牙本质牙髓复合体的形成研究(一)牙本质牙髓复合体的新概念及其在牙齿发育中的形成研究

牙本质及牙本质牙髓复合体的形成研究一直是口腔医学研究的重大课题。近年来,生命前沿科学领域的飞速发展和重大进展,也掀起了牙本质牙髓形成研究的热潮。本文阐述了对牙本质牙髓复合体概念的新认识,系统回顾了牙齿发育过程中、牙齿发育完成后,牙本质牙髓复合体体内形成研究、体外形成研究的新进展,及这些研究对临床治疗的指导意义和应对策略,分析了面临的挑战。这对我们把握该领域的研究现状和进一步深入研究奠定了必要的基础。     

牙髓—牙本质复合体

牙髓－牙本质复合体的各结构组合相依赖、相互影响、相互作用，构成一个功能性的有机整体，本文就牙髓－牙本质复合体的概念、动力学特性、体外培养及临床应用等方面作一综述。     

牙髓-牙本质复合体

牙髓-牙本质复合体的各结构组分相互依赖、相互影响、相互作用,构成一个功能性的有机整体.本文就牙髓-牙本质复合体的概念、动力学特性、体外培养及临床应用等方面作一综述.     

牙髓一牙本质复合体的生物学

牙髓一牙本质复合体的生物学是被广泛研究多年的老问题,但随着新技术新方法的开展,对它的认识也有了一些新的进展和争论。当然也仍然有些问题迄今尚未解决。现仅就其组织发生、成熟与衰老以及修复再生等若干问题综述如下。     

重建牙本质-牙髓复合体样结构的实验研究

目的 采用组织工程学的方法重建牙本质-牙髓复合体样结构。方法以大鼠牙髓干细胞为种子细胞，将羟基磷灰石-磷酸三钙（HA-TCP）复合支架材料接种至裸鼠背部皮下，8周后取材进行组织学及免疫组织化学检测。结果移植物组织学切片可见支架材料孔隙内有3层组织结构，由外向内分别为矿化牙本质、前期牙本质及牙髓组织，其中牙本质小管明显，牙髓组织外层细胞密集，部分出现极化，呈现出成牙本质细胞样细胞特征。免疫组织化学染色证实人牙本质特异性蛋白、DMP1在前期牙本质区及成牙本质细胞样细胞为阳性表达。结论采用牙髓干细胞为种子细胞、HA-TCP为支架材料可成功构建牙本质-牙髓复合体样结构，为进一步进行牙齿组织工程再造奠定基础。     

小分子化合物促进牙髓牙本质复合体损伤修复的研究进展

龋病、外伤、医源性刺激等均可引起牙髓牙本质复合体损伤,保存活髓、促进牙髓牙本质复合体的损伤修复对临床治疗至关重要。近年来研究发现,各类小分子化合物可通过细胞内关键信号通路和代谢途径等机制调控炎症,促进牙髓干细胞迁移、增殖、分化,促进血管、神经再生,从而促进牙髓牙本质复合体的损伤修复。该文旨在对近年来小分子化合物在促进牙髓牙本质复合体损伤修复中的应用研究作一综述。     

关于"牙本质-牙髓复合体"一词的译名

由于牙本质和牙髓在胚胎学、组织学和功能上有极为密切的关系,所以近几十年来常将二者称为复合体。在英美一些教科书或专著上有:dentino- pulp complex,dentin- pulp complex,pulp- dentin complex,pulpodentin complex等名词,因而在我国书刊上也就出现“牙本质-牙髓复合体”、“牙髓-牙本质复合体”,甚至还有“牙髓牙本质器官”等等。鉴于与其他专业名词一致,例如“enamo-dentin junction”,“dentiono- enamal junction”译为“釉牙本质界”,而不译为“牙本质釉质界”,我们推荐将dentin- palp complex译为“牙本质-牙髓复合体”,不用“牙…     

