血糖升高速度对糖尿病模型大鼠低血糖性脑损伤的影响

目的探讨不同的血糖升高速度对糖尿病模型大鼠低血糖性脑损伤的影响。方法将糖尿病模型大鼠随机分为假手术组(Sham组,5只)、低血糖后快速再灌注组(Fast组,5只)、低血糖后慢速再灌注组(Slow组,5只)。所有大鼠实验前禁食12 h。Sham组大鼠以1.5 ml/h灌注葡萄糖胰岛素混合液,维持血糖在(5.50±0.25)mmol/L。Fast组和Slow组以1 U/h的速度泵入胰岛素诱导低血糖。Fast组以2.8~3.0 ml/h灌注25%葡萄糖,在5~10 min内将血糖水平升至5~6 mmol/L;Slow组以1.2~1.4 ml/h灌注25%葡萄糖,在20~30 min内将血糖水平升至5~6 mmol/L。利用微透析探针技术,连续动态监测脑组织部分氨基酸水平的变化情况。利用电镜技术检测脑组织超微结构的变化。结果电镜检查发现,在葡萄糖再灌注后,Fast组突触前膜、突触后膜不清晰,多数有融合,突触间隙模糊不清;Slow组突触前膜、突触后膜尚清晰,突触间隙大致正常,少数有融合,突触小泡增多不明显。与低血糖前相比,低血糖后各组大鼠脑组织天冬氨酸、谷氨酸和GABA浓度均升高(均P0.05)。Fast组和Slow组葡萄糖再灌注后脑组织谷氨酸、天冬氨酸和GABA浓度明显低于低血糖后,亦低于Sham组葡萄糖胰岛素混合液灌注后(均P0.05)。在葡萄糖再灌注后,Slow组脑组织天冬氨酸和谷氨酸以及GABA浓度明显低于Fast组(均P0.05)。结论低血糖发生后,天冬氨酸和谷氨酸以及GABA浓度升高,一旦予以葡萄糖再灌注后,脑组织内上述氨基酸浓度降低。葡萄糖再灌注速度较慢的大鼠脑组织神经突触超微结构损害更轻,脑组织谷氨酸、天冬氨酸和GABA浓度降低更显著。     

大鼠流体冲击致脑损伤后海马循环的变化

目的 :探讨大鼠闭合性脑损伤后 ,脑循环功能的改变规律。方法 :应用流体冲击致大鼠脑损伤模型 ,采用氢清除法和二胺基联苯胺染色及图像分析 ,观察大鼠海马血流量及海马血管密度的变化。结果 :大鼠脑损伤后 1h海马血流量开始下降 ,4h达最低 ,8h后逐渐恢复 ;与此同时海马血管密度在伤后 4h升高达峰值 ,8h后渐下降至伤前水平。结论 :大鼠流体冲击致脑损伤后 ,海马血流量的降低与血管密度破坏性的增加表明脑循环明显受损     

创伤性脑损伤后大鼠海马区糖皮质激素受体mRNA的表达

目的研究创伤性脑损伤(TBI)后大鼠海马区糖皮质激素受体(GR)mRNA表达的变化及其对大鼠认知功能的影响。方法建立大鼠头颅侧向旋转加速脑创伤模型,应用逆转录酶-聚合酶链式反应(RT-PCR)和Morris水迷宫检测伤后大鼠海马区GR mRNA的表达与学习记忆功能的关系。结果伤后4～7 d大鼠海马区GR持续低表达;Morris水迷宫检测伤后大鼠出现认知功能障碍。结论 TBI大鼠海马区GR mRNA的降低影响大鼠认知功能。     

