白藜芦醇对肺癌紫杉醇耐药细胞的增殖抑制作用及其机制

目的：研究白藜芦醇作用后人肺腺癌紫杉醇耐药细胞对紫杉醇敏感性的改变,并探讨其作用机制。方法：建立人肺腺癌紫杉醇耐药细胞A549/Taxol-R,用不同浓度白藜芦醇、紫杉醇单独或联合干预A549/Taxol-R细胞,MTT法检测细胞增殖抑制率;概率单位法计算半数抑制浓度（IC₅₀）;观察不同浓度白藜芦醇处理后,紫杉醇对A549/Taxol-R细胞IC₅₀的变化;流式细胞术检测细胞凋亡水平;Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和Caspase-3的表达。结果：白藜芦醇对A549/Taxol-R细胞增殖的抑制率具有浓度和时间的双重依赖性（P均 < 0.05）。白藜芦醇处理后,紫杉醇对A549/Taxol-R细胞的IC₅₀值下降,从（17.50±1.24）μg/mL降低至（4.18±0.62）μg/mL。白藜芦醇和紫杉醇联合干预的A549/Taxol-R细胞凋亡率、坏死率高于单独干预组（P < 0.05）,联合干预组A549/Taxol-R细胞的Bax、Caspase-3的表达较单独干预组上调,而Bcl-2的表达则相对下调（P < 0.05）。结论：白藜芦醇可能通过促进细胞的凋亡来增强人肺腺癌紫杉醇耐药细胞对紫杉醇的敏感性,其机制可能和促进Bax、Caspase-3的表达,下调Bcl-2的表达有关。     

组蛋白去乙酰化酶抑制剂SAHA与紫杉醇联用诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡的实验

目的 探讨组蛋白乙酰化抑制剂SAHA联合紫杉醇体外对宫颈癌HeLa细胞增殖抑制效果及其机制。方法 分别设置空白对照组SAHA（10 μmol/L）组、紫杉醇（10 nmol/L）组、SAHA（10 μmol/L）+紫杉醇（10 nmol/L）联合组,采用MTT法检测各组HeLa细胞的抑制率,采用流式细胞术检测HeLa细胞凋亡情况和细胞周期。结果 MTT结果显示经SAHA组、紫杉醇组和联合组分别处理24、48 h后,与SAHA和紫杉醇组比较,联合组能够显著抑制HeLa细胞的增殖,差异有统计学意义,且二者具有叠加作用（Q=0.861, Q=1.25）; HeLa细胞的凋亡实验结果显示联合组的凋亡率分别高于紫杉醇组、SAHA组;HeLa细胞周期实验发现：联合组处理后的HeLa细胞主要处于G0/G1期,提示SAHA与紫杉醇联合使用能够抑制HeLa细胞有丝分裂过程中的DNA合成和复制。结论 SAHA与紫衫醇联用能够抑制宫颈癌HeLa细胞增殖,增强诱导HeLa细胞凋亡的能力,阻滞细胞周期,最终增强抗肿瘤的能力。     

RNA结合基元蛋白24通过调控HOTAIR表达抑制鼻咽癌细胞增殖

目的： 探讨RNA结合基元蛋白24（RBM24）抑制鼻咽癌细胞增殖的可能机制。方法： 分别在永生化鼻咽上皮细胞N5、NP69和鼻咽癌细胞CNE1中转染RBM24 siRNA构建敲低RBM24表达的细胞模型。建模后分别于1~5 d用CCK-8法检测细胞增殖活性，用实时荧光PCR法检测细胞HOX转录反义RNA（HOTAIR）的表达水平。结果： 实时荧光PCR法检测结果表明敲低RBM24表达的细胞模型构建成功。第4天时RBM24敲低组的CNE1、N5细胞增殖率（分别为5.11±0.03和2.09±0.18）与相应的对照组细胞（分别为4.53±0.05和1.73±0.12）相比均升高（P均 < 0.05），且CNE1、N5细胞的HOTAIR mRNA表达水平（分别为67.54±1.87和7.81±1.90）较相应的对照组（1.00±0.21和1.00±0.19）亦升高，差异均有统计学意义（P均 < 0.05），而NP69细胞的增殖率和HOTAIR mRNA表达水平变化不明显（P均 > 0.05）。结论： RBM24可抑制鼻咽癌CNE1细胞和永生化鼻咽上皮N5细胞的增殖，其机制可能是通过抑制HOTAIR表达起作用。     

