恒河猴促黄体激素生物测定法及应用研究

目的 建立恒河猴促黄体激素(LH)生物测定法.方法 利用LH体外生物测定法,测定恒河猴血清中LH含量.结果 测定方法的灵敏度为0.05ng/管,批内和批间误差分别为(3.18±1.52)%和(7.56±3.41)%,证明该方法准确性高;恒河猴血清中LH含量反应曲线和hLH标准曲线平行良好,说明该方法可以用来检测恒河猴血清中的具有生物活性的LH变化,反映了动物正常的生理状态;回收实验表明,在该测定方法中加入10ng、20ng、40ng hLH时的回收率分别为(99.12±4.56)%、(99.31±6.49)%、(101.02±7.58)%,说明测定结果的可靠性.结论 本实验所建立的LH体外生物测定法灵敏度高,稳定性强.     

家兔失血性休克时促滤泡激素含量的变化

据报道,休克可能对生殖功能有影响。本文用失血休克兔模型证明:失血性休克能抑制促滤泡激素(FSH)的分泌;抢救休克的某些措施能部分恢复该激素的分泌功能。     

恒河猴月经血量测定

恒河猴月经血量的测定,对于恒河猴生殖生物学研究以及人类新型避孕药具临床前研究、妇科月经量改变研究的动物模型是必要的。国内尚未见此类报道。本文应用 Hallberg 碱性正铁血红素比色法,测定有规则月经周期的7只成年恒河猴(Rhesusmonkey)的月经血量。     

恒河猴同种异体原位经典式肝移植模型的建立

目的 建立恒河猴肝移植模型,为基础与临床实验奠定基础.方法 健康恒河猴16只,体重5-7kg,雌雄不限,供体体重略小于受体,用非静脉转流的方法建立恒河猴原位肝移植模型.整个实验主要步骤大致分为:(1供体组手术,主要包括供体血采集、经门静脉及腹主动脉插管行非离体肝脏灌注及供肝的切取和供肝修整;(2受体肝脏的切除及新肝的植入.结果 8次肝移植实验中,手术成功率100%.95%CI为63.06%-100%.存活时间均超过6h,最长达9h.结论 初步建立恒河猴肝移植模型,手术成功率100%,模型的稳定性需进一步提高.     

恒河猴模型在妇科疾病研究中的应用

<正>恒河猴属于非人灵长类动物中的一种,因其形态解剖、生理机能与人类相似[1],已作为实验动物广泛运用于医学领域[2]。笔者查阅大量文献,拟对以恒河猴为实验动物研究妇科常见病的现状作一综述。1绝经后骨质疏松症绝经后骨质疏松症(postmeno-pausal osteoperosis,PMOP)是一种与绝经有关的代谢性骨病,此病的发生与绝经后卵巢功能减退,雌激素减少密切相关。中医认为妇女在绝经前后随着天癸逐渐     

恒河猴皮毛真菌的培养和治疗观察

９例出现表皮癣菌的恒河猴,经病原菌培养,鉴定为石膏样毛癣菌,随机分为２组治疗,组Ｉ（ｎ＝４）局部分擦达克宁霜剂;组Ⅱ（ｎ＝５）局部外擦达克宁霜剂,同时用１０％甲醛溶液喷洒猴舍。在各组治疗结束后第１４天进行疗效评估：组Ｉ有效率为７５％;组Ⅱ有效率为１００％。结果显示：（１）达克宁霜剂与１０％甲醛溶液同时用药治疗恒河猴患石膏样毛癣菌病效果显著;（２）用１０％甲醛溶液定期消毒猴舍对预防恒河猴感染石膏样毛     

恒河猴剖腹产手术和术后婴猴护理的探讨

目的因恒河猴难产，在普通助产不成功时，需剖腹挽救母猴和胎儿的生命。方法难产母猴经氯胺酮肌注麻醉，实施剖腹产手术；术后母猴采取抗炎治疗，抑制渗出，补充维生素C等方法治疗护理；婴猴采取人工保温、人工喂乳等措施护理。结果共实施难产手术15例，手术成功率100％；术后母猴存活率均达100％，恢复良好；婴猴存活率70％，能健康成长。结论利用氯胺酮肌注麻醉，其稳定性和维持时间可满足猴子剖腹产手术的要求，15只猴子没有手术并发症及手术死亡，这种剖腹产手术操作方法对相关的灵长类动物科研工作以及保护珍贵恒河猴动物资源，减少因难产引起的死亡均有一定的参考价值。     

