创伤性脑损伤大鼠肠黏膜损害及小肠运动功能障碍的关系研究

目的观察创伤性脑损伤（TBI）后大鼠肠黏膜形态学改变及小肠动力变化,探讨二者的关系。方法采用改良Feeney自由落体撞击伤法建立TBI模型。64只雄性健康Wistar大鼠随机分为假手术对照组和TBI组,两组又根据实验终止时间各分为4个亚组,分别于伤后3、6、12、24 h光镜下观察小肠黏膜的病理变化及利用美蓝染色法计算小肠推进比。结果 TBI组小肠推进比均低于对照组（P〈0.05）。光镜下TBI组3 h即可见肠绒毛肿胀、增粗、缩短,12 h见绒毛破损、剥脱。结论 TBI后早期即可出现肠黏膜损伤和肠动力障碍,二者可能互为因果。     

缺血性脑卒中大鼠小肠动力异常及与血清Ghrelin变化的关系

目的:探讨缺血性脑卒中大鼠小肠动力的改变及与血清Ghrelin变化的关系. 方法:48只♂ Wistar大鼠随机分为对照组(n=8)和实验组(n=40),实验组按照3、6、12、24、48 h随机分为5个亚组,每组大鼠8只.采用Longa线栓法建立大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型(对照组组大鼠仅切开皮肤,不放线栓),所有大鼠进行神经生物学评分,MCAO组进行脑组织TTC染色.美蓝染色法检测肠动力;酶联免疫法测定血清Ghrelin水平;取距回盲部5 cm处小肠,光镜及电镜下观察肠黏膜组织的变化. 结果:对照组大鼠神经生物评分为0分,MCAO组大鼠神经生物评分为1-3分,MCAO组大鼠脑组织TTC染色可见缺血坏死区.MCAO各亚组的小肠推进比均明显低于对照组(P<0.05),脑缺血后24 h降至最低.MCAO各亚组血清Ghrelin水平均明显高于对照组(P<0.05),血清Ghrelin水平于术后3 h即升高,24 h达峰值.相关性分析显示缺血性脑卒中大鼠血清Ghrelin 水平与小肠推进比之间呈线性关系(r=-0.841,P<0.05).光镜下MCAO组肠黏膜上皮细胞受损,电镜下可见大量线粒体肿胀、嵴断裂,细胞器空泡变性,细胞间紧密连接偶见增宽,可见凋亡细胞. 结论:MCAO大鼠局灶性脑缺血后出现肠动力改变、血清Ghrelin水平变化,脑缺血24h内小肠动力显著下降,考虑可能与脑缺血应激后多种因素共同作用的结果,其机制仍需进一步研究.     

小肠出血损伤对大鼠肠黏膜内跨细胞白蛋白转运的影响

目的探讨小肠出血损伤对大鼠肠黏膜内跨细胞白蛋白转运的影响。方法选取40只SD雄性大鼠,体重240~280 g,随机分为对照组和模型组,每组20只。采用7.5 mg/kg双氯芬酸灌胃,诱导大鼠小肠黏膜损伤模型,建立大鼠非甾体类抗炎药(NSAIDs)肠黏膜损伤模型。将以上两组再随机分为急性期(T1)和亚急性期(T2)亚组,每组10只。对照组以1 ml纯化水灌胃;模型组以7.5 mg/kg双氯芬酸灌胃。T1亚组在灌胃1 d后处死,T2亚组灌胃5 d后处死。根据小肠损伤程度病理评分进行评价。测定大鼠血清中一氧化氮(NO)、白蛋白含量,同时测定荧光标记白蛋白,研究大鼠肠黏膜中白蛋白跨细胞转运的情况。结果7.5 mg/kg双氯芬酸能引起大鼠小肠黏膜严重的出血性损伤,小肠黏膜可见糜烂、溃疡、红斑,局部肠腔见囊样扩张,且T1、T2模型组小肠的损伤程度均大于T1、T2对照组(P<0.05),T2模型组小肠的损伤程度大于T1模型组(P<0.05)。T1模型组血清NO含量显著低于T1对照组(P<0.05),T2模型组NO含量显著高于T1对照组和T1模型组(P<0.05)。T1、T2模型组血清白蛋白显著低于T1、T2对照组(P<0.05),T2模型组较T1模型组显著降低(P<0.05)。结论短期小剂量的双氯芬酸能引起大鼠小肠黏膜损伤出血,并随着时间的延长而加重;小肠出血损伤会影响大鼠肠黏膜内跨细胞白蛋白的转运,从而导致NSAIDs性肠黏膜损伤。     

