癌性胸水肿瘤浸润淋巴细胞的增殖力、表型和杀伤细胞活性的研究

探讨癌性胸水中肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)的生物学特性,便于更好地应用于临床.用低浓度白细胞介素2(IL-2)诱导培养癌性胸水TIL,按常规法计数TIL细胞增殖量,采用流式细胞仪分析TIL细胞表型及MTT法检测其杀伤细胞活性.经低浓度IL-2(10U/ml)诱导培养TIL21d后,TIL增殖倍数为2130±1140,大于1000倍占72%.CD3无显著性变化(P>0.05),CD4,CD8有显著性差异(P<0.01),而CD4/CD8     

肿瘤浸润淋巴细胞治疗肺癌的研究进展

肺癌是我国最常见的恶性肿瘤之一 ,常用的治疗手段仍为手术、化疗和放疗。肿瘤生物疗法的创立 ,为恶性肿瘤的临床治疗开辟了途径。近年来 ,肿瘤的过继免疫治疗 (ａｄｏｐｔｉｖｅｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ ,ＡＩＴ)有了快速的发展。肿瘤浸润淋巴细胞 (ｔｕｍｏｕｒｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｎｇｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ ,ＴＩＬ)作为一种新的抗肿瘤效应细胞 ,由于其具有比淋巴因子激活的杀伤细胞 (ＬＡＫ细胞 )更强的特异杀瘤活性 ,受到更多的关注。 80年代以后 ,随着分离制备ＴＩＬ技术的改进及重组白细胞介素 2 (ｒＩＬ 2 )的问世 ,使ＴＩＬ…     

肿瘤浸润淋巴细胞治疗肺癌的现状

肺癌常用的治疗手段仍为手术。化疗和放疗。近年来,肿瘤的过继免疫治疗（ａｄｏｐｔｉｖｅ ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ, ＡＩＴ）有了快速的发展。肿瘤浸润淋巴细胞（ｔｕｍｏｕｒ ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｎｇ　 ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ, ＴＩＬ）作为一种新的抗肿瘤效应细胞,由于其具有比ＬＡＫ细胞更强的特异杀瘤活性,故受到更多的关注。ＴＩＬ临床回输治疗人类恶性黑色素瘤与肾细胞癌具有一定的疗效,而肺癌肿瘤浸润淋巴细胞的研究及应用尚不多见。本文就ＴＩＬ治疗肺癌的研究现状作一概述。１ＴＩＬ的来源与抗瘤特点 治疗肺癌用的Ｔ…     

肝癌肿瘤浸润淋巴细胞抗瘤活性及表型特征

目的 探讨肝癌肿瘤浸润淋巴细胞的抗瘤活性及表型特征。方法 13例肝癌患者(7例接受术前TACE，6例未接受)，MTT法检测TIL细胞抗肿瘤活性，APAAP法检测TIL细胞表型。结果 TACE组TIL细胞在第2周增殖达到高峰，至第3周平均扩增52倍，而未接受术前化疗组在第3周扩增达到高峰，平均扩增了12倍。术前介入化疗患者TIL细胞肿瘤杀伤活性增强，CD3^ 、CD4^ 、CD8^ 不同程度的增加。结论 术前介入化疗可缩短肝癌患者TIL细胞增殖时间，提高肿瘤杀伤活性。     

肿瘤浸润淋巴细胞的研究现状

肿瘤浸润淋巴细胞(tumor infiltrating lymphocyte,TIL)是继淋巴因子激活杀伤细胞(LAK)之后,第二代抗肿瘤免疫活性细胞。它具有高效、特异、副作用小等优点,它有望成为新一代抗肿瘤免疫细胞,本文就目前国内外对TIL的研究现状作进行综述。     

