1, 25-二羟维生素D3对软脂酸诱导的胰岛素抵抗血管内皮细胞功能的影响

目的：探讨1, 25-二羟维生素D3[1, 25(OH)2D3]对软脂酸（PA）诱导的人脐静脉内皮细胞（HUVECs） 的胰岛素抵抗的影响及其可能作用机制。方法：用含0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9mmol/LPA 的DMEM培养基培养HUVECs,建立胰岛素抵抗内皮细胞模型。分别用0、0.01、0.1、1.0、10、100nmol/ L1, 25(OH)2D3干预,硝酸盐/亚硝酸盐荧光试剂盒测定NO含量,Westernblot法测定pAkt及peNOS蛋白的 表达,qPCR法测定VDR、ET-1的表达。结果：0.6mmol/L的PA培养HUVECs18h后,培养液中的葡萄糖浓度 耗减显著低于对照组,细胞活力降低,胰岛素抵抗的内皮细胞模型建立。PA干预后NO含量较对照组HUVECs 减少（ P ＜0.05）,1nmol/L1, 25(OH)2D3干预胰岛素抵抗的内皮细胞后NO含量增加,在1min时NO量达最 大值。1nmol/L浓度1, 25(OH)2D3干预胰岛素抵抗的内皮细胞后peNOS及pAkt的蛋白表达量明显增加（ P ＜ 0.05）,ET-1的mRNA表达水平明显减少（ P ＜0.05）。结论：1, 25(OH)2D3增加PA诱导的胰岛素抵抗血管内皮细 胞peNOS、pAkt的表达,增加NO产生,降低ET-1的表达,可能对胰岛素抵抗的血管内皮细胞存在一定的保护作用。     

人脐带间充质干细胞体外修复子痫前期重度患者血清损伤后血管内皮细胞内分泌功能的研究

 目的探讨人脐带间充质干细胞（UC-MSCs）在体外对子痫前期重度患者血清损伤后血管内皮细胞内分泌功能的影响。方法将人脐静脉内皮细胞株接种于6孔培养板,进行分组干预,分为无血清正常对照组（N组）、健康孕妇血清干预组（H组）和子痫前期重度患者血清干预组（P组）,每组均予UC-MSCs上清干预。采用ELISA法检测UC-MSCs干预前后细胞上清中ET-1和NO的含量。结果UC-MSCs干预前P组内皮细胞中ET-1含量最高,而NO最低;UC-MSCs干预后P组内皮细胞中ET-1含量下降,而NO升高;UC-MSCs干预前后P组ET-1和NO含量的差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论UC-MSCs在体外可修复子痫前期重度患者血清损害的内皮细胞的内分泌功能。     

PPAR-γ激动剂对AngⅡ刺激血管内皮细胞分泌血管活性因子的影响

目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)激动剂对AngⅡ刺激血管内皮细胞分泌血管活性因子的影响,并与AngⅡⅠ型受体(AT1R)拮抗剂losartan相对照,即从细胞水平进一步揭示PPARγ与高血压病的关系.方法 以脐静脉内皮细胞为研究对象,观察PPARγ激动troglitazone对内皮细胞分泌内皮素-1(ET-1)和NO的影响,及其对AngⅡ刺激内皮细胞分泌ET-1和NO的影响,并与losartan相对照.结果 10 μmol/L和50μmol/L troglitazone使人脐静脉内皮细胞分泌ET-1含量与对照组相比虽有下降但无统计学意义,而NO与对照组相比明显升高(P＜0.05);50μmol/L troglitazone可明显抑制AngⅡ(1×10-6 mol/L)刺激的ET的分泌(P＜0.05);两种浓度troglitazone均能抑制AngⅡ对内皮细胞生成NO的减低作用(P＜0.05);losartan抑制AngⅡ刺激内皮细胞合成和分泌ET-1增加和抑制AngⅡ减弱内皮细胞合成和分泌NO的作用比troglitazone更为明显(P＜0.05).结论 PPARγ激动剂troglitazone可抑制AngⅡ刺激内皮细胞合成和分泌ET-1的增加和NO的减少,但其作用并没有losartan明显,提示troglitazone通过影响血管活性因子的分泌而调节血压的作用并非完全是通过AT1R途径.     