牙髓牙本质复合体植物神经的研究进展

植物神经包括交感神经和副交感神经,是调节牙齿组织微循环的重要神经,而且与感觉神经的兴奋性、胶原的形成等密切相关。其功能状态在维持牙的健康与牙病的发生发展中发挥着重要作用,本文拟从供应牙的植物神经的组成、来源、分布、功能等方面作一简要综述。1　牙髓牙本质复合体交感神经纤维1.1　牙髓牙本质复合体交感神经纤维的组成牙髓牙本质复合体的交感神经纤维均为无髓鞘的Ｃ类纤维,直径在0.1～1.5μｍ之间,传导速度较慢。按目前已知其释放的物质又可分为肾上腺素能神经纤维和神经肽Ｙ(ｎｅｕｒｏｐｅｐｔｉｄｅＹ,ＮＰＹ)阳性神经纤维。…     

牙本质牙髓复合体的形成研究(二)牙本质牙髓复合体的在体形成研究

牙本质牙髓复合体在体形成研究包括牙齿发育完成后在各种因素下形成的第三期牙本质和成牙组织、细胞在口腔以外部位形成牙齿样结构两方面。一些细胞外基质分子和生长因子形成的网络调控在其形成中发挥关键性作用。对这些分子机理的研究将为临床牙髓病的生物保髓治疗和牙髓、牙齿再生替代治疗奠定了基础。     

人前磨牙牙髓牙本质复合体的eNOS 、iNOS免疫组化研究

目的：研究内皮型与诱生型一 氧化氮合酶（eNOS与iNOS)在牙髓牙本质复合体的表达，探讨其分布与功能的关系。方法:收集新鲜健康的人前磨牙60个， 固定、脱钙、石蜡包埋、切片,eNOS、iNOS的SABC法免疫组织化学染色。结果：eNOS阳性免疫反应物出现于牙髓血管内皮细胞，部分平滑肌细胞、成牙本质细胞；在部分牙髓血管内皮细胞、平滑肌细胞及神经纤维可见少量iNOS免疫阳性反应物。结论：eNOS在牙髓血管内皮细胞、平滑骨细胞、成牙本质细胞表达、提示eNOS在牙髓血流调节和牙本质的形成中起重要作用；在牙髓牙本质复合体的部分血管内皮细胞、神经纤维有少量iNOS表达，提示少量iNOS可能也参与牙髓牙本质复合体的正常生理功能。     

人前磨牙牙髓牙本质复合体层粘连蛋白受体的免疫组织化学研究

目的：研究层粘连蛋白受体在牙髓牙本质复合体内的表达，探讨其分布与功能的关系。方法：收集新鲜健康人前磨牙60个，固定，脱钙，石蜡包埋，层粘连蛋白受体SABC免疫组织化学染色。结果：层状连蛋白受体免疫反应物（LNR－IR）普遍存在于牙髓牙本质复合体的神经纤维膜、血管内皮细胞、成牙本质 细胞及成纤维细胞上，以牙髓的神经纤维膜、血管内皮细胞最为丰富。结论：层粘连蛋白受体一般见于牙髓复牙本质复合体的各种细胞 膜上，它与层粘连蛋白一起在支持、固定牙髓牙本质复合体各结构的正常位置、形态和功能的发挥上可能起了重要作用。     

iNOS在不同年龄段牙髓牙本质复合体中的差异

目的：研究诱导型一氧化氮合酶（iNOS）在各年龄组牙髓牙本质复合体中的表达,探讨其在牙齿衰老中的意义。方法：新鲜健康的不同年龄段人前磨牙120颗,固定、脱钙、包埋、切片、SABC法免疫组织化学染色,图像定量分析与统计学处理。结果：青少年组牙髓牙本质复合体基本无iNOS表达,随年龄增长逐步出现iNOS表达,老年前期组表达开始明显,表达部位为牙髓牙本质复合体内的神经纤维、成牙本质细胞及其在前期牙本质内的突起、血管内皮细胞。阳性免疫反应物的体密度、面数密度、积分光密度在青少年组、中年组与老年前期组、老年组之间有统计学差异。结论：iNOs与牙本质小管老年性矿化无关,与牙髓老年性血供减少、细胞退行形变、牙本质脆性增加有关。     

