海南地区地中海贫血产前基因诊断的临床研究

目的:研究检测α-地中海贫血及β-地中海贫血在产前基因诊断中的临床应用价值。方法:对孕妇夫妇携带地中海贫血的48例风险胎儿的羊水(或脐血)应用单管多重PCR体系和反向点杂交法,进行α-地中海贫血和β-地中海贫血基因诊断。结果:共检测出地中海贫血胎儿38例。其中α-地中海贫血14例,包括东南亚缺失型杂合子(--SEA/αα)2例,东南亚缺失型纯合子(--SEA/--SEA)8例,左缺失型杂合子(-α4.2/αα)1例,右缺失型杂合子(-α3.7/αα)2例,非缺失型点突变(ααT/αα)1例;β-地中海贫血24例,包括CD41-42杂合子16例,CD41-42纯合子2例,-28(A-G)杂合子3例,双重杂合子(IVS2nt654/CD41-42,-28(A-G)/CD71-72(+A),CD41-42/-α3.7)3例。其中10例重型地贫儿引产,1例重型地贫儿产后新生儿死亡,其余均足月分娩存活。所有病例经引产或正常分娩后留取脐带血,作地贫基因诊断,与产前诊断结果一致。结论:应用单管多重PCR体系及反向点杂交法能快速、准确进行α-和β-地中海贫血产前基因检测,这对于有效预防重型地中海贫血胎儿出生具有重大临床意义。     

福建地区孕妇α地中海贫血基因突变类型及产前诊断

目的:了解福建地区孕妇α地中海贫血的基因突变类型及其分布特征,对高风险胎儿进行产前诊断。方法:应用聚合酶链反应(PCR)和反向斑点杂交(RDB)技术,进行α地中海贫血基因分析和产前诊断;对少见的泰国缺失型α地中海贫血基因类型进行测序确认。结果:1502例孕妇中检出314例α地中海贫血患者,阳性率为20.9%,其中东南亚缺失型杂合子(--SEA/αα)225例,右缺失型杂合子(-α3.7/αα)30例,左缺失型杂合子(-α4.2/αα)10例,左缺失型纯合子(-α4.2/-α4.2)1例,右缺失型纯合子(-α3.7/-α3.7)1例,血红蛋白H病27例(-α3.7/--SEA9例,-α4.2/--SEA13例,ααCS/--SEA2例,ααQS/--SEA2例,ααWS/--SEA1例),另外检出少见泰国缺失型α地中海贫血4例;非缺失型α地中海贫血中,ααQS/αα8例,ααCS/αα6例,ααWS/αα2例。对28对夫妇均为地中海贫血携带者胎儿进行了产前基因诊断,确定正常胎儿6例,地中海贫血杂合子9例,巴氏水肿胎儿(HbBart's)13例。结论:福建地区α地中海贫血基因突变类型较为复杂,首次报道福建地区非缺...     

地中海贫血高风险胎儿的产前基因诊断

目的　探讨地中海贫血 (简称地贫 )高风险胎儿宫内基因诊断的价值。　方法　 12 8例地中海贫血高风险胎儿于妊娠中期抽取羊水 10～ 2 0 ml或脐血 1m l进行基因诊断。　结果　 12 8例被检胎儿中基因正常 32例 ,α地贫缺失杂合子 38例 ,纯合子 2 7例 ;β地贫单一突变杂合子 18例 ,纯合子 4例 ,双重杂合子 9例 ;β地贫基因突变类型及频率依次为 :CD41- 42 (47.5 % ) ,IVS- - 6 5 4(42 .5 % ) ,CD17(A- T) (7.5 % )及 - 2 8(A- G) (2 .5 % )。无一例发生严重母胎并发症 ,重型地贫胎儿 40例均在知情同意前提下及时终止妊娠。　结论　筛查地贫高风险胎儿并及时进行产前基因诊断安全、有效、准确。在地贫高发区域 ,应作为常规产科检测方法。     

