q23／MLL基因重排的恶性血液病的细胞遗传学特点,探讨荧光原位杂交技术（FISH）在诊断及鉴定恶性血液病11q23／MLL基因重排中的价值。方法用间期FISH分析11q23／MLL基因易位细胞的30例恶性血液病患者的核型特征,用MLL双色分离探针绿色标记在（5′MLL,光谱绿）和（3′MLL,光谱桔红）。结果应用常规细胞遗传学及间期FISH分析白血病患者30例,结果显示11q23＋／MLL＋患者9例（30．0％）,12q23-／MLL＋患者4例（13．3％）,11q23＋／MLL-患者2例（6．7％）,11q23-／MLL-患者15例,检测到部分病例染色体核型分析与间期FISH方法检测11q23异常与MLL基因重排不一致。结论FISH在检测11q23／MLL基因重排方面与传统的常规细胞遗传学相比具有检出率高的优势,能更有效、直观地分析恶性血液病的染色体异常,对于恶性血液病的诊断以及异常染色体的检出具有广泛的应用前景。     

混合系白血病基因相关白血病骨髓细胞形态学特征

目的通过观察混合系白血病(Mixed lineage leukemia，MLL)基因相关白血病患者骨髓细胞形态学特征，了解MLL基因重排特征与FAB形态学分型的关系。方法用多重巢式RT-PCR方法检测214例白血病和淋巴瘤的常见白血病相关融合基因，选择有MLL基因异常的白血病患者骨髓细胞涂片做光镜下的形态学观察，比较具有不同MLL基因异常的白血病细胞的形态学差异。结果患者中发现MLL基因异常者14例，其中有MLL／AF6融合基因者5例，骨髓细胞形态学均为FAB—M5型，具有典型的原始单核细胞白血病的特征：在光镜下均表现为细胞体积大，染色质疏松，细胞核折叠，有1～2个大而清晰的核仁，胞质嗜碱性呈毛玻璃样。多数细胞核旁淡染区明显，胞浆内可见细长型奥氏小体，染色体纤细。过氧化物酶染色阴性，非特异脂酶染色阳性，可被氟化钠抑制。其他MLL基因异常7例，包括MLL部分串联重复(PTD)，MLL／AF10融合基因，MLL／AF4阳性者，分别属于M1，M4型，MDS和幼稚淋细胞白血病。结论MLL基因异常主要见于与单核细胞相关的白血病，MLL／AF6重排可能是急性原始单核细胞型白血病一种独立亚型的重要标志，该融合基因可能与单核细胞分化有更密切的关系。     

Early G2/M checkpoint failure as a molecular mechanism underlying etoposide-induced chromosomal aberrations

Topoisomerase II (Topo II) inhibitors are cell cycle-specific DNA-damaging agents and often correlate with secondary leukemia with chromosomal translocations involving the mixed-lineage leukemia/myeloid lymphoid leukemia (MLL) gene on chromosome 11 band q23 (11q23). In spite of the clinical importance, the molecular mechanism for this chromosomal translocation has yet to be elucidated. In this study, we employed 2-color FISH and detected intracellular chromosomal translocations induced by etoposide treatment. Cells such as ataxia-telangiectasia mutated-deficient fibroblasts and U2OS cells, in which the early G2/M checkpoint after treatment with low concentrations of etoposide has been lost, executed mitosis with etoposide-induced DNA double-strand breaks, and 2-color FISH signals located on either side of the MLL gene were segregated in the postmitotic G1 phase. Long-term culture of cells that had executed mitosis under etoposide treatment showed frequent structural abnormalities of chromosome 11. These findings provide convincing evidence for Topo II inhibitor-induced 11q23 translocation. Our study also suggests an important role of the early G2/M checkpoint in preventing fixation of chromosomal abnormalities and reveals environmental and genetic risk factors for the development of chromosome 11 translocations, namely, low concentrations of Topo II inhibitors and dysfunctional early G2/M checkpoint control.     

