鼠视网膜的免疫原性

为探讨视网膜的免疫原性,选择ＤＢＡ／２鼠（ＭＨＣ为Ｈ２ｄ）为供体,Ｃ５７ＢＬ／６（ＭＨＣ为Ｈ２ｂ）或ＢＡＬＢ／Ｃ鼠（ＭＨＣ为Ｈ２ｄ）为受体,把ＤＢＡ／２鼠的半个视网膜移植于受体鼠的皮下,２周后检测迟发型超敏反应（ＤＴＨ）和细胞毒性Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）。结果示移植组的迟发型超敏反应（ＤＴＨ）和细胞介导的细胞毒效应（ＣＴＬ）均低于阳性对照ＤＢＡ／２鼠脾细胞组（Ｐ＜０．０１）,高于阴性对照假手术组（Ｐ＜０．０１）。提示ＤＢＡ／２鼠视网膜表达ＭＨＣⅠ类和Ⅱ类抗原及ＭｉｎｏｒＨＣ抗原,刺激受鼠产生较弱的细胞免疫应答。视网膜具有弱免疫原性。     

ZMBC902小鼠乳腺癌免疫原性及异质性的研究

本研究使用两种常用方法：①切除后免疫力测定。②长介苗免疫刺激法。测定了一株来源于NIH小鼠的乳腺癌株ZMBC902的免疫原性，结果表明ZMBC902肿癌具有一定的免疫原性，能刺激宿主与机体产生一定的抗肿瘤免疫反应．但不同的宿主对ZMBC902的免疫反应具有一定的异质性。     

视网膜下间隙移植免疫赦免的实验研究

探讨视网膜下间隙的免疫学特点。方法：将ＤＭＥＭ，同源视网膜，ＤＢＡ／２鼠视网膜加或不加完全福氏佐剂和人外周血单个核细胞分别植入ＢＡＬＢ／Ｃ鼠的视网膜下间隙，２周后检测迟发型超敏反应，细胞毒性Ｔ淋巴细胞的特异杀伤率及行眼组织病理学检查。     

氧诱导视网膜新生血管模型鼠视网膜水通道蛋白1的表达

目的 研究氧诱导视网膜新生血管模型鼠视网膜组织中水通道蛋白1(AQP1)表达的变化.方法 高浓度氧诱导7 d龄C57BL/6J幼鼠,建立视网膜缺血型病变动物模型.采用免疫组化法、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western印迹法观察氧诱导模型组(12、15和17 d)和正常对照组小鼠视网膜组织中AQP1的变化.结果 部分12 d小鼠和所有15 d及17 d的小鼠视网膜均有AQP1表达,且氧诱导模型组视网膜血管内皮细胞有AQP1表达;此外,17 d氧诱导模型组小鼠视网膜的AQP1表达明显高于正常对照组(AQP1 mRNA转录1.81±1.02 vs 1.15±0.01;AQP1蛋白1.82±0.05 vs 1.57±0.04).结论 AQP1可能参与视网膜新生血管的形成.     

冷冻保存对同种异体移植物免疫原性的影响

同种异体移植物的免疫原性强弱是关系到移植效果的重要因素之一。自从1965年Smith成功地冷冻保存了游离的软骨细胞以及1972年Wilmut等成功地将胚胎长时间冷冻保存以来；一些学者致力于通过冷冻处理改变异体组织的免疫原性，减轻或延缓移植后排斥反应的发生，从而提高移植效果。冷冻又包括低温（高于-80℃）、深低温（-80℃）、超深低温（-196℃）以及反复冻融等方法。现将冷冻对同种异体移植物免疫原性的影响综述如下。     

异体深冷冻牙移植的免疫原性实验研究

采用Ｃ５７ＢＬ／６和Ｂａｌｂ／ｃ两种主要组织相容性复合体（ＭＨＣ）完全不相同的近交系不鼠作为动物模型，对异体深冷冻（－１９６℃）牙的免疫原性进行研究。通过检测宿主抗体－补体介导的细胞杀伤（ＡＣＭＣ）、细胞介导的细胞杀伤（ＣＭＣ）水平，发现异体深冷冻牙移植后，其ＡＣＭＣ和ＣＭＣ瓜水平与同基因型牙无显著性差异（Ｐ〉０．０５）；这说明异体深冷冻牙的免疫原性很低，具有良好的组织相容性。     

