单克隆抗体ELISA检测班氏丝虫病人血清循环抗原

应用抗马来微丝蚴抗原4B_1株单克隆抗体(McAb)和抗马来成虫代谢抗原4B_7株McAb酶联免疫吸附试验(ELISA)检测班氏微丝蚴血症者血清中循环抗原,阳性率分别为78.46％(102/130)和87.13％(88/101);检测51例晚期丝虫病人血清,阳性率分别为3.92％和1.96％;36例经治疗后微丝蚴血症阴转者血清,阳性率分别为13.89％和8.33％。丝虫病非流行区99例肠道蠕虫感染者阳性率分别为16.16％和5.05％。结果表明抗马来成虫代谢抗原4B_7株McAb应用于诊断班氏丝虫感染的效果优于抗马来微丝螺4B_1株McAb。     

应用单克隆抗体酶联免疫吸附试验双抗体法检测人体丝虫病循环抗原

应用兔抗微丝蚴抗体及抗班氏丝虫微丝蚴代谢抗原(ES34株)或抗马来丝虫3期幼虫抗原(HC11株)单克隆抗体(McAb)酶联免疫吸附试验(ELISA)双抗体法检测人体丝虫病循环抗原时,微丝蚴血症者阳性率分别为94.5％(103/109)及89.0％(97/109),且ES34株单克隆抗体ELISA检测结果显示微丝蚴密度与抗原滴度呈正相关;部分微丝蚴血症者尿液中亦可测得丝虫抗原;晚期丝虫病人阳性率分别为57.4％(31/54)及61.1％(33/54);获自美国及中国贵阳非丝虫病流行区正常人血清阳性率分别为0～4.1％及2.8～4.1％;30份肠道蠕虫感染者血清全部为阴性。血清中丝虫循环抗原的存在似与活动性感染有关。     

抗丝虫成虫代谢抗原杂交瘤细胞株的建立与鉴定并应用Dot-ELISA检测人体淋巴丝虫病循环抗原

本文报道抗马来丝虫成虫代谢抗原(AWES_5)杂交瘤细胞株的建立与初步鉴定,AW-ES_5分泌的抗体针对成虫代谢抗原的McAb,并能与成虫抗原、成虫代谢抗原、微丝蚴抗原、犬恶丝虫抗原发生反应,具有科的特异性,与肺吸虫无交叉反应,与蛔虫抗原在低浓度时也无交叉反应,用马来丝虫成虫冰冻切片IFAT     

用抗牛丝虫抗体检测人体丝虫循环抗原

近年不少学者探索检测病人循环抗原诊断丝虫病.本实验应用抗牛丝虫抗体的酶联免疫吸附试验(ELISA)检测淋巴丝虫病人的循环抗原,评价其实用价值。材料和方法一、血清 34份马来丝虫微丝蚴阳性血清采自安徽潜山县,46份班氏丝虫微丝蚴阳性血清及5份微丝蚴阴性而有鞘膜积液、乳糜尿或象皮肿的晚期病人血清采自安徽阜阳县。68份非流行区正常人血     

副肌球蛋白增强小鼠清除马来丝虫微丝蚴的作用

本研究目的旨在鉴定和了解人淋巴丝虫几个发育阶段共同具有的保护性抗原的生化特性,在共同抗原中最主要抗原分子量为97kDa(Bm97),并证明其为副肌球蛋白。生化纯马来丝虫和Caenorhabditis elegans的副肌球蛋白具有诱导小鼠产生部分抗马来丝虫微丝蚴(mf)的作用。作者通过SDS-PAGE发现mf的97kDa抗原与马来丝虫第Ⅲ期幼虫(L_3)免疫的小鼠IgG的反应最强,并用电洗脱法提取这一区带的抗原。用2μg Bm97分别在放血前28天和14天两次皮下注射CF     

班氏丝虫循环抗原43kDa组分对沙鼠体内马来丝虫的免疫预防作用

作者从班氏丝虫微丝蚴血症患者血浆中分离出43 kDa抗原组分(CFA2-6),经小鼠制备相应的抗体。用ELISA方法分析小鼠的抗CFA2-6抗体与马来丝虫成虫、微丝蚴、L3幼虫三期虫体ES抗原和可溶性抗原的反应活性,结果显示抗CFA2—6抗体与ES抗原反     

丝虫抗原的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析

在基本消灭丝虫病的广大地区,多种免疫学诊断技术已广泛地应用于流行病学监测。随之对抗原的制备及纯化提出更高的要求。为了解丝虫抗原主要蛋白成分的分子量,用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳对马来丝虫成虫、微丝蚴抗原、成虫分泌代谢(E-S)抗原及牛腹腔丝虫虫体抗原进行了分析。 材料与方法 1 马来丝虫成虫及微丝蚴抗原     