炎症因子对人脐静脉内皮细胞表达血管内皮生长因子及妊娠相关血浆蛋白-A的影响

目的 探讨炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）对人脐静脉内皮细胞(HUVEC) 血管内皮生长因子（VEGF）、妊娠相关血浆蛋白-A（PAPP-A）表达的影响。方法 采用酶联免疫吸附法(ELISA法)测定正常对照组、IL-1β刺激组、TNF-α刺激组、IL-1β+VEGF受体拮抗剂（SU5416）组、TNF-α+VEGF受体拮抗剂（SU5416）组细胞上清液中VEGF、PAPP-A浓度。结果 ELISA结果显示培养的人脐静脉内皮细胞能低水平地表达VEGF、PAPP-A。IL-1β刺激组VEGF、PAPP-A的浓度均明显高于对照组[(VEGF( 279.09±6.341)pg/mlVS (41.124±0.918) pg/ml, P＜0.01;PAPP-A(8.842±0.426)ng/mlVS (6.049±0.729) ng/ml, P＜0.01)];TNF-α刺激组VEGF、PAPP-A的浓度均明显高于对照组[(VEGF(135.379±11.684) pg/mlVS (41.124±0.918) pg/ml, P＜0.01;PAPP-A (8.063±0.426) ng/mlVS (6.049±0.729) ng/ml, P＜0.01)];且IL-1β与TNF-α引起的增强效应不同,在炎症因子中加入SU5416,VEGF和PAPP-A的表达均显著减少,差异均有统计学意义（P＜0.01)。结论 静息状态下HUVEC表达极少量的VEGF、PAPP-A,炎性刺激可诱发VEGF、PAPP-A高表达,且VEGF与PAPP-A的表达有一定的相关性,VEGF的减少引起相应PAPP-A的减少,说明炎症和新生血管的形成在动脉粥样硬化形成过程中具有相互的作用。     

脱氢表雄酮对内皮细胞NO,ET-1生成及ICAM-1表达的影响

目的:观察脱氢表雄酮对内皮细胞NO合成、ET-1分泌及细胞表面ICAM-1表达的影响.方法:培养的人脐静脉内皮细胞系ECV304经不同浓度和不同作用时间DHEA处理后,采用硝酸还原酶及放免法分别测定培养液中NO及ET-1水平,用SABC免疫组化法观察细胞表面ICAM-1的表达.结果:与对照组相比,随着DHEA浓度的增加,培养液中NO的含量从(387±12)降至(242±11)μmol/L(P<0.05),而ET-1的浓度却从(397±13)增至(626±29)ng/L(P<0.05).随着时间的延长,各对照组培养液中NO含量均无明显变化(P>0.05),而DHEA组NO生成量却逐渐降低(P<0.05),呈时间依赖.培养液中ET-1浓度无论是对照组还是DHEA组均随时间的延长而升高(P<0.05),但DHEA组升高的更为明显.无论是增加浓度还是延长时间,DHEA均不影响细胞表面ICAM-1的表达.结论:DHEA可通过调节内皮细胞NO及ET-1生成量对血管功能进行调控.     

同型半胱氨酸与老年冠心病患者内皮功能的关系

目的探讨血清同型半胱胺酸(HCY)与老年冠心病患者内皮细胞损伤的关系.方法对76例行冠状动脉造影的患者检测血清中HCY、一氧化氮(NO)、内皮素～1(ET-1)、循环内皮细胞(CEC)含量,以冠状动脉造影正常者做对照,进行t检验、线性相关分析.结果冠心病组HCY、ET-1、CEC水平均明显高于对照组(P＜0.01),NO水平显著低于对照组(P＜0.01);从相关分析看,HCY与ET-1、CEC呈正相关,与NO/ET-1呈负相关(P＜0.05).结论HCY与内皮细胞分泌NO、ET-1平衡失调有关.     

