魟鱼软骨多糖对Lewis肺癌VEGF MMP-2和MMP-9蛋白表达的影响

目的探讨魟鱼软骨多糖(RCG)对Lewis肺癌血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达的影响。方法:接种Lewis肺癌细胞,复制肺癌移植瘤模型;将实验分为生理盐水(Saline)组、不同剂量魟鱼软骨多糖(RCG)组、环磷酰胺(CTX)组,给药后观察肿瘤生长情况,计算肿瘤抑制率和肺转移瘤灶数目;采用Westernblot检测瘤组织中VEGF、MMP-2和MMP-9的蛋白表达。结果:与生理盐水组比较,魟鱼软骨多糖各剂量组对肿瘤的抑制率和肺转移数都具有显著性差异(P<0.05;P<0.01);与生理盐水比较,该多糖各剂量组对VEGF、MMP-2和MMP-9的蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。结论:魟鱼软骨多糖明显抑制小鼠Lewis肺癌原发瘤的生长和转移,可能与其抑制肿瘤VEGF、MMP-2和MMP-9蛋白的表达有关。     

魟鱼软骨多糖对小鼠Lewis肺癌的作用及分子机制探讨

目的:研究魟鱼软骨多糖(RCG)对小鼠Lew is肺癌的作用,并初步探讨其作用机制。方法:建立小鼠Lew is肺癌模型,将实验分为生理盐水(Saline)组、不同剂量魟鱼软骨多糖(RCG)组、环磷酰胺(CTX)组,计算原发瘤抑制率及肺转移数;采用RT-PCR和W estern b lot检测原发瘤组织VEGF、bFGF mRNA和蛋白表达。结果:应用魟鱼软骨多糖各剂量组,小鼠原发瘤抑制率、肺转移数与生理盐水组比较差异有显著性(P<0.05,P<0.01);与生理盐水比较,魟鱼软骨多糖各剂量组,VEGF、bFGF mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。结论:魟鱼软骨多糖明显抑制小鼠Lew is肺癌原发瘤的生长和转移,可能与其抑制肿瘤VEGF、bFGF mRNA和蛋白表达有关。     

苦参碱对小鼠Lewis肺癌的影响

目的 研究苦参碱对小鼠Lewis肺癌的作用,并初步探讨其作用机制.方法 建立小鼠Lewis肺癌模型,实验分为模型组、不同剂量苦参碱组、环磷酰胺组,计算原发瘤抑制率及肺转移灶数;采用Western blotting检测原发瘤组织基质金属蛋白酶(MMP-2、MMP-9)蛋白表达.结果 苦参碱各剂量组小鼠原发瘤抑制率、肺转移灶数与模型组比较差异显著(P<0.05、0.01);与模型组比较,苦参碱各剂量组MMP-2、MMP-9蛋白表达水平显著降低(P<0.01).结论 苦参碱明显抑制小鼠Lewis肺癌原发瘤的生长和转移,可能与其抑制肿瘤组织MMP-2和MMP-9蛋白表达有关.     

魟鱼软骨多糖的分离纯化及生物活性的研究

目的研究魟鱼软骨多糖(raycartila geglycosam inoglycans,RCG)的提取、分离与纯化方法,并初步探讨其生物活性。方法采用盐酸胍提取、丙酮分级沉淀、膜超滤、Sephadex凝胶柱色谱分离、纯化获得魟鱼软骨多糖,由HPLC确定其相对分子质量和质量分数;建立Lewis肺癌小鼠模型,将实验分为生理盐水(Saline)组、不同剂量(500、250、125mg/kg)鱼软骨多糖组、环磷酰胺(CTX,60mg/kg)组,观察小鼠肿瘤生长情况,绘制肿瘤生长曲线,计算原发瘤与肺转移灶数抑瘤率,免疫组织化学染色计数肿瘤组织微血管密度(MVD),采用RT-PCR检测瘤组织血管内皮生长因子(VEGF)基因表达。结果经HPLC检测,该组分为单一多糖,其质量分数达99%以上。生物活性检测结果表明,与生理盐水组比较,该多糖各剂量组小鼠的肿瘤生长曲线平缓,原发瘤抑瘤率、肺转移灶数与生理盐水组比较差异显著(P<0.05、0.01);与生理盐水组比较,鱼软骨多糖各剂量组MVD显著减少、VEGFmRNA表达水平显著降低(P<0.01)。结论鱼软骨多糖明显抑制小鼠Lewis肺癌原发瘤的生长和转移,并可抑制肿瘤的血管形成。     

