戊四氮点燃大鼠海马Nogo-A及其受体NgR的表达

目的:探讨戊四氮点燃大鼠海马Nogo-A及其受体NgR的表达变化.方法:40只成年健康雄性大鼠随机分为实验组(腹腔注射戊四氮35 mg/kg,1次/d)和正常对照组(腹腔注射生理盐水3.5 mL/kg,1次/d),每组20只.实验第2周、4周,每组各取10只大鼠测定脑电图,然后采用免疫组织化学方法检测大鼠海马结构内Nogo-A及NgR的表达水平.结果:与对照组比较,第2周及4周时,实验组大鼠海马齿状回内分子层、门区及海马CA3区Nogo-A的表达降低 (P<0.05),同时,实验组大鼠海马齿状回颗粒细胞层、门区及海马CA3区NgR的表达也降低(P<0.05).结论:Nogo-A及NgR可能参与了癫(癎)后海马异常苔藓纤维出芽及突触重建过程.     

戊四氮点燃大鼠海马脑源性神经营养因子表达的变化

目的:探讨戊四氮点燃大鼠海马脑源性神经营养因子(BDNF)表达的变化.方法:40只成年健康雄性大鼠随机分为实验组和对照组,每组20只.实验组大鼠采用戊四氮点燃法制备癫(癎)模型,对照组不做处理.采用免疫组织化学方法观察实验第2周及4周时各组大鼠海马结构内BDNF表达的变化.结果:与对照组相比较,第2周和第4周时,实验组大鼠海马齿状回、门区及CA1、CA3区BDNF表达均升高(P<0.05).结论:BDNF可能参与了癫(癎)后海马异常苔藓纤维出芽及突触重建过程.     

托吡酯对戊四氮点燃大鼠海马胶质原纤维酸性蛋白表达的影响

目的:观察托吡酯(TPM)对戊四氮点燃大鼠海马胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响,以探讨胶质增生在癫(癎)发病机制中的作用.方法:将成年健康雄性SD大鼠40只,随机分为4组,每组10只,模型组、高剂量 TPM组、低剂量 TPM组和对照组.模型组胃灌入生理盐水10 mL/kg 1 h后腹腔注射10 g/L戊四氮35 mg/kg;高、低剂量 TPM组分别胃灌注10 g/L TPM 100 mg/kg、40 mg/kg 1 h后腹腔注射戊四氮,剂量同模型组;对照组按10 mL/kg和3.5 mL/kg分别胃灌注和腹腔注射生理盐水.实验第2周和第4周时,每组各选取5只大鼠处死,去海马,采用免疫组织化学化方法检测海马GFAP蛋白的表达.结果:第2 周和第4周时,模型组、高剂量 TPM组、低剂量 TPM组GFAP蛋白阳性细胞数均较对照组增高(P<0.05),高、低剂量 TPM组阳性细胞数小于模型组(P<0.05),高、低剂量TPM组间差异无统计学意义(P>0.05).4周时,模型组、高剂量 TPM组、低剂量 TPM组GFAP蛋白阳性细胞数高于2周时的水平(P<0.05).结论:GFAP参与了癫(癎)的病理过程.托吡酯可抑制大鼠海马GFAP的表达.     

戊四氮致大鼠海马CA1区超微结构改变(简报)

临床资料表明 ,癫状态中选择性易损伤区为海马CA1区 ,为了解癫发生与海马CA1区损伤的关系 ,笔者通过戊四氮致大鼠模型研究海马CA1区超微结构改变。1　材料与方法清洁级近交系SD雄性大鼠 6只 [上海西普尔 必凯实验动物有限公司 ,许可证号 :Scxk(沪 ) 2 0 0 3 0 0 0 2 ],体质量 2 15～2 4 0 g ,随机分 2组 ,每组 3只。实验组腹腔注射戊四氮 (5 0mg/kg) (美国Sigma公司 )。根据癫点燃动物行为标准评价。对照组腹腔注射等量生理盐水。注药后 4h处死动物 ,断头取脑 ,剥离海马组织 ,解剖镜定位。取海马CA1区组织1mm× 1mm× 3mm ,2 …     

