原因不明复发性流产患者调节性T淋巴细胞比例及功能的测定

目的 探讨外周血CD4+CD25+调节性T淋巴细胞(CD4+CD25+Tr细胞)的比例和功能在原因不明复发性流产(URSA)中的作用.方法 采用双荧光标记流式细胞分析技术检测15例URSA患者(流产组)、15例正常非妊娠妇女(正常非孕组)和13例正常妊娠妇女(正常妊娠组)外周血中CD4+CD25+Tr细胞的比例.采用磁珠分选方法从3组妇女外周血淋巴细胞中分离CD4+CD25+Tr细胞和CD4+CD25-T淋巴细胞,通过体外增殖抑制实验计算抑制率来评价CD4+CD25+Tr细胞对CD4+CD25-T淋巴细胞的抑制功能.结果 流产组妇女外周血中CD4+CD25+Tr细胞的比例为(6.9±1.8)%,明显低于正常非孕组的(10.8±1.1)%(P＜0.05)和正常妊娠组的(11.2±1.4)%(P＜0.01).流产组妇女CD4+CD25+Tr细胞的抑制率为(75±6)%,明显低于正常非孕组的(89±4)%(P＜0.05)和正常妊娠组的(90±4)%(P＜0.01).正常非孕组与正常妊娠组妇女CD4+CD25+Tr细胞的比例和抑制率比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 URSA的发生可能与外周血CD4+CD25+Tr细胞的比例下降和功能降低有关.     

雌激素及其受体对T淋巴细胞免疫功能的调节

雌激素和核内雌激素受体(ER)或膜相关雌激素受体结合,分别通过基因途径和快速信号反应途径调节T淋巴细胞功能.雌激素和雌激素受体从多个方面调节T淋巴细胞的免疫功能:雌激素能调节辅助性T细胞1(Th1)和辅助性T细胞2(Th2)的比例,使其向Th2型细胞偏移;雌激素也能影响CD4+/CD8+T细胞的比例;雌激素和ER影响T细胞的分化和成熟.     

雌激素及其受体对T淋巴细胞免疫功能的调节

雌激素和核内雌激素受体（ER）或膜相关雌激素受体结合，分别通过基因途径和快速信号反应途径调节T淋巴细胞功能。雌激素和雌激素受体从多个方面调节T淋巴细胞的免疫功能：雌激素能调节辅助性T细胞1（Th1）和辅助性T细胞2（Th2）的比例，使其向Th2型细胞偏移；雌激素也能影响CD4^＋／CD8^＋细胞的比例；雌激素和ER影响T细胞的分化和成熟。     

卵巢癌细胞诱导T淋巴细胞凋亡的实验研究

目的　探讨卵巢癌细胞诱导T淋巴细胞凋亡及一氧化氮与细胞内游离钙离子在T淋巴细胞凋亡过程中的作用。方法　分别采用电子显微镜、流式细胞仪观察 3个卵巢癌细胞株 (OVCAR3、CAOV3和SKOV3 )的培养上清液诱导的CD+ 8T淋巴细胞的凋亡 ;逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)技术检测诱导型一氧化氮合成酶 (iNOS)mRNA的表达 ;Fura 2荧光负荷技术和酶联免疫 (EIA)法分别检测细胞内游离钙离子浓度 ( [Ca2 + ]i)和环鸟苷酸 (cGMP)浓度。结果　 ( 1)分别经卵巢癌细胞株OVCAR3、CAOV3和SKOV3细胞培养的上清液作用后 ,CD+ 8T淋巴细胞出现典型的凋亡改变 ,即染色质固缩和片段化 ;流式细胞仪上见凋亡峰 ;细胞凋亡率 [分别为 ( 2 3 8± 3 5) % ,( 2 3 1± 2 9) %、( 2 4 2± 4 9) % ]较对照 [( 4 6± 0 5) % ]明显增高 (P <0 0 1) ;( 2 )CD+ 8T淋巴细胞凋亡过程中iNOSmRNA的表达 (分别为 1 14± 0 0 3 ,1 0 5± 0 0 4,1 16± 0 0 2 )较对照 ( 0 60± 0 0 3 )显著增高 (P <0 0 1) ;细胞内游离 [Ca2 + ]i[分别为 ( 3 80± 3 8)、( 3 66± 13 )、( 3 56± 2 0 )nmol L]和cGMP浓度 [分别为 ( 0 65± 0 0 9)、( 0 62± 0 16)、( 0 57± 0 12 )pmol ml]均较对照 [分别为 ( 184± 11)nmol L、( 0 2 9± 0 0 4     

