硫氧还蛋白与人类疾病相关性的研究进展

硫氧还蛋白是一个广泛分布的氧化还原蛋白，通过二硫化物活性中心可逆地催化许多氧化还原反应，参与机体多种生物学活性，如刺激细胞生长，转录因子的调节、抑制凋亡等。它与人类许多疾病有关，硫氧还蛋白特异性抑制剂可能成为化学治疗干预的重要靶点。     

线粒体型硫氧还蛋白的研究进展

硫氧还蛋白是新近发现的一类小分子多功能蛋白,它与硫氧还蛋白还原酶及还原型辅酶Ⅱ共同组成了硫氰还蛋白系统.线粒体型硫氧还蛋白是硫氧还蛋白超家族中特异定位于线粒体的一员.目前研究显示,线粒体型硫氧还蛋白广泛参与体内细胞氧化应激反应、核酸代谢、细胞生长及凋亡等多种生物学过程,与机体生长发育、氧化应激损伤、肿瘤、器官缺血再灌注损伤等多种疾病相关.线粒体型硫氧还蛋白参与机体调节的具体机制,一方面是通过其分于内巯基/二硫键的相互转换来实现,另一方面是作为信号分子参与多种信号途径.     

硫氧还蛋白对大鼠睾丸缺血再灌注损伤保护作用的研究

目的 探讨硫氧还蛋白对大鼠睾丸缺血再灌注损伤的保护作用.方法 选取雄性SD大鼠60只,随机分为4组:假手术对照组(A组);睾丸扭转/复位组(B组);睾丸扭转/复位+腹腔内注射生理盐水组(C组);睾丸扭转/复位+腹腔内注射硫氧还蛋白组(D组).无菌条件下制作左侧睾丸扭转模型,扭转持续4h,复位4h后取睾丸标本(D组在复位前15 min腹腔内注射硫氧还蛋白).对标本进行病理组织学检查;检测睾丸组织中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的含量.结果 睾丸扭转/复位后可见生精小管退变,间质出现水肿及出血,腹腔注射硫氧还蛋白使睾丸扭转/复位诱发的组织学改变明显改善.B组及C组睾丸损伤评分(8.3±0.96;8±0.87)明显高于A组(0.78±0.36)(P＜0.01),而腹腔注射硫氧还蛋白可以使睾丸损伤分值(3.1±0.42)显著降低(P＜0.05).B组及C组MDA含量(4.39±0.21;4.42±0.17)升高,SOD活性(269±27.1;271±21.3)降低,与对照组(MDA:1.61±0.18;SOD:317±22.3)相比,差别具有显著性意义(P＜0.01).而腹腔注射硫氧还蛋白能有效降低MDA含量(2.03±0.03)并升高SOD活性(315±24.2)(P＜0.01).结论 本实验为硫氧还蛋白作为治疗睾丸扭转继发损害的有效物质提供了组织学及生化依据.为临床预防和治疗睾丸缺血再灌注损伤提供了理论依据.     

人硫氧还蛋白1多克隆抗体制备及对内毒素血症新生大鼠的保护作用

目的 克隆人硫氧还蛋白1(hTrx-1)基因并在大肠杆菌表达体系中进行有效表达,制备其多克隆抗体.初步探讨hTrx-1对内毒素血症新生Sprague-Dawley(SD)大鼠的保护作用.方法 从人胎肝细胞中用RT-PCR的方法得到了hTrx-1全长基因,将它克隆到原核表达载体上,在大肠杆菌诱导表达并纯化,纯化的蛋白免疫...     

硫氧还蛋白在早产鼠高氧肺损伤中的动态表达及其临床意义

目的研究高氧肺损伤早产鼠肺组织硫氧还蛋白(Trx)的表达及其临床意义。方法早产新生SD大鼠128只,生后d1随机分为空气组和高氧组,每组64只。分别于d1、4、7、10、14提取肺组织总RNA,采取半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定Trx mRNA水平;免疫组织化学方法检测肺组织切片凋亡蛋白半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3);HE染色观察肺组织病理变化。结果高氧组肺发育明显受阻,与空气组比较,高氧暴露后Trx mRNA表达显著增强,且于d10时达高峰(P<0.05,0.01)。Caspase-3表达显著升高(P<0.05,0.01)。结论高氧上调早产鼠肺组织Trx mRNA的表达;肺组织Trx mRNA的表达增高可能在早产鼠高氧肺损伤的发生发展中发挥重要保护作用。     

