过敏小鼠模型Th1/Th2漂移和纠正

目的：研究炒紫苏子醇提物对过敏小鼠模型Th1／Th2漂移和纠正作用。方法：设正常对照组、过敏模型组、炒紫苏子醇提取物0．32、0．64和1．28g／kg各剂量组小鼠共5组。利用流式细胞仪技术测定Th1型细胞因子IL-2、IFN-γTNF-α和Th2型细胞因子IL4、IL-5水平。结果：过敏模型小鼠IFN-γ／IL4为0．87，而正常小鼠IFN-γ／IL4为3．93，说明过敏小鼠Th1／Th2异常偏向Th2漂移。0．32、0．64和1．28g／kg各剂量组能明显提高IFN-γ水平（P〉0．05、P〈0．05和P〈0．01），降低IL-4水平（P〉0．05、P〉0．05和P〈0．05），其相应的IFN-γ／IL-4分别为1．92、2．85和3．14。结论：炒紫苏子醇提物能够纠正过敏小鼠Th1／Th2异常偏向Th2漂移，恢复正常，其作用呈剂量依赖关系。     

束缚应激对S180荷瘤小鼠Th1/Th2型细胞因子及肿瘤生长的影响

目的:观察束缚应激对荷S180瘤小鼠Th1/Th2型细胞因子及肿瘤生长的影响。方法:取腹腔传代第7天的肿瘤细胞S180,调细 胞密度至1×1010/L,注射于昆明小鼠右腋皮下,每只0.2 mL。接种后束缚限制活动,8 h/d,并设单纯束缚组、单纯肿瘤组和正常对照组。10 d后处死小鼠,剥取肿瘤称瘤重,计算胸腺指数,分别采用MTT比色法和丝裂原激活淋巴母细胞法检测脾T细胞增殖及产生Th1型细胞因子IL-2、IFN-γ的能力,并取血清用ELISA法检测Th2型细胞因子IL-4、IL-10的含量。结果:束缚应激可明显增加荷瘤小鼠的瘤重(P<0.01),降低小鼠胸腺指数和脾T细胞的增殖能力(P值分别<0.01),降低荷瘤小鼠脾细胞产生IL-2和IFN-γ的能力(P值分别<0.01),并可使小鼠血清IL-4、IL-10的含量明显增加(P值分别<0.01和<0.05)。结论:束缚应激可显著抑制荷瘤小鼠的细胞免疫功能,使产生Th1型细胞因子的功能减弱,Th2型细胞因子的含量增加,导致Th1/Th2细胞的平衡进一步向Th2细胞漂移。这可能是其促进肿瘤生长的重要机制。     

P13K信号途径在哮喘患者外周血单个核细胞中的表达及意义

目的：初步了解磷脂酰肌醇3激酶（P13K）在急性发作期哮喘患者外周血单个核细胞（PBMC）中的活化情况，并观察其特异性抑制剂（Wortmannin）对Th1、Th2型细胞因子IFN-γ和IL-4表达的影响，探讨PI3K信号途径在哮喘T细胞免疫紊乱中可能的作用机制。方法：以20例急性发作期哮喘患者作为实验组，15例健康人为对照组。PBMC提取采用Ficoll密度梯度离心法，半定量RT-PCR法测定PBMC中PI3KmRNA的表达，ELISA法测定不同浓度组Wortmannin处理的PBMC培养上清液中IFN-γ、IL-4水平。结果：与对照组相比，急性发作期哮喘患者PI3KmRNA表达增高（P〈0．05）。哮喘患者PBMC培养上清液IFN-γ水平低下、IL-4水平升高，与对照组比较差异均有统计学意义（P〈0．05和P〈0．01）；同时加入不同浓度Wortmannin共培养后，实验发现均浓度依赖性地抑制了哮喘组及对照组IL-4的产生（P〈0．05或P〈0．01），而同组不同浓度梯度组间比较IFN-γ产生升高，但差异无统计学意义。结论：哮喘患者急性发作时可能存在PI3K信号途径的过度活化，其过度活化对Th1型细胞因子IFN-γ影响不明显，有可能主要通过介导Th2型细胞因子IL-4的产生而参与Th1／Th2的失衡。     

