炙甘草汤含药血清对兔心肌细胞瞬间外向钾电流的影响

目的 用血清药理学的方法研究炙甘草汤含药血清对兔心肌细胞瞬间外向钾电流（ho）的影响。方法 进行单个心室肌细胞的分离和膜片钳全细胞记录,将心室肌细胞分为对照组、空白血清组及5％、10%、20％、40%含药血清组,分别以普通细胞外液及加入上述不同浓度血清的细胞外液进行灌流,检测不同浓度含药血清对I10的影响。结果 含药血清可抑制I10,5％、10%、20%、40%含药血清分别将I10峰值（PA／PF）从（16．1±1．4）降至（13．9±1．5）、（11．8±1．9）、（8．3±1．5）、（8．2±1．2）,洗脱后其作用可消除。结论 炙甘草汤含药血清可抑制l。,且呈浓度依赖性作用增强,可能是炙甘草汤抗心律失常作用的机理。     

炙甘草汤含药血清对兔心肌细胞动作电位的影响

目的:用血清药理学的方法研究炙甘草汤含药血清对兔心肌细胞动作电位的影响。方法:进行单个心室肌细胞的分离和膜片钳全细胞记录,实验分为对照组、空白血清组及5%、10%、20%、40%含药血清组,分别以普通细胞外液及加入上述浓度血清的细胞外液进行灌流,检测各组对动作电位的影响。结果:空白血清组对动作电位各参数均无明显影响(P>0.05);含药血清各组对APA均无明显影响,但可延长APD,5%、10%、20%、40%含药血清分别将APD50从198.8±35.9ms延长至352.7±39.2ms、430.1±28.8ms、521.2±35.3ms、539.3±26.8ms,将APD90从340.1±32.9ms延长至447.1±26.8ms、526.0±39.4ms、595.7±53.3ms、624.3±54.0ms。结论:炙甘草汤含药血清可延长APD,且呈浓度依赖性作用增强,这可能就是炙甘草汤抗心律失常作用的机理之一。     

炙甘草汤含药血清对正常家兔离体主动脉环作用的研究

目的:观察炙甘草汤合药血清对正常家兔离体主动脉平滑肌环运动的影响,并初步探讨其作用机制.方法:运用Powerlab生物信号系统记录家兔离体主动脉环标本的活动,观察不同浓度组炙甘草汤含药血清对主动脉平滑肌收缩力的影响.结果:炙甘草汤含药血清对正常家兔离体主动脉平滑肌环有明显地兴奋作用,可增强其收缩力,且收缩强度与含药血清的浓度有相关性.炙甘草含药血清的这一作用可被异搏定(L型电压依从性Ca2+抖通道阻断剂)和酚妥拉明(非选择性α受体阻滞剂)阻断(异搏定组P<0.05;酚妥拉明组P<0.01).结论:炙甘草汤含药血清在体外可增强正常家兔主动脉平滑肌的收缩,该作用可能是通过L型钙通道和α受体发挥作用.     

炙甘草汤含药血清对正常家兔离体子宫平滑肌作用的研究

目的:观察炙甘草汤含药血清对正常家兔离体子宫平滑肌环运动的影响,并初步探讨其作用机制。方法:运用Powerlab生物信号系统记录家兔离体子宫平滑肌标本的活动,观察不同浓度组炙甘草汤含药血清对子宫平滑肌收缩力的影响。结果:炙甘草汤含药血清可以不同程度降低子宫平滑肌收缩力,减少子宫收缩时间,从而降低子宫活动力(高、中浓度血清组与空白血清组比较P<0.01)。通过阻断钙通道、M、α和β受体,进一步降低小肠平滑肌标本的活动力(P<0.01)。结论:炙甘草汤含药血清可以明显降低子宫平滑肌收缩力,缩短收缩时间,抑制子宫平滑肌的活动力。该抑制作用并非通过钙通道、M、α或β受体单一途径起作用,应当是多个途径的结果。     