MLL基因重排急性白血病患儿的临床和生物学特点研究

目的对儿童急性白血病进行混合谱系白血病(mixed lineage leukemia，MLL)基因重排的临床和实验研究：方法应用MLL双色荧光原位杂交(FISH)基因探针进行双色FISH，以13对引物行多重RT—PCR检测融合基冈，并联合染色体R带核型分析及流式细胞仪免疫表型检测，对298例儿童急性白血病中16例含有MLL基因重排患儿进行分析：结果MLL基因重排的白血病在儿童急性白血病中占5.4％，而在婴幼儿白血病中占56．3％；对106例患进行多重RT—PCR，检测到涉及MLL基因重排11例，其中MLL／AF42例，MLL／AF61例，MLL／AF6、MLI／ELL合并MLL／AFX或HOX11各1例，MLL／AF92例，MLL／AF101例，MLI／ELL2例。串联重复dup11q231例，HOX活化1例；27例进行了FISH检测，发现9例有MLL重排，其阳性率为36．0％；16例MLL基因重排患儿中14例(87．5％)有克隆性染色体异常，其中11例累及11号染色体[t(4；11)2例，t(6；11)、t(8；11)、t(7；8；11)、t(9；11)各1例， 112例，11q-3例]；16例MLL基因重排患儿中11例为B系ALL，以B祖细胞或前B细胞白血病为主，5例为急性单核细胞白血病，其中3例有CD7和CD2淋系抗原表达；16例MLL基因重排患儿中8例接受治疗，7例获得完全缓解。结论多重RT—PCR和FISH联合是检测MLL重排最精确和灵敏的方法，MLL基冈重排中包括易位、缺失和重复。MLL基因重排的检测对儿童急性白血病预后判断和治疗方案的选择具有重要意义，并且对WHO分型将其单独列为11q23／MLL白血病提供了有力的依据。     

儿童急性白血病MLL基因的检测及临床意义

目的对儿童急性白血病(acute leukem ia,AL)MLL基因重排进行临床和实验研究。方法采用荧光原位杂交(FISH)和多重RT-PCR技术,联合染色体R带核型分析及流式细胞仪免疫表型检测,对27例儿童AL进行分析。结果25例儿童AL中的9例(36.0%)有MLL重排,ALL中的发生率为4.0%,AML中的发生率为3.7%。多重RT-PCR检测到MLL易位产生的融合基因4例,分别为MLL/AF4 2例、MLL/AF9和MLL/AF10各1例;27例白血病患儿进行了染色体核型分析,22例(81.5%)有克隆性染色体异常。在MLL重排中ALL均为B系ALL,AML均为M5b。结论MLL基因重排可能与儿童急性单核细胞白血病和B细胞系ALL有关。     

Dimerization of MLL fusion proteins and FLT3 activation synergize to induce multiple-lineage leukemogenesis

The mechanisms by which mixed-lineage leukemia (MLL) fusion products resulting from in utero translocations in 11q23 contribute to leukemogenesis and infant acute leukemia remain elusive. It is still controversial whether the MLL fusion protein is sufficient to induce acute leukemia without additional genetic alterations, although carcinogenesis in general is known to result from more than 1 genetic disorder accumulating during a lifetime. Here we demonstrate that the fusion partner-mediated homo-oligomerization of MLL-SEPT6 is essential to immortalize hematopoietic progenitors in vitro. MLL-SEPT6 induced myeloproliferative disease with long latency in mice, but not acute leukemia, implying that secondary genotoxic events are required to develop leukemia. We developed in vitro and in vivo model systems of leukemogenesis by MLL fusion proteins, where activated FMS-like receptor tyrosine kinase 3 (FLT3) together with MLL-SEPT6 not only transformed hematopoietic progenitors in vitro but also induced acute biphenotypic or myeloid leukemia with short latency in vivo. In these systems, MLL-ENL, another type of the fusion product that seems to act as a monomer, also induced the transformation in vitro and leukemogenesis in vivo in concert with activated FLT3. These findings show direct evidence for a multistep leukemogenesis mediated by MLL fusion proteins and may be applicable to development of direct MLL fusion-targeted therapy.     