CD4+CDhigh25调节性T淋巴细胞在妊娠肝内胆汁淤积症发病中的作用

目的 探讨妊娠肝内胆汁淤积症(ICP)患者外周血与蜕膜组织CD4+CD25+凋节性T淋巴细胞(Treg细胞)及CD4+CD25hJigh细胞在ICP发病中的作用.方法 采用流式细胞仪检测30例ICP患者(ICP组,其中轻度15例,重度15例)及28例正常晚期妊娠妇女(对照组)外周血和蜕膜组织CD4+CD25+Treg细胞及CD4+CD25hJigh细胞占CD+T淋巴细胞的百分率,分析其与ICP发病的关系.结果 ICP组外周血CD4+CD25+Treg细胞百分率为(7.96±1.32)%,CD4+CD25high细胞了百分率为(0.78±0.22)%,均低于对照组[(17.05±2.86)%、(1.71±0.69)%],分别比较,差异均有统计学意义(P<0.01);ICP组蜕膜组织CD4+CD25+Treg细胞百分率为(17.18±2.27)%,CD+4CD25highTreg细胞百分率为(2.25±0.89)%,也均低于对照组[(32.01±3.88)%、(8.30±1.13)%],分别比较,差异也均有统计学意义(P<0.01).ICP组及对照组蜕膜组织中CD4+CD25+Treg细胞及CD4+CD25highTreg细胞百分率均高于外周血,差异均有统计学意义(P<0.01).ICP组轻度及重度患者外周血CD4+CD25+Treg细胞百分率分别为(8.74±0.96)%、(7.17±1.17)%,CD4+CD25hiithTreg细胞百分率分别为(0.89 ±0.20)%、(0.68±0.19)%,而蜕膜组织CD4+CD25+Treg细胞百分率分别为(18.43 ±1.90)%、(15.94±1.95)%,CD4+CD25highTreg细胞百分率分别为(2.62±0.72)%、(1.87±0.90)%,ICP组外周血及蜕膜组织CD4+CD25high胞及CD4+CD25+Treg细胞百分率随着病情的加重呈下降趋势,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 CD4+CD25+Treg细胞及CD4+CD25+highTreg细胞可能参与ICP的发病过程,并与病情的严重程度密切相关.     

米非司酮对胎儿外周血淋巴细胞表型的影响

目的 :探讨用米非司酮引产的胎儿血液淋巴细胞表型的变化 ,了解米非司酮对胎儿免疫功能的影响机理。方法 :选择妊娠 2 2～ 2 4周要求引产的健康妇女 3 0例 ,随机分成 2组。实验组 1 5例 ,顿服米非司酮 1 5 0mg,2 4h后行水囊引产术 ;对照组 1 5例 ,行单纯水囊引产术。胎儿娩出后立即抽取脐动脉血 ,用流式细胞仪 (FCM)分析胎儿外周血淋巴细胞表型。结果 :实验组CD8+ 细胞、CD1 2 2 + (IL 2受体β)、NK细胞 (CD3 -/CD1 6-CD5 6-和CD3 + /CD1 6+ CD5 6+ )百分率均显著低于对照组 (P <0 .0 1 ) ;CD4+ /CD8+ 比值则显著高于对照组 (P <0 .0 1 ) ;两组比较 ,CD3 + 细胞、CD4+ 细胞及CD2 5 + (IL 2受体α)细胞百分率差异无显著性(P >0 .0 5 )。结论 :米非司酮可影响胎儿外周血淋巴细胞表型 ,使胎儿免疫抑制反应减弱 ,免疫排斥反应增强 ,影响胎儿免疫功能     