人前磨牙牙髓牙本质复合体层粘连蛋白受体的免疫组织化学研究

目的研究层粘连蛋白受体在牙髓牙本质复合体内的表达,探讨其分布与功能的关系.方法收集新鲜健康人前磨牙60个,固定,脱钙,石蜡包埋,层粘连蛋白受体SABC免疫组织化学染色.结果层粘连蛋白受体免疫反应物(LNR-IR)普遍存在于牙髓牙本质复合体的神经纤维膜、血管内皮细胞、成牙本质细胞及成纤维细胞上,以牙髓的神经纤维膜、血管内皮细胞最为丰富.结论层粘连蛋白受体一般见于牙髓牙本质复合体的各种细胞膜上,它与层粘连蛋白一起在支持、固定牙髓牙本质复合体各结构的正常位置、形态和功能的发挥上可能起了重要作用.     

成体干细胞在组织工程化牙本质牙髓复合体中的应用研究与展望

牙髓干细胞(dental pucp stem cells，DPSCs)是一种成体干细胞。有关成体十细胞的研究进展，尤其是骨髓基质干细胞(bone marrow stromal stem cells，BMSSCs)的研究，为牙髓干细胞的研究提供了可以借鉴的思路和方法。DPSCs也有相对特异的识别途径和特点，其中重要的特征之一是一定条件下能形成牙本质牙髓复合体。这将为其应用于组织工程中重建牙本质牙髓复合体，展示了巨大的优越性和可行性，也为其在牙髓生理、病理、牙髓病的生物治疗方面的研究提供了重要的应用价值。     

牙本质龋损下牙本质-牙髓复合体的反应

目的 探讨牙本质龋损进展过程中,牙本质-牙髓复合体的变化特点及规律.方法 选择即刻拔除的第三磨牙65颗,其中牙本质浅龋27颗(急性龋15颗,慢性龋12颗);牙本质深龋28颗(急性龋16颗,慢性龋12颗);无龋损的正常牙10颗.常规固定、脱钙、切片(厚4 μm),光学显微镜下观察牙本质龋病损下方牙髓的组织病理学改变,并用多功能图象分析仪对相应部位的成牙本质细胞的数目、浆核比、前期牙本质面积等进行测量分析.结果 随龋损深度的增加,成牙本质细胞数目显著减少,细胞形态由高柱状变为立方状直至扁平状,前期牙本质变薄甚至消失,第三期牙本质变厚且发生率增加,血管扩张充血,炎症细胞增多,主要为淋巴细胞与浆细胞;牙本质浅龋阶段,成牙本质细胞浆核比显著下降,慢性龋成牙本质细胞样细胞分化、迁移活跃,胶原纤维增多.牙本质深龋阶段出现修复性牙本质,急性龋炎症细胞聚集明显.结论 牙本质-牙髓复合体对龋损的反应与龋损深度及活动性有关;龋损深度增加,损伤反应加重;龋损活动性降低时修复与防御反应加强.     

牙本质牙髓复合体的形成研究(四)牙本质牙髓复合体形成研究的临床应用策略

牙本质牙髓复合体体内、体外形成机制研究的最终目的是应用于临床牙病的治疗。本文在对前述研究文献综述的基础上，简要介绍应用生物活性分子或干细胞进行活髓保存治疗的临床应用策略，分析了应用前景，并提出了应用需要解决的问题。     