魟鱼软骨多糖对小鼠G_(422)胶质瘤血管形成的影响

目的:观察魟鱼软骨多糖对小鼠G422胶质瘤血管形成及瘤组织VEGF mRNA和蛋白表达的影响。方法:建立小鼠G422胶质瘤腋下肿瘤模型,将实验分为生理盐水(Saline)组、不同剂量魟鱼软骨多糖(RCG)组、环磷酰胺(CTX)组,观察肿瘤生长情况,绘制肿瘤生长曲线,CD31免疫组织化学染色计数肿瘤组织微血管密度(M icrovessel density,MVD),采用RT-PCR和W estern b lot技术检测瘤组织血管内皮生长因子(Vascu lar endothelial growth factor,VEGF)mRNA和蛋白表达。结果:魟鱼软骨多糖各剂量组小鼠的肿瘤生长曲线平缓,MVD显著减少,VEGF mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。结论:魟鱼软骨多糖明显抑制小鼠G422胶质瘤的生长,抑制肿瘤的血管形成,可能与其下调肿瘤VEGF mRNA和蛋白表达有关。     

六神丸对Lewis肺癌模型小鼠移植瘤bFGF、CD34表达的影响

目的:探讨六神丸通过降低碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、微血管密度(MVD)的CD34表达的机制来抑制肿瘤生长及转移。方法:采用动物实验以Lewis肺癌小鼠为模型,观察六神丸的抑瘤、抗肺转移等作用疗效,用免疫组化方法检测六神丸对移植瘤组织bFGF、CD34表达的影响。结果:六神丸对Lewis肺癌移植瘤均有明显抑制作用,且能明显抑制肺转移瘤的生长,对Lewis肺癌自发肺转移的转移率和转移程度方面均低于生理盐水对照组(P<0.05或P<0.01);并抑制肿瘤组织bFGF、CD34的表达,高剂量优于低剂量,有显著性差异(P<0.01或P<0.05);六神丸高剂量组抑瘤作用与顺铂组相比无统计学意义(P>0.05),六神丸低剂量+顺铂组明显增强抑瘤作用(P<0.05)。结论:六神丸可能通过降低bFGF和MVD的CD30表达的机制来抑制Lewis肺癌自发肺转移的发生及原发肿瘤、肺转移瘤的生长。     

中肺合剂抗小鼠Lewis肺癌肺转移作用及相关机制的实验研究

 目的 观察中肺合剂对小鼠Lewis肺癌抗肿瘤肺转移的作用,并探索其相关机制。方法 采用Lewis肺癌移植瘤C57BL/6小鼠模型观察中肺合剂抗肿瘤肺转移作用,并采用荧光定量QRT-PCR法测定中肺合剂对Lewis肺癌小鼠肿瘤组织基质金属蛋白酶（MMP）-9表达的影响,采用EnVision法检测肿瘤组织血管内皮细胞生长因子（VEGF）和CD34蛋白的表达情况,并计数微血管密度(MVD)。结果 中肺合剂低、中、高剂量组（12.7,25.4,50.8 g·kg-1）和环磷酰胺（CTX）阳性对照组对移植性Lewis肺癌小鼠的肺转移抑制率为16.7%、45.8%、19.4%和80.6%,以中剂量组肺转移抑制作用最佳。中肺合剂能下调Lewis肺癌小鼠肿瘤组织MMP-9、VEGF蛋白的表达水平,并降低肿瘤组织MVD。MMP-9、VEGF表达和MVD之间呈正相关。结论 中肺合剂对小鼠Lewis肺癌具有显著的抗肿瘤肺转移作用,以中剂量组最佳。其作用机制可能与该药能降低肿瘤组织MMP-9、VEGF蛋白的表达水平,并降低肿瘤组织MVD有关。     

十全大补汤对Lewis肺癌小鼠MMP-9基因表达的影响

目的:探讨十全大补汤对Lewis肺癌组织中MMP-9基因表达的影响。方法:50只小鼠采用细胞株接种的方法复制Lewis肺癌转移模型,造模成功后,将小鼠分为模型组,CTX组,十全大补汤低、中、高剂量组。采用RT-PCR方法检测十全大补汤对Lewis肺癌组织中MMP-9基因表达的影响。结果:十全大补汤中、高剂量组的肿瘤转移抑制率为43.20%、29.59%,两组中MMP-9的表达下降,与模型组比较有统计学意义(P<0.01)。结论:十全大补汤下调MMP-9基因表达是其抑制肺癌转移的分子机制之一。     

