类风湿关节炎患者抗血管内皮细胞抗体、血管内皮生长因子和白细胞介素-17的检测及意义

目的 通过对类风湿关节炎(RA)患者血清抗血管内皮细胞抗体(AECA)、血浆血管内皮生长因子(VEGF)和白细胞介素-17(IL-17)的检测,旨在探讨AECA、VEGF、IL-17在RA患者发病、病情进展中的相关性及其内在联系.方法 采用间接免疫荧光法(IIF)和双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测86例RA、45例骨关节炎(OA)、30例健康对照AECA的阳性率和VEGF、IL-17水平,VEGF、IL-17水平与红细胞沉降率(ESR)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、类风湿因子(RF)等指标进行相关性分析.结果 RA患者AECA阳性率为8.1%,高于OA患者的阳性率2.2%(t:2.133,P<0.05)和健康对照的阳性率0(t=2.562,P<0.05);RA活动期AECA阳性率为16.7%,高于RA缓解期的阳性率3.6%(t=2.105,P<0.05);RA患者血浆IL-17和VEGF水平显著高于OA组(t=2.02、t=2.106,P<0.05)和健康对照组(t=2.413、t=2.469,P<0.05);RA患者活动期血浆IL-17和VEGF水平明显高于RA缓解组(t=2.315、t=2.232,P<0.05)及健康对照组(t:2.985、t=2.753,P<0.01);RA缓解组与健康对照组无明显差异(t=1.475、t=1.326,P>0.05);RA患者AECA滴度、血浆IL-17、VEGF水平与ESR、hs-CRP、RF的指标呈正相关.结论 AECA、VEGF、IL-17三者与RA的发病、病情活动存在一定的关系,IL-17、VEGF水平变化及AECA的滴度可作为临床观察RA病情活动、判断疗效及预后等方面的参考指标.     

类风湿关节炎患者抗血管内皮细胞抗体、血管内皮生长因子和白细胞介素-17的检测及意义

目的通过对类风湿关节炎（RA）患者血清抗血管内皮细胞抗体（AECA）、血浆血管内皮生长因子（VEGF）和白细胞介素-17（IL-17）的检测,旨在探讨AECA、VEGF、IL-17在RA患者发病、病情进展中的相关性及其内在联系。方法采用间接免疫荧光法（IIF）和双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测86例RA、45例骨关节炎（OA）、30例健康对照AECA的阳性率和VEGF、IL-17水平,VEGF、IL-17水平与红细胞沉降率（ESR）、超敏C反应蛋白（hs．CRP）、类风湿因子（RF）等指标进行相关性分析。结果RA患者AECA阳性率为8．1％,高于OA患者的阳性率2．2％（t=2．133,P〈0．05）和健康对照的阳性率0（t=2．562,P〈0．05）;RA活动期AECA阳性率为16．7％,高于RA缓解期的阳性率3．6％（f=2．105,P〈0．05）;RA患者血浆IL-17和VEGF水平显著高于OA组（t=2．02、t=2．106,P〈0．05）和健康对照组（t=2．413、t=2．469,P〈n05）;RA患者活动期血浆IL—17和VEGF水平明显高于RA缓解组（t=2．315、t=2．232,P〈0．05）及健康对照组（仁2．985、t=2．753,P〈0．01）;RA缓解组与健康对照组无明显差异（t=1．475、t=1．326,P〉0．05）;RA患者AECA滴度、血浆IL-17、VEGF水平与ESR、hs—CRP、RF的指标呈正相关。结论AECA、VEGF、IL-17三者与RA的发病、病情活动存在-定的关系,IL-17、VEGF水平变化及AECA的滴度可作为临床观察RA病情活动、判断疗效及预后等方面的参考指标。     