托吡酯对戊四氮点燃大鼠海马生长相关蛋白-43 mRNA表达的影响

目的:观察托吡酯对戊四氮点燃大鼠海马结构内生长相关蛋白(GAP)-43mRNA表达的影响.方法:健康成年雄性SD大鼠40只,随机分为4组,每组10只.I组大鼠胃内注入生理盐水(10 mL/kg)后1 h腹腔注射10 g/L 戊四氮(35 mg/kg);Ⅱ组和Ⅲ组大鼠腹腔注射戊四氮(剂量同I组)前1 h分别按100 mg/kg和40 mg/kg胃内注入10 g/L 托吡酯生理盐水溶液;Ⅳ组大鼠按10 mL/kg和3.5 mL/kg分别胃内注入和腹腔注射生理盐水,间隔1 h.各组选取2个研究时间点,第1个时间点为I组大鼠疒间性发作达到Ⅲ级,第2个时间点为Ⅰ组大鼠疒间性发作达到Ⅴ级,每个时间点各组大鼠为5只.应用RT-PCR半定量检测不同时间点各组大鼠齿状回、海马CA3区及CA1区GAP-43 mRNA的表达.结果:2周和4周时I 组大鼠疒间性发作分别达到Ⅲ级和V级.GAP-43 mRNA RT-PCR 产物经溴乙啶显色后显示出256 bp和385 bp 2个预期的条带.在同一时间点,Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组大鼠齿状回及CA3区的GAP-43 mRNA表达强于Ⅳ组,差异有统计学意义(P＜0.05);各组在CA1区GAP-43 mRNA表达差异无统计学意义(P＞0.05);Ⅱ组和Ⅲ组大鼠齿状回和CA3区的GAP-43 mRNA表达水平较Ⅰ组降低,差异有统计学意义(P＜0.05),而Ⅱ组和Ⅲ组大鼠之间GAP-43 mRNA表达水平差异无统计学意义(P＞0.05).与2周时相比,4周时Ⅰ组大鼠GAP-43 mRNA表达水平进一步增强,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:戊四氮点燃大鼠海马GAP-43 mRNA表达增强,表明突触重建参与了癫(癎)发生的病理过程;托吡酯可抑制GAP-43的表达,可能是托吡酯抗癫(癎)作用的机制之一.     

戊四氮点燃大鼠海马脑源性神经营养因子受体TrKB、P75NTR表达的变化

目的:探讨戊四氮点燃大鼠海马脑源性神经营养因子(BDNF)受体TrKB、P75NTR表达的变化.方法:40只成年健康雄性SD大鼠随机分为实验组和对照组,实验组采用戊四氮点燃法制备癫(癎)模型,对照组不做处理.第2周及第4周,2组各取10只大鼠,采用免疫组织化学方法观察海马结构内TrKB、P75NTR的表达水平.结果:第2周及第4周,对照组大鼠海马CA1、CA3区锥体细胞层及齿状回和门区可见TrKB阳性神经元和纤维;CA1、CA3 区锥体细胞层、齿状回及门区可见大量P75NTR阳性神经元.与对照组比较,实验组海马相应部位TrKB的表达升高(P<0.05),P75NTR的表达降低(P<0.05).结论:在癫(癎)形成过程中,BDNF的2类受体TrKB 、P75NTR可能参与了癫(癎)后海马异常苔藓纤维出芽及突触重建过程;2类受体可能相互拮抗.     

