正常妊娠及病理妊娠胎盘滋养细胞CD3的表达及其与FasL的表达的关系

[目的]研究胎盘滋养细胞CD3与FasL表达的相关性及其临床意义.[方法]采用免疫组织化学SP法检测52例正常妊娠及96例病理妊娠胎盘组织中CD3及FasL的表达.[结果]正常妊娠胎盘滋养细胞在表达FasL的同时,有CD3表达于细胞膜上,在妊娠高血压综合征(妊高征)、胎儿窘迫、早产3组患者胎盘滋养细胞中其强度与FasL的表达呈正相关.[结论]妊高征、胎儿窘迫、早产的胎盘绒毛发育不全、功能下降等一系列的免疫病理改变可能与胎盘滋养细胞表面CD3及FasL表达减少有关.     

妊高征及正常妊娠孕妇胎盘IL-6mRNA与羊水IL-6含量测定

目的 :探讨胎盘 IL- 6 m RNA及羊水 IL- 6与妊高征及胎盘、胎儿生长发育关系。方法 :妊高征组 5 7例 ,正常妊娠组 15例 ,均无感染及宫缩 ,应用 RT- PCR法检测胎盘 IL- 6 m RNA表达状况 ,EL ASA法检测羊水 IL- 6含量。结果 :1胎盘 IL- 6 m RNA及羊水 IL- 6含量随妊高征病情加重均呈下降趋势 ,经统计学处理 ,妊高征各组胎盘 IL- 6 m RNA含量均显著低于正常妊娠组 (P<0 .0 5、P<0 .0 1、P<0 .0 0 1) ,中、重度妊高征组羊水 IL- 6含量极显著低于正常妊娠组 (P<0 .0 0 1)。2中、重度妊高征组中 ,羊水 IL- 6与胎盘 IL- 6 m RNA呈高度相关 ,r=0 .79、P<0 .0 1。3重度妊高征伴 IUGR者 ,胎盘 IL- 6 m RNA及羊水 IL- 6显著低于无 IUGR者 (P<0 .0 5 )。结论 :妊高征时胎盘产生并转送 IL- 6能力下降 ,导致胎盘滋养细胞缺血及胎盘、胎儿生长发育障碍。     

妊高征患者胎盘床滋养细胞内皮素(ET-1)的表达与临床意义

目的:观察妊高征患者胎盘床浸润的滋养细胞内皮素(ET-1)的表达情况,探讨妊高征的发病机理。方法:收集正常妊娠病例30例,妊高征共70例,其中轻度30例,中度20例,重度20例,用免疫组化方法对妊高征和正常妊娠的胎盘床蜕膜段和肌层浸润的滋养细胞进行ET-1的标记。结果:ET-1在妊高征胎盘床蜕膜段浸润的滋养细胞的表达与正常妊娠无明显差别(P>0.05),ET-1在妊高征胎盘床肌层浸润的滋养细胞的表达明显高于正常妊娠(P<0.05)。讨论:妊高征时胎盘床肌层浸润的滋养细胞分泌的内皮素明显增多,提示妊高征的发生可能与肌层浸润的滋养细胞分泌的内皮素增多有关。     

核转录因子-kappa B在妊娠高血压综合征患者胎盘组织中的表达

目的:观察妊娠高血压综合征(妊高征)患者胎盘滋养细胞中核转录因子-kappaB(NF-kB)的表达情况,探讨其在妊高征发病中的作用。方法:采用免疫组化法检测正常产妇及妊高征产妇胎盘组织中NF-kBp65的表达,并采用计算机图像分析系统进行定量分析。结果:①绒毛毛细血管内皮细胞中的表达:NF-kBp65主要表达于内皮细胞胞浆、胞核内,阳性率明显高于对照组(χ2=9.905,P=0.002),妊高征组间差异有显著性(χ2=7.580,P=0.023);妊高征组NF-kBp65表达强度明显高于对照组(P<0.001),且随着病情的加重逐渐增强,其组间比较差异有极显著性(P<0.01)。②胎盘滋养细胞中的表达:NF-kBp65表达于滋养细胞的胞浆和胞核内,妊高征组的阳性表达率明显高于对照组(χ2=8.479,P=0.014),其组间NF-kBp65阳性率随妊高征病情加重而增高,差异有显著性(χ2=8.479,P=0.014);妊高征组中NF-kBp65的表达强度明显高于对照组(P<0.001),且随着病情的加重其表达强度明显增强,组间比较差异有极显著性(P<0.01)。结论:妊高征患者胎盘血管内皮细胞及滋养细胞中NF-kB的表达较正常孕妇明显增强,且随病情加重而升高,可能在妊高征的发生发展中具有重要作用。     