新生儿巨细胞病毒肺炎Th1/Th2细胞因子测定及意义

目的探讨新生儿巨细胞病毒肺炎血清细胞因子IL4、IFN-7、TNF—α水平及意义。方法选取25例确诊为新生儿巨细胞病毒肺炎．并将其分为丙种球蛋白治疗组和更昔洛韦治疗组，应用ELISA法检测治疗前和疗程结束后血清细胞因子IL-4、IFN-γ、TNF-α的浓度，另选取本院产科同期出生的足月正常新生儿15例为正常对照组，用相同的方法检测其血清中细胞因子IL-4、IFN-γ、TNF-α的浓度。结果相对于健康新生儿．CMV—IgM阳性患儿血清IFN-γ及TNF—α水平升高．差异有统计学意义（t值分别为2．65及3．16．P〈0．05）；而IL-4水平降低，差异有统计学意义（t=2．49．P〈0．05）。丙种球蛋白治疗组（IVIG）和更昔洛韦治疗组治疗前IFN-γ、IL-4、TNF—α水平比较，差异无显著性（t值分别为1．85、1．71及1．76．P〈0．05）；IVIG治疗组中．治疗前后比较．IFN-γ及TNF—α水平降低，差异有统计学意义（t值分别为3．98及5．16，P〈0．01）；而IL-4水平升高，差异有统计学意义（t=2．55，P〈0．05）。更昔洛韦治疗组中．治疗前后比较，IFN-γ及TNF—α水平变化不明显．差异无统计学意义（t值分别为1．75及1．16．P〉0．05）；而IL-4水平无明显降低．差异无统计学意义（t=1．89，P〉0．05）。结论巨细胞病毒肺炎新生儿Th1／Th2存在平衡失调，代表Thl细胞功能水平的细胞因子IFN-γ水平明显增高，呈现低水平的Th1相对优势，表明感染后．免疫平衡遭到破坏．细胞因子分泌失衡，造成机体的免疫炎症损伤，IVIG治疗可以纠正这-平衡失调，提示在新生儿巨细胞病毒肺炎除单-抗病原治疗外，应重视免疫调节治疗。     

sGVHD小鼠结肠IEL细胞CD137 和Th1细胞因子的表达

目的研究协同刺激分子CD137和Th1类细胞因子在小鼠同基因型移植物抗宿主疾病（sGVHD）中的作用。方法受体鼠用同基因型骨髓移植后,用环孢菌素A（CsA）诱导3周建立小鼠sGVHD模型;从小鼠结肠中分离上皮内淋巴细胞;用流式细胞术测定细胞亚群,RT-PCR方法检测CD137和Th1类细胞因子的表达,^3H掺入法测定T细胞增殖的抑制。结果sGVHD时,小鼠病变器官结肠上皮内淋巴细胞（IEL）中CD137及Th1类细胞因子（IL-12,IFN—γ,TNF-α）表达较正常,而移植对照组明显增高（P〈0．01）;IFN-γ的增高始于环胞霉素A诱导治疗后3周,而CDl37和IL-12、TNF-α表达增高仅在出现GVHD样症状时,Th2类细胞因子（IL-4、IL-10）在GVHD的诱导和发生中均无明显改变。     

吡格列酮对哮喘模型TH1/TH2细胞因子表达的影响

目的 初步探讨过氧化物酶增殖活化受体-γ（PPAR-γ）激动剂吡格列酮对哮喘模型TH1/TH2细胞因子表达的影响及其机制。方法 18只BALB／c小鼠随机分为正常对照组、哮喘组和药物组，每组各6只。采用Western blot方法检测各组小鼠肺组织T-bet和GATA3的表达，同时运用流式细胞仪检测小鼠脾细胞胞内细胞因子白细胞介素4（IL-4）和干扰素-γ（IFN-γ）的表达。结果 哮喘组肺组织T-bet的表达与正常对照相比显著升高（P〈0．01），GATA3无显著变化（P〉0．05）；经吡格列酮治疗的小鼠肺组织T-bet的表达与哮喘鼠比显著增高（P〈0．01），而GATA3无显著变化（P〈0．05）。哮喘鼠T细胞内IL-4／WN-γ比值与正常组相比明显升高（P〈0．01）；经吡格列酮治疗后细胞内IL-4，IFN-γ比值明显降低（P〈0．01）。结论 PPAR-γ激动剂吡格列酮可能通过参与调控TH1细胞转化过程中重要转录因子T-bet的表达，改变IL-4／IFN-γ比值，从而改善相应的炎性症状，PPAR-γ可能成为哮喘治疗的新靶点。     