206例地中海贫血家系产前基因诊断结果分析

目的 总结206例地中海贫血(简称地贫)产前诊断家系资料,分析其地域分布、基因型分布以及胎儿产前基因诊断结果,用于指导临床遗传咨询,避免高风险地区严重类型地贫患儿的出生. 方法 206例地贫产前诊断家系来自2008年1月至2009年12月期间于广州南方医科大学南方医院产前检查的地贫携带者孕妇及其配偶,抽取夫妇双方外周血和胎儿绒毛、羊水或脐血样本并提取DNA,以跨越断裂位点的聚合酶链反应(gap-polymerase chain reaction,gap-PCR)技术和反向点杂交技术(reverse dot blot,RDB)对a和β-地贫常见突变位点进行检测,同时对临床表型阳性而常见突变位点检测结果阴性的样本进行DNA测序.婴儿出生后半年电话随访婴儿表型. 结果 206例产前诊断家系来自包括黑龙江在内的12个不同省份和地区.a-地贫的基因突变类型有--SEA/、-a 3.7/、-a4.2/、αCSα/和αQSα/,全部为试剂盒中可检测的突变类型;而β-地贫的基因突变除常见的试剂盒中可检测到的类型外,还有中国型G γ+(Aγδβ)0、-28(A→C)、CD54-58 (-TATGGGCAACCCT)和CD37(G→A)等4种突变类型无法用常规试剂盒做出诊断.57例α-地贫家系中,产前诊断严重类型地贫11例(19.3％),包括巴氏水肿胎8例和Hb H病3例,杂合子26例(45.6％),正常胎儿20例(35.1％);149例β-地贫产前诊断家系中,严重类型地贫28例(18.8％),杂合子82例(55.0％),正常胎儿39例(26.2％),其中1例β-地贫杂合子合并13-三体.11例严重类型α-地贫胎儿、28例严重类型β-地贫胎儿和1例β-地贫杂合子伴13-三体胎儿均在围产期前后接受了终止妊娠的处理.结论　地贫的发病地域从长江以南各省逐渐扩散至一些北方地区.运用gap-PCR和PCR-RDB技术对地贫家系进行产前基因诊断,检出严重类型地贫胎儿,是降低高危地域严重类型地贫患儿出生的有效手段.但目前的试剂盒覆盖的检测位点在β-地贫筛查中存在漏诊现象,因此对临床表型阳性而常见突变位点检测结果阴性的样本进行DNA测序是十分必要的.此外,在进行地贫产前诊断的同时,也要注意染色体病产前诊断指征的确定.     

α地中海贫血的新生儿筛查

目的 研究珠海市人口中α地中海贫血（简称α－地贫）直实的基因携带率及探讨α－地贫新生儿筛查的必要性。方法 采用Zip zone电泳法对1998年11月－1999年12月间连续留取的新生儿脐血标本系统地进行Hb Bart's定量检测。结果 在1528份脐血标本中，检出Hb Bart's（≥1.0%）112例，阳性率为7.33%。其中Hb Bart's水平为％－1％、－2％、－10％和－40％，分别有78、38、73和1份，因此，该地区人群中静止型、α－地贫－1和HbH的基因摧带率分别为2.49%、4.78%和0.07%，以双亲均为粤籍者居多（67.86%），双亲均为南方籍者则次之（22.32%）。此外，尚发现异常血红蛋白病3例。结论 珠海市人群中α-地贫－1的基因携带率与台湾和香港两地区类似（P＞0.05），显著低于广州地区人群中该病8.3%的基因携带率（P＜0.05），造成这种显著性差异的主要原因是由于两地区的人口背景不同所致。此结果肯定了在α－地贫高发区普遍开展新生儿血红蛋白病筛查所具有的早期诊断和科学研究价值，并推荐血红蛋白电泳作为脐血常规筛查的方法。     