RNA结合基元蛋白24通过调控HOTAIR表达抑制鼻咽癌细胞增殖

目的： 探讨RNA结合基元蛋白24（RBM24）抑制鼻咽癌细胞增殖的可能机制。方法： 分别在永生化鼻咽上皮细胞N5、NP69和鼻咽癌细胞CNE1中转染RBM24 siRNA构建敲低RBM24表达的细胞模型。建模后分别于1~5 d用CCK-8法检测细胞增殖活性，用实时荧光PCR法检测细胞HOX转录反义RNA（HOTAIR）的表达水平。结果： 实时荧光PCR法检测结果表明敲低RBM24表达的细胞模型构建成功。第4天时RBM24敲低组的CNE1、N5细胞增殖率（分别为5.11±0.03和2.09±0.18）与相应的对照组细胞（分别为4.53±0.05和1.73±0.12）相比均升高（P均 < 0.05），且CNE1、N5细胞的HOTAIR mRNA表达水平（分别为67.54±1.87和7.81±1.90）较相应的对照组（1.00±0.21和1.00±0.19）亦升高，差异均有统计学意义（P均 < 0.05），而NP69细胞的增殖率和HOTAIR mRNA表达水平变化不明显（P均 > 0.05）。结论： RBM24可抑制鼻咽癌CNE1细胞和永生化鼻咽上皮N5细胞的增殖，其机制可能是通过抑制HOTAIR表达起作用。     

舌鳞状细胞癌组织中硫氧还蛋白和硫氧还蛋白还原酶-1的表达及其意义

目的：研究硫氧还蛋白（Trx）和硫氧还蛋白还原酶-1（TrxR1）在舌鳞癌组织中的表达及其临床意义。方法：收集28例舌鳞癌组织和10例癌旁上皮组织,采用免疫组织化学SP三步法检测Trx和TrxR1蛋白在两种组织中的表达水平,并分析其表达与临床病理特征的关系。结果：舌鳞状细胞癌组织中的Trx和TrxR1蛋白表达水平明显高于癌旁正常上皮组织,癌组织和癌旁正常组织的Trx IOD值分别为（2.84±0.34）×10⁸和（3.91±3.00）×10⁷（P < 0.01）,TrxR1 IOD分别为（1.88±0.29）×10⁸和（0.69±0.32）×10⁷（P < 0.05）;Trx和TrxR1蛋白表达水平在不同肿瘤大小、分化程度组间表达的差异均具有统计学意义（P均 < 0.05）;Trx和TrxR1表达水平之间呈正相关关系（r=0.504,P < 0.05）,且Trx和TrxR1高表达组与低表达组的生存率差异具有统计学意义（P < 0.05）。结论：硫氧还蛋白及其还原酶-1可能为舌鳞状细胞癌的药物治疗靶点和早期诊断、肿瘤筛查的重要临床指标。     

miR-95与胃癌细胞洛铂 敏感性的关系及 作用机制研究

目的：探讨miR-95与胃癌细胞洛铂敏感性的关系及作用机制。方法：收集30例手术切除的胃癌组织及癌旁组织标本,实时定量PCR（qPCR）法检测组织中miR-95的表达情况,CCK-8法检测洛铂对胃癌组织细胞的体外抑制率。采用miR-95抑制物（anti-miR-95）和miR-95模拟物（miR-95 mimics）分别转染人胃癌细胞株SGC7901,检测转染前后细胞对洛铂敏感性的变化;采用qPCR及Western blot法检测细胞耐药相关基因MDR1、GST-π、LRP、Survivin、xIAP、Bad mRNA和蛋白的表达。结果：qPCR检测结果显示,30例胃癌组织miR-95的相对表达水平（0.106±0.023）显著高于癌旁组织（0.046±0.025）（P < 0.05）。以miR-95表达均值为界将胃癌组织分为miR-95高表达组17例,低表达组13例。洛铂对miR-95表达水平高的胃癌细胞的抑制率低于miR-95低水平者（P < 0.05）。anti-miR-95转染后,SGC7901细胞对洛铂的敏感性明显增高（P < 0.01）,耐药相关基因MDR1、Survivin、xIAP mRNA和蛋白表达水平明显降低（P < 0.05）,而Bad mRNA和蛋白表达水平明显增高（P < 0.05）。miR-95 mimics转染后,洛铂对SGC7901细胞的抑制率明显增加（P < 0.01）,耐药相关基因MDR1、Survivin、xIAP mRNA和蛋白表达水平明显升高（P < 0.05）,而Bad mRNA和蛋白表达水平明显降低（P < 0.05）。结论：miR-95通过调节一些耐药基因的表达影响胃癌组织和细胞对洛铂的敏感性。     