诱导型一氧化氮合酶在创伤性脑损伤后肠黏膜屏障损伤中表达的变化

目的观察创伤性脑损伤（TBI）后肠黏膜屏障损伤时诱导型一氧化氮合酶（iNOS）表达的变化及其可能的作用。方法 48只健康雄性W istar大鼠随机分为TBI组（n=24）和对照组（n=24）,各组动物分别在手术后3、6、12、24 h处死,每个时间点6只。动物处死后,抽门静脉血测血清内毒素、二胺氧化酶（DAO）,取脑组织和回肠黏膜,观察组织形态学改变,并测定肠黏膜组织DAO的含量和iNOS的表达情况。结果 TBI组肠黏膜受损,血中内毒素含量增加（P〈0.05）;肠黏膜DAO活性下降（P〈0.01）,而血中DAO活性则升高（P〈0.05）;iNOS的表达3h已经增高,12h达到最高,而后逐渐降低,但仍然高于对照组（P〈0.05）。结论 iNOS在TBI后肠黏膜屏障损伤时表达明显增加,参与了TBI后肠黏膜屏障损伤。     

早期细胞凋亡在创伤性脑损伤肠黏膜屏障应激性变化中的作用

目的 探讨早期细胞凋亡在创伤性脑损伤(TBI)大鼠肠黏膜屏障应激性变化中的作用.方法 选用雄性Wistar大鼠64只,随机分为TBI组(32只)和假手术对照组(32只).2组大鼠分别按术后6、12、24和48 h时相点分为4个亚组(每个亚组8只).在光镜和透射电镜下观察肠黏膜组织形态学变化,同时用Annexin Ⅴ-PI双染法经流式细胞仪检测各组早期细胞凋亡率.结果 光镜下TBI组可见肠黏膜上皮细胞受损,电镜下可见其细胞间紧密连接较假手术对照组增宽,并可见典型的凋亡细胞.TBI组的创伤后早期即可见肠黏膜细胞的凋亡率较假手术对照组明显升高[6 h:(13.5±3.7)%比(6.1±1.7)%,P＜0.05;12 h:(66.1±6.0)%比(5.2±1.1)%,P＜0.05;24 h:(39.8±4.8)%比(8.4±2.6)%,P＜0.05;48 h:(7.5±1.3)%比(6.6±0.5)%].结论 大鼠TBI后的早期,肠黏膜屏障功能即可受损,肠黏膜上皮细胞早期凋亡率的增加可能在这一病理生理过程中起着重要作用.     

C-Fos在腹泻型肠易激综合征大鼠模型脊髓中的表达及意义

目的制备腹泻型肠易激综合征大鼠模型,并探讨模型大鼠脊髓C-Fos表达及其意义。方法20只新生Sprague-Dawley大鼠随机分为实验组和对照组,各10只。PTCA球囊(3.5×20mm)新生大鼠结直肠扩张(CRD)制备腹泻型肠易激综合征模型,40d后通过腹壁回撤反应(AWR)评分评估内脏敏感性;观察大便性状,并Bristol评分;用碳素墨水肠道染色法观察小肠运动,以碳素墨水在小肠中移行距离占整段小肠长度的百分比,其作为小肠推进百分率来观察小肠推进运动功能;取两组大鼠脊髓,常规HE染色和通过免疫组化法观察C-Fos表达。结果模型组大鼠模型在较低的相同压力(≤60mmHg)的直肠刺激下AWR评分明显高于对照组,但是当压力较高时(≥80mmHg)两组的AWR评分差异无统计学意义,模型组大便Bristol评分明显升高,模型组小肠推进运动明显增强,模型组大鼠脊髓C-Fos阳性神经元显著增多。结论新生大鼠结直肠扩张可以制备肠道内脏敏感性、肠黏膜分泌和运动均增强的腹泻型肠易激综合征模型,脊髓C-Fos阳性神经元可能在神经信号传入过程中起放大信号作用。     

