A组乙型溶血性链球菌膜蛋白抗原纯化及其在风湿性心脏炎发病中意义的探讨

目的　探讨纯化A组乙型溶血性链球菌膜蛋白抗原 (A HSMPA)的方法及其在风湿性心脏炎发病免疫过程中的意义。方法　用反胶束萃取法提纯 ,分别检测提纯前后A HSMPA的成分及抗原性 ,再以A HSMPA及粒细胞 /单核细胞集落刺激因子 (GM CSF)分别刺激风湿性心脏炎组、风湿性心脏病静止期组、急性风湿性关节炎组、自身免疫性疾病组、非风湿性心脏病组、链球菌感染相关性疾病组及健康人对照组的外周血淋巴细胞 ,检测其人类白细胞抗原DR亚型 (HLA DR)分子表达量的改变。结果　 1 提纯后的A HSMPA基本为蛋白成分 ,提纯前后抗原检测外周淋巴细胞促凝血试验结果无显著差异 ,链球菌壁多糖抗体则差异显著。 2 加入A HSMPA孵育后 ,风湿性心脏炎组HLA DR分子表达量的增加为 (19 5 5± 4 32 )× 10 -6A/cell,对照组为 (12 2 2± 6 2 9)× 10 -6A/cell,各组有显著性差异 ;而经GM CSF刺激后 ,以上各组无明显差别。 3 A HSMPA对风湿性心脏炎患者的刺激作用较GM CSF明显。 4 风湿性心脏炎患者随着症状的好转其HLA DR表达量亦减少。结论　 1 反胶束萃取法可提纯A HSMPA并保持其抗原性不变 ,且简便可靠。 2 A HSMPA与HLA DR分子表达量的改变均在风湿性心脏炎发展成为风湿性心脏病过程中起了重要作用。 3 监测A HSMPA刺激后H     

HLA—DR抗原β链的共同表位与类风湿关节炎相关性研究

目的 探讨人类白细胞抗原（ＨＬＡ）－ＤＲ基因编码的共同表位（ＳＥ）与武汉籍汉族类风湿关节炎（ＲＡ）的相关性。方法 采用聚合酶链反应－序列特异性引物技术（ＰＣＲ－ＳＳＰ）,对武汉籍汉族人群７８例ＲＡ患者和１２６例健康者的ＨＬＡ－ＤＲＢ１＊０１、＊０４基因型进行检测。结果 ＲＡ患者中具有编码ＱＫＲＡＡ或ＱＲＲＡＡ的共同表位阳性率为４３．６％,明显高于正常对照组（１５．１％,ｐ〈０．０１）;ＳＥ阳怀的Ｒ     

类风湿关节炎中HLA-DR分子表达量的改变

目的 探讨外周血淋巴细胞表面HLA－DR分子表达量在类风湿关节炎（RA）发病中的作用。方法 选择RA患者活动期34例,静止期40例;正常对照（NC）43例,急性风湿性关节炎（ARA）21例及系统性红斑狼疮（SLE）28例,分别检测外周血淋巴细胞表面的HLA－DR分子表达量。同时在活动期RA治疗3个月前后,分别检测HLA－DR分子表达量、类风湿因子（RF）及对症状计分,进行统计学分析。结果 ①RA活动组HLA－DR分子表达水平最高（P＜0．05）,ARA组及RA静止组较NC组明显增高（P＜0．05）,而SLE组与NC组无明显差别（P＞0．05）;②RA活动组HLA－DR分子表达量及RF的阳性率均在治疗后显著下降,临床症状明显改善。结论 ①检测患者外周血淋巴细胞表面HLA－DR表达量有助于RA的诊断及监测RA活动度;②HLA－DR分子表达量与RF的动态变化相平行;③动态观察HLA－DR分子表达量变化有助于判断RA病情及其预后。     