细辛含药血清对大鼠心肌细胞钠通道的影响

目的研究中药细辛舍药血清对大鼠心肌细胞钠通道的影响,在离子通道水平揭示细辛抗缓慢型心律失常作用的可能机制。方法用原代培养的方法获得单个心肌细胞,用全细胞膜片钳技术记录心肌细胞钠通道电流加入含药血清前后的变化。结果25％细辛舍药血清对钠通道的激活曲线、1-V曲线均有影响。结论细辛含药血清对心肌细胞钠通道电流有增强作用。     

炙甘草汤含药血清对大鼠离体心脏场电位影响的研究

目的：研究炙甘草汤含药血清对大鼠离体心室肌场电位的影响。方法：随机将50只SD大鼠分为空白、炙甘草汤不同浓度含药血清（5%、10%、20%）组与胺碘酮组。应用MEA技术监测fAPD及心率的变化。结果：与空白组对照,胺碘酮组fAPD显著延长,心率减慢;10%与20%浓度炙甘草汤含药血清组大鼠心室肌fAPD均延长,心率均减慢,二者比较则fAPD与心率均无统计学差异（P〉0.05）;二者分别与对照组比较,则P〈0.05;5%浓度炙甘草汤含药血清组对心室肌fAPD及心率无明显影响。10%、20%浓度的炙甘草汤含药血清组与胺碘酮组心室肌fAPD相比较,P〈0.05,但心率无统计学差异。结论：10%与20%浓度的炙甘草汤含药血清均能延长心室肌fAPD,心率均减慢,具有抗室性心律失常效应。     

交泰丸及其组分含药血清对豚鼠心室肌细胞钠通道的影响

目的探讨交泰丸及不同组分含药血清对单个豚鼠心室肌细胞Na~+通道的影响。方法制备含药血清,急性分离豚鼠心室肌细胞,细胞复钙后随机分为空白组、黄连组(黄连100 g煎液)、肉桂组(肉桂10 g煎液)、黄连加肉桂组(黄连100 g单煎液+等体积肉桂10 g单煎液)和交泰丸组(黄连100 g+肉桂10 g合煎),各组分别加入各含药血清,实验分为10%和15%两个浓度组,加药完成后细胞放于37℃,5%CO_2的孵育箱中孵育24 h后进行膜片钳实验,记录Na~+通道电流及其激活和失活曲线。结果与空白组比较,15%浓度黄连组、肉桂组、黄连加肉桂组、交泰丸组均不同程度抑制Na~+电流(P0.05),其中黄连加肉桂组差异最显著;10%浓度药物组差异无统计学意义(P0.05)。与空白组比较,15%浓度交泰丸组Na~+通道激活和失活时间常数延长(P0.05)。结论交泰丸及各组分含药血清对钠离子电流有不同程度的抑制作用,与Ⅰ类抗心律失常药物的作用机制相同,这可能是交泰丸抗心律失常的电生理机制。     

龙芽楤木皂苷对培养心肌细胞钠通道电流的影响

目的:在新生鼠心肌细胞培养液中加入龙芽楤木皂苷(Aralosides As)后,对细胞膜上钠离子流产生的效应进行观察。方法:采用全细胞膜片钳技术,观察不同浓度的As(1μg/ml,10μg/ml,100μg/ml)对培养大鼠心室肌细胞钠电流(INa)幅值的影响。结果:1)As使培养心室肌细胞的INa电流-电压(I-V)曲线明显下移,原有的(I-V)依赖特征不变。2)As在10μg/ml,100μg/ml浓度时,均明显剂量依赖性增加INa的峰值,分别使峰值增加29%和41%。结论:As增加培养心肌细胞INa幅值,可能是实现其正性肌力的作用机制之一。     

六味地黄汤含药血清对海马神经元突触活动的影响

目的：研究六味地黄汤益智作用的机理。方法：应用血清药理学和电生理方法，观察六味地黄汤含药血清对原代培养大鼠海马神经元自发突触活动的影响。结果：含药血清作用48h可明显增加海马神经元自发动作电流(spontaneous action cur-rent,sAC)和微小兴奋性突触后电流(miniature excitatory post aynaptic currenl,mEPSC)的产生频率，但并不影响mEPSC的幅度。结论：六味地黄汤可作用于突触前位点对海马神经元突触活动产生调节作用，该作用可能是其调节海马神经元的兴奋性进而发挥益智作用的机制之一。     