子痫前期患者辅助性T淋巴细胞及协同刺激分子CD28/CTLA-4的表达

目的:探讨辅助性T淋巴细胞及协同刺激分子CD28/CTLA-4在子痫前期发病中的作用。方法:采集22例正常妊娠妇女(正常妊娠组)及45例子痫前期患者(子痫前期组,包括22例轻度和23例重度)外周血,用流式细胞技术分别检测外周血Th1、Th2及Th1/Th2比率及CD28和CTLA-4在CD4+T细胞的表达。结果:子痫前期组Th1、Th1/Th2、CTLA-4均高于正常妊娠组,且重度高于轻度(P0.05);子痫前期组Th2、CD28/CTLA-4低于正常妊娠组,且重度低于轻度(P0.05)。CD28与Th1呈负相关,r=-0.295;CTLA-4与Th1呈正相关,r=0.551,与Th2呈负相关,r=-0.363;CD28/CTLA-4与Th1/Th2呈负相关,r=-0.707。结论:子痫前期患者外周血协同刺激分子CD28/CTLA-4表达异常,高表达的CTLA-4促进CD4+T淋巴细胞过度活化并向Th1亚群分化,导致Th1/Th2比率失衡,这可能是子痫前期发生的重要原因之一。     

儿童幽门螺杆菌感染时T淋巴细胞亚群的变化

目的研究儿童幽门螺杆菌(H.pylori)感染时的T淋巴细胞亚群变化。方法流式细胞仪直接免疫荧光法测定38例［H.pylori+慢性浅表性胃炎(CSG)12例；H.pylori+十二指肠溃疡(DU)5例；H.pylori-CSG 21例］儿童胃窦黏膜及外周血T淋巴细胞亚群。各组患儿均在内镜检查下取胃窦黏膜作快速尿素酶试验、组织学检查及淋巴细胞提取，同时抽取外周肝素抗凝静脉血2mL。提取的淋巴细胞经CD3 FITC、CD4 PE、CD8 PerCP染色后行流式测定。其中，胃黏膜T淋巴细胞亚群的检测以CD3设门。结果(1)胃黏膜CD+3(%)细胞的检出率分别为：H.pylori-CSG组3.14±2.03,H.pylori+CSG组4.58±2.30,H.pylori+DU组为6.49±4.49；(2)胃黏膜CD+3细胞中CD+4(%),CD+8(%)的相对比例及CD+4/CD+8值分别为：H.pylori-CSG组为19.81±9.25,47.30±12.83,0.43±0.19，H.pylori+CSG组为40.66±12.52,29.25±8.58,1.42±0.31,H.pylori+DU组为31.98±14.02,49.52±19.00，0.72±0.43。H.pylori+CSG组局部胃窦黏膜CD+4细胞、CD+4/CD+8比值明显高于H.pylori-CSG组，CD+8细胞则低于H.pylori-CSG组(P<0.01)。H.pylori+DU组CD+4、CD+4/CD+8比值也高于H.pylori-CSG组(P<0.05)，但CD+8细胞无统计学差异。H.pylori+DU组CD+8细胞高于H.pylori+CSG组而CD+4细胞无统计学差异，CD+4/CD+8比值则低于H.pylori+CSG组(P<0.01)。(3)外周血T淋巴细胞亚群的变化在三组之间并无明显的差异。结论H.pylori+DU与H.pylori+CSG的宿主的T淋巴细胞反应并不相同，而局部胃窦黏膜的T淋巴细胞亚群的异常可能在儿童H.pylori感染的免疫致病机制中起一定的作用。     

调节性T淋巴细胞与原因不明复发性流产的相关性研究

目的　探讨外周血中CD 4 CD 2 5调节性T淋巴细胞 (CD 4 CD 2 5Tr)在原因不明复发性流产发病中的作用。方法　用双荧光标记流式细胞分析技术 ,检测 17例原因不明复发性流产妇女 (流产组 )、2 0例正常非孕妇女 (正常非孕组 )和 2 0例正常妊娠妇女 (正常妊娠组 )外周血中CD 4 CD 2 5Tr的表达情况。结果　流产组妇女外周血中CD 4 CD 2 5Tr表达率为 (11 9± 2 7) % ,明显低于正常非孕组妇女的 (15 2± 3 0 ) % ,两组比较 ,差异有极显著性 (P <0 0 1)。正常妊娠组妇女外周血中CD 4 CD 2 5Tr的表达率为 (14 4± 4 8) % ,与正常非孕组比较 ,差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论　原因不明复发性流产的发生 ,可能与患者外周血中CD 4 CD 2 5Tr数量减少有关。     

