丝裂素活化蛋白激酶与心肌重构

心肌重构主要指心肌细胞肥大和间质增生。丝裂素活化蛋白激酶（ＭＡＰＫ）是一类重要的细胞内信息传递物质。研究发现ＭＡＰＫ是原核细胞和真核细胞生长与分化的细胞内信号传导的共同通路。心室肌、心房肌和心脏间质成纤维细胞中均有ＭＡＰＫ存在，而且许多外界刺激因素如牵张作用、某些血管活性肽和生长因子均可激活ＭＡＰＫ导致心肌重构。因此ＭＡＰＫ在心肌重构的发生中具有重要的地位     

磁场对AMI大鼠血SOD活性及心肌ATP含量变化的影响

本实验将大鼠随机分为五组：空白对照组、磁作用对照组、ＡＭＩ组、ＡＭＩ药物（心得安）治疗组、ＡＭＩ磁场治疗组。分别采用四氮唑蓝法和生物发光法测定各组大鼠血红细胞ＳＯＤ活性及心肌ＡＴＰ含量。结果表明：ＡＭＩ磁场治疗组血红细胞ＳＯＤ活性及心肌ＡＴＰ含量均明显高于ＡＭＩ组（Ｐ＜０．０１），磁作用对照组高于空白对照组（Ｐ＜０．０５）。初步证实，磁场对ＡＭＩ大鼠和健康大鼠心肌具有一定的保护作用，此种作用对ＡＭＩ大鼠更为明显。     

连接蛋白43在培养心肌肥大时的表达及其意义

目的研究培养心肌连接蛋白４３（Ｃｘ４３）的表达及与心肌肥大的关系。方法分离培养大鼠心肌细胞,用去甲肾上腺素（ＮＥ）或苯肾上腺素（ＰＥ）诱导心肌肥大,用免疫组化方法观察心肌细胞Ｃｘ４３、增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）及ｃｄｃ２表达,以图像分析系统检测Ｃｘ４３表达量的变化。结果在培养中加ＮＥ或ＰＥ的心肌细胞,Ｃｘ４３表达明显低于对照组,而其ＰＣＮＡ的阳性率明显高于对照组。ｃｄｃ２阳性率不变。结论在ＮＥ或ＰＥ作用下,培养大鼠心肌细胞中Ｃｘ４３表达下降,与细胞进入Ｓ期有关,这可能是两者促进心肌肥大的机制     

SHR心肌细胞离子泵活性与血压及左心室肥厚的相？…

目的：研究心肌细胞膜离子泵活性与血压及左心室肥厚之间的关系。方法：将１２只自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）分成两组,一组灌喂缬沙坦（２４ｍｇ／ｋｇ）,另一组和６只正常大鼠（ＷＫＹ）灌喂生理盐水共４周。测量实验前后及实验后心肌细胞膜的Ｎａ＾＋－Ｋ＾＋－ＡＴＰ酶、Ｃａ＾＋－ＡＴＰ酶和Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰ酶活性,同时测量心肌细胞横径（ＴＤＭ）和心脏重量／体重（ＨＷ／ＢＷ）。结果：ＳＨＲ生理盐水组的血压和ＴＤＭ及     