1089例地中海贫血孕妇的产前筛查及产前诊断

目的 探讨产前筛查和产前诊断对检出重型地中海贫血(简称地贫)胎儿的临床应用价值. 方法 2010年6月5日至2011年10月30日,共有1089例贵阳市户籍孕妇在贵州省人民医院产科进行地贫产前筛查.采用红细胞指数分析结合血红蛋白电泳检测筛查血液学表型阳性的孕妇,表型阳性者进一步做地贫基因诊断.应用跨越断裂位点聚合酶链反应技术检测α-珠蛋白基因缺失突变,应用反向点杂交技术检测α-珠蛋白基因点突变,及中国人8种常见和9种罕见的β-珠蛋白基因点突变.携带同型地贫基因的高危夫妇,于妊娠16～22周行羊膜腔穿刺进行产前诊断. 结果 1089例孕妇中筛查出地贫血液学表型阳性者60例,基因诊断确诊为地贫基因携带者53例(4.87％),其中α-地贫20例,β-地贫33例.6对夫妇为同型地贫基因携带者,均行产前诊断,其中1例胎儿确诊为重型β-地贫,经孕妇同意终止妊娠;4例胎儿为地贫携带者和1例正常胎儿,均继续妊娠至分娩,娩出后取新生儿脐带血进行基因检测,结果与产前诊断一致. 结论 产前筛查和产前诊断可有效检出重型地贫胎儿,对提高人口素质有重要意义.     

2种新的中国人β-地中海贫血基因突变类型CD13/14(-C)和beta nt1582(A>G)突变

目的:报道2种新的中国人β-地中海贫血(β-thalassemias,β-地贫)基因突变类型CD13/14(-C)和beta nt1582(A>G)突变。方法:疑似β-地贫患者10例,其中7例为临床疑似轻型β-地贫基因携带者,1例为临床疑似重型β-地贫患者,2例为父母双方均为β-地贫基因携带者的胎儿。应用聚合酶链反应联合反向点杂交技术(PCR-RDB),以及基于PCR技术的DNA测序技术检测β血红蛋白基因。根据患者表型和以往文献报道,对新发现的基因突变性质进行分析。结果:检测出2种β-地贫常见基因突变型,分别是IVS-2-654(C>T)和-28(A>G)。检测出5种β-地贫稀有基因突变型,分别是beta nt1582(A>G),PolyA(AATAAA>GATAAA);CD13/14(-C);beta nt1586(A>G),PolyA(AATAAA>AATAGA);IVS-1-1(G>T);IVS-2-2(-T);其中前2种为新发现的β-地贫基因突变类型。结论:发现了2种新的β-地贫基因突变类型,其表型效果可能为β0或β+。对常规基因检测技术不能诊断的β-地贫疑似病例,可作DNA测序进行确诊。     

广州市黄埔区5306对夫妇孕期地中海贫血的筛查与诊断分析

目的通过对广州市黄埔区群众的地中海贫血筛查、诊断结果进行总结,了解广州市黄埔区群众地贫基因携带率,地贫类型,为本区制定地贫防治工作提供指导。方法通过对2008年1月至2012年12月在广州市黄埔区参加出生缺陷工程的5 306对夫妇孕早期抽血进行地中海贫血初筛,检查到一方或双方初筛阳性者,夫妇均进一步行地贫基因检查,对携带同型地贫基因的夫妇建议产前诊断。结果共检出地贫基因携带者1 338例,单纯性α地中海贫血801例,检出率为7.55%,单纯性β地中海贫血498例,检出率为4.69%,α复合β地中海贫血双重杂合子39例,检出率为0.37%。地贫高风险家庭48户,经产前诊断,确诊10例重型地贫胎儿,均行引产。结论黄埔区的α地中海发生率较广东其他地区稍低,但β地中海贫血发生率偏高,在预防干预时要重视;α复合β地中海贫血双重杂合子的准确检出对于做好优生优育及产前诊断非常重要。     