LactusideB对缺血性脑损伤大鼠海马和纹状体NT-3mRNA表达的影响

目的 探讨Lactuside B对缺血性脑损伤大鼠海马和纹状体NT-3 mRNA表达的影响.方法 SD雄性大鼠,体重280～320g,随机分为假手术组、模型组、阳性药物对照组、Lactuside B低剂量组、中剂量组和高剂量组,共6组,8只/组.采用大鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤模型,各组动物均按5ml/kg的容量腹腔注射相应的实验药物,每天给药一次.动物持续脑缺血2h,在再灌注24h和72h对其神经系统体征进行客观评分后分别处死4只动物,采用RT-PCR技术检测大鼠海马和纹状体不同时间段NT-3 mRNA的表达.结果 研究发现Lactuside B各剂量组均可降低神经缺损症状评分,提高海马和纹状体NT-3 mRNA的表达,且低、中剂量组作用较好,与模型组和阳性对照药比较有显著性差异(P＜0.05或P＜0.01),用药72h后两部位的NT-3mRNA表达更多,与24h比较有显著性差异(P＜0.05或P＜0.01).结论 Lactuside B可通过上调海马和纹状体NT-3 mRNA的表达起到抗缺血性脑损伤的作用,两部位升高的NT-3 mRNA对目标蛋白的合成具有积极的导向性质.     

大鼠创伤性脑损伤后脑组织β-微管蛋白表达及意义

目的 探讨大鼠创伤性脑损伤(TBI)后脑组织中β-微管蛋白(β-tubulin)的表达规律及意义.方法 雄性SD大鼠56只,按随机数字表法分为正常对照组(8只)和TBI组(48只);采用头颅侧向旋转致伤方法制作TBI模型,按建模后处死时间分为6h,12 h,24 h,72 h、7d,14 d共6个亚组,每组8只动物.采用SP免疫组化方法检测β-tubulin在大鼠脑组织中表达及分布.β-tubulin阳性结果判断标准以胞浆内出现棕黄染色为阳性,反之为阴性,并设阴性对照切片.结果 大鼠脑组织中β-tubulin在皮层与海马组织细胞的胞浆、轴突、胞体树突中均有表达,脑损伤后6h时间点皮层与海马细胞表达均最低(P＜0.01),随后表达量逐渐递增,至损伤后14 d其表达量恢复正常值,14 d与正常对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 TBI后,β-tubulin出现一个表达低值,提示在不同机制下可能对脑损伤的发生与发展发挥重要影响作用.     

创伤性脑损伤后大鼠脑组织S100A6的表达规律及意义

目的探讨大鼠创伤性脑损伤（traumatic brain injury,TBI）后脑组织中钙结合蛋白S100alpha 6（S100A6）的表达规律及意义。方法雄性SD大鼠54只,按随机数字表法分为正常对照组（6只）和TBI组（48只）;采用头颅侧向旋转致伤方法制作TBI模型,并按伤后大鼠处死时间分为1,3,6,12,24,72 h、7 d,14 d共8个亚组,每组6只。采用免疫组化方法法检测S100A6蛋白在大鼠脑组织中表达规律及分布情况。S100A6阳性结果判断标准以细胞浆内出现棕黄染色颗粒为阳性,反之为阴性,为消除背景染色的影响,同一组织连续切片设阴性对照组。结果大鼠脑组织中S100A6蛋白在皮层与海马组织细胞的核膜、胞质、细胞膜中均有表达,脑损伤后一小时时间点皮层与海马细胞表达均最低（P〈0.01）,随后表达量逐渐递增,至损伤后7d其表达量恢复正常值,7 d、14 d与正常对照组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论在TBI后,S100A6蛋白出现一个表达低峰,提示在不同机制影响下可能对脑损伤的发生与发展发挥重要作用。     