p38MAPK基因对PM2.5染毒HK-2细胞部分癌基因和凋亡相关基因表达的影响

目的：探讨p38MAPK基因对PM_2.5染毒人肾上皮细胞（HK-2）部分癌基因和凋亡相关基因表达的影响。方法：根据GenBank提供的p38MAPK mRNA序列,设计合成干扰序列,将重组慢病毒载体转染HK-2细胞,构建p38MAPK基因沉默细胞株。分别采用实时荧光定量PCR （qPCR）和Western blot法检测p38MAPK mRNA和蛋白的表达水平鉴定沉默效果。用50 μg/mL的PM_2.5混悬液分别染毒正常HK-2细胞和p38MAPK基因沉默细胞24 h,利用荧光定量PCR和Western blot检测癌基因c-myc,c-fos、p53和凋亡相关基因Caspase-8、Caspase-9、Bcl-2的mRNA和蛋白的相对表达水平。结果：qPCR和Western blot检测结果显示,与正常HK-2细胞比较,p38MAPK基因沉默细胞中p38MAPK mRNA的表达下降了58.50%,p38MAPK蛋白表达水平下降了51.33%（P<0.01）。PM_2.5混悬液对HK-2细胞和p38MAPK基因沉默HK-2细胞染毒后,qPCR检测结果显示,与正常HK-2细胞未染毒组比较,正常HK-2细胞PM_2.5染毒组中c-myc、c-fos、Caspase-8和Casepase-9基因表达分别升高39.89%、15.12%、19.47%和15.45%,p53和Bcl-2基因表达分别下降21.54%和31.77%,差异均具有统计学意义（P<0.05）;与正常HK-2细胞PM_2.5染毒组比较,p38MAPK基因沉默HK-2细胞PM_2.5染毒组中c-myc、c-fos、p53、Caspase-8和Caspase-9 mRNA表达分别下降了84.55%、63.55%、34.49%、37.19%和54.97%,差异均具有统计学意义（P<0.05）。Western blot检测结果显示,与正常HK-2细胞未染毒组比较,正常HK-2细胞PM_2.5染毒组中的c-myc和Caspase-8蛋白表达增加,Bcl-2蛋白表达减少;与正常HK-2细胞PM_2.5染毒组比较,p38MAPK基因沉默HK-2细胞PM_2.5染毒组中的c-myc、Caspase-8和Bcl-2蛋白表达减少（均为P<0.05）。结论：成功构建了p38MAPK基因沉默细胞株,PM_2.5可引起HK-2细胞癌基因和凋亡相关基因表达水平升高,p38MAPK基因可能参与PM_2.5对HK-2细胞的毒性作用过程。     

纳米镍对大鼠睾丸生精-支持共培养细胞的凋亡作用及机制研究

目的：研究纳米镍对大鼠睾丸生精-支持共培养细胞的作用及其相关机制。方法：以体外共培养的大鼠睾丸生精-支持共培养细胞为实验对象,分别加入不同浓度的纳米镍（0、25、50、100、200、400和800 μg/mL）染毒24 h后,采用MTT法检测细胞存活率,Hoechst33258染色法检测细胞凋亡形态及Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡率;lncRNA基因芯片检测细胞凋亡相关lncRNA的差异表达。结果：与对照组相比,不同浓度纳米镍染毒后,细胞存活率均降低（P < 0.01）,并呈剂量效应关系（P < 0.01）。Hoechst33258染色结果显示,与对照组比较,纳米镍染毒组细胞核或细胞质内显示出浓染致密的颗粒块状荧光及明显核形态变化。Annexin V/PI双染法流式检测结果显示,染毒浓度为25、50、100、200、400 μg/mL时,细胞凋亡率分别为8.80%±0.50%、11.00%±0.70%、12.53%±0.71%、15.95%±0.54%和17.80%±0.76%,各浓度组细胞凋亡率与对照组比较均明显增加（P < 0.01）,且呈浓度效应关系（P < 0.01）。LncRNA基因芯片检测结果显示,与凋亡相关的lncRNA共169个,其中,100 μg/mL纳米镍染毒组与对照组比较,上调的有117个,下调的有52个。结论：纳米镍能引起大鼠睾丸生精-支持共培养细胞凋亡,lncRNA可能在其中起重要作用。     