细辛配伍附子含药血清对大鼠心肌细胞钠通道的影响△

目的：研究有毒中药细辛配伍附子含药血清对大鼠心肌细胞钠通道的影响,在离子通道水平探讨“相须相使”的增效减毒理论。方法：用原代培养的方法获得单个心肌细胞,用全细胞膜片钳技术记录心肌细胞钠通道电流加入含药血清前后的变化。结果：25％细辛配伍附子含药血清对钠通道的激活曲线、恢复曲线、I—V曲线均有影响。结论：细辛配伍附子含药血清较单用细辛对心肌细胞钠通道电流作用增强。     

苦参碱对豚鼠心室肌细胞钠离子通道电流的影响

目的: 观察苦参碱对豚鼠心室肌细胞钠离子通道电流(I_Na)的影响,探讨其抗心律失常的作用机制。方法: 豚鼠随机分为正常对照组、乌头碱组和苦参碱组。每组8只。乌头碱组以50 μmol·L^-1乌头碱灌流10 min, 苦参碱组在乌头碱组基础上,以10,50,100 μmol·L^-1苦参碱灌流20 min。采用膜片钳全细胞记录技术记录豚鼠单个心肌细胞钠电流并绘制电流密度电流强度(PA)/细胞膜电容(pF)曲线。结果: 50 μmol·L^-1乌头碱显著增大I_Na(-92.62±6.5) pA/pF[和对照组比较(-66.24±4.8) pA/pF,P＜0.05]。在乌头碱灌流基础上,10 μmol·L^-1苦参碱对I_Na没有明显作用,50 μmol·L^-1可使I_Na减小至(-49.21±5.1) pA/pF(和乌头碱组比较P<0.05), 100 μmol·L^-1又使I_Na稍微增大(和对照组比较P>0.05)。结论: 苦参碱抑制I_Na电流,呈浓度依赖性,浓度较高时抑制I_Na电流作用减弱,表现为双向调节的药理作用,可能是苦参碱抗心律失常作用温和持久的机制之一。     

血府逐瘀汤对冠心病血瘀模型家兔心功能、心肌及血管的影响

目的:观察血府逐瘀汤对冠心病血瘀模型家兔心功能、心肌及血管的影响。方法:36只健康家兔随机分为正常组、假手术组、模型组、血府逐瘀汤低、中、高剂量组,每组6只。模型组采用左冠状动脉放置缩窄环方法,制备冠心病血瘀模型;假手术组开胸但不放置缩窄环;在模型组基础上,术后第4周起,血府逐瘀汤低、中、高剂量组分别按10,20,40 g·kg-1ig,同时,正常组、假手术组、模型组ig等体积生理盐水,全部各组均是1次/d,连续5周。检测心功能、心肌肥厚指数、血管活性因子水平,观察心肌形态学、冠脉血管壁形态学变化。结果:与正常组比较,模型组心功能下降、心肌肥厚指数升高、血管活性因子血管紧张素II(Ang II)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、活性氧(ROS)水平均升高而一氧化氮(NO)水平降低,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01);模型组心肌形态学、冠脉血管壁形态学观察结果显示有病理性改变。与模型组比较,血府逐瘀汤低、中、高剂量组均可以不同程度改善心功能,抑制心肌病理改变,恢复血管活性因子水平和血管形态,差异均具有统计学意义(P0.05,P0.01)。结论:血府逐瘀汤可能通过减轻冠脉血管氧化损伤,改善心肌供血和病变从而恢复心功能。     