IL-22在类风湿关节炎中的表达及临床意义

目的：探讨RA患者IL-22的表达水平并分析其临床意义。方法：流式细胞术检测RA患者（50例）、OA患者（15例）、健康对照组（15例）外周血及RA关节滑液Th22细胞所占比例,ELISA法检测血清及RA关节滑液中IL-22水平。检测RA患者疾病活动性、临床指标、骨破坏情况,分析其与IL-22水平相关性。两组间比较用t检验,相关性分析采用Pearson直线相关分析法,多组样本比较用Kruskal-Wallis H检验。结果：RA患者外周血中Th22细胞比例高于OA组（t=2.290,P=0.021）及健康对照组（t=2.524,P=0.015）;RA患者血清IL-22水平高于OA患者（t=2.560,P=0.014）及健康对照组（t=2.768,P=0.009）。RF阳性RA血清IL-22水平高于RF阴性RA（t=2.322,P=0.035）。抗CCP抗体阳性RA血清IL-22水平高于抗CCP抗体阴性RA（t=2.504,P=0.015）。RA血清IL-22水平与ESR、RF、DAS28评分呈正相关关系（r分别为0.312、0.314、0.332,P<0.05）。RA患者血清IL-22水平随骨侵蚀的加重呈递增趋势,X线不同分期之间差异有统计学意义（H=9.14, χ²_0.05（3）=7.81,H>χ²_0.05(3),P<0.05)。有关节积液RA患者血清IL-22水平高于无关节积液RA患者（t=2.587,P=0.012）,关节滑液IL-22水平高于血清（t=2.668,P=0.011）,与关节滑液Th22细胞比例无相关性（r=0.287,P=0.065）。结论：RA患者血清及关节滑液IL-22水平增高,与疾病活动性及骨破坏相关,可成为病情评估与骨破坏的指标。IL-22可能为RA治疗的新靶点。     

类风湿关节炎患者血清炎性因子、ANCA水平与血管内皮损伤标志物的相关性分析

目的:探讨类风湿关节炎(RA)患者血清炎性因子及抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)水平与血管内皮损伤的相关性。方法:106例RA患者,分为活动组(83例)和缓解组(23例),55例健康人群作为对照,采用ELISA检测各组血清炎性因子白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、白介素-17(IL-17)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及血管内皮损伤标志物-血管性血友病因子(vWF)、可溶性细胞间黏附分子-1(sI-CAM-1)及血管内皮黏附分子-1(sVCAM-1)水平;采用间接免疫荧光法(IIF)检测各组血清ANCA阳性率。比较各组上述指标水平差异,分析两组RA患者炎性因子水平、ANCA阳性率与血管内皮损伤标志物水平的相关性。结果:RA活动组IL-6、TNF-α、vWF、sICAM-1、sVCAM-1血清水平均高于对照组(P<0.05);RA缓解组IL-6、vWF水平均低于RA活动组(P<0.05),但vWF、sVCAM-1水平仍显著高于对照组(P<0.01);RA患者IL-6、IL-1β、IL-17与血管内皮损伤标志物有不同程度的相关性;RA患者活动组ANCA阳性率为32.5%,显著高于对照组(P<0.01);ANCA阳性患者vWF水平高于ANCA阴性患者(P<0.05)。结论:RA活动期患者存在较明显血管内皮损伤,这种损伤与高水平的炎性因子及ANCA阳性表达有关。     

类风湿关节炎患者关节液中HSP72水平变化与疾病活动性及炎症因子水平相关性分析

目的观察类风湿关节炎(RA)患者关节液中热休克蛋白72(HSP72)的水平变化,并对其与疾病活动性相关指标和细胞因子之间的相关性进行分析。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测RA患者和骨关节炎(OA)患者关节液中HSP72、TNF-α、IL-6、IL-10的表达水平。结果活动期RA患者关节液中HSP72水平明显高于非活动期RA患者和OA对照组(P<0.01)。活动期RA患者关节液中TNF-α、IL-6的水平均高于非活动期RA患者和OA对照者(P<0.01),关节液中IL-10在各组之间无显著差异。RA患者关节液中HSP72的水平与血沉(ESR)、C反应蛋白(CRP)、风湿因子(RF)呈正相关;RA患者关节液中HSP72的水平与关节液中TNF-α、IL-6水平呈正相关。结论关节液中HSP72可能与RA的炎症相关,与RA病情活动有关。     