胎儿大脑中动脉收缩峰期血流速度与二维超声预测重型α地中海贫血的对比研究

目的:探讨和比较应用超声多普勒技术测量胎儿大脑中动脉收缩峰期血流速度(MCA-PSV)与二维超声预测胎儿重型α地中海贫血(地贫)的价值。方法:为129例具有重型α地贫风险的胎儿行二维及多普勒超声检查,测量胎儿MCA-PSV并行羊膜腔穿刺或脐血穿刺术进行α地贫基因诊断。MCA-PSV用中位数的倍数(MOM)表示。结果:重型α地贫胎儿MCA-PSV明显高于非重型α地贫胎儿,差异有显著的统计学意义(P0.001)。MCA-PSV1.29MOM预测胎儿重型α地贫的检出率为81.25%,高于二维超声(P0.05);MCA-PSV联合二维超声对胎儿重型α地贫的检出率为90.63%。MCA-PSV最早可在孕16周预测胎儿重型α地贫,MCA-PSV预测胎儿重型α地贫的平均孕龄小于二维超声(P0.05)。结论:MCA-PSV预测胎儿重型α地贫优于二维超声。MCA-PSV联合二维超声可提高胎儿重型α地贫的检出率。超声多普勒测量胎儿MCA-PSV对早期预测胎儿重型α地贫,早期处理以减少产科并发症的发生具有临床价值。     

改良单管多重PCR检测低平均红细胞体积儿童3种缺失型α地中海贫血基因

目的调查广西地区平均红细胞体积(MCV)<80fL儿童中3种缺失型α地中海贫血基因(即SEA、α3.7和α4.2)的携带率及基因型。 方法2004年6~12月，广西医科大学第一附属医院优化前人建立的单管多重聚合酶链反应(mPCR)技术，并用22例已知基因型的α地中海贫血DNA标本加以验证，运用此方法检测78例MCV<80fL的儿童。 结果经单管mPCR方法检测的22例α地中海贫血，所得基因型与已知基因型一致。78例MCV<80fL儿童中共检出37例缺失型α地中海贫血基因携带者，检出率为47.4%其中SEA缺失型杂合子(SEA/αα)29例，α3.7缺失型纯合子(α3.7/α3.7)6例，α3.7和α4.2缺失型双重杂合子(α3.7/α4.2)1例，HbH病(SEA/α3.7)1例。SEA缺失型等位基因检出最多，在78例受检者156条染色单体中，其携带频率为19.2%(30/156)，α3.7和α4.2缺失型分别为9.0%和0.6%。 结论单管mPCR技术能快速、准确地检测SEA、α3.7和α4.2基因，经优化后，可使该技术更为简便。缺失型α地中海贫血是广西地区儿童MCV降低的主要原因之一。     

取卵后第3天胚胎形态学指标与移植后着床的关系

目的:探讨取卵后第3天(Day3)多个胚胎形态学指标与胚胎着床的关系。方法:选取年龄≤35岁,进行Day3胚胎移植患者,按胚胎移植后全部植入或未植入分为,植入组:30个移植周期,56个胚胎;未植入组:32个移植周期,64个胚胎。分析Day3胚胎卵裂球数目、大小差异、卵裂球核、卵裂球颜色及颗粒、碎片比例和类型、胞质内空泡等与胚胎种植之间的相关性。结果:Day3胚胎发育速度、卵裂球核数量和碎片类型在两组间差异有显著性(P<0.05)。植入组中7~8细胞组最多见(71.4%),尤其是8细胞高达60.7%。卵裂球核指标中,植入组至少一单核组最多见(57.1%)。碎片类型中植入组T1出现率最高,为41.1%。其他形态学指标在两组间无统计学差异(P>0.05)。判别分析表明卵裂球数和碎片类型较卵裂球核、卵裂球大小差异、碎片多少对胚胎植入判别符合率为70.0%。结论:在选择移植胚胎时,胚胎生长速度及碎片类型是考虑的首要因素,其次是胚胎碎片含量。     