牙髓干细胞修复再生同质异体大鼠牙髓牙本质复合体的研究

目的:观察第3代同质异体牙髓干细胞(dental pulp stem cell,DPSCs) 定植于冠髓被摘除的大鼠髓腔后,再生修复牙髓牙本质复合体的能力。方法:18只SD大鼠随机分为实验组和对照组,两组均全麻下摘除大鼠上颌双侧第一磨牙冠髓,实验组同期髓腔定植体外培养的同质异体大鼠牙髓干细胞,对照组冠髓摘除后不进行任何处理,术后均使用光固化树脂充填封闭髓腔。两组动物均于术后2、4、6周处死,取其上颌骨进行大体观察,X线观察,组织学观察,牙本质的厚度测量。结果:实验组4周时,肉眼可见牙髓充血减少;6周时,X线显示牙本质厚度增加,根尖孔闭合;6周时,光镜下显示明显新生牙本质形成,成牙本质细胞栅栏状排列;牙本质厚度测量结果显示,实验组牙本质厚度2周时增厚,4周增厚更明显,持续至6周,优于对照组(P<0.05)。结论:牙髓干细胞髓腔内定植,可以促进牙髓牙本质复合体修复再生,具有潜在的临床应用价值。     

人前磨牙牙髓牙本质复合体的VIP阳性神经纤维

目的研究血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)在牙髓牙本质复合体中的表达,探讨其分布与功能的关系。方法收集新鲜健康的人前磨牙40颗,固定、脱钙、石蜡包埋切片,然后进行VIP免疫组化与图象定量分析。结果VIP阳性神经纤维在根部呈束状,很少分支,从颈部至冠髓扇形分开,大量分支,部分围绕于血管,部分止于牙髓基质,部分经成牙本质细胞层进入前期牙本质。在冠髓的积分光密度为12.7400±1.8070,体密度为0.0192±0.0127,线密度为0.0046±0.0028;在前期牙本质的积分光密度为13.0700±1.9270,线段长度为（19.6000±8.5970）μm。结论VIP阳性神经纤维存在于人牙髓牙本质复合体中,部分围绕血管,部分止于牙髓基质和前期牙本质,这种分布提示该神经纤维除与血管运动有关外,可能还与感觉有关。     

牙本质非胶原蛋白诱导牙髓-牙本质复合体反应的动物实验观察

目的：观察提取的猪牙本质非胶原蛋白对修复性牙本质形成的诱导活性。方法：用提取的猪EDTA可溶性牙本质非胶原蛋白作盖髓剂,对Wistar大鼠的健康第一磨牙进行直接盖髓实验,采用氢氧化钙（Dycal）和空白组为对照,通过组织学实验观察牙髓-牙本质复合体的反应。结果：盖髓术后7 d,各组之间软、硬组织反应的差异无统计学意义。术后14 d,NCPs组和Dycal组的修复反应均明显优于空白对照组（P〈0.01）,且NCPs组对牙髓的刺激小于Dycal组（P〈0.05）。结论：NCPs对牙髓刺激性小,可以诱导牙髓细胞分化为成牙本质细胞样细胞,形成修复性牙本质,其诱导活性至少与常规盖髓剂相当。     

人前磨牙牙髓牙本质复合体中CGRP阳性神经纤维的研究

目的 :研究CGRP在牙髓牙本质复合体中的表达 ,探讨牙痛、牙过敏机理。方法 :收集人前磨牙 ,石蜡包埋切片 ,免疫组化 ,图象定量分析。结果 :CGRP阳性神经纤维分布于牙髓、前期牙本质 ,但不到达成熟牙本质 ,部分分支围绕血管 ,部分分支终止于牙髓基质 ,或成牙本质细胞层 ,或前期牙本质。CGRP阳性神经纤维在冠髓的积分光密度为 12 .39± 1.6 6 ,体密度为 0 .0 182± 0 .0 10 6 ,线密度为 0 .0 0 46± 0 .0 0 2 6 ,在冠部前期牙本质的积分光密度为13 .0 7± 1.74,线段长度为 (19.42± 8.43)mm。结论 :CGRP阳性神经纤维分布于牙髓、前期牙本质 ,未达成熟牙本质 ,牙外因素引起的牙痛可能与间接刺激神经有关 ,牙内因素引起的牙痛可能与直接刺激神经有关。