心肌肥大时细胞核被膜核苷三磷酸酶活性及mRNA出核转运的变化

目的：探讨心肌肥大时心肌细胞ｍ ＲＮＡ 出核转运率及核被膜核苷三磷酸酶（ ＮＴＰａｓｅ） 活性的变化。方法：采用腹主动脉缩窄法复制大鼠心肌肥大模型,密度梯度离心法制备心肌细胞核被膜,观察心肌肥大时对心肌ＮＴＰａｓｅ 活性和成熟ｍ ＲＮＡ 出核转运速率的影响。结果：早、晚期肥大组心肌细胞核被膜ＮＴＰａｓｅ 最大反应速率以ＡＴＰ 为底物时较对照组增加２５ ％ ～６２ ％ （ Ｐ＜ ０ ．０１） ,以ＧＴＰ 为底物时增加８ ％ ～４４ ％ （ Ｐ＜ ０ ．０１） ,其中晚期肥大组ＮＴＰａｓｅ 最大反应速率增加幅度低于早期组。早期肥大组细胞核被膜ＮＴＰａｓｅ Ｋｍ 值不变,晚期组ＮＴＰａｓｅ Ｋｍ 值下降,以ＡＴＰ 和ＧＴＰ 为底物时晚期肥大组Ｋｍ 值分别下降２２ ％ 和８６ ％ 。早期肥大组１０ ｍｉｎ 心肌细胞核ｍ ＲＮＡ 出核转运率以ＡＴＰ 或ＧＴＰ 启动反应时分别较对照组增加６８ ％ （ Ｐ＜ ０－０１） 或７８ ％ （ Ｐ＜ ０ ．０１） ,晚期肥大组增加幅度不如早期组大,仅增加２７ ％ 和２１－７ ％ （ Ｐ＜ ０－０１） 。结论：大鼠心肌肥大组细胞核被膜ｍ ＲＮＡ 出核转运率的增加可能是心肌肥大时蛋白质合成增加的一个重要原因,而这种ｍＲＮＡ 出核转运率的增加可能与     

肾上腺髓质素抑制溶血磷脂酸的促平滑肌细胞增殖作用

目的和方法：在培养的家兔血管平滑肌细胞上,观察了肾上腺髓质素（Ａｄｍ）对溶血磷脂酸（ＬＰＡ）诱导的ＤＮＡ合成和丝裂素活化蛋白激酶（ＭＡＰＫ）活性途径激活的影响。结果：ＬＰＡ使［３Ｈ］－ＴｄＲ掺入和ＭＡＰＫ活性增加,Ａｄｍ对基础水平的ＭＡＰＫ活性和［３Ｈ］－ＴｄＲ的掺入并无显著影响,但Ａｄｍ对ＬＰＡ刺激［３Ｈ］－ＴｄＲ掺入和ＭＡＰＫ活性具有抑制作用。结论：Ａｄｍ和ＬＰＡ相互作用参与血管平滑肌细胞增殖的调节。     

心肌肥大时细胞核被膜核苷三磷酸酶活性及mRNA出核转运的 …

目的：探讨心肌肥大时心肌细胞ｍＲＮＡ出核转运率及被膜核苷三磷酸酶活性的变化。方法：采用腹主动脉缩窄法复制大鼠心肌肥大模型,密度梯度离心肌细胞核被膜,观察心肌肥大时对心肌ＮＴＰａｓｅ活性和成熟ｍＲＮＡ出核转运速率的影响。结果：早,晚期肥大心肌细胞核被膜ＮＴＰａｓｅ最大反应速率以ＡＴＰ为底物时较对照组增加２５％－６２％,以ＧＴＰ为底物时增加８％－４４％,其中晚期肥大组ＮＴＰａｓｅ最大反应速率增加幅度低     

微小RNA-199a-5p调控大鼠心肌细胞肥大的研究*

 目的：探讨微小RNA-199a-5p（miR-199a-5p）在心肌肥大模型中的表达及对大鼠心肌细胞肥大的调控作用。方法：用腹主动脉缩窄术（TAAC）构建心肌肥大大鼠模型,体外培养新生Sprague-Dawley大鼠心肌细胞,用血管紧张素II(Ang II)诱导心肌细胞肥大,荧光定量PCR (qRT-PCR)检测动物血浆和心肌细胞miR-199a-5p含量;合成大鼠miR-199a-5p的拟似物（mimic）和抑制剂（inhibitor）,用脂质体转染mimic和inhibitor进入心肌细胞,用qRT-PCR检测肥大基因心房钠尿因子和β-肌球蛋白重链mRNA的表达变化;用氚标亮氨酸掺入量检测细胞蛋白合成速率变化;用细胞荧光染色法检测细胞表面积变化。结果：TAAC 术后28 d,大鼠血浆miR-199a-5p的含量较对照组显著增加 (P<0.05),在Ang II诱导肥大的心肌细胞中,miR-199a-5p的表达量也较对照组显著增加。在心肌细胞中过表达miR-199a-5p,能使细胞肥大基因表达增加,蛋白合成速率加快,细胞表面积增大,而使用inhibitor阻遏miR-199a-5p的作用后,能抑制Ang II诱导的肥大基因表达、细胞蛋白合成速率和细胞表面积的变化。结论:心肌肥大动物和细胞模型中miR-199a-5p的表达发生上调。过表达miR-199a-5p能促进体外培养的心肌细胞肥大,而阻遏miR-199a-5p的作用能抑制Ang II诱导的心肌细胞肥大。     