单克隆抗体免疫放射测定法检测丝虫抗原

应用抗马来丝虫成虫单克隆抗体结合免疫放射测定法，对马来丝虫成早抗原，马来丝虫成虫排泄－分泌抗原，马来微丝蚴抗原及班氏丝虫病病人血清中循环抗原进行了检测。马来丝虫成虫抗原检出的最低含量为０．４８ｐｇ，ＥＳ抗原，马来微丝蚴抗原可测得抗原结合量分别为０．３５μｇ和０．０６５μｇ，班氏丝虫病人血清中循环抗原的检测结果阳性率为８０％，线虫病流行区５０份微丝蚴阴性血清及丝虫病非流行区５０份肠道蠕虫感染者血清全     

抗马来丝虫微丝蚴表面抗原的单克隆抗体能减轻感染沙鼠的微丝蚴血症

作者从感染马来丝虫的埃及伊蚊中获取第三期幼虫,并从感染沙鼠的腹腔中分离出马来丝虫的成虫和微丝蚴。雄性成虫、微丝蚴和L_3经PBS清洗、冻干,在PBS中不断搅动抽提,经20,000g离心20分钟,上清液贮于-20℃备用。从感染犬取得犬恶丝虫,成虫抗原制备步骤同上。6周龄的BALB/C小鼠经腹腔注射微丝蚴10~5条,每次间隔3     

间接免疫荧光试验检测感染丝虫的猫血清抗体

本文报道用二种方法(木瓜蛋白酶和超声粉碎)制备的马来丝虫微丝蚴抗原,用间接免疫荧光抗体试验(IFAT)检测不同丝虫感染的猫血清抗体水平,并比较两种抗原的敏感性。从感染马来丝虫的阳性猫体,采静脉血用生理盐水稀释,经5μm核孔薄膜过滤,再用pH7.6 PBS离心洗涤3次,收集微丝蚴,置-20℃保存。木瓜蛋白酶处理的整条微丝蚴抗原片(简称木瓜抗原片),按Santes等(1976)的方法进行,将经木瓜蛋白酶处理的微丝蚴悬液吸滴于聚氟乙烯玻片凹孔中,室温干燥、丙酮固定。超声粉碎处理的微丝蚴碎片抗原玻片(简称粉碎抗原片)制备方法:微丝蚴经超声粉碎后,将其悬液吸滴于上述玻片的凹孔中,用同法干燥固定。血清采自47只猫的静脉血,其中30只感染马来丝     

单克隆抗体免疫放射测定法检测丝虫抗原

应用抗马来丝虫成虫单克隆抗体（ＭｃＡｂ）结合免疫放射测定法（ＩＲＭＡ），对马来丝虫成虫抗原、马来丝虫成虫排泄－分泌抗原（ＥＳ抗原）、马来微丝蚴抗原及班氏丝虫病病人血清中循环抗原进行了检测。马来丝虫成虫抗原检出的最低含量为０．４８ｐｇ，ＥＳ抗原、马来微丝蚴抗原可测得抗原结合量分别为０．３５μｇ和０．０６５μｇ，班氏丝虫病人血清中循环抗原的检测结果阳性率为８０％（４０／５０），丝虫病流行区５０份微丝蚴阴性血清及丝虫病非流行区５０份肠道蠕虫感染者血清全部为阴性。     

周期型马来丝虫蚊体内阶段的体外培养研究

Devaney等(1979)报道将马来丝虫人工脱鞘的微丝蚴加入含马来伊蚊细胞的MM/MK培养基内,在第6d时30％微丝蚴发育至腊肠期。本文报告周期型马来丝虫微丝蚴在含有各种添加成分的3种商品培养基内也能发育到腊肠期。 一、微丝蚴脱鞘 周期性马来丝虫系1976年引     

一种克隆化马来丝虫抗原在微丝蚴血症小鼠模型中的保护性效应

作者曾报道由马来丝虫表达文库筛选出一株1800bp的cDNA克隆,此克隆编码的548个氨基酸蛋白相当于马来丝虫微丝蚴(mf)的62kDa抗原,与保护性mf抗原有关。本文报告了该重组蛋白在微丝蚴血症小鼠模型中的保护性效应、免疫原性和虫期特异性。     