亚低温对大鼠弥漫性脑损伤后海马CA3区HSP70表达及细胞凋亡的影响

目的 观察亚低温对大鼠弥漫性脑损伤(DBI)后海马CA3区HSP70在蛋白质和mRNA水平的表达及细胞凋亡上的影响,探讨亚低温脑保护分子生物机制。方法 将大鼠随机分成空白对照、假手术、单纯DBI和DBI后亚低温治疗四组,按Marmarou氏方法制作大鼠DBI模型,采用免疫组化法、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及流式细胞仪(FCM),分别观察各组动物脑海马CA3区HSP70在蛋白质和mRNA水平的表达及细胞凋亡率。结果 与对照组相比,大鼠DBI后海马CA3区HSP70表达水平及细胞凋亡率均升高(P<0.05);亚低温治疗后,大鼠脑海马CA3区HSP70表达水平较单纯DBI组显著增高(P<0.01),而细胞凋亡率则明显降低(P<0.05)。结论 亚低温对创伤性脑损伤的脑保护机制可能与促进HSP70表达,并减少神经细胞凋亡有关。     

PACAP对大鼠创伤性脑损伤后caspase-3的影响

目的观察垂体腺苷酸环化酶激活肽（PACAP）对创伤性颅脑损伤（TBI）后大鼠脑组织内切冬酶-3（caspase-3）表达及活性变化的影响。方法采用TBI模型，运用免疫组织化学及免疫荧光技术，观察TBI伤后2h～3d伤侧大脑皮层、海马caspase．3表达及活性变化情况。结果在伤后各时相点（2、12、24、48、72h）PACAP治疗组caspase-3表达与TBI组相比较，皮质与海马的表达都要相对减少；caspase-3的活性明显下降（P〈0．05）。结论PACAP能降低TBI脑组织内caspase-3表达及活性，减少神经细胞凋亡。     

尼莫地平对大鼠脑损伤后血脑屏障保护作用的定量研究

<正> 脑损伤后血脑屏障(BBB)通透性增加,脑水肿的发生、发展,加剧脑继发性损害。细胞内钙离子增加,超载是BBB通透性增加的直接原因。伊文兰与血浆蛋白结合的特性,用于定性观察血脑屏障通透性变化。本文采用分光光度计法,检测大鼠脑损伤后皮质、海马伊文氏兰含量,定量评价钙离子拮抗剂尼莫地平对血脑屏障的保护作用。 材料方法:雄性SD大鼠48只,体重250±30g,随机分为正常对照组、假手术组、脑损伤组和治疗组。每组12只。 脑损伤模型采用改良的Feeney’s自由落     

黄体酮对创伤性脑损伤大鼠神经细胞凋亡的影响

目的 观察黄体酮对脑外伤后神经细胞凋亡的影响,探讨其对脑外伤(TBI)继发性脑损伤是否存在保护作用.方法 雄性Wistar 大鼠随机分为无脑损伤的假手术(sham)组、脑损伤(TBI)组、脑损伤后注射黄体酮治疗(P-TBI)组及注射二甲基亚砜(DMSO)溶剂(D-TBI)组,每大组24 只,再分1 d、3 d、5 d 和7 d 四个小组,每小组6 只.采用Freeney 法造成鼠脑挫裂伤模型,在伤后四个不同时相点用TUNEL 染色法分别检测四组大鼠脑组织中神经细胞凋亡情况.结果 创伤性脑损伤后凋亡细胞数量在TBI 第1 d 明显增加,TBI后第7 d 神经细胞凋亡达到高峰.伤后注射黄体酮治疗组神经细胞凋亡指数明显下降(P ＜0.05).结论 大鼠TBI 后周围脑组织神经细胞凋亡在伤后持续增加,注射黄体酮能抑制细胞凋亡,对脑组织有一定保护作用.     