新生大鼠持续缺氧条件下水通道蛋白4与脑水肿的关系

目的探讨水通道蛋白4(AQP4)在新生大鼠持续缺氧过程中与脑水肿的关系。方法健康10d龄SD大鼠,随机分为对照组和实验组。实验组结扎右侧颈总动脉,然后缺氧不同时间分为缺氧缺血(HI)2h组、HI 4h组、HI 8h组、HI 16h组4个亚组,对照组行假手术。观察每组动物神经行为学改变,各组实验取脑组织,行苏木精伊红(HE)染色、免疫组织化学染色、荧光定量PCR,观察新生大鼠海马CA1区形态变化和AQP4表达水平。结果实验组均出现不同程度的缺氧症状;实验组与对照组比较,有不同程度的水肿,且随着时间的延长,水肿加重,神经元呈现不可逆损伤;AQP4蛋白和RNA的表达水平呈下降趋势。结论 AQP4表达水平下降参与新生大鼠持续缺氧缺血条件下脑水肿的形成。     

AQP4在癫(癎)大鼠海马区的表达及意义

目的探讨AQP4与癫发作的关系,并将水的跨膜转运问题引入癫的研究领域。方法健康成年SD大鼠,随机分为对照组(n=6)和戊四氮(pentylenetetrazol,PTZ)组(n=20)。PTZ组以PTZ亚抽搐剂量(35 mg/kg)每天对SD大鼠进行腹腔注射,连续注射28 d;观察癫点燃率。应用逆转录PCR(RT-PCR)方法对比分析对照组、未点燃组和点燃组大鼠脑组织中的AQP4表达的变化。结果SD大鼠总点燃率为50%。RT-PCR结果显示,点燃组大鼠脑组织中AQP-4mRNA的表达水平为(0.85±0.11)明显高于未点燃组(0.38±0.08)和生理盐水组(0.33±0.08),差异有统计学意义(P<0.05),而未点燃组和生理盐水组间AQP4的表达未见明显的差异(P>0.05)。结论AQP-4可能通过水的转运调节了细胞的神经兴奋性,介导癫活动。     

水通道蛋白基因4在子痫前期模型大鼠脑组织中的表达

目的研究水通道蛋白基因4(AQP4)在子痫前期模型鼠脑组织中的表达变化。方法成年SD大鼠分为PE模型组(7只)通过尾静脉注射内毒素(1μg/kg)的方法建立,正常妊娠组(6只)和非孕组(12只)注射等量生理盐水。应用免疫组化和Westernblot检测各组大鼠海马区AQP4的表达水平。结果妊娠第19日PE模型组大鼠血压(135±9)mmHg明显高于正常妊娠组(116±8)mmHg和非孕组(112±6)mmHg(P<0.02);PE模型组尿蛋白(3.8±0.5)水平明显高于正常妊娠组(2.6±0.6)和非孕组(2.3±0.4)(P<0.05)。免疫组化结果显示AQP4集中分布在脑内血管壁,Western-blot灰度分析提示子痫前期大鼠海马组织中AQP4蛋白的表达水平(41.7±4.2)明显高于正常妊娠组(26.3±5.3)和非孕组(9.2±2.1)(P<0.01)。结论 AQP4在子痫前期模型大鼠脑组织中表达上调,可能与子痫发病有关。     

雷公藤内酯对海人酸致痫大鼠脑海马区水通道蛋白 4表达的影响

目的 探讨雷公藤内酯对海人酸致痫大鼠海马区水通道蛋白4（AQP4）表达的影响.方法 30只SD大鼠随机分成三组：对照组、海人酸组、雷公藤内酯干预组,每组10只.海人酸组颈内皮下注射海人酸,剂量为10 mg/kg;雷公藤内酯干预组在海人酸注射前连续7d腹腔内注射雷公藤内酯,剂量为30 μg/kg;对照组注射等量的生理盐水.造模成功后取脑海马组织,应用RT-PCR和Western blot法检测各组动物海马区AQP4蛋白的表达.结果 Western blot结果显示,海人酸组和对照组AQP4条带与GAPDH条带的灰度值比分别为0.872±0.141和0.453±0.078,海人酸组AQP4表达显著增多（P＜0.05）;雷公藤内酯干预组中海马AQP4蛋白相对灰度值比为0.647±0.185,表达较海人酸组减少（P＜0.05）.RT-PCR结果显示,海人酸组与对照组AQP4条带与GAPDH条带的灰度值比分别为1.212±0.115和0.843±0.091,海人酸组AQP4 mRNA表达比对照组显著增加（P＜0.05）;雷公藤内酯干预组AQP4 mRNA相对灰度值比为1.105±0.192,与海人酸组比较明显减少（P＜0.05）.结论 雷公藤内酯对海人酸致痫大鼠脑海马区AQP4蛋白的表达有下调作用,可以作为临床难治性癫痫的候选药物之一.     