尿酸对DOCA-Salt高血压大鼠内皮细胞的影响

目的探讨不同尿酸浓度对DOCA-salt高血压大鼠内皮细胞的影响。方法根据Theodora Szasz的方法制备DOCA-Salt高血压大鼠模型,4周后与对照组分别培养胸主动脉内皮细胞,然后用10、50、100μm尿酸和载体NaOH和内皮细胞孵育1/2h,比较ET-1、NO及NF-κBmRNA表达的差别。结果在100μm尿酸的作用下,DOCA-salt高血压大鼠组血压ET-1和NF-κBmRNA表达均明显高于对照组（P〈0.05）,而NO的表达明显低于对照组（P〈0.05）。结论 100μm尿酸促进了DOCA-salt高血压大鼠内皮细胞功能的失调,可能通过NF-κB影响了ET-1和NO的表达,从而促进并加重高血压及其血管的病变。     

内皮素-1、一氧化氮、诱导型一氧化氮合酶在新生儿缺氧性肺动脉高压中的研究

目的：探讨血清内皮素-1（ET—1）、一氧化氮（NO）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）在新生儿缺氧性肺动脉高压（HPH）的作用。方法：本研究对35例HPH新生儿、22例正常新生儿,分别于生后3天内、第7天采血,用ELISA法检测血清NO、iNOS、ET-1含量,并采用彩色多普勒超声心动图同步测定肺动脉收缩压（PASP）、检测血气分析。结果：1．HPH组与对照组PaO2、PaO2／FiO2、PASP值的比较：两组间三者的数值在发病3天内,差异有统计学意义（P〈0．05,P〈0．01）,第7天升高,与对照组相比差异无统计学意义（P〉0．05）。2．HPH组与对照组血清NO、iNOS、ET-1水平的比较：发病3天内HPH组血清iNOS、ET-1水平较对照组明显增高,NO水平较对照组明显减低,差异均有统计学意义（P〈0．05）。第7天,ET-1水平有所下降、但仍持续在较高水平,与对照组相比差异仍有统计学意义（P〈0．05）;iNOS水平较前明显降低,与对照组相比差异无统计学意义（P〉0．05）;而NO水平在第7天较前升高,与对照组相比较略低、差异无统计学意义（P〉0．05）。3．血清N0、iNOS、ET-1水平与PASP的关系：发病3天内,血清iNOS、ET-1水平与PASP呈正相关（P〈0．01,P〈0．05）,NO水平与PASP呈负相关（P〈0．01）;第7天,仅血清ET-1与PASP仍呈正相关（P〈0．05）,NO、iNOS水平与PASP均无相关性。结论：在新生儿HPH急性缺氧早期,ET-1合成增多,NO减少,使肺动脉平滑肌痉挛、收缩,促进了HPH的发生、发展,而随着肺血管内皮细胞功能的改善,在iNOS的持续刺激下,NO水平逐渐增高,调节HPH病情的恢复。血清NO、iNOS、ET-1可能参与了新生儿HPH的发生、发展。     

脂联素对TNF-α介导的血管炎症反应的影响

目的:探讨脂联素对肿瘤坏死因子(TNF-α)引起的血管内皮细胞炎症反应的影响.方法:体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC).随机分为对照组,TNF-α刺激组和脂联素 TNF-α刺激组.HUVEC与脂联素联合孵育一段时间后再给予TNF-α刺激与单纯TNF-α刺激做对照,分别采用化学法,放免法及ELISA法检测脂联素对血管内皮细胞NO,iNOS,ET-1及MCP-1蛋白表达的影响.结果:HUVEC经TNF-α刺激6～12 h后其NO,iNOS,ET-1及MCP-1蛋白的表达(607.7±7.6,42.2±2.2,199.3±11.9,167.7±15.9)与对照组(543.5±2.2,23.8±2.0,148.4±5.3,128.0±8.4)相比明显增强(P＜0.05);当HUVEC在TNF-α刺激之前首先与脂联素共同孵育一段时间后,则血管内皮细胞NO,iNOS,ET-1及MCP-1蛋白的表达(565.7±13.0,36.5±2.7,170.8±8.3,142.6±5.6)与单纯给予TNF-α刺激相比明显减弱(P＜0.05).结论:脂联素可以通过抑制血管内皮细胞某些炎症因子的表达水平来调节血管内皮细胞的炎症反应,从而发挥其抗炎,抗动脉粥样硬化的作用.     

