介绍一种改良的麦康凯培养基

用麦康凯（ＭＣＡ）培基粉作基础,加入６苯甲酰萘基磷酸二钠盐改良ＭＣＡ培养基。经多种肠道菌检测证实本法可同时观察乳糖和磷酸酶反应,在原始平板上根据菌落的颜色,直接区分肠杆菌科和非发酵菌之菌落,简化了鉴定手续,节约了鉴定时间,对进一步选择鉴定板有很大帮助。     

应用山梨糖—伊红美蓝培养基分离肠出血性大肠埃希菌O157：H7的探讨

目的：探讨应用山梨糖－伊红美蓝培养基分离肠出血性大肠埃面菌Ｏ１５７：Ｈ７的新途径。方法：用标准野生株肠出血性大肠埃镣菌８８２３６４，以山梨醇－麦康凯培养基（ＳＭＡＣ）作对照，进行细菌的分离培养及菌落计数。结果：肠出血性大肠希菌Ｏ１５７：Ｈ７在ＳＥＭＢ培养基上生长较在ＳＭＡＣ培养基上快。在菌落计数方面二者无显著差异。     

微波与水浴融化培养基对细菌生长影响的比较研究

用ＭＴＴ法测在肠埃希菌ＡＴＣＣ２５９２２、金黄色葡萄球菌ＡＴＣＣ２５９２５、铜绿色假单胞菌ＡＴＣ三个菌株在两种解冻法融化的培养基中的生长繁殖情况。结果表明，微波法解冻培养基组没有破坏培养基中的营养成分，对细菌生长无不良影响。     

金黄色葡萄球菌与枯草杆菌间的类似CAMP现象

Ｂ群链球菌能产生“ＣＡＭＰ因子”,可与金黄色葡萄球菌（简称金葡菌）产生的β溶血素作用而增强其溶血活性,在两种菌垂直划线交界处出现箭头型透明溶血区,是为ＣＡＭＰ试验阳性。链球菌中只有Ｂ群ＣＡＭＰ试验阳性,因此可用于Ｂ群链球菌的鉴定~［１］。最近,我们在金葡菌与枯草杆菌之间发现了一种类似的ＣＡＭＰ现象。 材料与方法 菌种金葡菌（ＡＴＣＣ２５９２３）,大肠埃希菌（ＡＴＣＣ２５９２）,枯草杆菌和Ｂ群链球菌为我系保存的临床分离菌株。 培养基　　营养琼脂（上海伯奥生物科技公司,９７０１００）,含１０ ％羊血的血…     

从胆石症患者胆汁中分离出一株伤口埃希氏菌

１　临床资料患者，男，５０岁。因患胆石症入院，术后取胆汁做细菌培养，结果分离出伤口埃希氏菌。１．１　菌株分离　标本分别接种于血琼脂平板和伊红美蓝平板，３７℃培养２４ｈ。血平板上培养出灰白色、不透明、不溶血、圆形、凸起和直径为２～３ｍｍ的菌溶；涂片染色镜检细菌形态为革兰氏阴性杆菌。伊红美蓝平板为粉红色菌落。１．２　生化反应　氧化酶阴性，触酶阳性，ＯＤＣ－，ＡＤＨ＋，ＬＤＣ＋，ＵＲＥ－，ＬＡＲＬ－，ＧＡＴ＋，５ＫＧ－，ＬＩＰ－，ＲＰ＋，βＧＬＵ＋，ＭＡＮ＋，ＭＡＬ＋，ＩＮＤ－，βＮＡＧ－，βＧＡＬ＋…     

红色毛癣菌菌株的聚合酶链反应鉴定

目的 用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增红色毛癣菌和须癣毛癣菌临床分离株的ＤＮＡ,观察ＰＣＲ指纹的差异以及基因型与传统表型的关系,建立一种红以毛癣菌分子生物学鉴定方法。方法 采用寡核苷酸重复序列（ＧＡＣＡ）４、（ＧＴＧ）５及Ｍ１３中心序列（５’－ＧＡＧＧＧＴＧＧＣＧＧＴＴＣＴ－３’）等３种引物的矿增中,均可见红色毛癣菌和须癣毛癣菌呈现出具有种特异性的ＤＮＡ指纹,并检出其中２株原据表型鉴定为须癣毛癣菌的红     

HIGH DENSITY CULTIVATION OF A RECOMBINANT CD-1 CELL LINE PRODUCING PROUROKINASE USING A BIOSILON MICROCARRIER CULTURE SYSTEM