冷束缚应激状态下大鼠内源性糖皮质激素与肠屏障功能损害的关系

目的观察冷束缚应激(cold restrain stress,CRS)状态下大鼠血清皮质醇浓度及肠屏障功能的改变情况,以及糖皮质激素受体阻断剂(RU38486)对CRS状态下大鼠肠屏障功能的影响。方法60只成年雄性SD大鼠,随机分为正常对照组、应激组(S组)和糖皮质激素受体阻断剂组(R组)。S组和R组按应激后检测时间又分为S2 h、S4 h、S8 h、S16 h、S24 h组和R2 h、R4 h、R8 h、R16 h、R24 h组。应激动物模型参照Brodie[1]的方法改良制作。动态观察各组大鼠的血皮质醇浓度变化及肠黏膜屏障功能的改变情况。结果应激组各时段大鼠血清皮质醇浓度、D-乳酸浓度、血浆内毒素浓度及肠黏膜损伤指数均高于正常组,而糖皮质激素受体阻断后血清皮质醇浓度、D-乳酸浓度、血浆内毒素浓度及肠黏膜损伤指数均较应激组相应各时段明显增高。结论应激可以造成肠黏膜上皮的损伤,导致肠黏膜屏障通透性增高,糖皮质激素受体阻断剂则进一步加重肠屏障功能的损害,表明应激产生的血清皮质醇对肠屏障功能起着保护性的作用。     

伴高脂血症性重症急性胰腺炎大鼠的肠道免疫功能的实验研究

目的探讨伴或不伴高脂血症的重症急性胰腺炎(SAP)大鼠的肠道免疫功能改变及可能的机制。方法40只雄性SD大鼠,随机等分为4组:A组(正常对照组);B组(高脂血症组);C组(SAP组);D组(高脂血症+SAP组)。采用高脂饲料喂养4周建立大鼠高脂血症模型,采用逆行胰胆管注射3.5%牛磺胆酸钠制作大鼠SAP模型。建立SAP模型24h后处死动物,临床全自动生化仪检测血清三酰甘油(TG),鲎试剂法检测大鼠门静脉血内毒素水平,免疫组化方法检测小肠黏膜组织CD4+、CD8+T淋巴细胞数量,免疫放射分析法测定肠黏膜组织中分泌型免疫球蛋白A(sIgA)含量,分光光度计法测定肠道谷氨酰胺(Gln)摄取率、肠黏膜Gln含量、谷氨酰胺酶(GA)活力。结果B组血清TG值均较A组明显升高(P0.01),D组血清TG值均较C组明显升高(P0.01);C组血内毒素水平显著高于A组(P0.01),小肠黏膜组织CD4+、CD8+T淋巴细胞数量、sIgA含量、肠道Gln摄取率、肠黏膜Gln含量、GA活力较A组显著降低(P0.05～P0.01);D组血内毒素水平较C组明显升高(P0.01),小肠黏膜组织CD4+、CD8+T淋巴细胞数量、sIgA含量、肠道Gln摄取率、肠黏膜Gln含量、GA活力较C组显著降低(P0.05～P0.01)。结论SAP早期即出现肠道免疫功能受损,肠黏膜Gln代谢改变可能在这一损伤过程中起重要作用;高脂血症可加重SAP大鼠肠道免疫功能受损,而肠黏膜Gln代谢改变可能是高脂血症加重SAP肠道免疫功能受损的机制之一。     

糖皮质激素受体阻断剂对冷束缚应激状态下大鼠肠屏障功能改变的影响及相关研究

目的观察糖皮质激素受体阻断剂(RU38486)对冷束缚应激状态(cold restrain stress,CRS)下大鼠肠屏障功能改变的影响;探讨糖皮质激素受体对CRS状态下大鼠肠屏障功能的影响机制。方法将60只成年雄性SD大鼠,随机分为正常对照组、应激组(S组)和糖皮质激素受体阻断剂组(R组)。S组和R组按应激后检测时间又分为S2h、S4h、S8h、S16h、S24h组和R2h、R4h、R8h、R16h、R24h组。应激动物模型参照Brodie[1]的方法改良制作。动态观察各组大鼠肠黏膜屏障功能的改变情况。结果应激组各时段大鼠血清D-乳酸浓度、血浆内毒素浓度及肠黏膜损伤指数均高于正常组,而糖皮质受体阻断后血清D-乳酸浓度、血浆内毒素浓度及肠黏膜损伤指数均较应激组相应各时段明显增高。结论糖皮质激素受体阻断剂可加重应激引起的肠黏膜上皮的损伤,导致肠黏膜屏障通透性增高,造成肠屏障功能的损害。     