视网膜的干细胞移植

青光眼及老年性黄斑病变等是以视网膜神经元大量死亡为病理特征的不可逆性致盲眼病,临床上目前尚无有效的治疗方法。通过移植干细胞,使其整合入视网膜各层并诱导其增殖分化为目标细胞,补充缺失的视网膜神经元,重建视网膜功能,将给不可逆性致盲眼病患者复明带来希望。     

鼠伤寒杆菌外膜蛋白免疫原性初步研究

研究目的寻找鼠伤寒杆菌与免疫相关组分,探讨鼠伤寒杆菌外膜蛋白作为亚单位疫苗预防鼠伤寒杆菌感染的可能性。研究背景鼠伤寒沙门氏菌感染甚为普遍,而目前尚缺乏有效的防疫方法,制备有效疫苗是控制鼠伤寒杆菌感染和流行的重要措施。研究方法采用Schnaitman所描述的方法提取鼠伤寒杆菌OMP分别免疫小鼠和家兔后分离血清,用ELISA方法测定免疫血清抗体滴度。用小鼠作足垫肿胀试验作为测定细胞免疫指标。用免疫印迹试验分析免疫血清和鼠伤寒感染患者恢复期血清。研究结果鼠伤寒杆菌外膜蛋白能诱发小鼠和家兔产生高效价抗体,并能诱发小鼠产生明显的DTH反应,所有免疫血清均识别36KD蛋白带。结论鼠伤寒杆菌外膜蛋白具有较强的免疫原性,能诱发动物产生体液免疫和细胞免疫。36KD蛋白带可能是鼠伤寒杆菌主要免疫原。     

异体深冷冻牙移植的免疫原性实验研究

采用Ｃ５７ＢＬ／６ 和Ｂａｌｂ／ｃ两种主要组织相容性复合体（ＭＨＣ） 完全不相同的近交系小鼠作为动物模型， 对异体深冷冻 （－ １９６℃） 牙的免疫原性进行研究。通过检测宿主抗体－补体介导的细胞杀伤 （ＡＣＭＣ）、细胞介导的细胞杀伤 （ＣＭＣ） 水平， 发现异体深冷冻牙移植后， 其ＡＣＭＣ和ＣＭＣ反应水平与同基因型牙无显著性差异 （Ｐ＞ ０．０５）； 这说明异体深冷冻牙的免疫原性很低， 具有良好的组织相容性     

人胎儿卵巢免疫原性的研究

目的 :比较成人卵巢、胎儿卵巢免疫原性的差异 ,以及培养前后胎儿卵巢免疫原性的变化。方法 :对成人及培养前后胎儿卵巢的冰冻切片用HLA -ABC及HLA -DR单克隆抗体进行免疫组织化学染色 ,观察其阳性细胞形态及分布并计数。结果 :成人卵巢内HLA -ABC及HLA -DR抗原含量显著多于胎儿卵巢 (P <0 0 0 1) ,且培养后胎儿卵巢HLA -DR抗原含量显著低于培养前 (P <0 0 1) ,随培养天数的增加HLA -DR抗原含量逐渐减少 (P <0 0 1)。结论 :胎儿卵巢的免疫原性低于成人卵巢 ,且培养后进一步降低。以培养一段时间的胎儿卵巢作为移植供体 ,必将提高临床卵巢移植的成功率。     