妊娠期高血压疾病患者胎盘中NPY、ET-1及CGRP的测定及意义

目的:检测妊娠期高血压疾病(妊高征)患者胎盘中神经肽Y(NPY)、内皮素-1(ET-1)及降钙素基因相关肽(CGRP)的水平,观察三者在胎盘中的表达部位并探讨它们在妊高征发病中的作用。方法:用免疫组化法分别检测38例妊高征患者(其中子痫前期轻度20例、重度15例、子痫期3例)及32例正常足月妊娠患者胎盘中NPY、ET-1及CGRP的水平;同时观察NPY、ET-1水平与CGRP的相关关系。结果:妊高征组患者胎盘中NPY、ET-1在滋养细胞和血管内皮细胞都有表达,妊高征组患者胎盘中NPY、ET-1水平高于正常妊娠组患者,差异有统计学意义(P0.01),而子痫期患者胎盘中NPY、ET-1水平又显著高于子痫前期轻、重度患者,差异有统计学意义(P0.05);妊高征组患者胎盘中CGRP水平低于正常妊娠组患者,差异有统计学意义(P0.01)。妊高征组患者胎盘中NPY、ET-1水平与CGRP水平呈负相关性。结论:NPY、ET-1在妊高征组患者胎盘滋养细胞及血管内皮细胞中都有表达;妊高征组患者胎盘中NPY、ET-1水平明显升高,且随着病情的加重,水平逐渐升高。     

胎儿生长受限孕妇胎盘病理改变与Fas及FasL表达的关系

目的:通过观察胎儿生长受限(FGR)孕妇胎盘病理改变及胎盘组织中Fas、FasL的表达,探讨Fas、FasL在病理妊娠中的作用。方法:在孕龄为37～42周的单胎孕妇中选择FGR者30例,用HE组织染色观察胎盘绒毛滋养细胞、合体滋养细胞结节增生情况及绒毛间质纤维化和绒毛血管病变情况,采用免疫组化技术检测胎盘组织中Fas、FasL的表达,并与相同孕龄新生儿出生体重正常者作比较。结果:FGR组中,有22例发生了明显的胎盘病理改变,占73.3%,其中绒毛间质纤维化及纤维素样坏死发生率为66.7%,合体滋养细胞结节增生发生率为46.7%,绒毛血管减少发生率为70.0%,细胞滋养细胞增生发生率为53.3%,明显高于对照组(P<0.01)。在FGR组胎盘组织绒毛滋养细胞和蜕膜细胞中,Fas的表达明显强于对照组(P<0.01),FasL的表达则明显弱于对照组(P<0.01)。结论:FGR时胎盘发生了明显的病理改变,FGR孕妇胎盘Fas的高表达、FasL的低表达使母胎易发生免疫排斥反应,导致胎盘组织产生免疫病理损伤,影响胎盘的血液供应,导致胎儿发育异常。     

妊娠高血压综合征患者胎儿生长发育与白细胞介素-6的关系

目的:了解妊高征患者胎儿生长发育与白细胞介素-6(IL-6)水平的关系。方法:对2002年9月2004年9月50例妊娠高血压综合征患者(妊高征组)及30例正常孕妇(对照组)胎儿生长情况进行评价。采用酶联免疫吸附试验(ELISA法)检测两组母血清及羊水中IL-6的含量。结果:①中、重度妊高征患者低体重儿发生率显著高于正常妊娠组(P<0.01);②妊高征组母血清IL-6含量随病情加重呈升高趋势,中、重度妊高征组母血清IL-6含量显著高于正常妊娠组(P<0.01),羊水IL-6含量随妊高征病情加重呈下降趋势,中、重度妊高征组羊水IL-6含量显著低于正常妊娠组(P<0.01),母血清IL-6与羊水IL-6无显著相关关系(r=-0.21,r=-0.29,P>0.05);③妊高征组中24例新生儿出生体重低于2 500 g,其羊水IL-6含量显著低于新生儿出生体重达到2 500 g以上者,羊水IL-6水平与新生儿体重在妊高征组未发现明显相关性(r=0.232,P>0.05)。结论:妊高征患者的免疫活性细胞释放过多的IL-6,参与了妊高征的免疫损伤过程;妊高征患者胎盘产生并转运IL-6至羊水的能力下降,致羊水IL-6含量下降,对妊高征发病及其胎儿生长发育可能有重要影响。     