ＨＩＧＨＤＥＮＳＩＴＹＣＵＬＴＩＶＡＴＩＯＮＯＦＡＲＥＣＯＭＢＩＮＡＮＴＣＤ－１ＣＥＬＬＬＩＮＥＰＲＯＤＵＣＩＮＧＰＲＯＵＲＯＫＩＮＡＳＥＵＳＩＮＧＡＢＩＯＳＩＬＯＮＭＩＣＲＯＣＡＲＲＩＥＲＣＵＬＴＵＲＥＳＹＳＴＥＭ￥ＸｉａｏＣｈｅｎｇｚｕ肖成祖，Ｈ...     

两种培养基培养分离HP分析比较

幽门螺杆菌 (ＨｅｌｉｃｏｂａｔｅｒｐｙｌｏｒｉＨＰ)是一种寄生在胃粘膜上皮与粘液间的Ｇ- 杆菌[1],研究资料表明其与慢性肾炎和消化性溃疡病的发生密切相关 ,在病因学具有重要意义[2 ]。1 983年首次分离培养ＨＰ以来 ,多数资料证实ＨＰ的分离培养是最准确的可靠方法 ,国内最常用的是ＳＫＩＲＲＯＷ培养基 ,其培养菌落为灰白色 ,不易与其他菌区别 ,生长稀少的菌落易于漏检 ,有报道ＨＰ在加有 2 .3.5一氯化三苯四氮唑(ＴＴＣ)的培养基上 ,菌落为紫金色易于观察。本文以厌氧基础培养基 (ａｎａｅｒｏｂａｓｅｍｄｉｕｍＡＭ )为基础[3],加…     

组织型纤溶酶原激活物cDNA克隆及其真核表达载体的构建

目的：克隆组织型纤溶酶原激活物（t－ＰＡ）cＤＮＡ并构建含t－ＰＡ基因的腺病毒表达 载休划硫氰酸胍；－酚－氢仿一步法从Ｂｏｗｅｓ黑色素瘤细胞中提取总ＲＮＡ，并经反转录ＰＣＲ获得t－ＰＡcＤＮＡ。将质粒pＵＣ１９双酶切并纯化回收大片段，与纯化后的ＰＣＲ产物连接构成pＵＣ１９t－ＰＡ，转化大肠肝菌ＪＭ１０９，挑选白色克隆作酶切鉴定、测序，pＵＣ１９t－ＰＡ及腺病毒载体pＡdＭＶ（６．６７ｋｂ）分别双酶切前者回收１     

移植沉默ＴＳＧ－６基因的骨髓间充质干细胞对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的影响

摘要：【目的】在大鼠肝脏缺血再灌注模型中,观察移植沉默ＴＳＧ－６基因的骨髓间充质干细胞（ＢＭＳＣ）对大鼠肝脏缺血再灌注损伤（ＨＩＲＩ）的影响。【方法】全骨髓培养法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,流式细胞学鉴定,慢病毒载体（ＬＶ３－ｓｈＴＳＧ－６）感染下调ＴＳＧ－６基因的表达;６０只ＳＤ雌性大鼠７０％肝脏缺血再灌注损伤模型的建立,随机分４组,ＰＢＳ组、ＢＭＳＣ组,ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组、ＴＳＧ－６－ｓｈＲＮＡ－ＢＭＳＣ组;各组大鼠分别于恢复灌注后３、６、２４ｈ取血检测血清中ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＴＮＦ－α、ＩＬ－６含量,恢复灌注后６ｈ取中叶肝脏组织,ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ检测ＴＳＧ－６蛋白表达,切片ＨＥ染色后光镜观察肝组织显微结构。【结果】体外分离培养的ＢＭＳＣ状态稳定,增殖能力强,表达ＣＤ２９及ＣＤ４４,不表达ＣＤ３４及ＣＤ４５,慢病毒感染下调ＢＭＳＣ的ＴＳＧ－６基因表达效率达７３．９９％;大鼠肝脏７０％缺血再灌注损伤模型稳定,各时间点ＴＳＧ－６－ｓｈＲＮＡ－ＢＭＳＣ组的ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＴＮＦ－α、ＩＬ－６含量均高于ＢＭＳＣ组和ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组（Ｐ＜０．０５）;ＢＭＳＣ组和ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组的ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＴＮＦ－α、ＩＬ－６含量均低于ＰＢＳ组（Ｐ＜０．０５）;ＴＳＧ－６－ｓｈＲＮＡ－ＢＭＳＣ组的肝脏ＴＳＧ－６蛋白表达低于ＢＭＳＣ组和ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组（Ｐ＜０．０５）,ＰＢＳ组未见ＴＳＧ－６蛋白表达;ＴＳＧ－６－ｓｈＲＮＡ－ＢＭＳＣ组的肝组织损伤较ＢＭＳＣ组和ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组重,与ＰＢＳ组无明显区别,ＢＭＳＣ组和ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组的肝组织损伤较ＰＢＳ组明显减轻。【结论】移植ＢＭＳＣ能改善肝缺血再灌注损伤,移植沉默ＴＳＧ－６基因的骨髓间充质干细胞削弱了其对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用。     