11q23异常儿童急性白血病的临床及实验室分析

目的　研究伴 11q2 3异常儿童急性白血病 (AL)的形态学、免疫学、细胞遗传学与其临床特征和预后的关系。方法　对 32 0例AL中 18例伴有 11q2 3异常的患儿进行回顾性分析 ,包括细胞形态学观察、流式细胞仪细胞免疫表型检测、R带核型分析和临床预后。以同期核型正常的 2 0例AL患儿作为对照。结果　 18例伴 11q2 3异常AL患儿中 14例为急性淋巴细胞白血病 (ALL) ,4例为急性髓系白血病 ,其中M5b3例 ,M2a1例。进行免疫表型分析的 16例患儿中 ,13例有淋系抗原表达 ,3例除表达髓系抗原外均显示CD34 阳性。异常核型有 6种 :t(4 ;11) (q2 1;q2 3) 6例 ;t(10 ;11) (p13;q2 3) 3例 ;t(11;19) (q2 3;p13) 1例 ;t(11;17) (q2 3;q11) 1例 ;t(8;11) (q2 3;q2 3) 1例 ;del(11) (q2 3) 6例。本组AL完全缓解 (CR)率为 72 .2 % ,与对照组的 80 .0 %相比 ,差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ,而死亡率为 6 1.1% ,与对照组的 2 5 .0 %相比 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论　 11q2 3异常主要见于儿童ALL和急性单核细胞白血病 ,具有较为独特的临床、血液学和预后特点。     

Myeloid cell differentiation arrest by miR-125b-1 in myelodysplastic syndrome and acute myeloid leukemia with the t(2;11)(p21;q23) translocation

Most chromosomal translocations in myelodysplastic syndromes (MDS) and acute myeloid leukemia (AML) involve oncogenes that are either up-regulated or form part of new chimeric genes. The t(2;11)(p21;q23) translocation has been cloned in 19 cases of MDS and AML. In addition to this, we have shown that this translocation is associated with a strong up-regulation of miR-125b (from 6- to 90-fold). In vitro experiments revealed that miR-125b was able to interfere with primary human CD34⁺ cell differentiation, and also inhibited terminal (monocytic and granulocytic) differentiation in HL60 and NB4 leukemic cell lines. Therefore, miR-125b up-regulation may represent a new mechanism of myeloid cell transformation, and myeloid neoplasms carrying the t(2;11) translocation define a new clinicopathological entity.     

急性单核细胞白血病M5a和M5b细胞遗传学与临床表现的比较

为了比较急性单核细胞白血病M5a和M5b细胞遗传学差异，并研究其与临床行为之间的相互关系，采用骨髓直接法和24小时短期培养法制备染色体标本，用G显带技术对58例成人初发急性单核白血病细胞进行核型分析，同时对其临床资料进行回顾性研究。结果表明：58例患者中正常核型28例，异常核型30例，其中正常核型在M5b中出现率高于M5a（P=0．0001），异常核型中11q23异常和＋8染色体在M5a中均较M5b常见（P〈0．01）；临床上异常核型的M5患者常有高白细胞（WBC）计数，中枢神经系统浸润，完全缓解（CR）率低及存活期明显缩短的特征。结论：急性单核细胞白血病在遗传和临床上是一组异质性疾病，但M5a和M5b似乎具有各自独特的遗传学背景和临床表现。     

Mll partial tandem duplication induces aberrant Hox expression in vivo via specific epigenetic alterations

We previously identified a rearrangement of mixed-lineage leukemia (MLL) gene (also known as ALL-1, HRX, and HTRX1), consisting of an in-frame partial tandem duplication (PTD) of exons 5 through 11 in the absence of a partner gene, occurring in approximately 4%-7% of patients with acute myeloid leukemia (AML) and normal cytogenetics, and associated with a poor prognosis. The mechanism by which the MLL PTD contributes to aberrant hematopoiesis and/or leukemia is unknown. To examine this, we generated a mouse knockin model in which exons 5 through 11 of the murine Mll gene were targeted to intron 4 of the endogenous Mll locus. Mll(PTD/WT) mice exhibit an alteration in the boundaries of normal homeobox (Hox) gene expression during embryogenesis, resulting in axial skeletal defects and increased numbers of hematopoietic progenitor cells. Mll(PTD/WT) mice overexpress Hoxa7, Hoxa9, and Hoxa10 in spleen, BM, and blood. An increase in histone H3/H4 acetylation and histone H3 lysine 4 (Lys4) methylation within the Hoxa7 and Hoxa9 promoters provides an epigenetic mechanism by which this overexpression occurs in vivo and an etiologic role for MLL PTD gain of function in the genesis of AML.     