重组人 P53 腺病毒联合紫杉醇对宫颈癌HeLa细胞的抑制作用及其机制

目的： 探讨重组人 P53 腺病毒（recombinant human adenovirus-P53,rAd-P53）联合紫杉醇对宫颈癌HeLa细胞增殖、凋亡及血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）表达的影响。 方法： MTT法检测紫杉醇、rAd-P53单独或联合应用后HeLa细胞的增殖;DAPI染色法检测紫杉醇、rAd-P53单独或联合作用48 h后HeLa细胞的凋亡;Western blotting法检测紫杉醇、rAd-P53单独或联合作用后HeLa细胞VEGF的表达情况。 结果： 紫杉醇、rAd-P53单独或联合作用24~72 h均能抑制HeLa细胞的增殖,抑制作用具有时效和量效关系,且联合用药组对HeLa细胞的抑制率显著高于单用紫杉醇组及rAd-P53组（P<0.05）;联合作用时的相互作用系数（coefficient of drug interaction,CDI）均<1,说明两者具有协同作用;rAd-P53（5×107VP/ml）联合紫杉醇（3 μg/ml）作用48 h后,对HeLa细胞增殖的抑制率高于两药单用组\[（54.0±0.92）% vs （31.8±0.58）%、（27.2±0.55）%,P<0.05\]。联合用药组HeLa细胞的凋亡率也显著高于紫杉醇组、rAd-P53单用组\[（83±0.07）% vs（36±0.04）%、（62±0.05）%,P<0.05\]。联合用药组HeLa细胞中VEGF的表达显著低于两单独用药组,HeLa细胞中VEGF表达分别下降（81±0.08）%、（45±0.07）%和（60±0.06）%（P<0.05）。 结论： rAd-P53和紫杉醇联合用药抑制HeLa细胞的增殖、诱导细胞凋亡的效果优于单独用药,其机制可能与下调VEGF表达有关。     

干扰HMGB1基因表达对食管鳞癌细胞侵袭迁移及放射敏感性的影响

目的：探讨干扰HMGB1基因对X线照射后食管鳞癌细胞增殖活性、存活能力及侵袭、迁移能力的影响及其机制。方法：构建含有HMGB1 shRNA的慢病毒载体并转染人食管鳞癌EC9706细胞（HMGB1 shRNA组）,并以转染阴性序列的细胞为对照组,两组均设置X射线照射和未照射2个亚组。采用Western blot法评估HMGB1基因的干扰效果;MTS法和集落形成实验分别检测食管鳞癌EC9706细胞的增殖活性和存活能力;划痕实验和Transwell小室实验分别检测干扰HMGB1基因对EC9706细胞迁移和侵袭能力的影响;流式细胞术和Western blot分别检测照射后各组的细胞凋亡率及上皮间质转化（EMT）相关蛋白的表达。结果：与阴性对照组比较,Western blot结果显示干扰HMGB1基因明显降低了HMGB1蛋白的表达（P < 0.01）,MTS法检测结果显示X射线照射后干扰HMGB1显著抑制了食管鳞癌细胞的增殖水平（P < 0.05）,集落形成实验结果显示HMGB1 shRNA组细胞的放射敏感性明显增加（P < 0.01）。划痕实验结果显示,X射线照射后HMGB1 shRNA组细胞24 h的划痕愈合率为（20.78±4.38）%,低于阴性对照组的（39.02±3.25）%（P < 0.01）。Transwell实验结果显示X射线照射后HMGB1 shRNA组细胞在3.5 h的迁移细胞数为（67.00±16.56）个,低于阴性对照组的（194.00±19.74）个（P < 0.01）。流式细胞术结果显示,X射线照射后阴性对照组细胞凋亡率为（13.64±1.24）%,HMGB1shRNA组细胞凋亡率为（20.67±1.38）%;与阴性对照组比较,X射线照射后HMGB1 shRNA组细胞E-cadherin表达显著增加,而Ncadherin、Vimentin、MMP-2、MMP-9的表达明显降低（均为P < 0.01）。结论：干扰食管鳞癌细胞中HMGB1基因的表达后经X射线照射,降低了肿瘤细胞的增殖、侵袭、迁移水平和存活能力,诱导了细胞凋亡,增加了放射敏感性,并调控EMT相关蛋白的表达。     