原因不明复发性流产患者调节性T淋巴细胞对树突状细胞的调控作用

目的 探讨原因不明复发性流产(URSA)患者外周血和蜕膜组织中CD+4CD+25调节性T淋巴细胞(Tr细胞)对树突状细胞(DC)的调控作用.方法 采集4例URSA患者(流产组)和4例正常早孕妇女(对照组)的外周血和蜕膜组织,密度梯度离心法、免疫磁珠分离法分选出Tr细胞和DC,培养6 d,培养方法分为DC单独培养和Tr细胞与Dc混合培养.酶联免疫吸附试验(ELISA)检测两种方法培养的细胞培养上清液中辅助性T淋巴细胞(Th)1型细胞因子--γ干扰素(IFN-γ)的Th2型细胞因子--白细胞介素10(IL-10)的蛋白含量.结果 (1)外周血:流产组细胞混合培养和单独培养后,细胞培养上清液中IFN-γ蛋白含量为(22.5±3.0)、(23.2±0.7)ng/L,两者比较,差异无统计学意义(P>0.05);IL-10蛋白含量分别为(35±4)、(37±7)ng/L,两者比较,差异也无统计学意义(P>0.05).对照组细胞混合培养和单独培养后,IFN-γ蛋白含量为(36±1.1)、(30.5±4.0)ns/L,两者比较,差异无统计学意义(P>0.05);IL-10蛋白含量分别为(36±9)、(54±20)ng/L,两者比较,差异有统计学意义(P<0.01).(2)蜕膜组织:流产组细胞混合培养和单独培养后,IFN-γ蛋白含量分别为(24.4±2.5)、(23.4±2.6)ng/L,两者比较,差异无统计学意义(P>0.05);IL-10蛋白含量分别为(25±5)、(28±7)ng/L,两者比较,差异也无统计学意义(P>0.05);对照组细胞混合培养后,IFN-γ蛋白含量为(22.6±3.8)ng/L,明显低于单独培养后的(30.7±4.6)ng/L,差异有统计学意义(P<0.01);对照组细胞混合培养后,IL-10蛋白含量为(31±9)ng/L,明显高于单独培养后的(27±6)ng/L,差异也有统计学意义(P<0.05).结论 URSA患者Tr细胞抑制性免疫功能下降,从而导致对DC调控失常,Th1/Th2平衡失调和母胎免疫耐受异常.     

复发性流产患者外周血T淋巴细胞亚群及CD4^＋辅助性T淋巴细胞亚型的变化

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原因不明复发性流产患者外周血及蜕膜组织中CD+4CD+25调节性T细胞比例的变化

目的 探讨原因不明复发性流产(URSA)患者外周血及蜕膜组织中CD+4CD+25调节性T(Tr)细胞比例的变化.方法 采用双荧光标记流式细胞分析技术检测25例URSA患者(流产组)、34例正常早孕妇女(正常妊娠组)和22例正常非孕妇女(正常非孕组)外周血及蜕膜组织中CD+4CD+25Tr细胞的比例.结果 (1)流产组和正常妊娠组妇女外周血CD+4 CDbright25T细胞的比例[分别为(1.55±0.77)%、(2.65±1.10)%]均显著高于正常非孕组妇女[(0.39±0.14)%],分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05);流产组妇女外周血CD+4 CDbright25T细胞的比例显著低于正常妊娠组妇女,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05).(2)流产组妇女蜕膜组织中CD+4 CDbright25T细胞比例[(0.59±0.23)%]显著低于正常妊娠组妇女[(1.24±0.55)%],两组比较,差异有统计学意义(P<0.01).流产组妇女蜕膜组织中CD+4CDdim25T细胞比例[(4.23±1.52)%]与正常妊娠组[(3.75±1.88)%]比较,差异无统计学意义(P>0.05).(3)正常妊娠组妇女蜕膜组织中CD+4CDbright25T细胞占CD+4T细胞的比例(CD+4CDbright25/CD+4)为(13.10±10.25)%,显著高于外周血[(5.59±2.62)%],两者比较,差异有统计学意义(P<0.05);流产组患者蜕膜组织中CD+4CDbright25/CD+4比例[(5.16±2.83)%]与外周血[(4.64±2.07)%]比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 CD+4CD+25Tr细胞数量在早孕期显著升高,参与了正常妊娠的维持,有可能是调控母-胎界面局部免疫耐受形成的一个重要因素;CD+4 CD+25Tr细胞数量的减少可能与URSA的发生有关.     