AQPl、AQP8在病变宫颈上皮组织中的表达及临床意义

目的：探究水通道蛋白1（aquaporin一1,AQPl）及水通道蛋白8（aquaporin一8,AQP8）在病变宫颈上皮组织中的表达及临床意义。方法：采用免疫组织化学法、蛋白质印迹法对32例宫颈炎、95例宫颈癌及30例宫颈上皮内瘤变Ⅲ患者AQPl、AQP8的表达进行检测并分析。结果：3组AQPl微血管密度及AQP8阳性表达率差异均具有统计学意义（P％0．05）,且3组AQPl／甘油醛一3一磷酸脱氢酶（GAP—DH）、AQP8／GAPDH差异均具有统计学意义（P％0．05）;宫颈癌患者AQPl、AQP8的表达与临床分期、浸润深度、肿瘤直径等显著相关（P〈0．05）。结论：不同宫颈上皮组织病变程度的AQPl、AQP8表达差异具有统计学意义（P〈O．05）,且AQPl、AQP8在宫颈癌病情发生、发展过程中具有重要的临床病理意义。     

水通道蛋白的表达及其调节

水通道蛋白是具有高度选择性的水孔道特异蛋白质家族， 有13个家族成员。研究发现，水通道蛋白与多种临床疾病有着密切的关系，水通道蛋白在哺乳动物机体中调节作用的研究成为了当前水通道领域的一大热点。本文参阅了国内外近年来众多有关水通道蛋白的研究文献，介绍了水通道家族的分子结构，以及理化因素、激素和其他蛋白等调节水通道蛋白表达及功能的影响因素，并初步探讨了水通道蛋白在脑水肿、肺水肿和肾脏疾病中的调节机制。     

大鼠睾丸AQP7、AQP8表达随龄变化及人参二醇皂苷对其表达的影响

目的：探讨水通道蛋白7和8（aquaporin 7,AQP7;aquaporin 8, AQP8）的表达与睾丸生精功能的关系,以及人参二醇皂苷（PDS）对睾丸水通道蛋白表达的影响。 方法：4、12周龄Wistar大鼠分为盐水对照组(Con组)（n=6）和PDS腹腔注射组(PDS组)(n=6)。PDS组每日给予PDS腹腔注射（25 mg•kg^-1•d^-1,1　mL）,Con组注射等体积生理盐水,给药2周。采用半定量RT-PCR和Western blotting比较睾丸AQP7与AQP8的mRNA和蛋白质表达水平。 结果：随增龄睾丸AQP7和AQP8 mRNA和蛋白表达明显增高;4周龄大鼠PDS腹腔注射2周后睾丸AQP7和AQP8表达增强,PDS对4周龄大鼠睾丸AQP7蛋白质表达有明显的上调作用,12周龄大鼠接受14 d PDS腹腔注射后其AQP8蛋白质表达水平略有下降。 结论：睾丸AQP7和AQP8的表达随性成熟明显增高;PDS对睾丸水通道表达有明显的调节作用。     