一种钩端螺旋体DNA疫苗的免疫原性和免疫保护性研究

为了研究赖型钩体内鞭毛蛋白基因在动物体内的表达及其免疫保护性。采用ＰＣＲ扩增内鞭毛蛋白编码基因,以表达质粒ＶＰ１０１２为载体,构建了合有钩体的内鞭毛基因的重组质粒,在新西兰大白兔四头肌内注射该重组质粒ＤＮＡ５００μｇ／只,重复３次,每次间隔３周,于每次注射前和末次注射后３周,检测血清抗赖型钩体抗体效价,结果显示,在第１次加强免疫注射后３周,试验组血清抗体效价显著增高,豚鼠免疫保护试验表明,该ＤＮＡ     

恶性疟原虫融合抗原PfCP-2.9在不同品系小鼠中的免疫特性

目的:探讨恶性疟原虫融合抗原PfCP-2.9在不同品系小鼠(BALB/ca、C57BL/6J、C3H/He、DBA/2J及昆明种)中的免疫原性和免疫反应特性.方法:以ISA720为佐剂,PfCP-2.9抗原皮下免疫5种品系小鼠3次,间隔3周.以ELISA检测免疫血清中特异性抗体的动态变化、IgG抗体亚型及对融合抗原各组分的抗体水平,以间接荧光抗体实验分析免疫血清对恶性疟原虫天然抗原的识别情况.结果:5种品系小鼠均能产生针对PfCP-2.9的免疫应答,3次免疫后血清中特异性抗体滴度达105以上.PfCP-2.9所诱生的免疫血清不但能识别MSP1-19和AMA-1(Ⅲ)两个主要片段,而且能识别恶性疟原虫天然抗原.所诱导的4种IgG抗体亚型中,IgG1和IgG2a是免疫血清中主要的抗体类型.但特异性抗体水平及抗体亚型分布因遗传背景不同而异.结论:融合蛋白PfCP-2.9在5种不同品系小鼠中具有强的免疫原性,其抗体能识别疟原虫天然蛋白.     

离体电转染pCAGGS．EGFP对小鼠视网膜神经节细胞的标记

目的：通过离体电转染将GFP对胚胎期小鼠视网膜神经节细胞（RGC）进行标记来观察其形态．方法：剥离胚胎小鼠E14的视网膜连同晶状体,放入定制的电转杯中进行电转染,以8～16V电压将pCAGGS—EGFP质粒导入RGC,体外培养视网膜1～5d,观察绿色荧光蛋白GFP的表达情况。结果：以12V,50ms,950InS的间隔,5个脉冲转染效率最高,为81．25％：20～144h期间GFP依次由胞体向轴突、树突扩散分布。结论：在体外培养基中培养1～5d．pCAGGS—EGFP经过最适电压转染后能够在小鼠视网膜神经节细胞中持续扩散表达.     

空肠弯曲菌口服全菌佐剂疫苗的初步研究

目的本研究采用明胶为空肠弯曲菌菌苗的佐剂,灌胃免疫小鼠,评价佐剂全菌苗的免疫原性.方法采用明胶为佐剂的全菌疫苗灌胃免疫Balb/c小鼠.加明胶为佐剂全菌疫苗灌胃免疫Balb/c小鼠为实验组,全菌疫苗肌注和全菌疫苗灌胃免疫为实验对照组,PBS灌胃免疫为正常对照组,未作任何处理的Balb/c小鼠为阴性对照组;接种3次,间隔7d,末次接种1wk后收集小鼠血清和小肠粘液.采用ELISA间接法检测血清抗体IgG、IgA、IgM和肠道粘液抗体SIgA水平.结果各组血清抗体IgG、IgA、IgM和肠道粘液抗体SIgA水平,加佐剂组明显高于未加佐剂组,有统计学差异(P＜0.05),肌注组与加佐剂组间没有统计学差异(P＞0.05).结论本研究显示佐剂疫苗口服有良好的免疫原性,明胶可作为口服疫苗的候选佐剂.     