魟鱼软骨多糖对小鼠恶性黑色素瘤的抑制作用及对Laminin5γ2、HIF-α表达的影响

目的:研究魟鱼软骨多糖对小鼠黑色素瘤的抑制作用及对Laminin-5γ2、HIF-α表达的影响。方法:体外培养B16小鼠黑色素瘤细胞,MTT法测定魟鱼软骨多糖不同剂量组对黑色素瘤细胞与基质之间粘附的影响,将培养的B16细胞悬液接种于C57BL/6小鼠右侧腋下部位,建立肿瘤模型。将实验分为空白对照组、魟鱼软骨多糖高、中、低剂量(700mg/kg、300mg/kg、100mg/kg)组、环磷酰胺(60mg/kg)组,观察肿瘤生长情况并计算原发瘤抑制率;采用Western blot方法检测Laminin-5γ2、HIF-α蛋白的表达,采用RT-PCR方法检测Laminin-5γ2mRNA、HIF-αmRNA的表达。结果:应用魟鱼软骨多糖100、20、4、0.8mg/L,黑色素瘤细胞于基质间的粘附受到抑制,分别为16.67%、11.90%、9.52%、7.14%。小鼠原发瘤抑制率与空白对照租比较有显著性差异,魟鱼软骨多糖100、300、700mg/kg和环磷酰胺组抑癌率分别为14.77%,31.48%,44.55%;与空白对照组比较,魟鱼软骨多糖各剂量组随着药物浓度的升高,Laminin-5γ2、HIF-α蛋白表达受到抑制,Laminin-5γ2、HIF-α的基因表达显著降低。结论:魟鱼软骨多糖能够在一定程度上抑制小鼠黑色素瘤移植瘤的生长,可能与其减少肿瘤中Laminin-5γ2、HIF-α蛋白表达有关,Laminin-5γ2、HIF-α有望成为抗癌治疗的新靶点。     

桑黄云芝胶囊对Lewis肺癌自发肺转移模型小鼠的抑瘤作用

目的 :通过应用Lewis肺癌移植性肿瘤小鼠模型,观察桑黄云芝胶囊的抑瘤及抗转移作用。 方法: C₅₇BL/6小鼠右腋皮下接种Lewis肺癌瘤株,连续ig给药21 d后,处死动物,摘取瘤体称重,并计算肿瘤生长抑制率。剥离鼠肺,用Bouin氏液固定,解剖镜下计数肺部正反面及肺叶间的转移瘤集落数。 结果: 桑黄云芝胶囊高、中、低3个剂量对Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤的生长均有明显的抑制作用(与模型组比较,P<0.05),抑瘤率分别为21.2%,21.0%,24.6%。桑黄云芝胶囊高剂量组Lewis肺癌荷瘤小鼠肺转移集落明显少于模型组(P<0.05)。 结论 :桑黄云芝胶囊对Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤生长具有明显抑制作用,并可抑制Lewis肺癌荷瘤小鼠的肺转移,以高剂量最为明显。     

中药组方对小鼠Lewis肺癌细胞周期蛋白D1表达的影响

目的 :探讨中药组方对小鼠Lewis肺癌细胞周期蛋白D1的表达及肺癌细胞转移的影响。方法 :复制小鼠lewis肺癌 ,用免疫组织化学方法检测中药组方对肿瘤细胞cyclinD1的表达 ,记数小鼠肺组织内肿瘤转移结节数量等数据。结果 :生理盐水组cyclinD1阳性表达率与中药组方组和替加氟组有显著性差异 ,而后两组差异无显著性 ;中药组和替加氟组转移瘤结节数量显著少于生理盐水组。结论 :中药组方能有效降低小鼠Lewis肺癌细胞cyclinD1的表达 ,抑制肿瘤细胞的转移     

益气养阴方抗C57小鼠Lewis肺癌转移作用与调节MMP-9、TIMP-1蛋白表达的实验研究

目的免疫组化法观察益气养阴方对C57BL／6小鼠Lewis肺癌瘤体MMP-9、TIMP-1蛋白表达的影响以及抗肺转移作用,探讨该方抗转移作用的机理。方法24只C57BL／6小鼠随机分为3组,每组8只,接种Lewis肺癌瘤株,造模后第2天按如下方案进行干预：荷瘤对照组：0.9％NaCl溶液灌服;中药组：益气养阴方煎汤灌服;顺铂组：顺铂溶液腹腔内注射。第20天处死全部小鼠,称瘤重计算抑瘤率,计数肺转移数,计算抑制肺转移率,免疫组化Envision二步法测定瘤体MMP-9、TIMP-1蛋白表达情况。结果中药组和顺铂组的抑瘤率分别为35.02％和41.18％,具有统计学意义（P〈0.05）。中药组和顺铂组的抑制肺转移率分别为54.20％和39.02％,差异无统计学意义。瘤重与肺转移数之间存在正相关。荷瘤对照组MMP-9和TIMP-1阳性率均为100％,中药组MMP-9阳性率显著低于对照组,TIMP-1阳性表达与对照组比较差异无统计学意义,但中度及强阳性率明显低于对照组。MMP-9和TIMP-1的表达与肺转移数成正相关,两者之间亦存在正相关。结论益气养阴方具有较好的抑瘤作用和抑制肺转移的作用;肺癌均表达MMP-9和TIMP-1蛋白,是促进转移的重要机理和判断指标;益气养阴方能够显著下调肺癌MMP-9的表达,影响TIMP-1的表达,这是其抑制肺癌转移的机理之一。     