树突状细胞对肿瘤浸润淋巴细胞抗小鼠肝癌活性影响的研究

目的探讨H22细胞全细胞性抗原致敏的DC激活的TIL体外抗小鼠肝癌活性,并将H22-DC-TIL过继免疫荷瘤小鼠,研究其对荷瘤小鼠免疫功能的影响及抑瘤作用。方法从小鼠四肢长骨骨髓中获取DC,应用粒/巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白介素-4(IL-4)和肿瘤全细胞性抗原致敏DC,然后用DC激活TIL,观察TIL在体外对H22细胞、Hepal-6细胞和B16细胞的杀伤活性;检测应用H22-DC-TIL后荷瘤小鼠的脾淋巴细胞的NK、LAK、CTL活性、血清TNF活性、抑瘤作用以及瘤体病理改变,并与对照组相比较。结果①H22-DC-TIL具有很强的对H22细胞杀伤活性[杀伤率为(71.31±3.11)%],明显高于其对Hepal-6和B16细胞的杀伤活性[杀伤率分别为(50.11±3.03)%,(30.31±2.89)%],也明显高于未经DC激活的TIL、H22-DC-脾淋巴细胞和未经DC激活的脾淋巴细胞对H22细胞杀伤活性[杀伤率分别为(49.80±3.21)%,(48.76±3.60)%和(19.23±2.71)%]和对Hepal-6细胞杀伤活性[杀伤率分别为(39.40±3.21)%,(38.62±2.87)%和(18.73±2.40)%]以及对B16细胞杀伤活性[杀伤率分别为(26.38±2.51)%,(25.82±2.70)%和(18.34±3.01)%],同时B16-DC-TIL(TIL来源于H22瘤体)也可诱导相对较低的对B16细胞的特异性细胞杀伤活性。②H22-DC-TIL可明显诱导提高荷瘤脾淋巴细胞NK、LAK和CTL活性[活性为(30.43±1.35)%、(31.40±1.80)%、(35.30±1.20)%],并可检测到血清TNF水平明显上升[血清TNF为(40.41±1.85)U/ml],它们均达正常对照组水平,与未经DC激活的TIL组、H22-DC-脾淋巴细胞组、未经DC激活的脾淋巴细胞组、生理盐水组分别对应比较,差异均有显著性(P<0.01)。该组瘤体内淋巴细胞浸润程度也高于对照组,其瘤体生长明显受到抑制。结论①H22-DC-TIL可产生很强的体外针对H22细胞的特异性杀伤活性。②H22-DC-TIL具有很强的特异性抗小鼠肝癌作用。     

树突细胞对肿瘤浸润淋巴细胞抗乳腺癌免疫活性影响的研究

背景与目的:树突细胞(dendriticcell,DC)又称树突状细胞,是目前已知的功能最强的抗原呈递细胞,它可以在体内、外向T淋巴细胞呈递抗原,并诱发细胞毒T淋巴细胞(cytotoxicTlymphocyte,CTL)反应。本研究旨在探讨DC激活的肿瘤浸润淋巴细胞(tumorinfiltratinglymphocytes,TIL)体外对乳腺癌细胞的杀伤活性。方法:从乳腺癌患者外周血获取DC,应用粒/巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte/macrophagecolonystimulatingfactor,GM-CSF)、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)和肿瘤抗原激活DC,然后用DC激活TIL,观察TIL在体外对自体乳腺癌细胞和Bcap-37乳腺癌细胞的杀伤活性。结果:DC激活的TIL对自体乳腺癌细胞具有很强的杀伤活性,杀伤率为(85.76±2.93)%,明显高于未经DC激活的TIL、DC激活的T淋巴细胞和未经DC激活的T淋巴细胞对自体乳腺癌细胞的杀伤率犤分别为(52.11±1.48)%、(51.35±1.46)%和(3.59±0.25)%犦。而它们对Bcap-37乳腺癌细胞的杀伤活性则相对较低犤分别为(40.03±1.29)%、(22.09±0.87)%、(21.66±0.85)%和(1.76±0.14)%犦。结论:乳腺癌患者外周血DC能诱导TIL产生高效而特异的抗乳腺癌免疫活性。     