参归益智方联合丁苯酞对阿尔茨海默病患者血管内皮功能影响的临床研究

目的观察参归益智方联合丁苯酞软胶囊对阿尔茨海默病（AD）患者血管内皮生长因子（VEGF）、一氧化氮（NO）、内皮素（ET-1）、肿瘤坏死因子（TNF-α）、白介素-1（IL-1）水平的影响，探讨其对AD患者的治疗作用和机制。方法100例AD患者随机分为对照组50例，给予丁苯酞软胶囊口服；研究组50例，给予参归益智方和丁苯酞软胶囊口服。治疗前、治疗3月、6月后，比较2组患者血浆VEGF、NO、ET-1、TNF-α、IL-1表达水平差异，及简易精神状态量表（MMSE）评分变化。结果治疗前，2组患者血浆VEGF、NO、ET-1、TNF-α、IL-1水平及MMSE量表评分比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。治疗3月、6月后与对照组比较，研究组血浆VEGF、NO表达水平明显升高（P＜0.05），血浆ET-1、TNF-α、IL-1表达水平明显下降（P＜0.05）；研究组MMSE量表评分明显升高（P＜0.05），MMSE评分改善率明显高于对照组（P＜0.05）。结论参归益智方联合丁苯酞能明显提高AD患者血管内皮功能，明显提高认知记忆能力。     

四种黄芪黄酮类化合物单体对血管内皮细胞功能的保护作用

目的 观察从甘肃陇西产黄芪中提取的黄酮类化合物芒柄花素、毛蕊异黄酮-7-o-β-D-吡喃葡萄糖(CG)、毛蕊异黄酮和2’-OH-3’,4’-二甲氧基异黄烷-7-o-β-D-吡喃葡萄糖(DG)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)致人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的保护作用.方法 将芒柄花素、CG、毛蕊异黄酮和DG分别与1 μm...     

Association of higher resistin levels with inflammatory activation and endothelial dysfunction in patients with essential hypertension

Background Some studies have shown that serum resistin levels increase in hypertensive patients.Whether the increase of resistin is related to inflammatory or vascular endothelial function is still unk...     

黄秋葵总黄酮对氧化应激损伤人脐静脉内皮细胞的保护作用及其机制研究

目的 观察黄秋葵总黄酮对过氧化氢诱导的人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）氧化应激损伤的影响。方法 采用MTT法检测黄秋葵总黄酮对HUVECs的保护作用,采用分光光度法测定细胞培养上清液中细胞内超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）及一氧化氮（nitric oxide,NO）含量,酶联免疫吸附试验检测细胞上清液中内皮素-1（endothelin-1,ET-1）含量,采用二氯荧光乙酰乙酸盐法检测活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平;Western blot方法检测内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase,eNOS）的表达水平。结果 黄秋葵总黄酮可以提高氧化应激损伤的HUVECs存活率,增加SOD活性,升高NO水平,降低MDA、ET-1水平,降低细胞ROS水平,升高eNOS的表达水平。结论 黄秋葵总黄酮对过氧化氢诱导的HUVECs氧化应激损伤有保护作用,其作用机制可能与调节SOD、MDA、ET-1、NO氧化应激相关因子,调控内皮细胞功能相关蛋白eNOS的表达有关。     

三七总皂苷对oxLDL诱导的人脐静脉内皮细胞CD40, VCAM-1表达的影响

目的    探讨三七总皂苷(TPNS)对氧化型低密度脂蛋白（oxLDL）诱导的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）白细胞分化抗原40（CD40）、血管细胞粘附分子-1（VCAM-1）表达的影响。方法    原代培养HUVECs。细胞分为空白组、刺激组、小剂量（100mg/L）TPNS组、大剂量（200mg/L）TPNS组及辛伐他汀组并予相应处理。采用MTT法测定HUVECs活性,实时定量RT-PCR检测VCAM 1的基因表达,Western blot 分析CD40蛋白表达量。结果    TPNS及辛伐他汀均可以升高HUVECs的活性（P＜0.05, P＜0.001）,下调HUVECs表达免疫炎症因子CD40 (P＜0.05, P＜0.01)及VCAM-1（P均＜0.001）的水平。且大剂量TPNS作用优于小剂量TPNS（P＜0.05）。结论    TPNS能够减轻oxLDL对内皮细胞的损伤,降低内皮细胞免疫炎症因子的表达,在防治动脉粥样硬化中具有重要作用。     