IL-23及其受体与类风湿关节炎疾病活动的相关性分析

为探讨血清IL-23水平与类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)病情活动相关性及对患者外周血NK细胞功能的影响,选取本院2015年2月至2016年4月收治的RA患者80例作为观察组,选择健康者80例作为对照组,对两组入选者行血清IL-23、外周血NK细胞及相关指标检测,回顾性分析检测结果显示观察组患者IL-23显著高于对照组(t=87.217,P0.05);观察组IL-23R在NK细胞的表达率为(1.23±0.28)%,显著低于对照组的(4.53±1.07)%(t=21.097,P0.05);稳定与轻度、中度、重度活动组以及X线分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期组患者IL-23水平均呈递增趋势,且两两对比差异显著(P0.05);观察组患者IL-23水平与RF、ESR、CCP、CRP、DAS28评分均表现为显著正相关(P0.05),由此IL-23水平与RA病情进展密切相关。     

类风湿关节炎湿热痹阻型患者血清和关节液IL-1、IL-6、TNF-α的表达研究

目的检测类风湿关节炎(RA)湿热痹阻型患者血清和关节液中IL-1、IL-6、TNF-α的表达水平,分析IL-1、IL-6、TNF-α与炎性活动指标ESR、CRP、DAS28之间的关系,探索细胞因子与RA发生发展的关系。方法采用ELISA法检测RA湿热痹阻型患者外周血血清90例、RA湿热痹阻型患者关节液28例、骨性关节炎患者关节液30例及健康对照组血清30例IL-1、IL-6、TNF-α的表达,并常规方法检测ESR、CRP。利用SPSS11.5统计学软件进行统计学分析。结果 RA湿热痹阻型患者外周血血清中IL-1、IL-6及TNF-α表达水平显著高于健康组血清,差异有统计学意义(t=12.25,10.56,8.758;P0.05);RA湿热痹阻型患者关节液中IL-1、IL-6及TNF-α的表达水平显著高于外周血血清,差异有统计学意义(t=4.35,3.09,2.496;P0.05);RA湿热痹阻型患者关节液中IL-1、IL-6及TNF-α表达水平明显高于骨性关节炎关节液,差异有统计学意义(t=3.47,2.46,2.51;P0.05)。RA湿热痹阻型患者外周血血清和关节液中IL-1、IL-6及TNF-α的表达与ESR、CRP、DAS28无相关性(P0.05)。结论 RA湿热痹阻型患者外周血和关节液中IL-1、IL-6及TNF-α的异常升高可能参与了RA的发生发展。     

类风湿关节炎患者血清中IL-17 表达及IL-17F 基因位点rs763780 多态性分析

目的:了解类风湿关节炎(RA)患者血清中IL-17、类风湿因子(RF)及C反应蛋白(CRP)的表达,并探讨IL-17F基因位点rs763780多态性与RA发病易感相关性。方法:收集2016年1月～2018年10月来深圳市福田区风湿病专科医院就诊的RA患者176例为研究组,并选取同期来院体检的健康人群110名为对照组,分别检测血清中IL-17、RF及CRP含量,并采用聚合酶链反应(PCR-RFLP)技术对IL-17F基因位点rs763780多态性进行分析。结果:RA组血清中IL-17、RF及CRP含量分别为(36.73±11.06)pg/ml,(58.05±14.92)U/ml和(32.15±13.96)mg/L,明显高于对照组的(14.52±6.35)pg/ml,(10.24±5.32)U/ml和(6.81±3.25)mg/L,差异均有统计学意义(t=3.035 7～5.320 6,P0.05);RA组CC基因型和C等位基因检出率分别为19.32%和41.48%,明显高于对照组的6.36%和26.82%,差异有统计学意义(χ~2=3.916 5～5.054 7,P0.05);RA组IL-17F基因位点rs763780 CC基因型中的IL-17水平为(42.96±13.64)pg/ml,明显高于其他基因型,差异有统计学意义(P0.05),而三种基因型血清中RF和CRP水平之间差异均无统计学意义(P0.05)。结论:RA患者血清中IL-17,RF及CRP水平明显高于健康人群,同时RA患者IL-17F基因位点rs763780 CC基因型及C等位基因检测率明显高于健康人群,可能是导致本地区RA发病的危险遗传易感基因之一。     