子痫前期患者母-胎界面子宫自然杀伤细胞免疫表型及辅助性T淋巴细胞1、2免疫状态的研究

目的探讨母．胎界面子宫自然杀伤细胞免疫表型及辅助性T淋巴细胞（Th）1、2免疫状态的变化与子痫前期发病的关系。方法于剖宫产时采集20例子痫前期患者（子痫前期组）及11例正常妊娠妇女（正常对照组）的子宫底蜕膜组织,应用流式细胞技术检测两组产妇底蜕膜组织中子宫自然杀伤细胞亚群,子宫自然杀伤细胞表面受体CD69、CD94及Th1／Th2免疫状态。结果（1）子痫前期组底蜕膜组织中子宫自然杀伤细胞CD56^bright CD16^-亚群及CD56^dim CD16^＋亚群的含量分别为（17．3±11．1）％及（16．3±8．7）％,正常对照组分别为（17．9±16．8）％及（16．2±8．8）％,两组分别比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。（2）子痫前期组底蜕膜组织中子宫自然杀伤细胞CD56^＋CD69^＋及CD56^＋CD94^＋的含量分别为（37．9±18．9）％及（34．9±15．2）％,正常对照组分别为（36．8±19．7）％及（32．7±16．2）％,两组分别比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。（3）子痫前期组CD56^＋CD69^＋／CD56^＋CD94^＋值为1．1±0．2,正常对照组为1．2±0．6,两组比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。（4）子痫前期组底蜕膜组织中细胞毒性T淋巴细胞（Tc）2型细胞含量为（3．0±1．0）％,正常对照组为（4．3±0．9）％,两组比较,差异有统计学意义（P〈0．001）;子痫前期组Tc1／Tc2值为17．8±3．4,正常对照组为11．8±4．6,两组比较,差异有统计学意义（P〈0．001）;子痫前期组Th1／Th2值15．1±2．4,正常对照组为13．2±3．1,两组比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论子痫前期患者底蜕膜组织中母-胎界面的子宫自然杀伤细胞免疫表型无明显变化;但Tc1／Tc2值向Tcl偏移,使得母-胎界面Th1／Th2免疫状态向Th1型免疫偏移,这一现象可能与子痫前期发病有关。     

调节性T细胞和Notch1信号通路在原因不明复发性自然流产中的作用

目的探讨调节性T细胞(Treg)和Notch1信号通路在原因不明复发性自然流产(URSA)中的作用。方法流式细胞仪检测URSA患者(URSA组)及正常妊娠妇女(对照组)蜕膜CD4~+CD25~+T细胞Treg表达比例,real time RT-PCR及Western blotting检测蜕膜中CD4~+T细胞中Notch1信号通路和叉头转录因子家族3(Foxp3)表达情况。结果 URSA组CD4~+CD25~+T细胞/淋巴细胞、CD4~+Foxp3~+T细胞/淋巴细胞和CD4~+Foxp3~+T细胞/CD4~+T细胞比例均低于对照组(P0.05)。URSA组CD4~+T细胞中Notch1-Ic、RBPJκ、Foxp3 m RNA及蛋白表达均低于对照组。结论 URSA患者蜕膜CD4~+T细胞中Notch1信号通路和Foxp3表达下调,CD4~+CD25~+T细胞表达比例下降,提示URSA患者Notch1信号通路和Foxp3表达下调可能阻碍CD4~+T细胞转化为CD4~+CD25~+T细胞,进而诱发免疫排斥,诱导流产。     

Tumor-infiltrating lymphocytes contain higher numbers of type 1 cytokine expressors and DR+ T cells compared with lymphocytes from tumor draining lymph nodes and peripheral blood in patients with cancer of the uterine cervix