紫杉醇联合放射线照射对鼻咽癌细胞的放射增敏效应

目的探讨化疗药紫杉醇(PTX)联合放射线照射对鼻咽癌细胞的放射增敏作用。方法取指数生长期的CNE-I细胞,采用克隆形成分析法检测PTX的单药毒性,确定IC10、IC50和IC90剂量作为实验的药物浓度。分析照射前后PTX IC10、IC50和IC90浓度下作用24 h,照射剂量分别为0～10 Gy时对CNE-I细胞的放射增敏效应。采用流式细胞术分析不同浓度PTX作用0、2、6、12、18和24 h CNE-I细胞周期分布的变化。结果PTX对CNE-I细胞的IC10、IC50和IC90剂量分别为0.05、1.0和2.5 nmol/L。当小剂量照射前后,分别用0.05和1.0 nmoL/L PTX作用24 h,具有一定放射增敏作用。PTX浓度为2.5和10.0 nmol/L时,CNE-I细胞出现明显的G2/M期阻滞,高峰出现在18 h。结论在适当的结合序贯的基础上,PTX联合放射线照射对CNE-I细胞具有放射增敏效应,其增敏作用可能与PTX导致的细胞G2/M期阻滞相关。     

辐射诱导溶瘤腺病毒联合放疗对宫颈癌细胞HeLa S3的作用效果

目的:构建受辐射诱导的EGR-1启动子调控的携带人TRAIL基因的新型溶瘤腺病毒Ad-EGR-TRAIL,研究其联合放疗对宫颈癌细胞株HeLa S3的杀伤效果.方法:构建重组腺病毒Ad-EGR-TRAIL,用腺病毒Ad-GFP检测对HeLa S3细胞的感染效率.CCK-8法检测Ad-EGR-TRAIL组、单纯放疗组以及...     

辛二酰苯胺异羟肟酸对结肠癌HCT116和SW480细胞增殖、周期和凋亡的影响

目的:研究辛二酰苯胺异羟肟酸(suberoylanilide hydroxamic acid,SAHA)对结肠癌细胞系HCT116和SW480增殖、周期和凋亡的影响,并对其分子作用机制进行初步探讨.方法:将不同浓度SAHA分别处理结肠癌HCT116和SW480细胞后,MTT法检测SAHA对HCT116和SW480细胞增殖的影响,流式细胞仪检测HCT116和SW480细胞周期和细胞凋亡率,罗丹明(rhodamine) 123和二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)法检测HCT116和SW480细胞线粒体跨膜电位(Aψm)和活性氧(ROS)水平,Real-time PCR和Western blotting法检测乙酰化组蛋白3(Ac-H3)、p21、CyclinD1、Bax和Bcl-2的mRNA和蛋白的表达水平.结果:SAHA作用于HCT116和SW480细胞48 h后,细胞增殖被抑制、细胞周期G1期比率升高、凋亡率升高(均P＜0.05),线粒体跨膜电位显著下降、细胞内ROS产生增多(均P＜0.05).与对照组比较,SAHA处理组p21和Bax mRNA增多、Cyclin D1和Bcl-2 mRNA表达量减少(均P＜0.05),相关蛋白Ac-H3、p21和Bax增多,CyclinD1和Bcl-2减少(均P＜0.05).结论:SAHA抑制结肠癌HCT116和SW480细胞增殖、阻滞细胞周期并诱导细胞凋亡,其机可能与调节p21、CyclinD1和Bcl-2家族基因的表达、促进组蛋白乙酰化有关.     