两个先天性肾上腺皮质增生症家系的胚胎植入前遗传学检测

目的探讨肾上腺皮质增生症家系进行胚胎植入前遗传学检测的方法和意义。方法 2016年7月至2018年3月就诊于中国医科大学附属盛京医院产前诊断中心和生殖中心,应用直接检测突变位点结合SNP连锁分析的方法鉴定两个家系的胚胎基因突变携带情况,完成植入前遗传学检测。妊娠后分别对2个家系的胎儿羊水样本进行产前染色体和基因诊断。结果两个肾上腺皮质增生症家系均鉴定到CYP21A2基因杂合突变IVS2-13A/CG。家系1先证者为纯合突变,其父母为携带者;家系2夫妻双方均为杂合突变携带者。通过植入前遗传学检测,家系1的8个囊胚中1个胚胎为纯合野生型,5个为杂合突变携带者,1个为纯合突变型,1个单细胞扩增失败,所有胚胎染色体均为整倍体;家系2的4个囊胚中1个胚胎为纯合野生型,但其7号染色体单体,3个为杂合突变携带者,染色体为整倍体。两个家系均选择发育良好且遗传学正常的囊胚植入母体子宫,受孕后通过产前诊断确认胎儿染色体及基因位点情况,足月分娩健康婴儿。结论对于肾上腺皮质增生症家系,在明确致病突变位点后,无论是否有先证者,应用直接检测突变位点结合SNP位点连锁分析进行胚胎植入前遗传学检测都可有效避免患儿的出生。     

染色体多态性qh+与临床生殖异常关系的探讨

目的:目的:分析染色体长臂次缢痕增加(qh+)与生殖异常的临床效应关系。方法:对2080例不孕不育患者进行常规外周血染色体核型分析。结果:2080例不孕不育患者共检出染色体多态性208例,检出率为10.0%,其中qh+患者88例,占42.31%。88例qh+患者中,男性72例,女性16例。1qh+22例;9qh+17例;16qh+14例;Yqh+(46,XY,大Y)29例;46,XY,Yqh+,9qh+5例;46,XY,Yqh+,16qh+患者1例。72例男性患者中存在精子质量问题者60例,占83.33%。配偶有胚胎停育史者共12例,占16.7%,其中2次以上胚胎停育史者共8例,占11.11%;配偶有畸形儿生育史者3例。16例女性患者中有胚胎停育史者7例(43.12%),其中2次以上胚胎停育史者5例(31.25%)。结论:染色体qh+与不孕不育、复发性流产、生育畸形儿等生殖异常存在明显的相关性,不能忽视其临床效应。     

植入前胚胎染色体嵌合型的初步分析

目的　应用荧光原位杂交 (FISH)技术对人类早期胚胎染色体的嵌合型进行初步分析 ,并探讨胚胎染色体嵌合型对常规体外受精 胚胎移植 (IVF ET)成功率以及植入前诊断的影响。方法　对IVF ET治疗周期中胚胎质量差、不适于胚胎移植和冷冻保存的正常受精胚胎以及在植入前胚胎性别诊断中诊断为男性胚胎、不能移植的 38个胚胎进行FISH。结果　 38个胚胎共有 2 93个核 ,杂交率为 96 .2 %。其中正常胚胎 12个 ,占 31.6 % ,二倍体胚胎 (正常胚胎 二倍体嵌合型胚胎 ) 2 8个 ,占73.7% ,嵌合型胚胎 (二倍体嵌合型胚胎 异常嵌合型胚胎 ) 19个 ,占 5 0 .0 %。在≤ 4细胞期胚胎中 ,嵌合型胚胎占 18.2 % ,但在 5～ 8细胞期和≥ 9细胞期胚胎中 ,嵌合型胚胎的比例分别增至 6 8.4%和5 0 .0 %。结论　随着卵裂次数的增加 ,嵌合型胚胎所占的比例也增加 ,但嵌合型胚胎中嵌合细胞的比例却随之而降低。胚胎染色体的嵌合型可能是影响常规IVF ET成功率的重要因素。应用FISH技术可准确地进行单细胞植入前性别诊断 ,但在进行植入前单基因诊断时 ,最好能同时活检 2个细胞 ,以增加准确度。     