6种miRNAs在类风湿关节炎患者外周血及关节液中的表达分析

目的:探讨miR-16、miR-17、miR-30a等6种miRNAs在类风湿关节炎(RA)患者外周血血浆、单个核细胞(PBMC)及关节液中的表达水平及其临床意义,为进一步研究其在RA中的作用机制提供理论依据。方法:收集80例RA患者、32例骨关节炎(OA)患者及32例健康人外周血、关节液,分离血浆及PBMC;提取small RNA,用特异性茎环引物反转录成c DNA,构建成熟miRNAs的T载体,绘制标准曲线;stem-loop法Real-time PCR检测血浆、PBMC及关节液miRNAs的表达量,进行相关性分析;并与RA活动性监测指标类风湿因子(RF)、血沉(ESR)、C-反应蛋白(CRP)进行相关性分析。结果:RA组血浆、PBMC和关节液中miR-16、miR-17、miR-30a、miR-106 miR-101和miR-130相对于OA组、健康对照组表达上调(P<0.05),但血浆中miR-101的表达水平与OA组差异无统计学意义。相关性分析显示,6种miRNAs在血浆、PBMC及关节液中有不同程度的正相关(P<0.05)。与RF、ESR、CRP相关分析显示,血浆、PBMC和关节液中miRNAs与一个或多个指标正相关(P<0.05)。结论:miR-16、miR-17、miR-30a、miR-101、miR-106、miR-130在RA患者血浆、PBMC及关节液中有显著变化,表明这些miRNAs可能通过调控某些相关基因在RA的发病过程中发挥重要作用;其表达水平可作为RA疾病活动的有效检测指标,为RA提供新的诊断标志物。     

类风湿性关节炎患者的RF和IL-17的表达及临床意义

目的:探讨类风湿性关节炎患者的类风湿因子(RF)和白介素-17(IL-17)的表达及临床意义.方法:选取2019年1月～2021年3月我院收治的102例类风湿性关节炎患者为研究组,及102例健康志愿者为对照组.对比两组及不同病情活动程度类风湿性关节炎患者RF、IL-17水平;分析RF、IL-17联合检测对类风湿性关节炎诊断价值.结果:研究组RF、IL-17水平高于对照组(P<0.05).不同病情活动程度类风湿性关节炎患者RF、IL-17水平为:低活动度<中活动度<高活动度(P<0.05).RF、IL-17联合检测的敏感度与特异度均高于单一检测(P<0.05).结论:推测RF、IL-17可能参与了类风湿性关节炎发生、发展过程,联合检测两者在帮助类风湿性关节炎患者进行早期诊断及病情评估具有一定的价值.     

活动期类风湿关节炎患者血清及关节液白细胞介素-17水平变化及与有关实验室指标的关系

目的:分析类风湿关节炎(RA)患者外周血和关节液中T辅助细胞17(Thl7)相关细胞因子白介素-17(IL-17)水平,探讨其在RA中的变化特点及与实验室指标的相关性.方法:用ELISA检测50例活动期RA患者血清和其中15例关节液以及30例正常人血清IL-17水平.同时测定RA患者血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)、...     