肺癌浸润淋巴细胞的分离及增殖研究

目的　从肺癌患者手术切除的肿瘤组织中分离出肺癌浸润淋巴细胞 (TIL) ,经rIL 2体外激活培养 ,研究TIL体外分离、增殖的条件和特点。方法　应用机械、酶消化和不连续密度梯度离心法从 67例肺癌患者手术切除的实体瘤中分离得到TIL ,其中 3 4例TIL放入 10 %人AB血清RPMI 164 0液中培养。结果　本组 67例标本中 ,每克瘤组织获得的TIL平均为 6.84× 10 6个。在培养的 3 4例TIL中 ,第 7～ 2 8天之间增殖最旺盛 ,以后增殖活性降低 ,数量减少。增殖达到 10 9以上有 17例 ,可回输率为 5 0 %。Ⅰ期患者分离获取TIL数明显多于Ⅲ、Ⅳ期 ,但在增殖倍数上无显著性差异 ;鳞癌与腺癌分离获取TIL数无显著性差异 ,但腺癌TIL扩增明显比鳞癌好。结论　TIL能有效地分离和增殖 ,并已具备了应用于临床治疗肺癌的条件。     

乳腺原发癌和转移淋巴结肿瘤浸润淋巴细胞体外抗乳腺癌研究

目的探讨同个体乳腺原发癌和转移淋巴结肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)抗瘤活性。方法从35例乳腺癌伴有腋窝淋巴结转移患者的乳腺原发癌组织及转移淋巴结组织中分离出乳腺原发癌TIL和转移淋巴结TIL,观察不同部位获得的TIL体外对不同部位乳腺癌细胞的杀伤活性。结果乳腺原发癌TIL对乳腺原发癌癌细胞与转移淋巴结TIL对转移淋巴结癌细胞均具有很高的杀伤活性[杀伤率分别为(71.31±3.11)%和(69.38±2.51)%],明显高于乳腺原发癌TIL对转移淋巴结癌细胞和转移淋巴结TIL对乳腺原发癌癌细胞的杀伤活性[杀伤率分别为(50.31±2.89)%和(49.80±3.21)%]。结论同一个体乳腺癌其原发癌和转移淋巴结TIL抗瘤活性有差别。     

肿瘤浸润淋巴细胞在小细胞肺癌中的研究进展

小细胞肺癌（small cell lung cancer,SCLC）是一种预后极差的肺癌亚型,虽前期对放化疗敏感,但多数患者会在短期内因肿瘤复发、转移而死亡。探寻有效的、能指导预后及预测疗效的生物标志,以达到SCLC患者治疗的个体化和最优化是肿瘤研究的热门领域之一。目前有大量文献报道肿瘤浸润淋巴细胞（tumor-infiltrating lymphocytes,TILs）与较多类型癌种的（包括非小细胞肺癌、乳腺癌、结直肠癌、黑色素瘤等）预后及预测免疫治疗疗效的关系,本文将肿瘤浸润淋巴细胞在SCLC预后及疗效预测方面的作用作一综述。      

TIL细胞治疗恶性胸水的疗效观察

目的观察肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)治疗恶性胸水的疗效。方法从30例恶性肿瘤胸水中的肿瘤细胞分离得到TIL,并经10%人AB血清RPM I-1640液培养,经rIL-2体外激活培养,随后胸腔注射。结果完全缓解12例(40.0%),有效15例(50.0%),无效3例(10.0%),总有效率90.0%(27/30)。结论 TIL治疗恶性胸腔积液疗效好,毒副作用小,能改善患者的生活质量。     

Quantitative detection of survivin in malignant pleural effusion for the diagnosis and prognosis of lung cancer

In the present study, pleural effusions are the first time to be used as the specimens for detection of survivin expression in lung cancer patients. We demonstrated that by quantifying survivin expression with enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) in the 80 effusion samples exhibited a diagnostic power of 85% and 75% in sensitivity and specificity, respectively. A multivariate analysis with the Cox regression model revealed that both high survivin expression and cancer cells of stage IV were the indicators for poor prognosis of lung cancer. In conclusion, quantitative assay of survivin in pleural effusion could be useful both in diagnosis and prognosis for lung cancer.     