恒河猴外周血单核巨噬细胞体外培养方法的建立

目的 建立一种简单、经济、高效的培养恒河猴外周血单核巨噬细胞(monocyte-derived macrophage,MDM)的方法。方法 用肝素钠抗凝管采集成年恒河猴(Macaca mulatta)全血,密度梯度离心法分离外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMCs)。同时用无抗凝剂采血管采集同一只猴外周血,自凝后分离血清。将猴PBMCs置于CellBIND Surface的96孔(0.8×10⁶个细胞/孔)或48孔培养板(3×10⁶个细胞/孔)中,用含不同百分比的猴自体血清或胎牛血清(fetal calf serum,FCS)的RPMI 1640培养液培养24 h后洗弃未贴壁细胞,加入含有猴自体血清或FCS的新鲜培养基继续培养7 d后观察细胞形态学。分化良好的猴单核巨噬细胞贴壁能力强,占据板底大部分区域。胞体形态多样,多数呈长梭形。用巨噬细胞标记受体(CD14)抗体染色判断细胞纯度。并用细菌内毒素(LPS)刺激分化的巨噬细胞,检测巨噬细胞炎性因子的表达。此外,用猴艾滋病毒(SIVmac17E-Br、SIVmac251)和人-猴嵌合体艾滋病毒(SHIV KU-1)感染分化良好的猴巨噬细胞,检测病毒在猴巨噬细胞中的复制。结果 在含2%猴自体血清的RPMI 1640培养条件下,大多数(>85%)猴单核细胞能在24 h内贴壁,体外分化5～7 d后,猴巨噬细胞纯度大于96%。相比而言,含较高浓度(4%,8%或10%)猴自体血清或FCS的RPMI 1640 培养基对猴单核细胞的贴壁和分化作用较差。分化良好的猴巨噬细胞对LPS刺激敏感,可产生多种巨噬细胞炎性因子。此外,这些细胞对SIV或SHIV均易感,产生感染性病毒。结论 含2%猴自体血清的RPMI 1640培养基适于原代猴单核细胞的贴壁和分化。该方法简单、花费少,无需生长因子,且分化效果好,是培养猴艾滋病毒及开展相关免疫学实验的重要手段。     

恒河猴括约肌无力性尿失禁模型的建立

目的　建立恒河猴括约肌无力性尿失禁模型。方法　分离膀胱颈和后尿道支持组织 ,并剥除膀胱颈前壁1cm× 1cm大小肌层组织 ,雄猴还在尿道球部后方 ,贴近尿道两侧切断尿生殖膈肌层组织。结果　雄猴、雌猴术后均呈尿失禁状态。结论　通过破坏尿道内、外括约肌及膀胱颈、后尿道支持组织的方法建立恒河猴括约肌无力性尿失禁模型 ,效果稳定 ,操作简单     

体外培养恒河猴外周血单核巨噬细胞的研究

目的：建立一种简单、经济、高效地培养恒河猴外周血单核巨噬细胞（monocyte-derived macrophage,MDM）的方法。方法：用肝素钠抗凝管采集健康成年中国恒河猴（Macaca mulatta）全血,密度梯度离心法分离外周血单核细胞（peripheral blood mononuclear cells, PBMCs）。同时用无抗凝剂采血管采集同一只猴外周血,自凝后分离血清。将猴PBMCs置于CELLBIND Surface的96孔（0.8×106个细胞/孔）或48孔培养板（3×106个细胞/孔）中,用含不同百分比的猴自体血清或胎牛血清（fetal calf serum,FCS）的RPMI 1640培养液培养24h后洗弃未贴壁细胞,加入含有猴自体血清或FCS的新鲜培养基继续培养7天后观察细胞形态学。分化良好的猴单核巨噬细胞贴壁能力强,占据板底大部分区域。胞体形态多样,多数呈长梭形。用巨噬细胞标记受体（CD14）抗体染色判断细胞纯度。并用细菌内毒素（LPS）刺激分化的巨噬细胞,检测巨噬细胞炎性因子的表达。此外,用猴艾滋病毒（SIVmac17E-Br、SIVmac251）和人-猴嵌合体艾滋病毒（SHIV KU-1）感染分化良好的猴巨噬细胞,检测病毒在猴巨噬细胞中的复制。结果：在含2%猴自体血清的RPMI 1640培养条件下,大多数（>85%）猴单核细胞能在24h内贴壁,体外分化5-7天后,猴巨噬细胞纯度大于96%。相比而言,含较高浓度（4%,8%或10%）猴自体血清或FCS的RPMI 1640 培养基对猴单核细胞的贴壁和分化作用较差。分化良好的猴巨噬细胞对LPS刺激敏感,可产生多种巨噬细胞炎性因子。此外,这些细胞对SIV或SHIV均易感,产生感染性病毒。结论：含2%猴自体血清的RPMI 1640培养基适于原代猴单核细胞的贴壁和分化。该方法简单、花费少,无需生长因子,且分化效果好,是培养猴艾滋病毒及开展相关免疫学实验的重要手段。     