人白细胞介素-17在干燥综合征患者外周血中的表达及意义

目的 目的分析不同分期干燥综合征(Sj?gren's syndrome,SS)患者外周血中人白细胞介(interleukin,IL)-17的表达并探讨其临床意义.方法 选择同期SS患者46例及健康体检者23例,酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)分析不同临床病程患者与健康体检者外周血中IL-17的水平;同HE染色法检测唇腺中淋巴细胞浸润程度,分析不同病理级别患者外周血中IL-17差异.结果 与健康组比较,初发组、复发组、稳定组的IL-17水平升高,差异均均具有统计学意义(t=4.125、t=4.317,t=2.916,均P<0.05);稳定组分别与初发组和复发组比较,IL-17水平减低,差异均具有统计学意义(t=2.732、t=3.011,均P<0.05);初发组与复发组比较,差异无统计学意义(t=1.015,P>0.05).Ⅱ级病例的IL-17水平分别与Ⅲ级和Ⅳ级病例比较,差异均具有统计学意义(t=3.028、t=3.104,P<0.05);而Ⅲ级病例与Ⅳ级病例比较,差异无统计学意义(t=0.973,P>0.05).外周血IL-17水平与分级呈正相关性(r=0.887,P<0.05).结论 IL-17在SS的发生发展中起着重要作用,对S S患者病情的动态评估具有积极临床意义.     

类风湿关节炎患者血清和关节液细胞因子水平的变化及临床意义

目的探讨幼年类风湿关节炎(JRA)及类风湿关节炎(RA)患者IL-6、IL-8、sIL-2R和TNF-α等细胞因子(CK)水平的变化,及其与风湿活动的传统指标血沉(ESR)和C-反应蛋白(CRP)的相关性。方法采用夹心ELISA法,对30例JRA和34例RA患者的血清中,4例JRA、7例RA、6例骨性关节炎(OA)和9例半月板损伤(MT)患者的关节液中IL-6、IL-8、sIL-2R和TNF-α的水平进行检测。结果①30例JRA、34例RA患者血清IL-6和sIL-2R的水平与对照组相差非常显著(P〈0.01);30例JRA患者血清IL-8水平与对照组比较相差显著(P〈0.05)。②JRA全身型、少关节型患者血清IL-8、sIL-2R的水平和JRA多关节型患者血清IL-6的水平与对照组相差非常显著(P〈0.01)。③4例JRA及7例RA患者关节液sIL-2R的水平和RA患者关节液的IL-6水平与对照组相差显著(P〈0.05)。④JRA患者血清IL-6和sIL-2R的水平与ESR和CRP的变化呈明显的相关关系(r值分别为0.532和0.621)。结论①IL-6、sIL-2R的水平与JRA、RA病的活动性有关,是类风湿活动性的主要指标。②sIL-2R不仅参与JRA和RA的全身病理损伤,而且是引起关节局部损伤的主要CK,IL-6也参与JRA关节局部的病理损伤,在RA关节局部损伤似乎更为重要。③IL-8主要参与JRA的全身病理损伤,对关节局部病理损伤似乎并不重要。     

类风湿关节炎患者Th17细胞与调节性T细胞失衡的研究

目的观察类风湿性关节炎（RA）患者外周血Th17细胞与CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋调节性T细胞（Treg）平衡状态与疾病的关系,分析Th17／Treg细胞免疫失衡在RA发病机制中的作用。方法采用流式细胞仪四色荧光抗体标记法分别对47例RA患者和39名健康志愿者（HVs）进行CD3、CD8、IL-17与CD4、CD25、F0xP3标记,测定Th17与调节性T细胞的比例变化及相关细胞因子IL-6、IL-23和IL-17水平。结果RA组患者外周血中,CD3^＋CD8^＋IL-17^＋T细胞占CD3^＋T淋巴细胞的百分比为（1．12±0．38）％,明显高于对照组（0．68±0．29）％（t=1．83,P〈0．05）;CD4’CD25’FoxP3^＋细胞占CD4^＋T淋巴细胞的百分比为（2．74±0．71）％,明显低于对照组（4．69±1．23）％（t=-2．94,P〈0．05）。相关细胞因子测定结果：IL-6水平在RA组为（13．5±3．7）ng／L,正常人为（4．6±0．9）ng／L（t=6．24,P〈0．01）;IL-23水平在RA组为（71±19）ng／L,正常人为（25±6）ng／L（t=14．37,P〈0．01）;IL-17水平在RA组为（122±33）ng／L,正常人为（37±9）ng／L（t=19．01,P〈0．01）;RA患者血清IL-6、IL-23和IL-17水平均明显升高。结论RA患者外周血Th17与CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋调节性T细胞数量的异常可能是RA发病的重要因素,IL-6和IL-23的升高是引起这些改变的可能原因。     