研制14型肺炎链球菌培养基和优化其荚膜多糖提纯的工艺

目的研制国产培养14型肺炎链球菌的培养基,然后制备和纯化该菌的荚膜多糖,并对其全过程的工艺进行优化。方法测试添加不同种血清、培养基成分对肺炎链球菌生长的影响,在此基础上对比进口培养基和本实验自制培养基培养细菌的效果。测试不同裂解细菌方案对获得荚膜多糖多少的影响,并比较DNA酶和RNA酶酶解方法和常规乙醇沉淀方法去除残留核酸的效果。结果实验室自配培养基与进口培养基均能使肺炎链球菌较好生长。用1%NP40加胰酶的裂解方法可使多糖从细菌菌体更好的释放,使用DNA酶和RNA酶去除残留核酸,在多糖产量和核酸去除效率方面都取得了较好的结果,再进一步纯化后可以得到较纯的多糖。结论本文在培养基国产化、菌体裂解后多糖释放和核酸去除三大方面为肺炎球菌荚膜多糖提取提供了有效可行的方案。     

肤宁洗剂微生物限度检查方法的建立及验证

正肤宁洗剂是由黄柏、白鲜皮、白芷、地肤子等中药制成的复方制剂,具有清热燥湿、祛风止痒的功效,用于急性皮炎、湿疹伴有渗出或脓性分泌物等治疗。按照其用药途径,根据2015年版《中国药典》(四部)~([1])相关规定,微生物限度检查应进行需氧菌、霉菌和酵母菌总数的测定,及金黄色葡萄球菌、铜绿假单     

复方洁霉素滴鼻液细菌微生物限度验证

目的建立复方洁霉素滴鼻液的微生物检查法。方法通过对供试品的离心处理后,联合培养基稀释法,建立复方洁霉素滴鼻液微生物限度验证方法。结果采用上述实验方法,5种验证用菌的回收率都在70％以上。结论检查复方洁霉素滴鼻液微生物限度可用离心沉淀集菌法联合培养基稀释法。     

64排CT、CTA及1.5T MRA对大脑中动脉狭窄诊断价值的对照研究

目的通过与DSA的比较,评价1.5TTOF MRA和64排螺旋CT CTA在诊断大脑中动脉狭窄中的临床应用价值。方法收集2010年1月～2011年12月在我院行MRA、CTA及DSA检查的脑血管病患者146人。以DSA为标准,计算MRA、CTA诊断大脑中动脉狭窄的特异度、灵敏度等。结果 MRA检查大脑中动脉(MCA)轻度狭窄的灵敏度、特异度分别为70.6%、92.6%;CTA检查MCA轻度狭窄的灵敏度、特异度分别为72.2%、94.2%;MRA检查MCA中度狭窄的灵敏度、特异度分别为85.4%、93.0%;CTA检查MCA中度狭窄的灵敏度、特异度分别为88.2%、94.0%;MRA检查MCA重度狭窄的灵敏度、特异度分别为85.4%、95.4%,CTA诊断大脑中动脉重度狭窄的灵敏度、特异度分别为90%、97.1%;MRA诊断大脑中动脉闭塞的灵敏度、特异度为100%、95.7%。CTA诊断大脑中动脉闭塞的灵敏度、特异度分别为100%、98.5%。结论 CTA诊断MCA狭窄的灵敏度及特异度比MRA高,因此CTA在代替DSA,作为MCA狭窄筛选手段时,能够提供较MRA更准确的结果。     