妊高征滋养细胞不良浸润螺旋动脉的彩色多普勒超声监测

目的:探讨超声多普勒对妊娠高血压综合征(妊高征)滋养细胞不良浸润螺旋动脉的监测。方法:选择28例孕妇,妊高征组和正常妊娠组各14例,采用Sepuoia512彩色电脑声像仪探头4 V 1,监测子宫动脉及子宫胎盘床中央、周边螺旋动脉搏动指数(PI)、阻力指数(R I)值,同时对其中10例剖宫产者(妊高征组6例,正常妊娠组4例)术中取胎盘床组织,进行螺旋动脉组织学检查。结果:妊高征组子宫动脉的R I、PI值明显高于正常妊娠组(P<0.05),妊高征组螺旋动脉的R I、PI值与正常妊娠组比较,无论是子宫胎盘中央还是周边螺旋动脉均有极显著性差异(P<0.001)。组织学检查结果显示,妊高征组螺旋动脉生理变化不完全,同时存在管腔狭窄、平直,管壁增厚及急性粥样化等病理改变。结论:彩色多普勒超声监测妊高征孕妇子宫动脉、螺旋动脉血流阻力明显高于正常妊娠组,与滋养细胞不良浸润螺旋动脉的组织学改变相一致。彩色多普勒对螺旋动脉的血流动力学监测为妊高征滋养细胞不良浸润的研究提供了一种方便、无创、准确的方法。     

胎盘绒毛滋养层细胞MMP-9表达与妊高征的关系

目的 :研究MMP 9在胎盘绒毛滋养层细胞的表达 ,探讨MMP 9在妊高征发病中的作用。方法 :用免疫组化两步法检测 42例妊高征患者及 2 5例正常妊娠者胎盘组织中滋养层细胞MMP 9的表达。结果 :正常妊娠组滋养细胞MMP 9表达阳性率为 72 0 % ,明显高于妊高征组 (4 0 5 % ) ,P <0 0 5。随妊高征病情的加重 ,MMP 9的表达有减少趋势。结论 :妊高征患者胎盘滋养细胞MMP 9的表达明显减少 ,且随其病情加重 ,MMP 9表达有减少趋势。表明MMP 9与妊高征的发生有密切关系。     

MMP-9及TIMP-1在妊娠高血压综合征患者母胎界面的表达及意义

目的:研究基质金属蛋白酶(m atrix m etalloprote inases,MMP)-9及其组织抑制物(tissue inh ib itor of m etallo-prote inases,TIMP)-1在妊娠高血压综合征(妊高征)患者胎盘组织的表达情况及其与妊高征发病的关系。方法:采用免疫组织化学SP法检测48例妊高征(轻度10例、中重度38例)胎盘组织中MMP-9及TIMP-1的表达情况;同时做HE染色观察妊高征时胎盘的病理改变。结果:MMP-9、TIMP-1主要表达于滋养细胞、绒毛间质血管壁及蜕膜组织中。轻度妊高征MMP-9呈阳性表达,TIMP-1蛋白呈强阳性表达;中、重度妊高征MMP-9和TIMP-1蛋白均呈弱阳性表达,分别与正常妊娠和轻度妊高征相比表达均减弱,差异有极显著性(P<0.01)。中重度妊高征时胎盘组织绒毛数及间质血管数减少,出现典型的纤维素样坏死。结论:母胎界面MMP-9/TIMP-1表达异常与妊高征发病及胎盘病理改变的发生发展有关。     

母胎界面Fas及其配体FasL表达与妊娠期高血压疾病的关系

目的:探讨母胎界面上Fas及其配体FasL表达与妊娠期高血压疾病的关系。方法:采用免疫组化方法对49例产妇母胎界面上Fas及其配体FasL表达进行测定,其中正常孕足月产妇16人,妊娠期高血压疾病轻度子痫前期产妇18名,妊娠期高血压疾病重度子痫前期15名,所有患者均为剖宫产分娩。结果:妊娠期高血压疾病组胎盘滋养细胞Fas表达较正常孕足月组增强并随病情加重更为明显,而FasL着色较正常孕足月组减弱,随病情加重更为明显。在底蜕膜细胞中,随妊娠期高血压疾病的加重FasL表达与正常孕足月相比逐渐减弱。结论:母胎界面Fas及其配体FasL表达紊乱,致使局部免疫反应增强,免役豁免机制被破坏,而高表达的Fas引起胎盘滋养细胞及底蜕膜细胞随之增加,导致胎盘侵蚀异常,血管重铸障碍,可能是妊娠期高血压疾病发病的重要机制之一。     