槲皮素对宫颈癌HeLa细胞增殖影响机制探讨

目的：研究植物化学药物槲皮素对宫颈癌细胞的生长抑制作用和凋亡诱导效应,并探讨槲皮素对抗宫颈癌的可能作用机制。方法：采用浓度为10、20、40、80和160μmol/L槲皮素处理HeLa细胞,四唑盐比色法（MTT法）检测不同浓度在作用24、48和72h对HeLa细胞增殖的影响;流式细胞仪分析槲皮素对HeLa细胞凋亡的影响;逆转录-多聚酶链反应（RT-PCR）和蛋白质印迹法检测细胞内的MK和Caspase-3基因mRNA和蛋白表达水平。结果：槲皮素能抑制HeLa细胞增殖,且在一定浓度范围内呈时间浓度依赖性,P〈0.05;使用浓度为10μmol/L的槲皮素处理HeLa细胞48h凋亡率为（2.18±0.04）%,20μmol/L为（3.75±0.11）%,40μmol/L为（6.04±0.07）%,80μmol/L为（9.65±0.04）%,160μmol/L为（21.41±1.81）%,与空白对组的（1.64±0.12）%比较差异有统计学意义,F=300.80,P〈0.01;随槲皮素浓度的增高HeLa细胞中MK mRNA和蛋白表达依次下降,其中80和160μmol/L组下降较明显,而Caspase-3的mRNA和蛋白表达随药物浓度增高表达增强,P〈0.01。MK与Caspase-3的蛋白表达呈负相关,r=-0.922,P〈0.01;MK与Caspase-3的mRNA表达呈负相关,r=-0.955,P〈0.01。结论：槲皮素可显著抑制HeLa细胞增殖并诱导其凋亡,其机制可能通过下调MK、上调Caspase-3的表达水平而发挥抗宫颈癌作用。     

Vorinostat increases carboplatin and paclitaxel activity in non‐small cell lung cancer cells

We observed a 53% response rate in non‐small cell lung cancer (NSCLC) patients treated with vorinostat plus paclitaxel/carboplatin in a Phase I trial. Studies were undertaken to investigate the mechanism (s) underlying this activity. Growth inhibition was assessed in NSCLC cells by MTT assay after 72 hr of continuous drug exposure. Vorinostat (1 μM) inhibited growth by: 17% ± 7% in A549, 28% ± 6% in 128‐88T, 39% ± 8% in Calu1 and 41% ± 7% in 201T cells. Vorinostat addition to carboplatin or paclitaxel led to significantly greater growth inhibition than chemotherapy alone in all 4 cell lines. Vorinostat (1 μM) synergistically increased the growth inhibitory effects of carboplatin/paclitaxel in 128‐88T cells. When colony formation was measured after drug withdrawal, vorinostat significantly increased the effects of carboplatin but not paclitaxel. The % colony formation was control 100%; 1 μM vorinostat, 83% ± 10%; 5 μM carboplatin, 41% ± 11%; carboplatin/vorinostat, 8% ± 4%; 2 nM paclitaxel, 53% ± 11%; paclitaxel/vorinostat, 46% ± 21%. In A549 and 128‐88T, vorinostat potentiated carboplatin induction of gamma‐H2AX (a DNA damage marker) and increased α‐tubulin acetylation (a marker for stabilized mictrotubules). In A549, combination of vorinostat with paclitaxel resulted in a synergistic increase in α‐tubulin acetylation, which reversed upon drug washout. We conclude that vorinostat interacts favorably with carboplatin and paclitaxel in NSCLC cells, which may explain the provocative response observed in our clinical trial. This likely involves a vorinostat‐mediated irreversible increase in DNA damage in the case of carboplatin and a reversible increase in microtubule stability in the case of paclitaxel.     