Effects of severe hypoglycemia on the human brain neuropathological case reports

The neuropathological findings in two cases of irreversible hypoglycemic brain injury are described. A 26-year-old diabetic man injected insulin without adequate food intake and died after 2 months in coma. An 84-year-old nondiabetic man accidentally received 10 mg of glibenclamide and died after 3 months in relatively superficial coma.
In the first case, an extensive necrotizing injury with gliosis was present in the cerebral cortex with temporal preponderance, as well as in the amygdalae and hippocampus. Lesions were also present in the putamen and caudate nucleus whereas the globus pallidus and thalamus were less severely destroyed. The distribution of the lesions was therefore somewhat different from that commonly seen in hypoxic-ischemic brain injury, which, together with some previously published data, suggests some difference in the pathogenesis of hypoglycemic vs. hypoxic-ischemic brain injury.
In the second case only a slight loss of cortical neurons with secondary gliosis could be attributed to the hypoglycemic insult. This case demonstrates the danger of accidental intake of sulfonylurea preparations, which can cause an irreversible brain injury due to their prolonged hypoglycemic effect.     

Effect of hypoglycemia on brain glycogen metabolism in vivo

The brain contains a small but significant amount of glycogen, which has long been considered to play an insignificant role in the brain. In this study, brain glycogen metabolism was measured using (13)C NMR spectroscopy at 9.4 T. Brain glycogen metabolism was modulated by hyperinsulinemia resulting in a net accumulation. The role of glycogen in maintaining brain function is unknown; one possibility is that it may serve as an endogenous glucose reservoir to protect the brain against severe hypoglycemia. To address this possibility, rats were subjected to insulin-induced moderate hypoglycemia and when the level of brain glucose approached zero, brain glycogen content began to decrease gradually, demonstrating utilization of this glucose reservoir. The brain glycogen signal never became undetectable, however, even during 2 hr of hypoglycemia. When plasma and brain glucose concentrations were restored, glycogen increased and the concentration exceeded the pre-hypoglycemic level by several-fold. The data suggest that brain glycogen can provide fuel for extended periods of time when glucose supply is inadequate. Furthermore, brain glycogen can rebound (super-compensate) after a single episode of hypoglycemia. We postulate that brain glycogen serves as an energy store during hypoglycemia and that it may participate in the creation of reduced physiological responses to hypoglycemia that are involved in a symptom often observed in patients with diabetes, hypoglycemia unawareness.     

急性创伤性脑损伤大鼠血脑屏障通透性变化与Claudin-5的相关性研究

目的 研究大鼠急性创伤性颅脑损伤(TBI)后血脑屏障(BBB)通透性的变化和机制.方法 雄性Wistar大鼠96只按随机数字表法分为假手术组和TBI组,TBI模型参照Feeney自由落体致伤法制作,假手术组仅行开颅术不行打击致伤.每组按伤后处死时间的不同分为3h、6h、12h 、24 h、48 h、72h6个亚组,每亚组4只.采用干湿重比法测定脑组织含水量,Western blotting检测脑皮质紧密连接蛋白Claudin-5的表达,伊文思蓝(EB)法检测脑组织BBB通透性变化. 结果 与假手术组比较,TBI组大鼠创伤后不同时间点脑组织含水量、EB含量均增多.组内比较显示二者创伤后3h开始增多,24 h达高峰,随后下降,差异有统计学意义(P＜0 05);与假手术组比较,TBI组大鼠创伤后6h、12h、24 h、48 h、72 h紧密连接蛋白Claudin-5表达降低.组内比较显示其创伤后6h表达降低,24 h达最低值,随后回升,差异有统计学意义(P＜0.05);大鼠脑Claudin-5蛋白的相对表达水平和脑组织水含量、脑组织EB含量呈负相关关系(r=-0.994,P=0.000;r=-0.846,P=0.036).脑组织含水量和EB含量呈正相关关系(=0.863,P=0.027). 结论 TBI后大鼠BBB通透性变化和脑损伤程度具时间依赖性,紧密连接蛋白Claudin-5与BBB变化具有一定程度的相关性.     