便秘大鼠肠道血管活性肠肽的变化及其临床价值

将36只大鼠分为对照组和便秘组,建立慢传输性便秘模型,用放射免疫分析法测定两组大鼠小肠和结肠组织匀浆中血管活性肠肽（VIP）的含量。结果便秘组大鼠小肠和结肠VIP含量明显降低（P〈0．01）。提示便秘的形成可能与肠肌间神经丛VIP能神经病理改变或功能障碍而导致VIP分泌减少有关。     

Effects of intestinal mucosal blood flow and motility on intestinal mucosa

AIM:To investigate the role of intestinal mucosal blood flow(IMBF) and motility in the damage of intestinal mucosal barrier in rats with traumatic brain injury.METHODS:Sixty-four healthy male Wistar rats were divided randomly into two groups:traumatic brain injury(TBI) group(n = 32),rats with traumatic brain injury;and control group(n = 32),rats with sham-operation.Each group was divided into four subgroups(n = 8) as 6,12,24 and 48 h after operation.Intestinal motility was measured by the propulsion ratio o...     

炎症介质和细胞因子在急性脑缺血模型大鼠肠道细菌移位中的作用

目的探讨急性脑缺血模型大鼠肠黏膜屏障应激性损害发生的机制。方法 64只雄性W istar大鼠随机分为缺血模型组和假手术对照组,两组大鼠分别按术后6、12、24和48 h时相点分为4个亚组（每组8只）。测定门静脉血内毒素（ET）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）以及肠黏膜组织一氧化氮（NO）水平,检测肠系膜淋巴结等多器官组织匀浆中标记大肠杆菌的移位率。结果各时相点门静脉血ET、TNF-α以及肠黏膜组织NO水平模型组较对照组升高,P均〈0.05;多脏器荧光标记大肠杆菌检出率模型组高于对照组,P〈0.05。结论急性脑缺血模型大鼠伤后早期即有肠道细菌移位,与炎症介质和细胞因子水平的升高密切相关,是肠黏膜屏障损害的重要因素。     

谷氨酰胺对急性胰腺炎大鼠肠黏膜胰岛素样生长因子表达及肠黏膜屏障的影响

目的 观察急性坏死性胰腺炎（ANP）时肠黏膜屏障的损伤情况,以及谷氨酰胺（Gln）和胰岛素样生长因子（IGF）对肠黏膜屏障的保护作用.方法 成功诱导ANP模型雄性Wistar大鼠48只,随机分为ANP组和Gln组各24只,另取假手术组24只作为对照.Gln组每日以Gln灌胃2次,剂量为1.5g/（kg·d）;ANP组和假手术组以同等量的生理盐水灌胃.分别在模型制作术后3、6、24、48 h时间点杀死大鼠,取胰头和末端回肠3～5 cm放入液氮中保存.观察胰腺和肠黏膜组织形态学改变,测定肠黏膜中IGF-1的表达、血清中二氨氧化酶（DAO）活性和内毒素浓度.结果 ANP组大鼠肠黏膜屏障功能严重破坏,肠道通透性明显增加,肠黏膜损伤评分明显增加;血清内毒素浓度、DAO活性明显升高（P均＜0.01）.与ANP组比较,Gln组动物肠黏膜损伤减轻,损伤评分有所下降,血清内毒素水平、DAO活性下降（P均＜0.05）.ANP组IGF-1表达水平明显下降（P ＜0.05）;Gln组明显升高（P＜0.05）,同时肠黏膜屏障功能得到一定的改善.结论 ANP时肠黏膜屏障结构和功能存在严重破坏;Gln能一定程度上减轻肠黏膜屏障损伤并能维护其功能;IGF-1参与Gln对ANP肠黏膜屏障损伤的修复和维持.     