细胞骨架对肥大心肌细胞生物力学特性的作用研究

目的观察肥大心肌细胞骨架、生物力学特性的变化规律,并进一步阐明细胞骨架改变与肥大心肌细胞生物力学特性的相关性。方法将肾上腺素加入新生大鼠心肌细胞培养后,通过微管吸吮法检测心肌细胞黏弹性;心肌细胞收缩力以细胞收缩前后表面积的变化表示。分别采用免疫细胞荧光化学与Western Blot检测细胞骨架蛋白的分布、密度及含量;通过Western Blot检测了细胞骨架蛋白磷酸化水平及细胞骨架相关蛋白激酶的活性。结果与正常心肌细胞比较,肥大心肌细胞的收缩性仅轻度升高,其弹性下降,黏性增加（P〈0.01）。肥大心肌细胞骨架成分蛋白含量较正常心肌细胞明显增加（P〈0.01）。与正常心肌细胞比较,肥大心肌细胞骨架蛋白actin、α-actinin、α-tubulin及desmin磷酸化水平明显升高（P〈0.01）。肥大心肌细胞内PTK活性较正常心肌细胞显著增高（P〈0.01）。结论研究结果表明在致心肌肥大的病理条件下,心肌细胞被动生物力学特性（黏弹性）的改变较其收缩性的变化更为显著;心肌细胞骨架蛋白的改变,尤其骨架蛋白的含量及磷酸化水平方面的变化可能对肥大心肌细胞生物力学特性的调节起到了关键性的作用。     

血管内皮生长因子及其基因在自发性高血压大鼠心肌中的表达

目的：血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）是新近确定的一种特异作用于血管内皮细胞的活性肽。最近发现正常心肌细胞有ＶＥＧＦ及其基因表达,但对高血压肥大心脏心肌ＶＥＧＦ及其基因表达的变化尚不清楚。方法：本实验采用免疫组化和分子杂交方法,对自发性设备夸大鼠（ＳＨＲ）肥大于心脏心肌ＶＥＧＦ及其基因表达进行研究。结果：免疫组化结果表明：ＳＨＲ心肌细胞浆内特异性ＶＥＧＦ染色颗粒明显多于ＷＫＹ对照大鼠。Ｎｏｔｈｅｒｎ分     

不同年龄高血压大鼠心肌中MKP-1的表达及对心肌肥厚的影响

目的：研究不同年龄的自发性高血压大鼠（SHR）和Wistar Kyoto大鼠（WKY）心室肌组织中丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）及其磷酸酶（MKP-1）的表达以及与心肌肥厚的关系。方法： 用左心室重量与体重的比值作为心肌肥大指数并以此指标反映心肌肥厚；分别用Western blotting方法和RT-PCR法半定量测定心室肌组织中磷酸化细胞外信号调节激酶（p-ERK）的蛋白表达和MKP-1 mRNA的含量。结果： （1）SHR的血压自8周龄起明显高于WKY（P<0.01），心肌肥大指数明显大于WKY（P<0.05），ERK和MKP-1的表达均比WKY高（P<0.05）；（2）SHR的血压随年龄增长而升高（P<0.05），至14周趋于稳定，心肌肥大指数则在24周时出现激增（P<0.01）；（3）p-ERK随年龄增长呈递增趋势，而MKP-1呈递减趋势，且与心肌肥大指数和ERK的表达呈负相关（P<0.01）。结论： MKP-1在高血压大鼠随年龄和血压增加的心肌肥厚过程中起重要作用，其表达逐渐下降可能是导致ERK激活增加，进而引起心肌细胞肥大的重要原因。     