HLA—DR抗原在慢性肝炎及肝细胞癌中的表达

应用免疫组化ＳＰ法研究ＨＬＡＤＲ抗原在１９例慢活肝、１３例肝硬化（５例伴轻度中度不典型增生）及４９例肝细胞癌组织中的表达。结果显示，慢活肝中肝窦内皮细胞、枯否氏细胞及浸润炎细胞呈ＨＬＡＤＲ阳性染色，其中１例少部分肝细胞膜上有ＨＬＡＤＲ抗原的表达。ＨＬＡＤＲ抗原在正常肝组织、肝硬化伴轻中度不典型增生病灶及肝癌组织中的肝窦内皮细胞、枯否氏细胞呈ＨＬＡＤＲ阳性表达外，２２例肝癌细胞中还见ＨＬＡＤＲ抗原的表达，阳性率为４４．９％（２２／４９）。ＨＬＡＤＲ表达与是否伴肝硬化，癌组织分化程度间均无明显相关关系，而与转移有关。说明ＨＬＡＤＲ可作为反映肝细胞良、恶性病变的一项参考指标，对肝癌的预后评估也有一定的临床意义。     

汉族类风湿关节炎患者HLA—DR和—DQ基因分型研究

为探讨ＨＬＡ－ＤＲ和－ＤＱ等位基因与我国汉族类风湿关节炎（ＲＡ）的相关性，采用聚合酶链反应－限制性内切酶片段长度多态性分析（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）方法对汉族人群中３５例ＲＡ患者和１００名健康人的ＤＲ和ＤＱ位点进行ＤＮＡ定型分析。结果发现，ＤＲ４频率在正常人为２４．０％，在ＲＡ患者为５１．４％（Ｐ＜０．０１，ＲＲ＝３．３０）；ＤＲ４亚型位点分析发现２组均以ＤＲＢ１＊０４０５占多数，但ＤＲＢ１＊０４０５频率在ＲＡ组为３１．４％，高于正常人的１０．０％（Ｐ＜０．０１）。ＤＱ４频率在全部ＲＡ患者为３７．１％，在ＤＲ＋４ＲＡ患者为７２．２％，均高于全部正常人的１０．０％（Ｐ＜０．０１）和ＤＲ＋４正常人的４１．６％（Ｐ＝０．０３７６）；ＤＲ＋４－ＤＱ＋４ＲＡ患者的病情重于ＤＲ－４患者。结果提示，ＤＲ４、主要是ＤＲＢ１＊０４０５与ＲＡ相关，ＤＱ４可增加ＤＲ４对ＲＡ的易感性，ＤＲ＋４－ＤＱ＋４单倍型是ＲＡ病情严重程度的标志。     

应用A组乙型甸球菌特异性菌膜抗原诊断风湿性心脏炎的探讨

目的 研究Ａ组乙型溶血性链球菌菌膜抗原在外周血淋巴细胞促凝血活性试验中诊断风湿性心脏炎的特异性。方法 分别用Ａ组乙型溶血性链球菌菌膜抗原和１％植物血凝素（ＰＨＡ）作为刺激物，分别测定３８名健康对照组，３０例风湿性心脏病活动组（风心活动组）。２０例风湿性心脏病静止组（风心静止组）外周血淋巴细胞促凝血活性（ｐｒｏｃｏａｇｕｌａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ，ＰＣＡ）。结果 在特异性菌膜抗原刺激下风心活动组ＰＣ     

类风湿关节炎相关的HLA—DRβ1亚型对蛋白激酶A信号的影响

目的：研究类风湿关节炎（RA）相关的HLA－DRβ1基因亚型对细胞内蛋白激酶A（PKA）信号通路的影响。方法：测定HLA－DRβ1^*0401、^*0402、^*0403、^*0404亚型转基因细胞内PKA、cAMP及腺苷环化酶（AC）的浓度及活性。结果：RA相关的HLA－DRβ1^*0410和^*0404转基因细胞的PKA活力、cAMP水平及AC活力明显低于HLA－DRβ1^*0402及^*0403转基因细胞（P值均＜0.01）。结论：RA共同表位QK／RRAA的表达可抑制PKA、cAMP和AC的活性,并可能通过干扰细胞内PKA信号通路参与RA的发病。     