仁术健脾理气方对功能性消化不良大鼠胃排空功能及Ghrelin、5-HT、CGRP的影响

[目的]研究仁术健脾理气方对碘乙酰胺（iodoacetamide,IA）诱导的功能性消化不良（FD）大鼠胃排空功能及胃促生长素（Ghrelin）、5-羟色胺（5-HT）、降钙素基因相关肽（CGRP）的影响,初步探讨仁术健脾理气方治疗FD的机制.[方法]雄性10日龄SD幼鼠100只,随机分为正常组（30只）和造模组（70只）.采用0.1％ IA灌胃诱导大鼠FD模型.大鼠8周龄时进行模型评定,将造模成功的70只大鼠随机分为模型组（30只）、中药低剂量组（10只）、中药中剂量组（10只）、中药高剂量组（10只）和阳性药组（10只）5组.正常组与模型组予以0.9％氯化钠溶液1 ml/100 g灌胃,中药低、中、高剂量组分别给予生药含量0.477 5 g/ml、0.955 5 g/ml、1.911 g/ml的中药煎剂1 ml/100 g灌胃,阳性药组给予0.3 mg/ml多潘立酮溶液1 ml/100 g灌胃.采用苏木精-伊红染色观察大鼠胃组织病理变化.采用放射免疫法检测大鼠胃组织髓过氧化物酶（MPO）活性以及血清中Ghrelin、5-HT、CGRP的含量.[结果]胃排空结果显示,中药高剂量组和阳性药组大鼠3h摄食量和胃排空率显著高于模型组（P＜0.05）,而3h后胃内食物残余量显著低于模型组（P＜0.05）.血清学结果显示,中药各剂量组和阳性药组FD大鼠血清中Ghre-lin和5-HT的含量均不同程度地升高（均P＜0.05）,且高剂量组与阳性药组比较差异无统计学意义;中药各剂量组和阳性药组FD大鼠血清中CGRP的含量均不同程度地降低（均P＜0.05）,且高剂量组与阳性药组比较差异无统计学意义.[结论]仁术健脾理气方对IA诱导的FD大鼠具有加快胃排空、降低胃肠感觉过敏的作用,其机制可能与外周血 Ghrelin、5-HT含量升高、CGRP含量降低有关.     

中药枳术汤加味对大鼠肠黏膜屏障通透性的影响

[目的]观察中药枳术汤加味对大鼠肠黏膜屏障通透性的影响。[方法]360只雄性Wistar大鼠,随机分为3组,各20只。对照组,实验前给予0．85％氯化钠0．35m1;模型对照（模型）组,术前给予0．85％氯化钠0．35ml;模型治疗（治疗）组,术前给予中药枳术汤0．35m1;均2次／d灌胃,连续7d;通过夹闭肠系膜上动脉30min后重新开放,建立肠道缺血一再灌注（氓）损伤模型;于灌注后1、24h分别检测各组肠道细菌移位发生率、细菌培养阳性率、外周血浆D-乳酸浓度和二胺氧化酶（DAO）浓度。[结果]LR后1h和24h,比较肠道细菌移位阳性率、细菌培养阳性率、血浆D-乳酸和DAO浓度,模型组〉对照组（p〈0．05）,治疗组〈模型组（P〈0．05）。[结论]中药枳术汤加味能抑制肠道细菌移位,降低肠黏膜的通透性,对肠黏膜屏障有较好的保护作用。     

褪黑激素及其受体对腹泻表现内脏高敏感大鼠胃肠道动力的影响

背景:肠易激综合征(IBS)的发病机制尚不完全清楚,褪黑激素(MT)可能参与IBS的病理生理。目的:探讨血清MT以及肠道褪黑激素受体(MR)在腹泻型IBS(IBS-D)发病机制中的意义。方法:45只Sprague-Dawley大鼠随机分为模型组、对照组以及模型治疗组。予大鼠球囊结直肠扩张,以制备腹泻表现内脏高敏感模型。造模后,模型治疗组大鼠每天给予MT 0.3 mg/kg灌胃,连续2周。实验第54 d处死大鼠。以腹壁回撤反射(AWR)评分评估内脏敏感性;观察大便性状,行Bristol评分;免疫组化法检测回盲部以及乙状结肠MR表达;ELISA法测定血清MT水平。结果:与对照组相比,模型组大鼠AWR评分、Bristol评分、肠道MR表达均显著升高,而血清MT水平显著降低(P0.05)。经MT治疗后,上述指标均显著改善(P0.05)。结论:肠道MR表达增强和血清MT水平降低可调节胃肠道运动,可能参与IBS-D的发生。     