一株伴有t(6;11)(q27;q23)和p53基因异常的人单核细胞白血病细胞系SHI-1的建立及鉴定

目的建立人急性单核细胞白血病(AML—M5b)细胞系并研究其生物学特性。方法从1例AML—M5b患者白血病复发时的骨髓标本分离出单个核细胞，用液体培养法进行培养。采用瑞特染色、电子显微镜、细胞化学染色、流式细胞仪、R显带核型分析、逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR)、荧光原位杂交(FISH)、半固体甲基纤维素集落培养、裸小鼠致瘤实验、荧光定量PCR、DNA荧光染色法及支原体肉汤培养法、短串联重复序列(STR)-PCR、p53基因的PCR扩增产物测序、多色FISH(M—FISH)和^3H—TdR掺入实验等方法对SHI-1细胞的生物学特性进行了鉴定、结果建立了1个可持续增殖的人单核细胞白血病细胞系SHI-1；形态学和免疫表型呈现典型的单核系特征；核型分析显示SHI-1细胞系有和患者复发时骨髓细胞完全相同的异常：46，XY，t(6；11)(q27；q23)，del(17)(p11)；RT—PCR检出MLL—AF6融合基因的转录本；FISH俭测结果显示存在6号和11号染色体之间易位、MLL基因的重排和p53基因的缺失；PCR产物测序结果显示1个p53等位基因6号外显子发生点突变ATC→ACC集落培养显示SHI-1细胞具有较强的集落形成能力；皮下接种4只裸小鼠均形成实体肿瘤；荧光定量PCR提示无EB病毒感染；DNA荧光染色法和支原体肉汤培养法术检出支原体；M—FISH证实传代至2003年3月的SHI-1细胞除有t(6；11)、del(17)(p11)外，还有t(7；13)所致的衍生7号染色体、18单体和来自8号染色体的微小体；STR—PCR结果显示SHI-1细胞系确实来自患者原代白血病细胞；IL4-和IL-15可促进SHI-1细胞的增殖，IFN-1、TNFα、IL-2、PDGF和IL-7可抑制SHI-1细胞的增殖。结论SHI-1是1个伴有t(6；11)(q27；q23)和P53基因异常的裸小鼠高致瘤性人单核细胞白血病细胞系，为白血病研究提供了一个新的有价值的工具。     

细胞形态检查在伴AML1-ETO及CBFβ-MYH11阳性急性髓系白血病中的作用

目的探讨伴AML1-ETO和伴CBFβ-MYH11阳性急性髓系白血病患者骨髓细胞形态、免疫表型、染色体核型特点及预后基因表达,以及形态对此类白血病的提示作用。方法瑞士吉姆萨染色法观察骨髓细胞形态,流式细胞术检测白血病细胞免疫表型,PCR检测白血病43种融合基因,G显带法观察染色体核型,一代测序毛细管电泳法方法检测髓系预后基因。结果伴AML1-ETO阳性的患者6例(37.5%)以原始粒细胞增多为主,8例(50%)以核浆发育不平衡的异常中幼粒细胞增多为主,2例(12.5%)以原始、幼稚单核细胞增生为主;伴CBFβ-MYH11阳性6例(85%)以原始、幼稚单核细胞、原始粒细胞及异常嗜酸性粒细胞增生为主,1例以原始、幼稚单核细胞增生,未见异常嗜酸性粒细胞增多。结论AML1-ETO和CBFβ-MYH11阳性形态发现率分别为87.5%和86%,提示分子生物学检查在急性髓系白血病诊断中具有不可替代的作用。     

分化抑制因子nm23基因在急性白血病细胞中的表达及临床意义

目的 探讨分化抑制因子nm23在急性白血病细胞中的表达水平及临床意义。方法 应用RT-PCR半定量分析34例初诊急性白血病[22例急性髓系白血病(AML)，12例急性淋巴细胞白血病(ALL)]，9例临床完全缓解AML(AML-CR)，4例慢性粒细胞白血病(CML)患的骨髓标本中nm23-H1、nm23-H2的mRNA表达水平，并分析了其与一些临床指标的关系。结果 nm23-H1基因在急性白血病，尤其是粒-单核细胞及单核细胞白血病(M4,M5)中的表达水平明显增高；经化疗完全缓解后的AML患nm23基因表达显低于初诊AML患；在AML中，nm23-Hl的高表达与外周血白细胞计数、乳酸脱氢酶、CD7及髓外浸润等预后较差指标呈正相关性，而与特征性染色体异常如t(8；21)和t(15；17)呈负相关性。结论 nm23-Hl基因在急性白血病特别是粒．单核细胞白血病(M4,M5)中表达较正常人明显增高，可能是AML预后较差的一种标志。     