钩藤碱对自发性高血压大鼠心室重构过程中TGF-β_1/Smad通路的影响

目的:观察钩藤碱对自发性高血压大鼠血压、心肌肥厚及心肌纤维化的影响并探讨其可能的作用机制。方法:32只自发性高血压大鼠随机分为模型组、钩藤碱高(10 mg·kg-1·d-1)、低(2.5 mg·kg-1·d-1)剂量组、卡托普利组(17.5 mg·kg-1·d-1),每组8只。另设8只Wistar-Kyoto大鼠作为正常对照组。分别于给药前和给药后每2周测量尾动脉收缩压(SBP)。治疗10周后处死大鼠,取其心脏计算全心重量指数和左心室重量指数;检测心肌中羟脯氨酸(HYP)及血浆中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的含量;HE染色观察心肌病理学变化,Masson染色观察心肌胶原纤维变化;免疫组化法和Western blot法测心肌组织转化生长因子-β1(TGF-β1)和Smad3蛋白的表达。结果:与模型组相比,钩藤碱能明显降低自发性高血压大鼠的血压(P0.05),降低心肌HYP含量及血浆AngⅡ的含量(P0.05),减轻心肌组织的病理损伤和胶原纤维沉积,下调TGF-β1和Smad3蛋白的表达(P0.01)。结论:钩藤碱能降低自发性高血压大鼠的血压、调节改善自发性高血压大鼠的心室重构,其机制可能与其影响TGF-β1/Smad通路以及降低AngⅡ含量有关。     

短链酰基辅酶A脱氢酶在大鼠生理性和病理性心肌肥大中的作用

 目的：研究短链酰基辅酶A脱氢酶(short-chain acyl-CoA dehydrogenase, SCAD)在大鼠生理性和病理性心肌肥大中的变化,探讨其与心肌肥大之间的关系。方法：以自发性高血压大鼠作为病理性心肌肥大模型,游泳运动训练性大鼠作为生理性心肌肥大模型。检测大鼠的血压、左室重量指数、血清和心肌游离脂肪酸含量、SCAD mRNA、蛋白表达及其酶活性的变化,采用超声心动图观察心脏的结构及功能。结果：与对照组比较,运动组大鼠出现了明显的离心性肥大,心肌收缩功能增强;而高血压组大鼠呈现出明显的向心性肥大,心肌收缩功能减退。与对照组比较,运动组和高血压组大鼠的左室重量指数均明显增高,但两组间比较无显著差异,二者发生了相同程度的心肌肥大。与对照组比较,运动组大鼠左心室SCAD mRNA和蛋白表达均明显上调,酶活性增高,血清和心肌游离脂肪酸含量明显减少;而自发性高血压大鼠左心室SCAD mRNA和蛋白表达均明显下调,酶活性下降,血清和心肌游离脂肪酸含量明显增多。结论：SCAD在生理性和病理性心肌肥大中呈现出不一致的变化趋势,可能作为区别2种不同心肌肥大的分子标志物以及病理性心肌肥大的潜在治疗靶点。     

Dyrk1A经ASF调控CaMKⅡδ可变剪接在肾血管性高血压大鼠心肌肥厚中的作用

 目的：探讨双特异性酪氨酸磷酸化调节激酶1A (Dyrk1A) 经可变剪接因子(ASF)对钙/钙调素依赖蛋白激酶Ⅱδ（CaMKⅡδ）可变剪接的调控在肾血管性高血压大鼠心肌肥厚中的作用。方法：制备两肾一夹肾血管性高血压大鼠模型,给予Dyrk1A抑制剂表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）和哈尔碱（harmine）干预,观察大鼠血压及心肌肥厚程度变化,逆转录-多聚酶链反应法检测CaMKⅡδ可变剪接的改变,免疫印迹法检测大鼠心肌Dyrk1A和ASF蛋白质表达的变化。结果：两肾一夹术后8周,与假手术组相比,手术组大鼠血压显著升高（P<0.05）,大鼠左室重、左室重/体重比值及心肌细胞面积均增高（P<0.05）,同时该组大鼠心肌中Dyrk1A蛋白表达增加,ASF蛋白表达下降（P<0.05）,CaMKⅡδ亚型可变剪接表现为CaMKⅡδA、δB mRNA表达升高,δC mRNA表达降低（P<0.05）;与手术组相比,EGCG和哈尔碱组大鼠左室重、左室重/体重比值和心肌细胞面积下降,同时大鼠心肌中Dyrk1A蛋白表达降低,ASF蛋白表达上调,CaMKⅡδ亚型可变剪接逆转（均P<0.05）。结论：Dyrk1A可通过ASF调控CaMKⅡδ的可变剪接,从而参与肾血管性高血压大鼠心肌肥厚的发生。     