新疆黑种草子总黄酮体外抗宫颈癌活性研究

目的：检测新疆民族药材黑种草子总黄酮的体外抗宫颈癌活性,并初步探讨新疆黑种草子总黄酮成分的体外抗肿瘤机制。方法：以宫颈癌细胞株SiHa和HeLa为实验对象,分为空白对照组和处理组（2.5、5、10、15、20、25、50 μg/mL）,使用MTT法检测不同浓度的黑种草子总黄酮体外对宫颈癌细胞株的抗增殖活性,最终确定有效药物浓度范围及半数抑制率（IC₅₀）,通过划痕实验检测其对宫颈癌细胞株的抗迁移作用,使用流式细胞术分别检测对照组和处理组宫颈癌细胞凋亡率。结果：与空白对照组相比较,黑种草子总黄酮处理组SiHa和HeLa细胞的增殖均受到抑制,并呈浓度依赖性,黑种草子总黄酮对SiHa细胞株的IC₅₀为16.935 μg/mL,对HeLa细胞株的IC₅₀为18.366 μg/mL。处理前后划痕宽度比较发现,SiHa细胞株空白对照组的肿瘤细胞相对迁移距离为（223.333±13.868）px,处理组的相对迁移距离为（56.333±10.970）px;HeLa细胞株空白对照组的肿瘤细胞相对迁移距离为（360.667±15.308）px,处理组的相对迁移距离为（13.000±3.606）px。黑种草子总黄酮处理可诱导SiHa和HeLa细胞发生凋亡,SiHa细胞株10、15、25 μg/mL组凋亡率分别为（8.5±0.5）%、（35.9±1.3）%、（85.7±1.6）%;HeLa细胞株10、15、25 μg/mL组凋亡率分别为（5.3±0.4）%、（11.4±0.8）%、（85.9±1.9）%,与空白对照组比较差异均有统计学意义（P < 0.05）。结论：新疆黑种草子总黄酮在体外具有抗宫颈癌细胞增殖和迁移的药理活性,同时能够诱导宫颈癌细胞株发生凋亡。     

MTT法体外药敏实验预测宫颈癌细胞药物敏感性的初步探讨

背景与目的:近年来,宫颈癌新辅助化疗逐渐受到重视,应用广泛,但不同个体对不同化疗药物敏感性不同.本研究通过宫颈癌体外药敏实验来预测肿瘤细胞对化疗药物的敏感性,为临床筛选对宫颈癌相对敏感的化疗药物提供参考依据.方法:采用MTT法测定9种药物对32例宫颈癌患者的原代培养癌细胞的抑制水平.结果:①宫颈癌细胞对9种药物的敏感性依次为:力扑素＞泰素＞卡铂＞异环磷酰胺＞鬼臼乙叉甙＞氟尿嘧啶＞顺铂＞博来霉素＞环磷酰胺,力扑素、泰素和卡铂对肿瘤细胞的平均抑制率(IR)较高,分别为56.56%、55.66%和46.81%,与其它药物相比,差异有显著性(P＜0.05).②对Ⅰ b1期宫颈癌细胞,泰素、力扑素和卡铂IR值较其它药物高,分别为58.71%、53.00%和49.25%;对Ⅰ b2期宫颈癌细胞,力扑素和泰素的IR值较其它药物高,分别为65.26%和50.06%.③对于宫颈中分化鳞癌细胞,泰素、力扑素和卡铂IR值较其它药物高,分别为52.01%、49.21%和40.24%;对低分化鳞癌细胞,力扑素、泰素和卡铂的IR值较其它药物高,分别为61.16%、60.62%和48.75%.结论:①MTT法作为一种应用广泛的药敏实验方法,对宫颈癌新辅助化疗筛选敏感药物、选择临床化疗方案有一定的参考价值.②力扑素、泰素和卡铂对宫颈癌细胞较其它药物敏感.     

组蛋白去乙酰化酶抑制剂提高腺病毒对K562细胞转染及杀伤效率的研究

 目的　研究通过观察组蛋白去乙酰化酶（histone deacetylase,HDAC）抑制剂曲古抑菌素A（trichostatin A,TSA）对人类白血病细胞系K562 CAR表达水平的影响,并探讨HDAC抑制剂在以腺病毒为载体的基因治疗中的应用价值。方法　在mRNA和蛋白水平检测TSA处理K562细胞前后CAR的表达情况,采用流式细胞术测定病毒的转染效率,四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测腺病毒及其携带的基因的体外抗瘤效应。结果　TSA处理后,K562细胞CAR 的mRNA 和蛋白表达明显增高;流式细胞仪分析ADV-GFP转染K562 后GFP的表达发现：未处理组的转染率为（8.74±0.34）％,1、10 和100 nmol／L TSA处理细胞48 h后的转染率分别为（12.26±0.55）％、（20.83±1.22）％和（28.66±0.43）％。未处理组与处理组间及各处理组间转染效率的差异有统计学意义（P＜0.05）。MTT结果表明腺病毒M1介导的体外杀伤效应TSA处理组比未处理组增强（P＜0.05）,TSA各处理组间的体外杀伤效应随TSA浓度的提高而增强（P＜0.05）。结论　低浓度的TSA可以增强腺病毒对K562细胞的感染及杀伤效率,可以提高以腺病毒为载体的血液肿瘤基因治疗的疗效。