SARS-CoV S DNA疫苗诱导特异性T细胞及相关细胞因子的特性研究

目的 小鼠经皮下SARS-CoV S DNA疫苗免疫后，研究其特异性T细胞及相关细胞因子的特性。方法SARS-CoV S DNA疫苗免疫BALB／c小鼠后，获取淋巴细胞悬液。经S抗原多肽刺激后，采用ELISA检测细胞培养上清液中IFN-γ／的水平，利用流式细胞仪在单个细胞水平上检测IFN-γ和IL-2的表达及其关系。结果 当S混合多肽刺激后，DNA疫苗免疫小鼠的淋巴细胞产生大量的IFN-γ，与对照鼠相比差异有统计学意义（P〈0．01）。细胞亚群分析的结果表明，IFN-γ^＋和IL-2^＋的CD4^＋T细胞百分率明显高于CD8^＋T细胞。单独产生IL-2的细胞占大多数，其次为IFN-γ和IL-2双阳性细胞，只产生IFN-γ的细胞很少。结论 SARS-CoV S DNA疫苗免疫小鼠后可以诱导抗原特异性CD4^＋和CD8^＋T细胞的产生。     

接种纯化人用狂犬病疫苗对妊娠期Th1/Th2类细胞因子谱的影响

目的研究人用狂犬病纯化疫苗（RV）对妊娠期Th1/Th2类细胞因子谱的影响。方法对所有可疑狂犬病毒暴露者进行RV的全程接种,在接种RV的第0、14、45天时采血并分离外周血单个核细胞与RV进行培养,采用ELISA法检测抗狂犬病病毒抗体,体外培养检测淋巴细胞增殖能力,CBA法检测细胞培养上清液中Th1类细胞因子：干扰素-γ（IFN-γ）、肿瘤坏死因子（TNF）、白细胞介素-2（IL-2）以及Th2类细胞因子：IL-4、IL-5、IL-10的水平。结果 17例暴露者于RV全程注射后17d（第45天）抗体检测阳性;RV刺激后,暴露者第45天淋巴细胞增殖能力明显高于第0天（P〈0.05）;当RV刺激后,暴露组第14天、第45天产生IL-2、IL-4、IL-5的含量显著高于未刺激组及暴露组第0天水平（P〈0.05）。结论妊娠期注射RV在刺激机体产生体液免疫的同时,可以有效地诱导Th1/Th2类细胞因子的产生。     

巨噬细胞瘤苗免疫调节作用的研究

目的 观察巨噬细胞肿瘤疫苗对细胞毒性T细胞（CTL）反应及Th1／Th2型细胞因子分泌的调节作用。方法 分别采用MTT法和比色法检测肿瘤细胞杀伤率和清液上乳酸脱氢酶（LDH）含量,采用Western印记法与ELISA法检测脾细胞内及分泌入培养上清的IL-2、IL-4、IL-10及IFN-γ等细胞因子。结果 巨噬细胞肿瘤疫苗接种组的淋巴细胞肿瘤细胞杀伤率与培养上清液LDH水平分别为（36．70±21．02）％和（0．29±0．15）U／ml,明显高于热灭活肿瘤细胞接种组、石蜡诱导的巨噬细胞接种组（P值均〈0．05）。肿瘤细胞冻融物刺激72h后,各组免疫小鼠的脾细胞内均可检测到IL-2、IL-4、IL-10及IFN-γ等细胞因子;同时巨噬细胞肿瘤疫苗接种组脾细胞培养上清中,IL-2、IL-4、IL-10及IFN-γ含量分别为（7．97±3．15）pg／ml、（0．44±0．11）pg／ml、（1．83±0．85）pg／ml和（9．16±4．64）pg／ml,IL-2、IFN-γ的水平均高于热灭活肿瘤细胞接种组和石蜡诱导的巨噬细胞接种组（P值均〈0．05）。结论 巨噬细胞肿瘤疫苗可诱导机体产生特异性抗肿瘤反应,能够促进Th1型细胞因子IL-2、IFN-γ的分泌。     