Reversal of cardiac hypertrophy in renal hypertensive rats: medical vs. surgical therapy

Cardiac hypertrophy consequent to renovascular hypertension was investigated in two-kidney one-clip Goldblatt rats. Ventricular weight in renal hypertensive rats correlated closely with level of arterial pressure (r = 0.93, P less than 0.001). DNA, RNA and hydroxyproline contents of the hypertrophied hearts were higher than sham control, but there was no significant change in myocardial concentration of any of them. Surgical treatment (removal of clipped kidney) as well as medical therapy (inhibition of converting enzyme with orally administered captopril, 150 mg/l drinking water) led to reduction of ventricular weight (2.70 +/- 0.01 and 2.78 +/- 0.06, respectively, vs. 3.4 +/- 0.05 mg/g in controls, P less than 0.01 for both). Reduction of cardiac weight was associated with increase in both myocardial concentration and content of hydroxyproline in surgically treated rats and in medically treated animals. Ventricular catecholamine concentration was increased after nephrectomy but was unchanged by captopril treatment.     

Chronic kidney disease: cardiac and renal angiotensin-converting enzyme (ACE) 2 expression in rats after subtotal nephrectomy and the effect of ACE inhibition

Renin-angiotensin system blockade slows but does not prevent the cardiovascular complications of chronic kidney disease (CKD). Angiotensin-converting enzyme (ACE) 2 is differentially regulated in acute kidney injury, with increased cardiac ACE2 but decreased kidney ACE2 levels. This study investigated the effect of long-term ACE inhibition on cardiac and renal ACE2 in rats with CKD induced by subtotal nephrectomy (STNx). Sprague-Dawley rats had sham (control) or STNx surgery. Control rats received vehicle (n = 9) and STNx rats ramipril (1 mg kg(-1) day(-1); n = 10) or vehicle (n = 10) for 28 days. Subtotal nephrectomy resulted in impaired creatinine clearance (P < 0.05), proteinuria (P < 0.05), renal fibrosis (P < 0.05) and reduced renal cortical ACE2 mRNA (P < 0.05) and activity (P < 0.05). In rats with CKD, ramipril improved creatinine clearance (P < 0.05) and was associated with an increase in cortical but not medullary ACE2 activity (P < 0.05). Compared with control rats, STNx rats were hypertensive (P < 0.01), with increased left ventricular end-diastolic pressure (LVEDP; P < 0.01), left ventricular hypertrophy (LVH; P < 0.05) and interstitial (P < 0.05) and perivascular fibrosis (P < 0.01). In rats with CKD, ramipril decreased blood pressure (P < 0.001) and reduced LVEDP (P < 0.01), LVH (P < 0.01) and perivascular fibrosis (P < 0.05) but did not significantly reduce interstitial fibrosis. There was no change in cardiac ACE2 in rats with CKD compared with control rats. In rats with CKD, ACE inhibition had major benefits to reduce blood pressure and cardiac hypertrophy and to improve creatinine clearance, but did not significantly impact on cardiac ACE2, cardiac interstitial fibrosis, renal fibrosis or proteinuria. Thus, in rats with CKD, renal ACE2 deficiency and lack of activation of cardiac ACE2 may contribute to the progression of cardiac and renal tissue injury. As long-term ACE inhibition only partly ameliorated the adverse cardio-renal effects of CKD, adjunctive therapies that lead to further increases in ACE2 activity may be needed to combat the cardio-renal complications of CKD.     