Expression of vascular endothelial growth factor isoforms and their receptors Flt-1, KDR, and neuropilin-1 in synovial tissues of rheumatoid arthritis

Angiogenesis is an indispensable process in the chronic proliferative synovitis and pannus formation of rheumatoid arthritis (RA). This study examined the expression of vascular endothelial growth factor (VEGF) isoforms and VEGF receptors, Flt-1, KDR and neuropilin-1, in RA and osteoarthritis (OA) synovia, and studied the relationship between their expression and the synovial angiogenesis. By RT-PCR analysis, the isoform VEGF(121) was constitutively expressed in all the RA (17/17 patients) and OA (8/8 patients) synovia. In contrast, the expression of the isoform VEGF(165) was observed in 41% of the RA synovia (7/17 patients), but was undetectable in the OA samples (0/8 patients). The receptor Flt-1 was almost constitutively expressed in RA (15/17 patients) and OA (8/8 patients) synovia, while the expression of KDR was detected in the synovia of six RA patients (6/17 patients; 35%) but none of the OA patients (0/8 patients). The expression of neuropilin-1, an isoform-specific receptor for VEGF(165) which enhances the binding of VEGF(165) to KDR, was also up-regulated in the same RA synovia that expressed KDR. Furthermore, there was a close correlation between the expression of isoform VEGF(165) and that of its receptors KDR and neuropilin-1. Morphometric analysis demonstrated that the vascular density is significantly higher in the RA synovial tissues with expression of VEGF(165), KDR, and neuropilin-1 than in those without their expression (p<0.01). In situ hybridization and immunohistochemical studies indicated that the cells expressing VEGF are macrophage-like synovial lining cells and spindle-shaped cells in the sublining cell layer. These results suggest that the selective up-regulation of the isoform VEGF(165) and its signalling via KDR and neuropilin-1 play an important role in the synovial angiogenesis which occurs in RA.     

类风湿性关节炎患者外周血芳香烃受体表达与Th17细胞相关性研究

目的 检测类风湿性关节炎患者(RA)外周血单个核细胞芳香烃受体(AhR)的表达情况,分析其表达与Th17细胞相关性并初步探讨AhR在RA发病中的作用机制.方法 Ficoll密度梯度法分离75例RA患者(其中活动期RA患者40例,缓解期RA患者35例)及70例健康对照者外周血单个核细胞(PBMC),酶联免疫吸附实验(EUSA)检测细胞裂解上清中AhR蛋白表达.流式细胞术检测75例RA患者Th17细胞表达比例.分析RA患者AhR蛋白表达与Th17细胞比例及其他临床指标的相关性.结果 RA患者PBMC内AhR表达[(91.25±15.27) ng/L]高于健康对照组[(41.81 ±9.72) ng/L],差异有统计学意义(t=3.191,P＜0.01).活动期RA患者AhR表达与缓解期RA患者表达差异无统计学意义(P＞0.05).RA患者PBMC中AhR水平与Th17细胞表达呈正相关(r=0.361,P=0.0015).RA患者PBMC中AhR表达与血清IL-17水平呈正相关,与其他临床指标无相关性(r=0.324,P=0.006).结论 RA患者PBMC中AhR表达升高,且与Th17细胞和血清中IL-17水平呈正相关,推测RA中AhR可能正向调控Th17细胞分化,促进IL-17表达.