36例11q23/Mll融合基因白血病的分子生物学和临床特点分析

本研究分析急性白血病(AL)伴11q23/mll融合基因阳性的患者临床和分子生物学特点,探讨适宜的治疗策略。对36例急性白血病伴mll融合基因阳性患者的骨髓和外周血细胞形态学、免疫学、分子生物学、染色体特征以及患者治疗、生存情况进行总结分析。结果表明,在494例急性白血病患者中,mll融合基因阳性共36例,占7.2%,其中32例为急性髓细胞白血病(AML),免疫表型均为髓系表达,有5例同时伴淋系表达;4例为急性淋巴细胞白血病(ALL),免疫表型为B淋巴系表达,有3例同时伴有非系别确定性髓系标志表达。36例患者中29例(80%)可检测到克隆性染色体异常,其中有22例检测到11号染色体改变。对所有患者均进行了化疗,总缓解率为47.2%,25例缓解后的病人有10例在6个月内复发,其复发率为40%,有9例进行了异基因造血干细胞移植,其中7例移植后存活;共死亡24例。36例患者的中位生存期为16(2-46)个月,2年总生存率(OS)为41.4%,9例移植病人2年OS为87.5%。结论:白血病伴mll融合基因阳性的患者化疗效果差,易复发,预后差,异基因造血干细胞移植可明显改善MLL融合基因阳性AL患者的生存。     

间期荧光原位杂交技术对诊断核心结合因子急性髓系白血病的价值

本研究主要探讨间期荧光原位杂交技术在核心结合因子急性髓系白血病(CBF AML)诊断中的价值。采用间期荧光原位杂交技术(I-FISH),分别应用AML1-ETO双色双融合探针和荧光素直接标记的双色断裂点分离基因探针CBFβ-MYH11检测82例AML-M2及43例AML-M4/M5患者白血病细胞的细胞遗传学异常,并与R显带常规细胞遗传学(CC)检测结果进行比较分析。结果表明:82例AML-M2患者中FISH检测AML1-ETO融合基因阳性患者为25例(30.5%),CC检测存在t(8;21)(q22;q22)染色体异常为23例(28.0%),所有FISH检测AML1-ETO阳性患者中典型的阳性信号模式1R1G2F为22例(88.0%);不典型的信号模式包括1R2G1F和2R1G2F共3例(12.0%)。在所有43例AML-M4/M5患者中,FISH检出inv(16)(p13;q22)/t(16;16)(p13;q22)信号模式(1R1G1F)为10例(23.3%),CC检测出存在inv(16)(p13;q22)/t(16;16)(p13;q22)为2例(4.6%),FISH检测灵敏度显著高于CC(p<0.05)。结论:FISH作为新型细胞遗传学分析技术可以弥补CC技术灵敏度较低、检测周期长等不足,两者结合可以成为CBF AML诊断乃至微小残留病监测的有力工具。     

混合系白血病基因重排的检测方法及其临床意义

为了研究混合系白血病（MLL）基因重排在急性白血病（AL）中的发生率、融合基因类型及其临床意义，用荧光原位杂交技术检测60例急性白血病（AL）患者MLL基因重排，对于MLL基因重排阳性的患者，用巢式RT—PCR方法检测MLL基因重排形成的6种常见融合基因类型。结果表明：7例AL患者有MLL基因重排，发生率为11．67％，其中2例为急性髓细胞白血病M5（AML—M5），融合基因均为MLL／AF9；男5例为B细胞系急性淋巴细胞白血病（B—ALL），其中2例融合基因为MLL／ENL，1例MLL／AF4，2例未扩增出融合基因产物。结论：荧光原位杂交技术是检测ALMLL基因易位重排的快速、特异、灵敏的方法，巢式RT-PCR是检测MLL基因重排产生的融合基因类型的简便可行的方法；MLL基因重排的检测对急性白血病预后判断和治疗方案的选择具有重要意义。