Dot—ELISA检测抗丝虫抗体的初步实验研究

本文报告以马来丝虫成虫可溶性抗原作Dot-ELISA检测丝虫病人抗丝虫抗体的初步结果。62例马来丝虫微丝蚴血症者的阳性符合率为96.8％,49例班氏丝虫微丝蚴血症者的阳性符合率为85.7％,50例和39例非流行区正常人的假阳性率分别为4.0％和5.1％,与钩虫和蛔虫混合感染者的血清有一定的交叉反应。实验结果显示,Dot—ELISA检测微丝蚴血症者抗丝虫抗体具有敏感性高,且方法简便,可望用于丝虫病监测。     

长爪沙鼠抗马来丝虫抗体的动态变化

用马来丝虫成虫和微丝蚴可溶性粗抗原作ELISA,观察了感染马来丝虫的长爪沙鼠血清中特异抗体的动态变化。结果表明:感染沙鼠腹腔液中的微丝蚴阳性检出率为36.7％;抗成虫和微丝蚴抗体最早分别在感染后第2周和第3周可测得;两种抗体在第1次出现后,均持续上升,抗成虫抗体水平在感染后的第16周稍有下降,而抗微丝蚴抗体却持续在高水平上;显性感染沙鼠的抗微丝蚴抗体在腹腔出现微丝蚴后,明显高于隐性感染鼠.     

冰晶研磨匀浆-冻融法制备马来丝虫微丝蚴可溶性抗原

目前,制备马来丝虫微丝蚴可溶性抗原的方法通常为匀浆法和冻融法序贯结合或再加超声法三者序贯结合。超声法产热较多,即使操作在冰浴中进行,亦难免破坏部分抗原活性。常规的匀浆法制备马来丝虫微丝蚴抗原效果甚差。因为微丝蚴长度只有200～300μm,宽度只有7.5～10μm,而手摇匀浆器的操作杆与匀浆器内壁往往并非密切吻合,微丝蚴可随溶液在杆与壁间隙流动,致使匀浆效果极差。单纯冻融法的效果亦不甚理想,只能使微丝蚴成为具有一定长度的片段。我们应用多次冰晶研磨匀浆-冻融法制备马来丝虫微丝蚴可溶性抗原,效果较为满意,特作如下报道。     

马来丝虫虫体抗原检测长爪沙鼠血清抗体

长爪沙鼠实验感染马来丝虫后,用感染期幼虫、微丝蚴的超声粉碎片段抗原和成虫的冰冻切片抗原,进行间接荧光抗体试验,观察血清抗体动态变化。抗感染期幼虫抗体多于感染后前3Wk内出现,抗成虫及微丝蚴抗体多于感染后前5、6wk内出现。在微丝蚴出现前,腹腔微丝蚴阳性和阴性沙鼠抗体水平差别无显著性,而在微丝蚴出现后,抗体水平具有显著性差别。     

用对流免疫电泳探测人及动物丝虫病的抗体

作者等用犬丝虫成虫及微丝蚴制成水溶性抗原,每毫升含蛋白质15毫克。用抗原免疫家兔取得相应抗体。用对流免疫电泳试验家兔抗体、犬丝虫阳性的猫、犬血清及24例汤加班氏丝虫病患者血清。结果证明,犬微丝蚴血症的抑制(即微丝蚴阴性)与抗微丝蚴沉淀体有关,微丝蚴中等密度者只有针对成     

班氏丝虫病病人循环抗原的鉴定

将班氏丝虫病病人分为3组:(1)周期型或亚周期型无症状微丝蚴血症者(MF);(2)慢性淋巴阻塞性病变如象皮肿或鞘膜积液,伴有反复发作淋巴管腺炎(CP);(3)热带肺嗜酸粒细胞增多症(TPE)。对照组是在流行区的有明显的抗丝虫免疫反应的正常人(EC)、非丝虫病流行区健康者、非丝虫性蠕虫感染(钩虫、粪类圆线虫、蛔虫、鞭虫)及血和皮肤中查见微丝蚴的盘尾丝虫、罗阿丝虫、常现丝虫等其它丝虫病患者。对象于白天采血置肝素中抗凝收集,含有微丝蚴的血浆立即通过0.45μm滤膜除去微丝蚴,防止假性降解和微丝蚴释放抗原,标本贮于液氮或     

一种用于日间血样检测班氏丝虫微丝蚴血症的血清学诊断克隆抗原

为了寻找一种用日间采集的血样来诊断微丝蚴血症的方法,作者用班氏丝虫微丝蚴血症和无微丝蚴血症供者的血清对马来丝虫的cDNA文库进行了特异性的筛选。采集斯里兰卡班氏丝虫感染者有微丝蚴血症和无微丝蚴血症的血清,首先用ELISA标准方法选出有高滴度抗丝虫IgG抗体血