CD40配基化的肿瘤特异性树突状细胞介导Th1细胞分化的研究

目的：探讨CD40配基化的肿瘤特异性DCs在介导Th1细胞分化中的作用。方法：采用GM-CSF和IL-4联合方案体外诱导小鼠髓系DCs，并利用mCD40L-CHO和TNF-α分别刺激凋亡肿瘤细胞负载的DCs制备DCs瘤莆；^3H-TdR掺入试验检测DCs对T淋巴细胞的促增殖效应；ELISA测定细胞培养上清中IL-10、IFN-1、IL-12的含量；胞内染色和流式细胞术检测经成熟DCs活化的T细胞中CD4^＋IFN-γ^＋T和CD4^＋IL-4^＋T的比例。结果：体外刺激T细胞增殖能力在CD40配基化DCs组最高（P〈0．05），CD40配基化DCs能更有效地促进活化T细胞分泌IFN-γ和介导CD4^＋IFN-γ^＋T细胞的分化（P〈0．05）。同时，CD40配基化DCs分泌IL-12的量也明显高于TNF-α组（P〈0．05）。结论：CD40配基化的肿瘤特异性DCs体外能有效介导Th1细胞的分化。     

三种类型肺癌患者外周血Th1/Th2相关细胞因子的临床分析

目的：了解不同病理类型肺癌患者辅助性T细胞亚群（Th1/Th2）的反应状态,探讨肺癌发生发展的免疫机制。方法：收集三种不同病理类型肺癌患者47例（鳞癌23例,腺癌15例,小细胞肺癌9例）、健康志愿者31例的血清,分成肺癌组、正常对照组,用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测各组外周血中Th1型细胞因子、白细胞介素2（IL-2）、γ-干扰素（IFN-γ）和Th2型细胞因子IL-4、IL-10的浓度。结果：三种不同病理类型肺癌患者外周血中IL-2、IFN-γ浓度均显著低于正常人组,IL-4、IL-10浓度显著高于正常人组（P〈0.05）。结论：腺癌、鳞癌、小细胞非分化癌三种不同病理类型的肺癌患者外周血中的免疫细胞均呈现Th2型免疫反应优势状态,呈现Th1/Th2的漂移状态。     

雷公藤单体T4对胰岛β细胞免疫保护作用的机制探讨

目的探讨雷公藤单体T4对胰岛β细胞的免疫保护作用,为胰岛β细胞的免疫保护治疗提供实验依据。方法培养胰岛β细胞株NIT细胞及正常对照外周血单个核细胞,分别与以下6组作用：①IL-1β＋IFN-γ组;②IL-1β＋IFN-γ＋DXM组;③IL-1β＋IFN-γ＋T4组;④T4组;⑤DXM组;⑥对照组（DMEM）。ELISA法检测培养上清IL-4、IFN-γ水平,硝酸还原酶法检测上清一氧化氮水平,化学发光法检测上清胰岛素水平。结果①IL-1β＋IFN-γ刺激的NIT-1细胞分泌IL-4水平较其他各组减少（P〈0.01）,IFN-γ分泌比其他各组增多（P〈0.01）,IL-4/IFN-γ比其他各组降低（P〈0.01）。②T4＋IL-1β＋IFN-γ刺激的NIT-1细胞与IL-1β＋IFN-γ刺激组相比,分泌IL-4水平增高（P〈0.01）,IFN-γ减少（P〈0.01）,IL-4/IFN-γ增高（P〈0.01）。③IL-1β＋IFN-γ刺激的NIT-1细胞分泌NO较其他各组增高（P〈0.01）,胰岛素分泌减少（vsIL-1β＋IFN-γ＋T4组、IL-1β＋IFN-γ＋DXM组,P〈0.05;vsT4组、DXM组、对照组,P〈0.01）。④T4＋IL-1β＋IFN-γ刺激的NIT-1细胞与IL-1β＋IFN-γ组相比,分泌NO水平减少（P〈0.01）,Ins增加（P〈0.05）;与IL-1β＋IFN-γ＋DXM组相比,NO分泌减少（P〈0.05）。结论 T4可减轻IL-1β＋IFN-γ对NIT细胞的损伤作用,保护NIT细胞的胰岛素分泌功能。     