高体积分数氧对胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞硫氧还蛋白及其还原酶表达的影响

目的 探讨高体积分数氧(高氧)对胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AEC Ⅱ)硫氧还蛋白(Trx)及硫氧还蛋白还原酶(TrxR)表达的影响.方法 无菌条件下取孕19 d SD大鼠的胎鼠肺组织,剪碎.采用1 g/L胰酶和1 g/L胶原酶消化19 d胎鼠肺组织块,经差速离心和反复贴壁法,分离、纯化、原代培养胎鼠AEC Ⅱ,待其生长至亚融合状态时,随机分为空气和高氧组.于培养箱内静置30 min后,空气组置于同一室内空气中,高氧组通以1 000 mL/L纯氧(2 l/min)10 min;然后密封培养瓶,置培养箱中培养.二组分别培养12、24、48 h,倒置相差显微镜下观察高氧对其细胞形态及活性的影响;并采用半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测其Trx mRNA和TrxR mRNA表达.采用SPSS 13.0软件进行组间两样本均数t检验.结果 细胞爬片上AEC Ⅱ纯度为(94±2)%,表明所获细胞适合研究使用.与空气组比较,随时间延长,高氧暴露各时间点AEC Ⅱ生长状态明显不良;悬浮细胞增多,但大多数细胞仍具有活力;高氧暴露可促使AEC ⅡTrx mRNA、TrxR mRNA表达增加,且二者分别于24 h(t=2.471 P=0.033)和48 h(t=2.916 P=0.015)表达最强.结论 高氧暴露可促使胎鼠AEC ⅡTrx mRNA和TrxR mRNA表达上调;Trx和TrxR的表达上调可能是高氧肺损伤的重要保护作用机制之一.     

硫氧还蛋白及其还原酶在新生鼠高氧肺损伤中的表达

目的 研究硫氧还蛋白(Trx)及其还原酶(TR)在早产新生鼠高氧肺损伤的肺组织中的表达变化及意义.方法 早产新生SD大鼠,生后第一天随机分为空气组和高氧组.每组64只.两组分别于高氧或空气暴露后第4、7、10、14天提取肺组织总RNA,采取半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定Trx和TR mRNA表达;同时采用HE染色观察肺组织病理学变化,并进行辐射状肺泡计数(RAC).结果 病理学观察显示:与对照组比较,高氧组肺组织出现明显肺泡炎性改变和肺发育滞后,同时RAC值亦较空气组显著减少(P＜0.05).高氧暴露各组Trx、TR mRNA表达较空气组均明显增强(P＜0.05),且二者表达强度分别于第10天和第7天达高峰.结论 高氧上调肺组织Trx、TR表达;肺组织Trx系统表达增高可能在早产鼠高氧肺损伤的发病过程中发挥重要保护作用.     

高体积分数氧致A549细胞肺表面活性物质蛋白-A表达的变化

目的探索高体积分数氧(高氧)致A549细胞肺表面活性物质蛋白(SP)-A表达的变化规律。方法将A549细胞分为高氧组和常氧组。高氧组细胞置于含950 mL·L-1氧气和50 mL·L-1二氧化碳的条件下培养,常氧组以空气替代氧气,于0 h、12 h、24 h、48 h、72 h、96 h在倒置相差显微镜下观察细胞生长状况,提取细胞内总蛋白,采用硫代巴比妥酸比色法检测其丙二醛(MDA)水平,Western blot检测其SP-A表达水平。结果高氧48 h可导致A549细胞生长明显减慢,72 h后细胞生长停滞,可见较多漂浮死亡细胞,96 h后漂浮死亡细胞明显增多。高氧组各时间点A549细胞SP-A表达水平均高于常氧组,高氧24 h SP-A表达增多最显著,此后增多的幅度逐渐减小,高氧48 h后细胞内MDA水平显著高于常氧组,随时间延长,MDA水平进一步升高。结论高氧可导致A549细胞损伤,SP-A表达在细胞高氧损伤早期代偿性增加,晚期降低,推测SP-A表达降低可能与细胞损伤加重有关,增加SP-A的表达可能有助于减轻高氧引起的细胞损伤。     

TXNIP/NLRP3通过调控Wnt/β-catenin通路促进大鼠先天性肛门直肠畸形的发生

目的研究胎鼠肛门直肠发育过程中硫氧还蛋白相互作用蛋白(thioredoxin-interacting protein, TXNIP)/NOD样受体家族含pyrin结构域3 (NOD-like receptor protein 3, NLRP3)轴在泄殖腔发育中的作用。方法 50只Wistar孕鼠被随机分为先天性肛门直肠畸形(anorectal malformation, ARM)组和正常组, 每组各25只, 孕10 d分别按125 mg/kg给予乙烯硫脲(ethylene thiourea, ETU)及等量生理盐水灌胃, 孕14 d、孕15 d和孕16 d剖宫取胎, 显微镜下收集胎鼠的后肠组织。通过蛋白印迹法和免疫组织化学检测NLRP3炎性小体和TXNIP蛋白的表达量。进一步在IEC-6中转染si-NC/TXNIP, 通过实时定量PCR和蛋白印迹法检测TXNIP在mRNA和蛋白水平的敲减效率, 用蛋白印迹法、细胞免疫荧光试验和酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测si-NC组和si-TXNIP组NLRP3炎性小体、β-c...     

自由基与小儿呼吸系统疾病（综述）

自由基是指最外层轨道上含有未配对电子的原子,原子团或呈特殊状态的分子,包括超氧阴离子(O_(?)~-)、过氧化氢(H_2O_2)、氢氧自由基(·OH)及单线态氧(′O_2)。其化学活性高,氧化能力强,极不稳定。迄今已有许多研究表明,不少疾病的发生或其