细胞粘附分子CD15和HLA—DR抗原在慢性肝炎中的表达研究

采用免疫化ＳＰ法，对细胞粘附分子ＣＤ１５和人类主要组织相容性复合体ＨＬＡ－ＤＲ抗原在慢性肝炎中的表达民政部进行了研究。结果发现慢迁肝和慢活肝中，枯否氏细胞，浸润淋巴细胞和单核细胞呈ＣＤ１５阳性染色，而肝细胞和肝窦内皮细胞均为阴性反应；肝窦内皮细胞，枯否氏细胞和浸润单核细胞呈ＨＬＡ－ＤＲ阳性染色。     

自身免疫性甲状腺疾病对突状细胞和HLA—DR抗原的免疫组化研究

用ＡＢＣ免疫组化法研究桥本甲状腺炎和Ｇｒａｖｅｓ病患者甲状腺内的Ｓ－１００蛋白阳性树突状细胞和ＨＬＡ－ＤＲ抗原阳性甲状腺上皮细胞。发现ＨＴ和ＧＤ甲状腺内的Ｓ－１００蛋白阳性ＤＣ较正常增多，且大多数ＤＣ与ＴＥＣ或浸润淋巴细胞密切接触。     

HLA—DR基因与我国北方汉族肺结核的相关性研究

目的 探讨我国北方汉族ＨＬＡ－ＤＲ基因多态性与肺结核（ＰＴＢ）的遗传关联性及其与临床表现的关系。方法 本研究采用联合酶链反应－序列特异性引物（ＰＣＲ－ＳＳＰ）方法,对７４例ＰＴＢ患者及９０例正常人的ＨＬＡ－ＤＲ等位基因进行分型。结果 与对照组相比,ＰＴＢ患者组的ＤＲＢ１＊１５等位基因频率显著增高（３４．３％比１７．０％,Ｐｃ〈０．０５,ＲＲ＝２．９１）,ＨＬＡ－ＤＲＢ１＊１２基因频率增高（１５．４     

彩色多普勒超声对风湿性心脏炎的诊断价值

目的探讨风湿性心脏炎时彩色多普勒超声心动图（ＣＤＥ）的诊断意义。方法对３８例年龄４－１６岁（平均年龄１０岁）,按近期修订的Ｊｏｎｅｓ诊断标准及ＣＤＥ诊断为心内膜炎包括心瓣膜炎,心包炎、心肌炎者的临床资料及声像图进行分析。结果ＣＤＥ诊断膜病变３１例（８１％）,而临床听诊仅１３例（３４％）,故超声对辩膜病变的检出率明显较高,心包积液急性期５ｍｌ－１５ｍｌ,经２－８周治疗后积液明显减少,大多消失,心脏增     

促凝血活性试验诊断风湿性心脏炎意义的再评价

目的：为了寻找特异性诊断风湿性心脏炎的方法。方法：测定５５例风湿性心脏炎患的外周血淋巴细胞促凝血活性（Ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ ｐｒｏｃｏａｇｕｌａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ,ＬＰＣＡ）,并了解他们的外周血 巴细胞对体外培养的人胚心肌细胞促凝血活性（Ｈｅａｒｔ ｔｉｓｓｕｅ ｃｅｌｌ ｐｒｏｃｏａｇｕｌａｎｔ ,ＨＰ－ＣＡ）的影响。ＨＰＣＡ的测定以血浆凝固时间为指标。结果：风湿性心脏炎患的外周血淋巴细胞能使ＨＰＣＡ明显升高,与其他对照组有显性差异（Ｐ〈０．００１）,而宜综的改变与ＬＰＣＡ有高度的一致性,ＨＰＣＡ及ＬＰＣＡ在风湿性心脏炎时的慢性率分别为８０．０％、８３．６％,均高于ＥＳＲ和ＣＲＰ。结论：揭示ＨＰＣＡ和ＬＰＣＡ均能较特异和敏感地反应湿性心炎,其中ＬＰＣＡ可作为风湿性心     