Th1、Th2在慢乙肝重叠戊肝感染导致重症化中的作用

目的研究慢性乙型肝炎重叠戊肝感染的临床及免疫指标的变化特点与临床转归。方法选择慢性乙肝重叠戊型肝炎患者及同期单纯慢性乙肝患者各30例,分为重叠感染组和对照组,采用ELISA法检测戊型肝炎病毒以及乙肝病毒e系统状态,PCR法检测HBV—DNA,对慢性乙型肝炎重叠戊肝感染患者进行肝功能、免疫指标IL-4、TNF—α、IFN-γ、Th1／Th2的检测,并与单纯慢性乙型肝炎进行对照分析,观察两组在治疗8周时的肝功能恢复情况。结果重叠感染戊肝患者发生重症肝炎的人数多（9例vs6例,P〈0．05）,e抗原转阴比例高（2例vs1例）,ALT、TBIL恢复较差,免疫指标提示与对照组相比,重叠感染组IL-4水平降低（P〈0．05）、TNF-α、IFN-γ变化不大（P〉0．05）,Th1／Th2水平明显增高（P〈0．05）。结论慢性乙型肝炎重叠HEV感染后病情趋向重症化,可能是由于抗炎性细胞因子IL-4表达减少,细胞免疫增强导致肝细胞大量损害所致。     

Apigenin Attenuates Experimental Autoimmune Myocarditis by Modulating Th1/Th2 Cytokine Balance in Mice

This study aims to investigate the protective effect of apigenin on the development of experimental autoimmune myocarditis (EAM) and the underlying mechanisms. An EAM model was induced in BALB/c mice by the injection of porcine cardiac myosin. Apigenin was orally administered from day 1 to 21. The severity of myocarditis was assessed by determination of heart weight/body weight ratio (HW/BW) and histopathological evaluation. Echocardiography was conducted to evaluate the cardiac function and heart structure. Antigen-specific T cell proliferation responses to cardiac myosin were evaluated by the lymphocyte proliferation assay. ELISA was used to determine serum levels of type 1 helper (Th1) and Th2 cytokines. Apigenin treatment significantly decreased HW/BW. Histopathologic analysis showed that the infiltration of inflammatory cells was reduced significantly by apigenin treatment. Meanwhile, apigenin administration effectively ameliorated autoimmune myocarditis-induced cardiac hypertrophy and cardiac dysfunction as well as inhibited lymphocyte proliferation in mice immunized with myosin. Furthermore, Th1 cytokines tumor necrosis factor-alpha (TNF-α), interferon-gamma (IFN-γ), and interleukin-2 (IL-2) were significantly downregulated, while Th2 cytokines IL-4 and IL-10 were markedly upregulated. The results indicated that apigenin can alleviate EAM due to its immunomodulatory reactions in modification of helper T cell balance.     

TH1/TH2细胞因子与习惯性流产的关系研究

目的通过测定习惯性流产患者（RSA）及正常妊娠妇女外周血血清TH1/TH2细胞因子的含量,探讨TH1/TH2细胞因子与习惯性流产发生的关系。方法采用酶联免疫吸附法检测30例RSA患者,72例正常妊娠妇女血清IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ、TNF-α及TNF-β水平并比较两组之间的差异。结果RSA患者IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ、TNF-α血清水平显著高于正常妊娠妇女（P〈0.05）,TNF-β血清水平显著低于正常妊娠妇女（P〈0.05）。结论血清IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ、TNF-α水平可能在习惯性流产发生中起重要作用。     