炙甘草汤对心律失常气阴两虚证患者心率变异性及炎症因子的影响

目的:观察炙甘草汤对心律失常气阴两虚证患者心率变异性及炎症因子的影响,并探讨其作用机制。方法:将诊断明确的心律失常患者90例,随机分为治疗组(47例)和对照组(43例),对照组给予西医常规治疗加用胺碘酮片,治疗组在对照组基础上辨证服用炙甘草汤加减。两组均治疗8周,比较两组治疗前后心律失常疗效、中医证候积分及疗效、心率变异率(HRV),白细胞介素-6(IL-6),超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平。结果:治疗后,治疗组的心律失常疗效指标优于对照组(P0.05);两组治疗后中医症状疗效比较,治疗组总有效率高于对照组(P0.05);同治疗前比较,两组治疗后均能改善中医证候积分,治疗组积分改善程度优于对照组(P0.01);治疗后两组HRV指标均升高(P0.05,P0.01),IL-6,hs-CRP水平均下降(P0.05,P0.01),治疗组HRV,IL-6,hs-CRP改善程度优于对照组(P0.01)。结论:炙甘草汤能提高心律失常临床疗效,调节心律失常患者心率变异性指标,抑制炎症细胞因子,改善患者临床症状,对心律失常患者心脏自主神经病变及炎症损伤具有修复作用。     

养心汤对不稳定型心绞痛家兔血浆前列腺素及主动脉、心肌超微结构的影响

目的:通过观察养心汤对不稳定型心绞痛家兔血浆前列腺素含量的影响及其主动脉、心肌组织超微结构的改变,探讨其治疗不稳定型心绞痛的确切作用机制。方法:将24只雄性家兔随机分为3组,即正常对照组、模型对照组、治疗组,在高脂饮食形成动脉粥样硬化斑块的基础上,采取颈总动脉球囊扩张引起动脉粥样斑块不稳定的方式复制成类似于人类不稳定型心绞痛病理变化的家兔心肌缺血模型。测定治疗前后家兔血浆前列腺素含量的变化并电镜观察其超微结构。结果:养心汤可以明显升高模型家兔血浆6-Keto-PGF1α的含量。改善主动脉及心肌超微结构的异常改变。结论:养心汤可提高血浆6-Keto-PGF1α的含量,改善心肌、主动脉病理学异常改变,这可能是其治疗不稳定型心绞痛的作用机制之一。     

四君子汤含药血清抑癌作用的实验研究

目的:观察四君子汤含药血清体外抑制肿瘤细胞增殖的作用.方法:以人胃癌细胞系SGC-7901和人肝癌细胞系SMMC-7721为病理模型,采用血清生物化学方法,酶标仪MTT比色法和倒置显微镜观察四君子汤不同剂量、不同浓度含药血清对人胃癌细胞系SGC-7901、肝癌细胞系SMMC-7721的增殖抑制状况,并计算各组细胞生长抑制率.结果:加药组细胞变小、变圆、脱落、悬浮情况较对照组明显,且以20%高剂量血清组最为明显.四君子汤含药血清对这两种细胞增殖均有明显的抑制作用,呈剂量、浓度依赖性.结论:四君子汤含药血清能明显抑制胃癌和肝癌细胞生长.     

欣舒药物血清对原代培养平滑肌细胞增殖的影响

目的 观察中药欣舒注射液药物血清对原代培养平滑肌细胞增殖的影响,探讨其防治pCI术后再狭窄的机制.方法 含药血清的制备,平滑肌细胞培养,平滑肌细胞鉴定.观察药物血清对平滑肌细胞作用24 h的影响:MTT比色法测定平滑肌细胞存活率,筛选合适药物血清浓度;流式细胞仪检测平滑肌细胞生长周期.结果 中药组和西药组G0/G1期细胞数目的百分比高于正常组;中药组S期、G2/M期细胞数目的百分比低于正常组;西药组G2/M期细胞数目的百分比低于正常组.中药组G2/M期细胞数目的百分比高于西药组.结论 欣舒注射液具有防治PCI术后再狭窄的作用,这可能与其具有抑制平滑肌细胞增殖的作用有关.     