Sirt1参与异丙肾上腺素诱导的小鼠心肌肥大

目的:观察Ⅲ类组蛋白去乙酰基酶1(Sirt1)在异丙肾上腺素(ISO)诱导的小鼠心肌肥大中的表达及作用。方法:昆明小鼠随机分为正常对照组、ISO模型组和ISO+NAM(烟酰胺,Sirt1抑制剂)组。皮下注射ISO诱导小鼠心肌肥大。以心脏重量指数(心脏重量/体重)、HE染色、透射电镜以及脑钠肽(BNP)mRNA表达水平观察心肌肥大的变化。同时采用RT-PCR、Western blotting检测各组心肌Sirt1 mRNA、蛋白质的表达。结果:与对照组相比,心脏重量指数,HE染色,透射电镜以及BNP mRNA表达水平均显示皮下注射ISO可明显诱导小鼠心肌肥大;Sirt1在心肌肥大模型组表达显著增多(P0.01),其抑制剂NAM可明显减轻ISO诱导的心肌肥大(P0.05),并降低Sirt1的表达(P0.01)。结论:Sirt1的激活可能参与ISO诱导的小鼠心肌肥大。     

内皮素在NG-硝基-L-精氨酸甲酯引起的高血压的作用

在口服Ｎ＾Ｇ－硝基－Ｌ－精氨酸甲酯（Ｎ＾Ｇ－ｎｉｔｒｏ－Ｌ－ａｒｇｉｎｉｎｅ－ｍｅｔｈｌｅｓｔｅｒ,Ｌ－ＮＡＭＥ）造成的大鼠高血压模型上,观察血浆内皮素和亚硝酸盐含量,血管内皮素水平和ＮＯ合酶活性和ＥＴ受体的变化,以及应用ＥＴ受体阻断剂ＪＫＣ－３０１对高血压的影响。     

过表达endophilin A2减轻异丙肾上腺素诱导的心肌肥大

目的:研究过表达吞蛋白A2(endophilin A2,Endo A2)对异丙肾上腺素(isoprenaline,ISO)诱导的心肌肥大的影响。方法:取健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、Ad-EndoA2组、ISO模型组及ISO+Ad-EndoA2组,其中Ad-EndoA2组和ISO+Ad-EndoA2组于给药前1 d左心室壁注射Ad-EndoA2腺病毒,假手术组和ISO组注射磷酸缓冲盐溶液,然后分别连续7 d皮下注射生理盐水或ISO。7 d后用小动物超声测定心功能指标,然后处死大鼠,收集心脏,以心脏重量指数、HE染色及胚胎基因表达水平评价心肌肥大情况,Western blot法检测自噬相关蛋白LC3和P62的表达。结果:小动物超声结果显示,与假手术组相比,ISO组大鼠处于心肌肥大代偿期(左室收缩期前壁厚度、左室收缩期后壁厚度、射血分数和短轴缩短率升高,左室收缩内径及心输出量下降,均P 0. 05),心脏重量指数、HE染色及RT-qPCR结果也均显示心脏发生了明显肥大(P 0. 05),过表达Endo A2可明显减轻ISO诱导的心肌肥大,改善心功能(P 0. 05)。Western blot结果显示,过表达Endo A2明显逆转ISO引起的自噬水平降低(P 0. 05)。结论:过表达Endo A2可减轻ISO诱导的大鼠心肌肥大,可能与加强自噬有关。     

苯那普利对自发性高血压大鼠心肌缺血-再灌注心功能、氧自由基和肌浆网Ca2+-ATP酶的影响

目的:探讨血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)对自发性高血压大鼠(SHR)心肌缺血-再灌注心功能、氧自由基和肌浆网Ca²⁺-ATP酶的影响。方法:30只10周龄雌性SHR分为2组,SHR对照组(SHR)、SHR+B组(每日10mg/kg苯那普利);另15只同周龄、同性别Wistar大鼠作为对照组(Wistar)。治疗12周后,每组大鼠结扎左冠状动脉前降支30min,再灌注30min,观察血流动力学参数,左室心肌丙二醛(MDA)含量、超氧化物岐化酶(SOD)活性及肌浆网(SR)Ca²⁺-ATP酶活性。结果:与Wistar组比较,SHR组血压、左心室重/体重较高,左心功能损害程度较重,心肌MDA含量较高,SOD活性和SRCa²⁺-ATP酶活性较低;SHR+B组血压、左心室重/体重、左心功能损害程度,SRCa²⁺-ATP酶活性无显著性差异,但心肌MDA含量较低,SOD活性较高。结论:苯那普利可逆转SHR左室肥厚,促进缺血-再灌注心肌SRCa²⁺-ATP酶活性的恢复和减少氧自由基损害,从而减轻缺血-再灌注心功能损伤。