正加速度暴露对大鼠应激性胃黏膜损伤和血浆EGF、CGRP的影响

目的 观察不同正加速度暴露值对大鼠胃黏膜的损伤和胃液EGF含量及降钙素基因相关肽（CGRP）水平的影响,探讨高正加速度值暴露后大鼠胃黏膜损伤的可能发生机制.方法 40只雄性Wistar大鼠随机分成4组：对照组（＋1Gz值,n=10）、＋5Gz值组（n=10）、＋10 Gz值组（n=10）、重复暴露组（n=10）.＋5 Gz值暴露组、＋10 Gz值组均连续暴露5 min;重复暴露组：＋5Gz值下暴露1.5 min,＋10 Gz值连续暴露2 min,＋5 Gz值连续暴露1.5 min.大鼠上机前每只大鼠专用一个固定盒,保证加速度作用的方向.大鼠头朝向离心机轴心,仰面固定于离心机转臂远端,每组10只同时上机.采用梯形正加速度作用曲线,G值增长率1 G/s,由计算机进行加速度程序控制.每组下离心机后,光镜下用游标卡尺检测胃黏膜损伤指数,生化比色法检测血浆EGF和CGRP含量并分析其相互关系.结果 各组胃黏膜损伤指数：重复暴露组＞＋10Gz值组＞＋5Gz值组＞对照组.＋5Gz值组与对照组相比胃黏膜损伤指数差异无统计学意义（P＞0.05）,＋ 10Gz值组、重复暴露组与对照组比较,差异均具有显著统计学意义（P＜0.01）.各组大鼠血浆EGF含量：重复暴露组＜＋10Gz值组＜＋5Gz值组＜对照组.＋5Gz值组与对照组相比血浆EGF含量差异无统计学意义（P＞0.05）,＋ 10Gz值组、重复暴露组与对照组比较,差异具有显著统计学意义（P＜0.01）.各组大鼠血浆CGRP含量：重复暴露组＜＋ 10Gz值组＜＋5Gz值组＜对照组.各实验组与对照组相比血浆CGRP含量差异均具有统计学意义（P＜0.05）.结论 正加速度值暴露对大鼠胃黏膜有损伤作用,在越高正加速度值暴露和正加速度重复暴露下,胃黏膜受损程度越重,血浆EGF和CGRP含量越低.高正加速度值暴露和重复加速度暴露造成大鼠的急性胃黏膜病变与胃黏膜的保护因子EGF和CGRP表达有关.     

急性胰腺炎时胰腺诱生型一氧化氮合酶及瘦素与肠壁通透性的关系及大黄素对其的影响

目的探讨大黄素在急性胰腺炎（AP）时对胰腺诱生型一氧化氮合酶（iNOS）和血清瘦素表达,以及对肠壁通透性的影响及作用机制。方法60只成年SD大鼠随机分为AP组（n=20）,假手术组（n=20）,和大黄素组（n=20）。检测血清淀粉酶活性、血清瘦素含量、胰腺组织中iNOS及NO含量、肠黏膜通透性（以血液与肠内125I-清蛋白累积指数表示）,并对胰腺和回肠进行病理学检查。结果AP组和大黄素组血清淀粉酶活性、瘦素含量、胰腺组织内的NO和iNOS水平及125I-清蛋白累积指数均显著高于假手术组（P〈0．05）;与AP组比较,大黄素组血清淀粉酶活性、胰腺组织内的NO、iNOS水平及125I-清蛋白累积指数均显著下降（P〈0．05）,血中瘦素含量明显升高（P〈0．05）,同时胰腺及回肠病理损害明显减轻。结论AP肠壁通透性增加的原因之一可能与AP时胰腺iNOS的过度表达产生过多NO有关,大黄素可降低胰腺iNOS的表达,该作用可能与升高血清瘦素水平有关,大黄素对降低AP时肠壁通透性的增加有一定预防和治疗作用。