稳心颗粒对兔心室肌晚钠电流影响的研究

目的:应用微电极阵列(MEA)技术研究稳心颗粒对兔心室肌晚钠电流(INaL)的影响。方法:新西兰大白兔50只,随机分成5组,对照组(n=10),心衰组(n=10),心衰+稳心颗粒A组(1 g/L,n=10),心衰+稳心颗粒B组(2 g/L,n=10),心衰+稳心颗粒C组(4 g/L,n=10)。迅速开胸取出心脏进行langendroff灌流,用柔性电极贴附左心室,记录场电位时限(fAPD)等电生理信号的变化。结果:与对照组相比,心衰组兔心室肌fAPD由(347.13±12.41)ms延长至(392.52±13.50)ms,激动传导速度(ECV)由(0.68±0.06)m/s减慢至(0.55±0.08)m/s,心率(HR)由(104±7.23)bpm加快至(126±9.52)bpm(均P0.05)。与心衰组相比,心衰+稳心颗粒A、B、C组fAPD分别由(392.52±13.50)ms缩短至(369.83±10.72)ms、(348.13±12.56)ms、(331.26±9.37)ms;ECV分别由(0.55±0.08)m/s减慢至(0.45±0.10)m/s、(0.43±0.08)m/s、(0.42±0.07)m/s;HR分别由(126±9.52)bpm减慢至(105±8.42)bpm、(97±6.70)bpm、(94±8.62)bpm(均P0.05)。但稳心颗粒A、B、C组之间ECV和HR变化无明显差异(P0.05)。结论:稳心颗粒是一种安全有效的抗心律失常中药,对INaL的抑制作用是其发挥抗心律失常作用的主要机制之一。     

六味地黄丸含药血清对树突状细胞增殖的影响

目的：研究六味地黄丸含药血清对SD大鼠骨髓源性树突状细胞（bone marrow-derived dendritic cells,BMDC）增殖的影响。方法：制备六味地黄丸含药血清,观察含药血清作用下的细胞生长情况,进行细胞计数及细胞活力测定;用四甲基偶氮唑盐（MTT）法,检测不同浓度、不同时间六味地黄丸含药血清作用下的细胞增殖变化,寻找最佳六味地黄丸浓度和作用时间;ELISA法检测细胞上清中树突状细胞分泌细胞因子IL-12的浓度;混合淋巴细胞反应（MLR）检测其刺激T淋巴细胞活化和增殖能力。结果：与空白对照组比较,成熟型DC含药血清组显著促进DC细胞增殖,且这种增殖在含药浓度15%,作用时间48 h时最为显著。其IL-12分泌量显著提高（P<0.05）。六味地黄丸含药血清培养的成熟型DC对异基因T淋巴细胞具有增殖刺激作用,且随着细胞数量的增加作用增强（P<0.05）,呈量效关系。结论：六味地黄丸含药血清具有诱导大鼠骨髓源性树突状细胞增殖的作用。     

尖叶假龙胆含药血清对心肌细胞离子通道的影响

目的:基于膜片钳技术探讨尖叶假龙胆含药血清对心肌细胞I Ca-L离子通道的影响。方法:通过对各组I Ca-L电流密度的峰值的变化、不同去极化水平电流密度的改变,I-V曲线、激活曲线以及失活曲线的变化等证明心肌缺血再灌注损伤发生后心肌细胞离子通道发生变化,尖叶假龙胆含药血清干预后能够改变离子通道的变化。制备尖叶假龙胆含药血清。选取大鼠H9c2心肌细胞株,建立缺氧复氧心肌细胞损伤模型,实验分为空白组、模型组、尖叶假龙胆含药血清高、中、低剂量组,应用膜片钳技术观察尖叶假龙胆含药血清对心肌细胞I Ca-L离子通道的影响。结果:与模型组比较,尖叶假龙胆含药血清各剂量组能够升高损伤后不同去极化水平电流密度(P<0.05),下移I-V曲线,降低激活与失活半电压值,使激活曲线发生左移,失活曲线发生右移。结论:尖叶假龙胆可能通过影响L型钙离子通道稳定心肌细胞的电生理活动,对心肌缺血再灌注损伤心肌产生保护作用。