OBJECTIVE: The aim of this study was to compare the phenotype and function of lymphocytes collected from the peripheral blood (PBL), tumor draining regional lymph nodes (LND), and infiltrating tumor tissues (TIL) of patients with stage IB-IIA cervical cancer. METHODS: Leukocytes from peripheral blood (n = 35), tumor draining lymph nodes (n = 33), and tumor tissues (n = 15) of cervical cancer patients were evaluated for the relative proportions of lymphocyte subsets including CD3+, CD4+, CD8+, CD19+, CD56, and the early (CD25) and late (HLA-DR) activation markers on CD3+ T cells, as well as the ability to synthesize type 1 cytokines (IFN-gamma and IL-2) and a type 2 cytokine (IL-4) by flow cytometry. RESULTS: In all patients, T cells (CD3+) were the major leukocyte population detected in each tissue, with CD4+ T cells being dominant in PBL and LND, while CD8+ T cells predominated in TIL (CD4:CD8 ratios, 2.4 vs 4.0 vs 0.7, respectively). CD19+ lymphocytes (B cells) were significantly higher in LND compared to PBL and TIL (P > 0.01) while CD56+ lymphocytes were higher in PBL compared to LND (P > 0.01) and TIL (P > 0.05). The early activation marker CD25 was significantly up-regulated in LND, while TIL had a higher proportion of T cells expressing the late activation marker HLA-DR. Type 1 cytokines were the dominant type produced by in vitro stimulated T cells for each population, with a greater proportion of IFN-gamma+ CD4+ and CD8+ T cells (i.e., Th1 and Tc1) and IL-2+ CD8+ T cells (Tc1) seen in TIL, as compared with LND and PBL (P > 0.01). Low percentages of IL-4+ T cells (i.e., Th2 and Tc2) were detected only in PBL. CONCLUSIONS: This study demonstrates significant differences in the phenotype and activation state of lymphocyte subsets from different anatomical sites, as well as differences in their ability to synthesize immunostimulatory cytokines. The recruitment and accumulation of high concentrations of antigen-experienced T lymphocytes in the cervical tumor tissue may represent an important local barrier to neoplastic dissemination.     

CD4＋T细胞在原因不明复发性流产中的研究进展

正常妊娠有赖于母体对胚胎半同种抗原的免疫耐受,一旦免疫耐受失衡,将导致免疫排斥、免疫攻击从而导致自然流产,原因不明复发性流产被认为与母胎免疫耐受失衡有关.CD4＋T在同种异体急性排斥反应中发挥重要作用,根据所分泌的细胞因子不同,CD4＋T 细胞分为Th1、Th2、调节性T细胞（Treg）及新近发现的Th17细胞.早期研究发现母体外周血、母胎界面CD4＋T细胞增高与复发性流产密切相关.随免疫耐受机制研究的不断深入,母胎免疫耐受的研究历经Th1/Th2平衡到Treg的免疫负调控作用,再到Th17/Treg平衡.综述CD4＋T细胞在原因不明复发性流产中的研究进展.     

原因不明复发性流产患者蜕膜组织中转录因子GATA-3及T-bet mRNA表达的研究

目的 探讨转录因子GATA-3、T-bet在原因不明复发性流产发病中的作用.方法 采用原位杂交方法,检测20例原因不明复发性流产患者(流产组)和20例正常妊娠妇女(正常妊娠组)蜕膜组织中1型辅助性T细胞(Th1)特异性转录因子T-bet和2型辅助性T细胞(Th2)特异性转录因子GATA-3的mRNA表达水平.结果 (1)GATA-3:蜕膜组织中每高倍视野平均GATA-3阳性细胞数流产组为(25±16)个,正常妊娠组为(38±16)个,两组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).(2)T-bet:蜕膜组织中每高倍视野平均T-bet阳性细胞数流产组为(59±17)个,正常妊娠组为(46±18)个,两组比较,差异也有统计学意义(P＜0.05).(3)两组妇女蜕膜组织中GATA-3 mRNA与T-betmRNA的表达水平呈负相关关系(r=-0.55,P＜0.01).结论 原因不明复发性流产患者蜕膜组织中T-bet表达占优势,GATA-3的表达受抑制,可能诱导了母胎界面Th1/Th2平衡向Th1偏移,从而使胚胎遭受免疫攻击而发生流产.     