Fasl在重度子痫前期胎盘滋养细胞表达的研究

目的:通过比较正常孕妇与重度子痫前期患者胎盘滋养细胞表面Fasl(Pas配体)表达,进一步从分子免疫学角度探讨重度子痫前期的免疫病理机制。方法:用特异性的Fasl抗体对重度子痫前期患者胎盘滋养细胞表面Fasl进行免疫组化染色,并通过高清晰彩色病理免疫组化测量系统对其定量分析,与同孕周的正常孕妇进行比较。结果:Fasl主要表达于胎盘绒毛合体滋养细胞及细胞滋养细胞的胞浆及胞膜内。重度子痫前期组胎盘滋养细胞表面Fasl表达强度明显低于正常对照组,两者间差异有非常显著意义(P<0.01)。Fasl在重度子痫前期组胎盘的表达与新生儿出生体重、胎盘均有明显相关性。结论:胎盘滋养细胞表面Fasl表达减少,导致母胎间的免疫耐受的破坏,引起异常的免疫反应可能是妊高征发病的重要机制。诱导Fasl的产生或调节母胎间的免疫耐受,将为临床治疗重度子痫前期提供新的方向。     

Fas表达异常与重度子痫前期的关系研究

目的:探讨重度子痫前期患者胎盘绒毛滋养细胞Fas(又称APO-1,CD95)的表达及意义。方法:采用免疫组化法观察24例Fas在重度子痫前期患者胎盘绒毛滋养细胞的表达,并与24例正常晚期妊娠胎盘比较。结果:Fas主要表达于胎盘绒毛合体滋养细胞及细胞滋养细胞的胞浆及胞膜内。与正常对照组比较,Fas在重度子痫前期组胎盘绒毛滋养细胞的表达水平显著增加(P<0.05),差异有显著性。Fas在重度子痫前期组胎盘绒毛滋养细胞的表达与新生儿出生体重和胎盘重量均有明显相关性。结论:Fas在重度子痫前期患者胎盘绒毛滋养细胞中表达失衡,通过免疫途径诱导滋养细胞发生级联凋亡反应及滋养细胞对螺旋小动脉的浸润过浅,影响“血管重铸”过程,导致胎盘缺血、缺氧,可能与重度子痫前期的病因及病理过程有关。     

整合素β3、基质金属蛋白酶2在妊娠期高血压疾病中的表达

目的:研究整合素β3(integrinβ3)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)在妊娠期高血压疾病胎盘中的表达,探讨整合素β3、基质金属蛋白酶2在妊娠期高血压疾病发病中的关系。方法:采用免疫组织化学染色(SP)法分别检测integrinβ3、MMP-2在10例妊娠期高血压疾病患者及10例正常妊娠者胎盘组织中的表达。结果:正常妊娠组胎盘整合素β3表达明显低于妊娠期高血压疾病组(P<0.01),正常妊娠组胎盘MMP-2表达明显高于妊娠期高血压疾病组(P<0.01)。结论:integrinβ3、MMP-2的失衡可使滋养细胞侵袭过浅,两者可能参与妊娠期高血压疾病的发生和发展。     