六种肿瘤标志物在肺癌胸腔积液中的诊断价值

目的通过对胸腔积液和血清中6种肿瘤标志物的检测及胸腔积液脱落细胞学检查,探讨各指标在肺癌胸腔积液中的诊断价值。方法应用化学发光法和酶联免疫分析法测定50例肺癌和30例肺良性疾病患者的胸腔积液和血清中的癌胚抗原（CEA）、糖类抗原19—9（CA19—9）、鳞状细胞癌抗原（SCC）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）、细胞角蛋白19片段（CYFRA21—1）、胃泌素前体释放肽（ProGRP）水平,同时对胸腔积液标本进行脱落细胞学检查,并根据受试者工作特性曲线（ROC）建立合理的临床判断临界值。结果肺癌患者胸腔积液中6种肿瘤标志物水平均高于肺良性疾病者,其中CEA、CA19-9、CYFRA21—1、ProGRP水平显著高于肺良性疾病组（P〈0．05）。胸腔积液CEA、血清CYFRA21—1及CEA含量在胸腔积液与血清中的比值（P／S）在各组中的ROC曲线下面积最大。结论胸腔积液CEA、血清CYFRA21—1及CEA的P／S值在鉴别良、恶性胸腔积液中有一定的辅助诊断价值,胸腔积液CEA的诊断价值最大。     

Plasma and pleural fluid pharmacokinetics of erlotinib and its active metabolite OSI-420 in patients with non-small-cell lung cancer with pleural effusion

Background: Erlotinib is orally active and selectively inhibits the tyrosine kinase activity of the epidermal growth factor receptor. The pleural space penetration and exposure of erlotinib is poorly understood. Thus, we investigated the pharmacokinetics (PK) of erlotinib and its active metabolite OSI-420 in non–small-cell lung cancer (NSCLC) of malignant pleural effusion (MPE). Patients and Methods: We analyzed the PK of erlotinib and OSI-420 on days 1 and 8 after beginning erlotinib therapy in 9 patients with MPE. Their concentrations were determined by high-performance liquid chromatography with ultraviolet detection. Blood samples were obtained five times per day: before administration, and 2, 4, 8, and 24 hours after administration. Pleural effusions were obtained once per day, 2 hours after administration on day 1, and before administration on day 8. The exceptions were cases 2 and 4, which had pleural effusions obtained just before drug administration, and 2, 4, 8, and 24 hours after administration. Results: The mean percentage of penetration from plasma to pleural effusion for erlotinib was 18% on day 1 and 112% on day 8, while these values for OSI-420 were 9.5% on day 1 and 131% on day 8. The area under the drug concentration-time curve of pleural fluid for erlotinib was 28,406 ng-hr/mL for case 2 and 45,906 ng-hr/mL for case 4. Conclusions: There seems to be a significant accumulation of both erlotinib and OSI-420 in MPE with repeated dosing. Although larger studies will be necessary to determine the true impact of erlotinib MPE accumulation on plasma PK and safety, erlotinib can be administered safely to patients with MPE with respect to efficacy and side effects.     

重组改构人肿瘤坏死因子联合博来霉素胸腔灌注治疗肺癌恶性胸腔积液的临床观察

目的　观察重组改构人肿瘤坏死因子（ｒｈｍＴＮＦ）联合博来霉素（ＢＬＭ）胸腔灌注治疗肺癌恶性胸腔积液的近期疗效及毒副反应。方法　收集２００７年６月至２０１０年１０月１１２例肺癌伴恶性胸腔积液患者,经胸腔置中心静脉导管排尽胸腔积液后分为３组。ｒｈｍＴＮＦ组３２例胸腔内灌注ｒｈｍＴＮＦ２００万～３００万单位,ＢＬＭ组４１例胸腔内灌注ＢＬＭ４０～６０ｍｇ,联合组３９例胸腔内联合灌注ｒｈｍＴＮＦ２００万～３００万单位和ＢＬＭ４０～６０ｍｇ。３组患者均每周治疗２次,共４次。治疗后１个月观察近期疗效、毒副反应及ＫＰＳ评分改善情况。结果　ｒｈｍＴＮＦ组、ＢＬＭ组和联合组的有效率分别为４６.９％、４６.３％和８２.１％,联合组显著高于其他两组（Ｐ＜０.０５）。３组主要毒副反应为发热及胸痛,３组间差异无统计学意义（Ｐ＞０.０５）。ｒｈｍＴＮＦ组、ＢＬＭ组和联合组ＫＰＳ评分改善率分别为５３.１％、５１.２％和８４.６％,联合组显著高于其他两组,差异有统计学意义（Ｐ＜０.０５）。结论　ｒｈｍＴＮＦ联合ＢＬＭ胸腔灌注治疗肺癌恶性胸腔积液有效、安全,值得推广。     