类风湿关节炎患者抗环瓜氨酸抗体、HLA—DR4基因与其临床特征的关系

目的 探讨抗环胍氨酸（CCP）抗体、人类白细胞抗原HLA-DR4基因与进展性类风湿关节炎（RA）临床特征的关系.方法 记录73例类风湿关节患者的临床资料和实验室检查结果,并采用细胞毒法检测全部病例的HLA-DR4基因携带情况,比较HLA-DR4阳性组与阴性组的临床表现、实验室指标、X线表现及关节功能分级.结果 HLA-DR4阳性者27例,基因频率为37%.HLA-DR4阳性组关节肿胀指数、疼痛指数较高,晨僵持续时间较长,关节功能分级为Ⅲ～Ⅳ级的比例较高,出现骨质破坏比例也较高,抗CCP抗体、类风湿因子、血沉、C反应蛋白值均高于阴性组.结论 HLA-DR4和抗CCP抗体阳性的RA患者与HLA-DR4阴性组的RA患者比较炎症活动严重,且进展较快,应积极治疗.     

HLA-DRβ1*04亚型的氨基酸序列与类风湿关节炎易感相关性分析

目的研究HLA-DRβ1鄢04亚型的氨基酸序列与类风湿关节炎易感性的关系。方法选取类风湿关节炎患者136例,其他疾病对照组79例,以序列特异性引物PCR(PCR-SSP)技术对HLA-DRβ1鄢04的36种基因亚型进行检测,并分析患者临床表现及血清学指标与各亚型氨基酸序列之间的关系。结果136例类风湿关节炎患者中46例出现HLA-DRβ1鄢04亚型阳性(33.8%),明显高于疾病对照组(12.7%)(OR=3.52,95%CI=1.43~5.43,P=0.001);RA患者的HLA-DRβ1鄢04亚型中的谷氨酰胺—赖氨酸或精氨酸—精氨酸—丙氨酸—丙氨酸(QK/RRAA)序列(22.1%)和谷氨酰胺—精氨酸—精氨酸—丙氨酸—谷氨酸(QRRAE)序列(9.6%)均分别高于疾病对照组(10.1%和1.3%)(OR=2.51、8.24,95%CI=1.05~4.52和1.01~56.64,P<0.05);HLA-DRβ1鄢04亚型阳性组、QK/RRAA序列组及QRRAE序列组的关节畸形发生率、血清CRP和RF的阳性率均明显增高(P<0.05);而含有QK/RRAA序列组与含有QRRAE序列组比较各项指标差异均无显著性(P>0.05)。结论HLA-DRβ1鄢04亚型是RA易感基因;携带QRRAE与QK/RRAA序列的RA患者关节受累明显,易发生关节畸形;HLA-DRβ1鄢04亚型中QRRAE序列与QK/RRAA序列均与RA的易感性有关。     

孕妇IgG血型抗体效价与ABO新生儿溶血病关系的探讨

目的:探讨孕妇IgG血型抗体效价与ABO新生儿溶血病发生率之间的关系。方法:对2741例妻O型Rh阳性夫非O型孕妇做IgG抗-A(B)效价测定,对其中286例有HDN危险的孕妇所生新生儿做HDN血型血清学检查(即ABO血型鉴定、Coomb's试验、游离和释放试验),以了解孕妇IgG血型抗体效价高低与ABO-HDN发病率之间的关系。结果:2741例O型孕妇中,IgG抗-A(B)效价<64、64、128、256和≥512各组分别占61.9%、17.0%、12.6%、6.1%和2.4%。286例母婴血型不合且有ABO-HDN危险的孕妇所生新生儿中共有71例HDN阳性,占24.8%;孕妇IgG抗-A(B)效价为64、128、256和≥512各组HDN阳性率分别为10.7%、28.3%、44.9%和64.3%(P<0.01)。结论:孕妇血清中IgG抗-A(B)效价高低与ABO-HDN的发生率成正相关,产前进行血清IgG抗体效价检测非常必要。     