Immunogenicity and tumor-inhibiting effects of HSP-antigen peptide complex in melanoma B16 cells in mice

目的 :黑色素瘤 B1 6细胞热休克蛋白 -抗原肽复合物 (HACs)及其粗提物 (HAC- CEs)的制备 ,以及它们的免疫原性和抑瘤效应的研究。方法 :应用 Sephacryl S- 2 0 0凝胶过滤制备HAC- CEs,应用亲和层析纯化 HACs,并测其免疫功能和抑瘤效应。结果 :应用凝胶过滤制备的HAC- CE3、HAC- CE4、HAC- CE5和应用亲和层析纯化的 HAC60 ,HAC75和 HAC97均不同程度地降低肿瘤发生率、延迟肿瘤发生时间和减少移植黑色素瘤 C57BL/6J小鼠死亡率 ;同时 ,伴有小鼠脾细胞 IFN-γ和 IL- 2分泌活性及 CTL杀伤率的增加。结论 :分子量为 60 0 0 0～ 970 0 0的 HACs具有免疫原性和抑瘤效应 ,本研究为制备肿瘤疫苗提供重要的实验依据。     

ICAM-1和VEGF在KK-AY糖尿病小鼠视网膜中的表达

目的 探讨KK-AY糖尿病小鼠视网膜中细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达情况.方法 实验共分为4组,每组10只小鼠.对照组为12周的C57BL/6小鼠;糖尿病模型组为KK-AY小鼠,分别为12周、16周、20周组.测量各实验组体重、血糖,并应用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和...     

Methanesulfonic acid sodium salt protects retina from acute light damage in mice

Background  Methanesulfonic acid sodium salt (Dipyrone), an antipyretic and analgesic drug, has been demonstrated to improve cerebral ischemia through the inhibition of mitochondrial cell death cascades. The aim of this study was to evaluate the potential photoprotective activity of methanesulfonic acid sodium salt in a model of light-induced retinopathy.

Methods  One hundred mice were assigned randomly into vehicle (V), methanesulfonic acid sodium salt (D), light damage model plus vehicle (MV) and light damage model plus methanesulfonic acid sodium salt (MD) groups (n=25 each). In the MD group, methanesulfonic acid sodium salt (100 mg/kg) was administered by intraperitoneal injection 30 minutes before light exposure. Twenty-four hours after light exposure, hematoxylin and eosin staining and transmission electron microscopy (TEM) were used for histological evaluation. The thickness of the outer plus inner-segment and outer nuclear layer was measured on sections parallel to the vertical meridian of the eye at a distance of 1000 mm from the optic nerve. Electroretinography (ERG) test was performed to assess the functional change. The morphology of mitochondria was also revealed by TEM. Finally, the expression of cytochrome c (CytC) and the relative apoptotic proteins were detected by Western blotting, and the interaction between mitochondrial proteins was investigated by co-immunoprecipitation.

Results  The photoreceptor inner and outer segments of the MV group were significantly disorganized than the MD group. The thicknesses of the outer plus inner-segment layers and the outer nuclear layer, and the amplitudes of the a and b waves of the scotopic ERG response markedly decreased in the MV group compared to those in the MD group (P <0.05). TEM examination revealed that the mitochondria of the MV group were distinctly swollen and contained disrupted cristae. In contrast, the morphology of mitochondria in the MD group was unaffected. Western blotting analysis showed that CytC, apoptosis proteinase activating factor-1 (Apaf-1), caspase 3, p53, p53-upregulated modulator of apoptosis (PUMA), Bax, and Bad were increased, whereas the anti-apoptotic proteins Bcl-2 and Bcl-X_L were significantly decreased in the MV group than the MD group. Co-immunoprecipitation detection revealed that PUMA immunoreactivity precipitated by Bcl-X_L decreased, whereas Bax immunoreactivity precipitated by Bcl-X_L increased in the MD group compared to those in the MV group.

Conclusion  Methanesulfonic acid sodium salt is an effective photoprotective agent against light-induced retinopathy through the inhibition of CytC-mediated mitochondrial impairment.

     

链霉素的免疫原性

用纯链霉素、双氢链霉素、硫酸链霉素与福氏完全佐剂混匀免疫家兔，可产生链霉素抗体，说明链霉素具有免疫原性，其中以纯链霉素产生的抗体滴度最高。