化瘀疏肝散结汤配合针刺对乳腺增生病患者卵泡期FSH、LH的影响

目的观察化瘀疏肝散结汤配合针刺对乳腺增生病患者卵泡期促卵泡生成素(FSH)、促黄体生成素(LH)的影响。方法 100例乳腺增生病患者随机分为两组。治疗组50例,采用化瘀疏肝散结汤配合针刺治疗,同时辅以乳腺专科护理。对照组50例,采用乳癖消片及逍遥丸治疗,护理与治疗组相同。所有患者均检测治疗前后卵泡期促卵泡生成素、促黄体生成素两项激素水平。结果治疗后两组促卵泡生成素均呈升高趋势,治疗组升高更明显,与治疗前比较,有极显著性差异(P0.01),与对照组治疗后比较,也有极显著差异(P0.01);治疗后两组促黄体生成素均呈下降趋势,治疗组下降更明显,与治疗前比较,有显著性差异(P0.05)。结论化瘀疏肝散结汤配合针刺可通过调节患者卵泡期促卵泡生成素与促黄体生成素的表达,从而达到治疗乳腺增生病之目的。     

Association between Two Polymorphisms of Follicle Stimulating Hormone Receptor Gene and Susceptibility to Polycystic Ovary Syndrome: a Meta-analysis

Objective To investigate the association between two polymorphisms of follicle stimulating hormone receptor(FSHR) gene and polycystic ovary syndrome(PCOS) susceptibility. Methods Case-control studies on relationship of Thr307 Ala and Asn680 Ser polymorphisms in FSHR gene and PCOS susceptibility were searched from Pub Med, ISI web of knowledge, EBSCO, and China National Knowledge Infrastructure(CNKI) databases up to March 21, 2013. The pooled odds ratio(OR) and 95% confidence interval(CI) were calculated using fixed- or random-effect model based on heterogeneity test in 5 genotype models analyses. Results A total of 11 studies were included in the Meta-analysis. The random-effect analysis showed Asn680 Ser was significantly associated with the reduced susceptibility to PCOS with dominant model(Asn/Asn+Asn/Ser vs. Ser/Ser, OR=0.83, 95% CI: 0.69-1.00), recessive model(Asn/Asn vs. Asn/Ser+ Ser/Ser, OR=0.84, 95% CI: 0.72-0.98), homozygote comparison(Asn/Asn vs. Ser/Ser, OR=0.79, 95% CI: 0.63-0.98), and the allele contrast(Asn vs. Ser, OR=0.87, 95% CI: 0.79-0.97) respectively(P=0.02, I2=56.0%), being protective factors for PCOS. However, no significant associations were found between Thr307 Ala and PCOS. Conclusion There might be a significant association between Asn680 Ser polymorphism and PCOS.     