大鼠冷冻性脑损伤动物模型的建立及评价

目的建立稳定的大鼠冷冻性脑损伤动物模型并进行评价。方法以自制冷冻杯，用液氮进行大鼠硬脑膜外冷冻，监测伤后的颅内压变化，测定伤后不同时期的行走、平衡等行为功能，并行神经组织病理检查。结果大鼠冷冻伤后出现颅内压升高，伤后4h达到高峰（14．56±2．31）mmHg；伤后的行走和平衡功能明显障碍；冷冻性脑损伤后神经细胞周围出现水肿，同时伴有脑皮质冻伤灶神经元变性、坏死，神经细胞和神经胶质细胞的空泡样变。结论大鼠的冷冻性脑损伤模型是一种稳定可靠的脑损伤动物模型。     

金尔伦治疗急性颅脑损伤的剂量效应研究

目的探讨金尔伦(盐酸纳洛酮)在治疗大鼠液压脑损伤后神经功能恢复和病理损害程度的剂量效应.方法将104只SD大鼠随机分为4组,伤后早期分别腹腔注射0.03 mg/Kg(小剂量组)、0.3 mg/Kg(中剂量组)、3 mg/Kg(大剂量组)金尔伦和等量生理盐水(对照组),连续7 d.结果中、大剂量组动物伤后脑神经功能恢复、脑水肿减轻程度及光、电镜检查显著优于对照组及小剂量组.结论伤后早期使用中剂量和大剂量金尔伦(盐酸纳洛酮)对大鼠液压颅脑损伤有明显的治疗效果.     

大鼠蛛网膜下腔出血后早期脑损伤模型的建立

目的 建立一种微创、重复性好的大鼠蛛网膜下腔出血后早期脑损伤动物模型.方法 采用视交叉前池注血法建立蛛网膜下腔出血( SAH)后早期脑损伤(EBI)动物模型.在脑立体定位仪引导下将导管插入视交叉前池,注入300μl自体动脉血建立SAH后EBI模型.进行神经功能学评分,采用激光多普勒血流量仪(LDF)测定局部脑血流量(rCBF),解剖观察前循环周围血液分布情况,应用透射电子显微镜观察海马区神经细胞超微结构变化.结果 大部分大鼠在SAH后有神经行为学异常,48 h后逐渐恢复正常.SAH后不同时间点的rCBF均低于对照组.模型组大鼠颅脑解剖发现前循环蛛网膜下腔有大量的血液和血凝块.透射电子显微镜观察:与对照组比较,SAH组神经细胞线粒体和内质网肿胀,核染色质凝聚、趋边.结论 此动物模型稳定可靠,重复性高,适合进行临床前循环动脉瘤性蛛网膜下腔出血后早期脑损伤病理生理研究.     

亚低温对重型脑损伤后血清IL-18含量的影响

目的 观察重型创伤性脑损伤(TBI)患者血清白细胞介素18(IL-18)的含量变化.方法 60例患者随机分成常温治疗组和亚低温治疗组,两组均于伤后第1 d、3 d、7 d 和10d 采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定血清中IL-18 含量.结果 两组IL-18 含量均高于对照组(P ＜ 0.01).亚低温治疗组IL-18 含量在3d、7 d、10d 低于常温治疗组(P ＜0.01),而在伤后第1 d 差异无统计学意义(P ＞0.05).结论 亚低温治疗能够降低sTBI 患者血清IL-18 含量.     

急性局灶性脑挫裂伤后大鼠血脑屏障改变的实验研究

目的:研究急性局灶性脑挫裂伤后大鼠血脑屏障的改变及对脑水肿的影响。方法:采用Feeney's自由落体撞击法建立急性局灶性脑挫裂伤模型。每组6只测量伤侧脑组织伊文思蓝(Evans Blue,EB)含量、脑组织含水量。每组3只电镜观察微血管内皮细胞超微结构改变。结果:急性局灶性脑挫裂伤后24h脑组织含水量为(79.79±0.83)%,与正常对照组(78.68±0.63)%相比有明显差异(P<0.01),脑损伤后6h脑组织中EB含量为(362.12±28.16)ug/g,与正常对照组(11.89±2.28)ug/g相比有明显差异(P<0.01);脑损伤后30min,微血管内皮细胞有轻度受损迹象,伤后3h毛细血管腔内有微绒毛形成,伤后6h微绒毛增多,伤后24~72h毛细血管腔明显狭窄。结论:脑含水量的变化与脑组织中EB含量变化不同步,BBB的开放先于脑水肿的形成。BBB的开放与微血管的机械性损伤、内皮细胞吞饮小泡增加、内皮细胞紧密连接中断有关,也与早期缺血、缺氧关系密切。     