HLA-G在无症状沙眼衣原体和解脲支原体感染患者早孕绒毛滋养细胞的表达及意义

目的:研究无症状沙眼衣原体和解脲支原体感染患者HLA-G在母胎界面的表达变化,及其对早孕绒毛滋养细胞侵蚀力的影响。方法:采用SP法对正常早孕和无症状沙眼衣原体及解脲支原体感染患者早孕绒毛组织中HLA-G免疫组化染色并观察HLA-G的定位和分布;采用免疫印迹法检测正常与无症状沙眼衣原体和解脲支原体感染患者早孕绒毛组织中HLA-G的表达情况;分离正常与无症状沙眼衣原体和解脲支原体感染患者绒毛外滋养细胞并进行培养和鉴定,应用免疫细胞化学法检测HLA-G的表达。结果:免疫组化结果显示正常妊娠时HLA-G主要表达于绒毛滋养细胞;免疫印迹灰度分析显示,对比正常妊娠无症状沙眼衣原体和解脲支原体绒毛感染者的早孕绒毛中HLA-G蛋白表达减弱;培养的正常早孕绒毛外细胞滋养细胞中HLA-G呈强阳性表达,而无症状沙眼衣原体和解脲支原体感染者其早孕绒毛外细胞滋养细胞中HLA-G表达减弱。结论:无症状沙眼衣原体和解脲支原体感染能对早孕绒毛HLA-G表达产生影响,造成母胎界面局面免疫功能紊乱,滋养细胞容易受到母体的攻击,从而影响到滋养细胞的侵蚀能力。     

重度子痫前期胎盘的免疫组化改变与围产儿预后的关系

目的:研究重度子痫前期胎盘的免疫组织化学改变,探讨白细胞抗原CD146、CD31在胎盘组织中的表达及其与围产儿预后的关系。方法:20例重度子痫前期患者为研究组,孕周接近的无合并症的流产、早产的胎盘、孕早期流产的绒毛共20例为对照组。应用间接免疫组化法结合计算机辅助图像分析技术,分析胎盘组织白细胞抗原CD146、CD31的表达及对围产儿预后的影响。结果:对照组20例胎盘组织中间滋养层都有CD146的表达,但是没有CD31的表达。研究组20例标本中2例展示微弱的CD146着色,18例中间滋养层CD146染色为阴性,CD31在研究组标本的中间滋养层细胞上也没有表达,染色阴性,差异具有显著性。研究组围产儿死亡、HIE、新生儿窒息、SGA发生率均明显增高,脐动脉血流异常、胎心监护异常和妊娠图异常发生率明显增高,差异具有极显著性。结论:与正常妊娠比较,重度子痫前期胎盘CD146的异常表达,可能反应体内CD146的功能,为重度子痫前期的病因学提供重要线索,认为异常滋养层浸润(滋养层浸润过少过浅)是子痫前期发病的潜在因素;同时造成围产儿预后不良。     

MMP-9调控绒毛外滋养细胞sFasL表达的研究

目的:探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在绒毛外滋养细胞对可溶性Fas配体(sFasL)表达的调控。方法:化学合成针对MMP-9的siRNA,通过脂质体转染绒毛外滋养细胞株(TEV-1),运用荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RealTimeRT-PCR)和ELISA法检测MMP-9siRNA转染前后细胞中MMP-9、FasLmRNA及其蛋白分泌表达的变化。结果:转染后24h,MMP-9siRNA组的MMP-9mRNA表达较对照组明显降低(P<0.05),而FasLmRNA表达较对照组无明显变化(P>0.05)。转染后48h,MMP-9siRNA组的MMP-9蛋白及FasL蛋白的分泌表达较对照组均显著降低(P<0.05)。结论:MMP-9siRNA能特异高效沉默TEV-1的MMP-9mRNA表达,MMP-9蛋白分泌减少的同时也降低了sFasL蛋白的分泌。绒毛外滋养细胞表达的MMP-9可调节sFasL的表达,从而影响内皮细胞凋亡,可能参与早期胎盘血管的重建过程。     

白血病抑制因子在子痫前期患者胎盘组织中的表达

目的:测定白血病抑制因子(LIF)在子痫前期患者胎盘组织中的表达,探讨其在妊娠高血压发病中的作用。方法:采用免疫组化技术-链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶连接(SP)法对在正常妊娠(正常妊娠组)、子痫前期(轻度子痫前期组和重度子痫前期组)孕妇胎盘组织中LIF的表达进行组织学定位和半定量分析。结果:3组孕妇胎盘组织中LIF均呈现阳性表达,阳性染色主要位于滋养细胞胞质中,胞核无明显着色。轻度子痫前期组和重度子痫前期组分别与正常妊娠组比较,胎盘组织的染色强度及范围显著减弱,差异有统计学意义(P<0.01),而轻度子痫前期组和重度子痫前期组的胎盘组织染色范围和强度比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:LIF对维持正常妊娠有一定的保护作用,LIF分泌或调控异常,影响了滋养细胞的浸润能力,导致病理妊娠,在胎盘组织中的低表达,参与了子痫前期发病机制。