EGFR突变与肺癌伴恶性胸腔积液患者生物学行为的相关性研究

目的 探讨表皮生长因子受体(EGFR)基因突变与肺癌伴恶性胸腔积液患者生物学行为之间的关系.方法 选取肺癌患者100例,其中伴恶性胸腔积液者43例作为观察组,不伴胸腔积液者57例作为对照组,观察两组患者EGFR基因突变情况.结果 观察组EGFR总突变率为72.09%,高于对照组的19.30%(P﹤0.05);观察组高分化、中分化和低分化患者的EGFR突变率分别为69.23%、71.43%和77.78%,均高于对照组高分化、中分化和低分化患者(P﹤0.05);不同性别、年龄、吸烟情况及分化程度的观察组患者EGFR基因突变率比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05);胸腔积液与活检组织标本EGFR基因检测结果的Kappa值为0.466(P﹤0.05),一致性中等.结论 肺癌伴恶性胸腔积液患者EGFR突变率较高,但EGFR突变与肺癌伴恶性胸腔积液患者的性别、年龄、吸烟情况及分化程度无关.     

非小细胞肺癌胸腔积液与配对肿瘤组织中EGFR基因突变检测的比较

目的:探讨非小细胞肺癌胸腔积液与配对肿瘤组织标本中EGFR基因突变检测结果的一致性,评价胸腔积液标本检测EGFR基因突变的应用价值.方法:收集非小细胞肺癌患者胸腔积液与配对肿瘤组织样本72例,采用ARMS方法,检测样本中EGFR基因第18~21外显子突变情况.结果:细胞学样本和组织学样本中EGFR基因突变阳性率分别为48.61%和51.39%,两者差异无统计学意义(P>0.05),二者一致率为92.11%,不一致率为7.89%.结论:二者的一致率较高,恶性胸水可以作为无法获得肿瘤组织的晚期非小细胞肺癌EGFR基因检测的有效样本.     

超声定位导管引流联合分子靶向药物治疗肺癌相关胸水与心包积液

目的:观察超声定位导管引流联合分子靶向药物治疗晚期老年肺腺癌伴恶性胸水及心包积液的近期疗效。方法:18例晚期肺腺癌伴恶性胸腔及心包腔积液的老年患者,采用中心静脉导管胸腔/心包腔闭式引流,同时口服分子靶向药物表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKIs)。观察24h胸水及心包积液引流量,药物不良反应,随诊4周胸水及心包积液情况。结果:治疗4～10d后,胸腔引流量＜100ml/24h;心包引流量＜20ml/24h。置管顺利,无严重并发症。9例出现皮疹,5例腹泻,4例皮疹+腹泻。随访2例中途停药,1例全身多发转移死亡,5例部分缓解,10例稳定。结论:超声定位导管引流联合口服分子靶向药物,控制老年晚期肺腺癌伴胸水、心包积液近期效果确定,可改善患者生存质量。     

血清IL-2水平对胸水TIL细胞体外扩增及活性的影响

目的通过对血清白介素-2(interleukine-2,IL-2)水平的检测,了解内源性IL-2水平对胸水TIL细胞体外扩增及抗肿瘤活性的影响.方法对54例有恶性胸水患者,第一次抽胸水时无菌收集胸水,进行TIL细胞培养,并同时进行血清IL-2水平检测.TIL细胞体外杀瘤活性用MTT法检测,血清IL-2的水平用ELISA法检测.将IL-2水平较高的27例患者分为1组,IL-2水平较低的27例患者分为另1组,比较两组患者胸水TIL细胞体外增殖速度及杀瘤活性.结果血清IL-2水平较低组,TIL细胞体外培养8天后扩增59.3±20.9倍,培养12天后扩增112.5±32.9倍,明显高于IL-2水平较高组的24.0±11.0倍和62.5±21.9倍.IL-2水平较低组TIL细胞体外杀瘤率为45.3±9.5%,明显高于IL-2水平较高组的26.7±7.3%,P＜0.05.结论血清IL-2水平高低与TIL细胞体外增殖的速度及其杀瘤活性明显相关,IL-2水平较低的患者胸水中TIL细胞体外增殖的速度较快,杀瘤活性较强.血清IL-2水平可望作为恶性胸水IL-2/TIL治疗选择的指标.