Improved learning and memory with theta‐burst stimulation of the fornix in rat model of traumatic brain injury

Objective: Learning and memory deficits are a source of considerable morbidity after traumatic brain injury (TBI). We investigated the effect of different patterns of hippocampal stimulation via a fornix electrode on cognitively demanding tasks after TBI. Methods: Male Sprague‐Dawley rats underwent fluid‐percussion injury and were compared with sham‐operated rats. Electrodes were implanted into the fornix and hippocampus, and stimulation of the fornix produced robust evoked potentials in the hippocampus. A 60‐s delayed non‐match‐to‐sample (DNMS) swim T‐maze was serially performed using four stimulation patterns: no stimulation (No Stim), low‐frequency stimulation (LFS, 5 Hz), high‐frequency stimulation (HFS, 130 Hz), and theta‐burst stimulation (TBS, 200 Hz in 50 ms trains, five trains per second; 60 µA biphasic pulses). In a separate cohort of sham and injured animals, Morris water maze (MWM) was performed with or without TBS. Results: In the DNMS swim T‐maze, LFS and HFS did not significantly improve performance after TBI. However, there was a significant difference in performance between TBI + No Stim and TBI + TBS groups (P < 0.05) with no significant difference between Sham + No Stim and TBI + TBS. In the MWM, latency in the TBI + TBS group was significantly different from TBI + No Stim starting on day 2 (P < 0.05) and was not different from Sham + No Stim. The TBI + TBS group performed significantly more platform crossings in the probe trial (P < 0.01) and exhibited improved search strategy starting on day 3 (P < 0.05) compared with TBI + No Stim. Conclusions: Deficits in learning and memory after TBI are improved with TBS of the hippocampus. HFS and LFS do not appear to produce as great an effect as TBS. © 2014 Wiley Periodicals, Inc.     

神经生长因子在大鼠脑损伤后血脑屏障的通透性

目的研究神经生长因子（NGF）在大鼠创伤性脑损伤后血脑屏障（BBB）中的通透性，寻找NGF通过BBB进入受伤脑组织的时间窗。方法采用液压打击造成大鼠中、重度颅脑创伤，尾静脉注射伊文蓝（EB），分别于伤后1h，3h，6h，12h，24h，72h，168h测量伤侧脑组织中的EB含量。将纯化的NGF用^125I标记，在上述时间段分别从尾静脉注射碘化NGF，用γ-counter计数仪测量伤侧脑组织的放射活性。结果重度脑创伤后EB值在伤后1h立即快速上升，并在3h达到高峰，峰值持续到72h，随后缓慢下降，在168h EB值仍较对照组明显增高。中度脑创伤后脑组织中的EB的含量在1h开始缓慢升高，6h达到高峰，峰值持续到12h随后下降，在168h基本恢复正常。重度脑创伤后脑组织中^125I—NGF在1h明显升高，在3h达到高峰，峰值持续约24h，在72h明显下降，在168h时仍比对照组高。中度脑创伤后^125I—NGF在1h脑组织中即能检测到，并缓慢升高，在6h即达到高峰，随后下降，至168h时其剂量同正常对照组相仿。结论脑创伤后BBB开放，其开放程度与颅脑创伤程度呈正相关。在脑创伤后NGF能随着BBB的开放而进入脑组织，NGF进入脑组织的量与BBB的开放程度及脑损伤程度呈正相关。