子痫前期患者血清中ABCA1的表达及其对内皮细胞损伤的影响

目的:探讨子痫前期患者外周静脉血清中三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)蛋白表达的特点,阐明ABCA1对内皮细胞损伤的影响及可能的机制。方法:选取同期住院、年龄、孕周无明显差异的子痫前期患者40例(按病情轻重分为轻度、重度组)及正常妊娠者20名,采用ELISA试剂盒定量检测3组研究对象外周静脉血清中ABCA1及氧化低密度脂蛋白(OX-LDL)表达水平的差异。原代分离并培养上述3组研究对象脐静脉内皮细胞 (HUVECs),采用荧光标记的牛血清白蛋白(BSA)检测内皮细胞的单层屏障功能;采用MTT法检测内皮细胞的增殖能力;采用硝酸还原酶法检测内皮细胞的一氧化氮(NO)合成能力;计算OX-LDL/ABCA1比值,并进行相关性分析。结果:与正常妊娠组比较,子痫前期组患者外周静脉血清中ABCA1蛋白表达水平明显降低(P<0.05),而OX-LDL表达水平及OX-LDL/ABCA1比值明显升高(P<0.05);ABCA1与OX-LDL表达水平呈明显负相关关系(r=-0.681,P<0.05)。与正常妊娠组比较,子痫前期组患者通过单层内皮细胞的BSA水平明显升高(P<0.05),内皮细胞增殖能力明显下降(P<0.05);内皮细胞分泌NO水平明显降低(P<0.05)。且病情越严重,上述改变越明显。子痫前期组患者血清中OX-LDL/ABCA1比值与通过内皮细胞的BSA水平呈正相关关系(r=0.791,P<0.05),与内皮细胞的增殖水平呈负相关关系 (r=-0.812,P<0.05),与内皮细胞中NO水平也呈负相关关系 (r=-0.635,P<0.05)。结论:子痫前期患者血清中ABCA1蛋白表达水平明显下降,引起氧化应激,OX-LDL和ABCA1表达失衡,这与全身血管内皮细胞的损伤密切相关,可能是参与子痫前期发生发展的重要机制之一。     

糖基化终末产物对人内皮细胞分泌前列环素和内皮素-1的影响

目的 了解糖基化终末产物（AGES）对人内皮细胞分泌前列环素（PGI2）和内皮素-1（ET-1）的影响,以及α-硫辛酸（α-LPA）对其的影响。方法 采用酶消化法收集人脐静脉内皮细胞,经原代培养后随机分为4组：正常对照组、AGES组、正常+AGES组和AGES + α-LPA组;放免法测定培养24、48、72h时培养基中的PGI2和ET-1含量。结果 ①AGES组较正常对照组PGI2显著下降(P＜0.05),ET-1显著升高(P＜0.05);②AGES +α -LPA组较AGES组PGI2显著升高 (P＜0.05),ET-1显著下降 (P＜0.01)。结论 AGES对血管内皮细胞有损伤作用,α-LPA可减轻这种损伤,提示抗氧化剂可用于保护血管内皮细胞。     

HSP27对Hcy诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用及其机制研究

目的 研究热休克蛋白27 (HSP27)对同型半胱氨酸(Hcy)诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用及其机制.方法 培养人脐静脉内皮细胞,采用MTT法检测Hcy对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)存活率的影响;Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒及流式细胞术检测Hcy及HSP27对细胞凋亡的影响;设计实验,采用总一氧化氮检测试剂盒(硝酸还原酶法)检测细胞培养液中NO水平、2',7'-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)活性氧(ROS)检测试剂盒及流式细胞术检测细胞内ROS来研究可能的保护机制.结果 HUVECs与不同浓度的Hcy作用后,0 mmol/L组存活率均值为97.33％,Hcy 0.2 mmol/L组存活率均值为95.17％,Hcy 0.4 mmol/L组存活率均值为90.72％,Hcy 0.6 mmol/L组存活率均值为78.29％,Hcy 0.8 mmol/L组存活率均值为63.65％,Hcy 1.0 mmol/L组存活率均值为41.51％.0 mmol/L组与Hcy 0.2 mmol/L组比较,差异无统计学意义(P＞0.05);Hcy 0.4、0.6、0.8、1.0 mmol/L组存活率均低于0 mmol/L组,差异有统计学意义(均P＜0.05).HSP27浓度越高,细胞的存活率越高,呈浓度依赖性,HSP27对HUVECs损伤具有保护作用.Hcy能够诱发内皮细胞凋亡,而HSP27能显著抑制这种凋亡,表明HSP27能减少Hcy对内皮细胞的损害.HSP27能抑制Hcy引起NO的减少和抑制Hcy诱导ROS的产生.结论 HSP27通过影响NO表达和调节细胞内ROS水平保护Hcy诱导的受损伤内皮细胞.