Relationship between autoimmune hepatitis and HLA-DR4 and DRbeta allelic sequences in the third hypervariable region in Chinese

AIM: To analyze the association of HLA-DRB1 with autoimmune hepatitis (AIH) in patients from China. METHODS: In 32 patients and 48 healthy controls, polymerase chain reaction amplification with sequence-specific primers (PCR-SSP) was performed to examine the association of certain alleles or polymorphic sequences of HLA-DRB1 with AIH. RESULTS: HLA-DRB1 typing by PCR-SSP showed that DR4 had a significantly increased frequency among patients with AIH versus healthy control (46.9% versus 20.8%; relative risk = 3.35, P=0.014). In subtypes of DR4, there was a trend of increase in the gene frequency of DRB1 0405 in patients with AIH versus healthy controls (21.9% vs 6.3%, P=0.04, but P(c) =0.08). In addition, a significant increase was found in the alleles frequency encoding QRRAA from the third hyperpolymorphic region of DR4 in the patients with AIH (86.7% of DR4 positive patients vs 40.0% in DR4 positive controls, P=0.016, P(c)=0.028, RR=9.75). CONCLUSION: AIH in Chinese is associated with HLA-DR4.There is a relationship between QRRAA sequence within the third hyperpolymorphic region of the DRB allele and AIH in Chinese.     

The clinical application of etanercept in Chinese patients with rheumatic diseases

Abstract

Over a 2-year period, to evaluate the efficacy and safety of biologic agents, etanercept (25?mg twice per week, s.c.) was used to treat 57 rheumatoid arthritis (RA) patients, 9 ankylosing spondylitis (AS) patients, 6 psoriatic arthritis (PSA) patients, and 4 juvenile rheumatoid arthritis (JRA) patients. In addition to inflammatory arthritis, I have used this tumor necrosis factor (TNF) blocker in other rheumatic diseases including idiopathic thrombocytopenic purpura (ITP), Behçet's disease with intractable oral ulcer, fibromyalgia syndrome, and systemic lupus erythematosis with intractable pleural effusion and acute lumbar disc herniation. For RA, after 6 months of etanercept treatment, all the parameters including number of swollen joints, number of tender joints, disease activity score, erythrocyte sedimentation rate, C-reactive protein, and global health status were rapidly improved (P < 0.001 or P < 0.0001). The anticyclic citrullinated peptide (anti-CCP) antibody and rheumatoid factor also significantly declined. For spondyloarthropathy, it also gave a similar effect as to RA. Both Bath Ankylosing Spondylitis Disease Activity Index and Bath Ankylosing Spondylitis Functional Index also improved. One of the two cases with Behçet's disease with intractable oral ulcer had a long-term remission after etanercept. The other Behçet's disease patient with oral ulcer and another with ITP obtained a good response temporarily. The short-term use of etanercept (<3 months) did not bring a significant effect for cases of fibromyalgia syndrome, pleural effusion, and lumbar disc herniation. In conclusion, a dramatic and rapid clinical response in different kinds of arthritis patients can be achieved by etanercept. Moreover, the TNF-α inhibitor also can treat other severe rheumatic-related symptoms. In general, except for a few cases with infection and two cases with malignancy, etanercept was safe in our arthritis patients. We need to study a larger number of patients in order to better understand the efficacy and safety of etanercept.