旋毛虫对三硝基苯磺酸和噁唑酮诱导肠炎小鼠结肠中Th1/Th2类细胞因子表达的影响

目的 研究旋毛虫(T. spiralis)对三硝基苯磺酸(TNBS)和噁唑酮(OXZ)诱导的实验性肠炎小鼠结肠中Th1/Th2类细胞因子表达的影响.方法 雌性BALB/c小鼠,随机分为50%乙醇对照组、T. spiralis应用组、TNBS(OXZ)诱导肠炎模型组、预先感染T. spiralis后诱导TNBS(OXZ)模型组(每组小鼠取材时保证6只以上).对各组小鼠肠黏膜固有层单个核细胞(LPMC)进行分离培养,采用ELISA方法观察感染T.spiralis和未感染T.spiralis小鼠于TNBS或OXZ诱导肠炎后3 d和7 d结肠中Th1/Th2类细胞因子蛋白的表达变化,包括IFN-γ、IL-12、IL-4、IL-10的表达量分析.结果 预先感染T. spiralis后诱导TNBS模型组小鼠在造模后3 d及7 d肠黏膜LPMC产生IFN-γ的水平均低于模型组(P＜0.05),而IL-4、IL-10的表达高于模型组(P＜0.05).预先感染T. spiralis后诱导TNBS模型组小鼠在造模后3 d肠黏膜LPMC产生IL-12的水平低于模型组(P＜0.05),第7天与模型组相比未见明显差异(P＞0.05).预先感染T. spiralis后诱导OXZ模型组小鼠在造模后3 d及7 d肠黏膜LPMC产生IFN-γ、IL-4及IL-10的水平均高于单纯造模组(P＜0.05).结论 T. spiralis对TNBS诱导的肠炎模型小鼠肠道局部免疫作用机制可能是通过诱导Th2型免疫反应及Tr1型细胞因子而抑制结肠炎小鼠Th1型过度免疫应答而实现的.在T.spiralis对OXZ模型小鼠的干预性研究中,没有按理论所设想的感染T.spiralis所产生的Th2型免疫反应会对OXZ诱导的Th2型炎症反应起叠加作用而加重病情.这提示我们,需要进一步探讨T.spiralis对拥有Th2型免疫应答的OXZ模型的具体作用机制.     

支气管哮喘患儿治疗前后外周血Th1／Th2相关细胞因子的临床分析

目的：探讨支气管哮喘患儿治疗前后外周血Th1／Th2相关细胞因子水平的变化及临床意义。方法i应用放射免疫分析和酶联法对31例支气管哮喘患儿进行了外周血中Th1型细胞因子（IL-2、IFN-1）和Th2型细胞因子IL-4、IL-10浓度,并与35名正常人组作比较。结果i支气管哮喘患儿在治疗前血清IL-2、IFN-^y水平均非常显著地低于正常儿组（P〈0．01）,而血清IL4、IL-10水平又非常显著地高于正常儿组（P〈0．01）。经治疗1个月后则与正常儿组比较无显著性差异（P〉0．05）。结论：支气管哮喘患儿存在Th1／Th2细胞免疫失衡。Th1免疫功能低下。IFN-1下调可能是参与哮喘发病机制的重要原因,对哮喘有负向调节作用。哮喘患儿存在Th2细胞免疫功能亢进,以IL-4、IL-10为代表的Th2免疫功能在儿童哮喘的发病中发挥正性促炎作用。     

IL-10、IFN-γ在外阴阴道念珠菌病患者发病中的作用

目的检测白细胞介素-10（IL-10）、干扰素-γ（IFN-γ）在正常女性、外阴阴道念珠菌病及复发性外阴阴道念珠菌病阴道分泌物中的表达水平。探讨细胞因子IL-10和IFN-γ的表达水平与外阴阴道念珠菌病发病的关系。方法ELISA法检测初发组和复发组念珠菌性阴道炎的妇女阴道分泌物中IL-10、IFN-γ的表达水平，以健康体检妇女为对照组。结果初发和复发念珠菌性阴道炎的阴道分泌物中IL-10的表达水平均显著高于对照组，复发组较初发组的表达水平也有显著性差异（P〈0．05）；初发和复发念珠菌性阴道炎的阴道分泌物中IFN-γ的表达水平元显著性差异（P〉0．05），但均高于健康对照组（P〈0．05）。结论Th1型和Th2型细胞因子的表达异常可能与念珠菌性阴道炎发病和复发有关。