Inhibitory effect of Sumu(Lignum Sappan) plus Fuzi(Radix Aconiti Lateralis Praeparata) on a lung carcinoma model

OBJECTIVE: To investigate the inhibitory effect of Sumu(Lignum Sappan) plus Fuzi(Radix Aconiti Lateralis Praeparata)(SF) on the growth and metastasis of Lewis lung carcinoma.METHODS: A lung carcinoma model was established by subcutaneously inoculating Lewis lung carcinoma cells into C57 BL/6 mice. The mice were randomly divided into four groups of 13 mice(control, low-dose, moderate-dose, and high-dose), and gavaged once-daily for 21 consecutive days. The rates of tumor inhibition, metastasis, and metastasis inhibition were observed. The differential expressions of s P-selectin and vascular endothelial growth factor C(VEGFC) were compared between the treatment groups and the control group.RESULTS: The tumor weights differed significantly between the treatment groups and the control group(P 0.05). Administration of SF in the moderate-dosage and low-dose groups significantly inhibited the expression of s P-selectin and VEGFC(both P 0.05), suggesting anti-tumor activity.CONCLUSION: SF can inhibit the growth and metastasis of Lewis lung carcinoma.     

中肺合剂对Lewis肺癌小鼠肿瘤组织血管生成的影响

目的：观察中肺合剂对Lewis肺癌小鼠肿瘤组织血管生成的影响。方法：取C57BL/6小鼠50只,接种Lewis肺癌瘤株后,随机分阴性对照组（0.9%生理盐水）,中肺合剂低、中、高剂量组（12.7、25.4、50.8g.kg-1）,阳性对照组（CTX组,30mg.kg-1）,每组10只。观察12天停药。无菌条件下取肿瘤组织,采用EnVision法检测肿瘤组织血管内皮生长因子（VEGF）和CD34蛋白的表达情况,并计数微血管密度（MVD）。结果：中肺合剂能降低肿瘤组织中血管内皮生长因子（VEGF）的表达和微血管密度（MVD）,VEGF表达和MVD之间呈正相关（P〈0.01）。其中以中、高给药剂量组抑制作用显著,与生理盐水组相比有显著差异（P〈0.01）。低剂量组与生理盐水组相比无显著差异（P〉0.05）。结论：中肺合剂能抑制Lewis肺癌小鼠肿瘤组织新生血管的形成,降低Lewis肺癌小鼠肿瘤组织中血管内皮生长因子（VEGF）的表达和微血管密度（MVD）,以中、高剂量组最明显。     

肠胃清介导CXCR4/CXCL12信号转导通路干预小鼠结肠癌肝转移

目的:观察中药复方肠胃清对小鼠结肠癌肝转移的抑制作用,从趋化因子受体4(CXCR4)/趋化因子12(CXCL12)信号转导通路及基质金属蛋白酶9(MMP9)的表达探讨肠胃清抑制结肠癌肝转移的作用机制。方法:采用原位瘤块接种法建立小鼠结肠腺癌细胞CT26肝转移模型,实验共分为4组,即假手术组、模型组、肠胃清低剂量组和高剂量组。假手术组和模型组均给予生理盐水,肠胃清低、高剂量组小鼠每日给药量分别为10.37,20.74 g·kg-1。HE染色法判断肝转移;免疫组织化学和实时荧光定量PCR实验方法检测CXCR4,CXCL12和MMP9的表达。结果:肠胃清低、高剂量组小鼠结肠癌原位瘤的质量抑制率分别为24.73%,45.91%;体积抑制率分别为27.93%,63.48%。模型组与肠胃清低、高剂量组肝转移率分别为75%,37.5%,12.5%。模型组结肠癌组织中CXCR4,CXCL12,MMP9的蛋白和mRNA表达显著高于假手术组(P<0.05);与模型组比较,肠胃清低剂量组和高剂量组CXCR4的蛋白和mRNA表达显著减低(P<0.05);肠胃清低剂量组和高剂量组CXCL12的蛋白表达显著降低(P<0.05);肠胃清高剂量组CXCL12的mRNA表达显著降低(P<0.05);肠胃清高剂量组MMP9的蛋白和mRNA表达显著降低(P<0.05)。结论:肠胃清抑制小鼠结肠癌原位瘤的生长和肝转移的发生率,肠胃清抑制结肠癌肝转移可能与其下调小鼠结肠癌原位瘤组织中CXCR4,CXCL12,MMP9的表达有关。