INDUCTION OF LUNG CARCINOMA BY INTRALOBAR BRONCHIAL INSTILLATION OF IODIZED OIL IN RATS

This paper reports a method for experiment- al induction of bronchogenic carcinoma by intra- lobar-bronchialinstillationof carcinogenic iodized oil in rats. The animals used in the study were divided int0 4 groups, ea.ch given different dosages. The 3-methylcholanthrene (MCA) or MCA and diethyinitrosamine (DEN) were dis- solved in iodized oil. The results show that 49 0f the 57 Group I outbred rats developed bronchogenic squamous cell ca.rcinoma within 240 days, a tumor induc- tion rate of 85.970. All 25 standard Wista.r rats of Group II developed the same type of carcinoma in 80 days, the tumor induction rate being 10070. The 35 standard Wistar rats of Group III developed bronchogenic carcinoma in 22 days, with a tumor induction rate o.f lOOTo. No respiratory tract tumors were found in any of the 40 control animals of Group IV. The roentgenographic results coincided with the gross pathologic examination. The advantages of this method are: the instilled carcinogen loca.lizes in l or 2 lobes with little injury to lung tissue and oinly slight irrita- tion to the respiratory function; because the carcinogen is injected deeply into the bronchioli respiratorii or ductuli alveolares it acts w'ith sufficient effectiveness without any oil rejection by the animal; carcinogen instillation is re- quired only once or twice; and the iodized oil plays a dual role as liposolvent and contrast medium, the former action dissolving the carcinogen into its more effective form and the latter being good for ro,entgenography. Results as observed in Group III probaly better for rapid development of lung carcinoma in Wistar rats.     

康腹止泻片微生物限度检查法验证

目的建立康腹止泻片微生物限度检查法。方法采用培养基稀释法。结果该法能有效消除康腹止泻片在检验条件下对细菌、真菌及酵母菌的抑制作用;控制菌可用常规法检查。结论该法简单、快捷,可用于康腹止泻片的微生物限度检查,有效控制其质量。     

改良血琼脂的评价与应用

目的 :评价改进配方后的血琼脂平皿细菌分离效果 ,将之应用于临床标本的检测 ,提高苛养菌的检出 ,借以提高总体阳性率。方法 :对 2 9株已知分别来自不同科属的细菌进行GI值的测定和比较 ;采用羊血琼脂和改良血琼脂对2 0 0 0份临床标本 (大便标本除外 )进行测试 ,统计和比较苛养菌的分离率差异及细菌在这两种培养基上的菌落特征一致率。结果 :2 9株已知菌在改良血琼脂培养基上的GI值明显高于传统羊血琼脂培养基 (t =6.72 ,P <0 .0 0 1)。对 2 0 0 0份标本苛养菌的分离率 ,改良血琼脂明显高于羊血琼脂 ( χ2 =394,P <0 .0 5 ) ;细菌菌落特征一致率 96 7%。结论 :改良血琼脂培养基的分离率高且不改变菌落特征。使用该培养基可有效提高分离率 ,大大减少苛养菌的漏检     

ChromID ESBLs显色培养基的临床应用评价

目的评价超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)显色培养基对患者标本中携带ESBLs大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌等细菌的快速筛选作用。方法将患者的肛拭子标本接种ESBLs显色培养基,对平板上生长的细菌做鉴定和双纸片增效确认实验。结果显色平板为紫红色的菌株中大肠埃希菌为98.3%,且100%为ESBLs确证阳性;显色平板为绿色的菌株中仅73.3%为肺炎克雷伯菌,90.1%为ESBLs确证阳性。119株中有24株无色细菌和5株棕色细菌,其中2株ESBLs确证为阴性。结论 ChromID ESBLs显色培养基能快速检测筛选ESBLs阳性的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌等肠杆菌科细菌,对控制院内感染、指导临床合理使用抗菌药物有积极意义,但是鉴定到种需加以生化反应,ESBLs株必须附加试验进行确定。     

产胞外蛋白酶细菌的快速筛选及其发酵产酶条件的初步研究

目的探讨产胞外蛋白酶细菌的快速筛选方法和产酶条件优化。方法取昆明郊区的农田土壤及河沟淤泥,采用含脱脂奶粉的菌种筛选培养基和划线法分离产蛋白酶的菌株,选用5种培养基进行发酵产酶条件优化。结果农田土壤中含有种类较多的产蛋白酶的菌株,菌种单一性不强。YPD培养基发酵的菌种蛋白酶活性高于其他4种培养基。结论利用含脱脂奶粉的筛选培养基进行初筛,YPD进行发酵培养复筛,可以显著提高筛选效率。