前列腺素E1对急性肺损伤小鼠水通道蛋白1、5基因表达的影响

目的研究急性肺损伤(ALI)小鼠肺组织中水通道蛋白1(AQP1)、水通道蛋白5(AQP5)基因的表达变化,探讨前列腺素E(PGE1)治疗ALI的机制,为临床治疗ALI提供新的选择靶点和方法。方法 32只昆明小鼠随机分成4组(每组8只),即空白对照组(NS组)、造模组(ALI组)、前列腺素E1治疗组(PGE1组)、地塞米松治疗对照组(Dex组),观察6h后测定肺湿干重比值(W/D),并采用HE染色观察炎症变化,RTPCR检测AQP1mRNA、AQP5 mRNA、TNF-αmRNA、IL-1βmRNA的表达变化。结果 ALI组小鼠的肺部炎症反应显著,以中性粒细胞浸润为主,伴明显的肺泡充血、水肿。前列腺素E及地塞米松治疗后,肺组织炎症、充血明显改善,ALI组的W/D的比值与其他3组比较,差异有统计学意义(P均<0.05);与NS组相比,ALI组AQP1mRNA的表达显著降低(P<0.05),而PGE1组、Dex组的AQP1 mRNA的表达显著高于ALI组(P<0.05)。AQP5 mRNA表达的变化与AQP1mRNA的变化相似。与NS组相比,ALI组TNF-αmRNA的表达显著升高(P<0.05),而PGE1组、Dex组的TNF-αmRNA的表达显著低于ALI组(P<0.05)。IL-1βmRNA表达的变化与TNF-αmRNA的变化相似,肺损伤炎症减轻。结论PGE1可通过上调AQP1、AQP5的表达减轻肺损伤时肺水肿。可能是通过抑制炎症因子TNF-α、IL-1β的表达实现的。     

补肾法对人腰椎间盘退变中水通道蛋白AQP1、AQP3表达的影响

目的研究人体腰椎间盘退变过程中水通道蛋白AQP1、AQP3表达的变化,并观察补肾法治疗前后AQP1、AQP3表达的变化并探讨其作用机制。方法选取符合腰椎间盘突出症手术者24例,随机分为对照组(12例,直接手术)和治疗组(12例,补肾法治疗1个月后手术),脊柱创伤需要接受手术治疗者12例作为正常组。荧光定量RT-PCR法、Western blot法检测人体腰椎间盘组织退变前后AQP1、AQP3 mRNA和蛋白表达水平的变化;观察补肾法治疗前后AQP1、AQP3 mRNA和蛋白的表达变化。结果对照组AQP1、AQP3 mRNA及蛋白表达水平较正常组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组AQP1、AQP3 mRNA及蛋白表达水平较对照组增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论腰椎间盘发生退变时,AQP1、AOQP3基因和蛋白的表达水平均下降,经过补肾法治疗后AQP1、AQP3的表达有所增加,提示补肾法治疗腰椎间盘退变可能与AQP1、AQP3的表达上调有关。     

脑水肿与通道蛋白4的关系及进展

脑水肿是神经内外科的一种常见症状,对于它的形成目前还未能全部了解,治疗手段有限,效果不一。水通道蛋白（aquaporin,AQP）是1988年发现的生物体内的一种水的分子通道。水通道蛋白4（aquaporin-4,AQP4）是AQP蛋白的一种,研究发现,AQP4蛋白对脑水肿的形成及预后有非常密切的关系,通过调节AQP4蛋白可影响脑水肿的形成及预后,同时AQP4可能还有一些其他功能。因此,对AQP4蛋白及脑水肿的关系进行深入研究有助于解决脑水肿的发生与治疗问题,同时对水在生物体内的代谢有更深入的了解。     