原因不明复发性流产与蜕膜CD4~+ CD25~+ T调节细胞和CD8~+ CD28~- T细胞的关系

目的:探讨原因不明复发性流产(unexplained recurrent spontaneous abortion,URSA)与蜕膜CD4+ CD25+ T细胞和CD8+ CD28-T细胞的关系。方法:采用流式细胞四色荧光法,检测原因不明复发性流产17例(URSA组)和正常早孕人流20例(对照组)的蜕膜CD4+ CD25+ T细胞及其FoxP3(+)表达,CD8+ CD28- T细胞及其表面CD95、CD95L表达。结果:两组蜕膜中CD4+ CD25+ T细胞比例无明显差异(P>0.05),URSA组蜕膜CD4+ CD25+ T细胞中FoxP3阳性率明显低于对照组(P<0.0001)。两组蜕膜CD8+ CD28- T细胞比例及其细胞表面CD95和CD95L的阳性表达率均无明显差异(P>0.05);结论:蜕膜CD4+ CD25+ FoxP3(+)T调节细胞明显减少,是导致URSA患者母胎界面免疫耐受异常的重要原因。     

Immune rosettes of T and B lymphocytes in infertile women with endometriosis

We examined the cell-mediated immune response in women with pelvic endometriosis by quantitating their T and B lymphocytes. The study was conducted on heparinized peripheral blood and peritoneal fluid. The results were compared with those in a control group of women without evidence of endometriosis. Each patient underwent laparoscopy as part of her infertility evaluation. The ability of T cells to form rosettes with sheep erythrocytes was used to estimate the percentage of total and active T cells. B lymphocytes were quantitated by erythrocyte antibody complement binding capacity. In addition, T and B lymphocytes were assayed with the Immunobead technique using specific monoclonal antibodies. The helper T cell (T4) and suppressor T cell (T8) subsets of lymphocytes were evaluated with specific monoclonal antibodies coupled to microbeads. The results demonstrated an increased number of T and B cells in peritoneal fluid and peripheral blood from patients with endometriosis as compared with controls. Furthermore, the ratio T4:T8 was significantly increased in patients with endometriosis. These results suggest a cell-mediated immune response in the presence of endometriosis.     

CD4~+CD25~+FOXP3~+调节性T淋巴细胞数量及功能变化与子宫内膜异位症患者发病相关性研究

目的:分析子宫内膜异位症(EMs)患者在位、异位内膜及外周血内CD4~+CD25~+FOXP3~+调节性T淋巴细胞(Treg细胞)的数量、分布及功能特性,探讨Treg细胞与EMs发病之间的关系。方法:收集EMs患者在位、异位内膜组织及外周血标本,并以非内异症患者作为对照,免疫组化分析在位、异位内膜内叉头状/翅膀状螺旋转录因子3(FOXP3)阳性细胞的数量及分布变化情况,并与EMs患者的r AFS临床分期进行相关性分析。流式细胞术检测Treg细胞占外周血CD4~+T淋巴细胞的百分比,及磁珠分选外周血内CD4~+CD25~+T细胞及CD4~+CD25-T细胞,3H-thymidine法测定CD4~+CD25~+T细胞免疫抑制功能变化情况。结果:EMs、非EMs患者在位内膜内平均FOXP3阳性细胞密度并无显著差异[(76.44±62.14)/mm~2vs(50.59±20.79)/mm~2;WU=152.0,P=0.20]。进一步按月经周期行亚组分析:EMs分泌期内膜内FOXP3阳性细胞密度显著高于非EMs患者[(94.84±53.91)/mm~2vs(31.37±19.02)/mm~2;MU=43.00,P=0.03]。不同r AFS期别患者卵巢异位症病灶内FOXP3阳性细胞密度并无显著差异[I~II期:(123.00±115.00)/mm~2vs III~IV期:(111.00±108.00)/mm~2;MU=139.5,P0.05]。EMs患者外周血内Treg细胞比例显著低于非EMs患者[(0.58±0.21)%vs(1.35±0.38)%,P0.001],但EMs患者外周血CD4~+CD25~+T淋巴细胞对CD4~+CD25-T淋巴细胞增殖抑制率,与非EMs相比并无显著变化[(68.43±18.15)%vs(66.37±17.78)%,P0.05]。结论:EMs患者在位内膜内Treg细胞失去正常的周期波动性,EMs患者分泌期内Treg细胞数目增加可能与内异症发病相关。EMs患者外周血内Treg细胞比例下降,但其免疫抑制功能并无明显改变。