猕猴早期妊娠血清孕酮的动态变化

以放射免疫分析法定期观察11只猕猴早期妊娠血清孕酮水平,发现自交配第5天开始孕酮水平升高,持续较高水平直至第40天左右,随后迅速下降并稳定在低水平状态。妊猴血清孕酮水平的变化规律有助于妊娠的早期诊断。     

猕猴黑质GABA能神经元的分布

采用进化程度较高的灵长类动物猕猴作为实验材料,在光镜下观察黑质的GABA能神经元。在黑质网状部GABA能神经元数量多,以多角形和梭形为主,致密部的GABA能神经元较网状部略稀少,胞体形态以多角形、圆形和梭形为主;在下丘平面还可见到许多GABA样阳性神经纤维。     

恒河猴心肺心房利钠多肽的免疫组织化学观察

用兔抗人α-心房肽血清和PAP免疫组织化学方法,观察到恒河猴心房肌细胞、肺细支气管上皮细胞及肺泡隔的一些细胞质中存在心房利钠多肽(atrial natriuretic polypep-tide,ANP)样活性物质,其为棕色颗粒。ANP主要定位于细胞核周质内,尤在核两端数量最多,这种颗粒的性质需待进一步研究。     

猕猴眼屈光间质及实用参数研究

本研究旨在提高猕猴白内障作为人类白内障理想的天然动物模型的实用性。在手术显微镜下采用微测量技术对４６只猕猴眼进行屈光间质及其它实用参数研究并与人的有关参数进行比较。研究结果表明，猕猴眼晶体厚度、晶体赤道部水平径、晶体赤道部垂直径、角膜水平径、角膜垂直径分别为４．２５±０．３３ｍｍ、９．７９±０．５６ｍｍ、９．５３±０．５３ｍｍ、１１．３２±０．３７ｍｍ、１０．８６±０．４６ｍｍ。这些参数与人的参数几乎完全相同，其他参数也与人的相应参数非常接近。由此，可为建立白内障的动物模型提供实验依据。     

催乳素对原代培养恒河猴睾丸间质细胞睾酮合成的影响

目的 研究催乳素对睾丸间质细胞睾酮生成的调节作用. 方法 采用无血清培养方法 分析催乳素时原代培养恒河猴睾丸间质细胞睾酮合成的影响. 结果 催乳素可增强恒河猴睾丸间质细胞对猴绒毛膜促性腺激素(mCG)刺激的反应,睾酮分泌量显著高于mCG和催乳素单独作用时的总和.在mCG存在下,催乳素可调节不同的睾酮前身物孕烯醇酮、孕酮和17α-羟孕烯醇酮转化为睾酮.低剂量的催乳素(10～100 ng·mL-1)可使一定剂量的睾酮前身物转化为睾酮的量明显增加,而高剂量的催扎素(300～1000 ng·mL-1)却明显地抑制睾酮前身物为睾酮,其中以17α-羟孕烯醇酮的作用最为显著. 结论 催乳素对睾丸间质细胞睾酮合成的作用,可能部分是通过其促进17α-羟孕烯醇酮转化为睾酮来实现的.     

补肾活血方对恒河猴PCO形态学和血清性激素的影响

目的探讨中药补肾活血方对恒河猴多囊卵巢(PCO)形态学和血清性激素的影响。方法选择健康育龄雌性恒河猴(6只)随机分为正常对照组、模型对照组、补肾活血方组;采用皮下注射丙酸睾丸酮和绒毛膜促性腺激素(HCG)建立PCO模型,分别灌胃给予生理盐水、补肾活血方,观察其卵巢形态及测定血清相关性激素含量。结果模型对照组血清LH、T水平较正常对照组明显升高,血清FSH、E2较正常对照组下降,与正常对照组相比模型组恒河猴卵巢体质量增加,呈多囊性改变,卵泡颗粒细胞减少而膜细胞层增加,电镜可见膜细胞内大量脂滴;补肾活血方组血清相关性激素水平恢复或接近正常对照组,卵巢形态接近正常组。结论提示此动物模型可以作为多囊卵巢研究的动物模型;补肾活血方具有改善多囊卵巢不排卵的作用。     

猕猴黑质含TH、GABA神经元与老化的关系

采用在种系进化上与人类很接近的猕猴为实验动物,分为青年组和老龄组,通过免疫组织化学技术观察黑质TH、GABA神经元与老化相关的变化。结果表明老龄组黑质致密部和网状部神经元的TH免疫反应性明显降低,老龄组GABA神经元数量和免疫反应性均明显低于青年组。提示中枢神经老化可能与黑质TH含量和GABA神经元数目减少有关。