卵巢上皮性癌组织中水通道蛋白3的表达

目的:检测卵巢上皮性癌组织中水通道蛋白3(AQP3)的表达,探讨其在卵巢上皮性癌发病中的意义.方法:取66例卵巢上皮性肿瘤(恶性46例,交界性10例,良性10例)、12例正常卵巢组织,应用免疫组织化学SP法检测AQP3的表达.结果:AQP3主要在卵巢上皮性癌癌细胞的胞质中和部分胞膜上表达,在良性卵巢上皮性肿瘤和交界性肿瘤部分肿瘤细胞胞质中、少量间质细胞胞质中也有表达.AQP3在交界性和恶性卵巢上皮性肿瘤组织中表达水平高于良性肿瘤组织和正常组织(P＜0.05).组织学分级为G2、G3的卵巢上皮性癌组织中AQP3的表达高于G1者,Ⅲ～Ⅳ期卵巢癌组织AQP3表达高于Ⅰ～Ⅱ期(P<0.05),腹水量超过1 000 mL者AQP3表达水平高于1 000 mL以下者(P<0.05),伴淋巴结转移的卵巢癌组织中AQP3表达水平高于无淋巴结转移者(P<0.05).结论:AQP3可能通过增加肿瘤上皮细胞和血管内皮细胞的水通透性,增强卵巢上皮性癌的侵袭和转移能力.     

功能失调性子宫出血患者子宫内膜水通道蛋白1的表达

目的:研究水通道蛋白1(AQP1)在人子宫内膜中的表达,并探讨AQP1对功能失调性子宫出血(功血)发生发展的意义。方法:选取正常月经妇女20例,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫组织化学法检测AQP1在正常子宫内膜中的定性及定位表达。选取正常月经妇女40例为正常对照组,功血患者51例为功血组,采用免疫组织化学法检测功血患者中AQP1的表达改变。结果:正常增生期和分泌期子宫内膜均可检测到AQP1 mRNA表达,AQP1蛋白表达于子宫内膜间质的毛细血管及小血管的内皮细胞。AQP1染色强度分泌期子宫内膜较增生期子宫内膜增高(P<0.01),AQP1染色强度和AQP1阳性的微血管密度单纯性增生组子宫内膜较正常对照组显著降低(P<0.01),在复杂性增生与不典型增生子宫内膜中逐渐增高,不典型增生组较单纯性增生组显著增高(P<0.001)。结论:AQP1表达于人子宫内膜间质的毛细血管及小血管的内皮细胞中,功血患者子宫内膜AQP1的降低可能导致血管形成不良,参与功血的发生。     

水通道蛋白-1在鼻息肉中的表达及其调节机制

目的:研究水通道蛋白-1(aquaporin1,AQP1)在鼻息肉组织中的表达,探讨其与鼻息肉水肿形成及发展的关系。方法:取鼻中隔偏曲矫正术患者下鼻甲黏膜30例和鼻息肉组织60例。鼻息肉组Ⅱ型1期10例,2期15例,3期25例,Ⅲ型10例。采用免疫组织化学检测AQP1在不同类型及不同临床分期鼻息肉和下鼻甲黏膜组织中的表达及在不同类型鼻息肉组织中的表达。结果:(1)鼻息肉上皮层AQP1阳性细胞数显著高于下鼻甲黏膜(P<0 01);不同分型分期鼻息肉上皮层AQP1的阳性细胞数又有差异,Ⅱ型3期和Ⅲ型鼻息肉显著低于Ⅱ型1期鼻息肉(P<0 01);而在鼻息肉血管内皮及腺体细胞中的AQP1的表达明显高于下鼻甲(P<0 01);(2)Ⅱ型3期和Ⅲ型鼻息肉血管内皮中AQP1阳性细胞数显著高于Ⅱ型1期鼻息肉和下鼻甲黏膜上皮下组织(P<0 01)。结论:AQP1在鼻息肉组织中的异常表达可能与鼻息肉的发生和发展密切相关,具体机制有待进一步研究。     

水通道蛋白5基因敲除纯合子小鼠的获取

水通道蛋白(aquaporins,AQPs)是表达于动植物细胞膜表面的一类蛋白质,主要调控渗透压介导的水分子运动,也部分调控其他小分子如甘油、尿素等物质的跨膜运动.目前发现人类有12种AQPs的表达,主要表达于泌尿系统、消化系统、呼吸系统等部位液体流动量较大的细胞膜上.呼吸系统中主要表达AQP1、3、4、5四种分子,其中AQP1、AQP5在急性肺损伤的发病中具有重要作用[1-2],但二者的确切作用机制尚不很清楚,对其确切机制的探讨是目前研究的热点.