乙肝病毒携带对不同卵巢储备功能女性体外受精-胚胎移植结局的影响

目的探讨乙肝病毒携带对不同卵巢储备功能女性进行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)助孕胚胎发育及妊娠结局的影响。方法回顾性分析接受IVF-ET助孕的1 310例不孕症患者资料,按照血清抗苗勒管激素(AMH)水平,分为三组:卵巢储备低下组(A组)AMH2μg/L,正常卵巢储备组(B组)AMH 2~7μg/L,卵巢高储备组(C组)AMH7μg/L,每组按HBs Ag检测结果分为女方乙肝病毒携带组和正常对照组,比较两组的正常受精率、卵裂率、优质胚胎率、着床率、临床妊娠率及流产率有无差异。结果 A组及C组中,乙肝病毒携带组与正常对照组的正常受精率、卵裂率、优质胚胎率、着床率及临床妊娠率差异无统计学意义(P0.05),但A组中乙肝病毒携带组的无可移植胚胎率(14.6%)高于正常对照组(5.9%)(P0.05);B组中乙肝病毒携带组的正常受精率(69.8%)、卵裂率(96.97%)、优质胚胎率(21.8%)、着床率(31.3%)及临床妊娠率(44.1%)均低于正常对照组(73.6%,98.6%,26.2%,41.3%,59.8%)(P0.05),差异有统计学意义。3组中乙肝病毒携带组的流产率均高于正常对照组(P0.05),差异有统计学意义。结论乙肝病毒携带可能干扰了卵巢储备低下及正常卵巢储备女性的卵子质量及胚胎的发育,最终影响妊娠结局。     

非优质胚胎囊胚培养应用价值研究

目的探讨非优质胚胎囊胚培养是否为高效利用非优质胚胎的最佳选择,为制定更利于患者的助孕方案提供参考。方法选择2015年12月至2016年12月在中国医科大学附属盛京医院辅助生殖中心接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)或卵胞浆内单精子显微注射-胚胎移植(ICSI-ET)的不孕患者308例。第3天无优质胚胎形成,按患者意愿分为两组:卵裂期移植组(196例)及囊胚培养组(112例)。比较两组累积临床妊娠率、种植率、流产率、治疗成本、移植周期。结果卵裂期移植组与囊胚培养组的种植率(26.4%vs.44.3%)、周期数[每例患者(1.12±0.37)个vs.(0.86±0.45)个]、治疗成本[每例患者(4433.67±2027.10)元vs.(4750.97±2067.06)元]比较,差异均有统计学意义(P0.05)。累积临床妊娠率(49.5%vs.44.6%)、流产率(4.1%vs.2.0%)比较,差异均无统计学意义(P0.05)。囊胚培养组具有较高的周期取消率。卵裂期移植组第3天胚胎数≥5枚的累积临床妊娠率显著高于囊胚培养组(81.6%vs.53.6%),差异有统计学意义(P0.05)。结论囊胚培养并不是高效利用非优质胚胎的最佳选择;卵裂期胚胎形态学评估预测胚胎植入潜能作用有限。     

辅助生殖诱发单卵双胎的研究进展

辅助生殖技术为不孕不育患者带来了福音,单卵双胎成为严重的并发症。辅助生殖治疗中,女性高龄、促排卵药物的使用、囊胚及多个胚胎的植入、早期胚胎的机械操作和培养条件等均可导致单卵双胎率的明显升高。单卵双胎会导致双胎输血综合征等多种并发症,严重影响母婴健康。因此,深入研究单卵双胎的影响因素以期有效降低单卵双胎发生率是辅助生殖技术面临的新挑战和急需解决的问题。     

胚胎遗留补插管对体外受精-胚胎移植治疗结局的影响

目的:探讨胚胎遗留后再插管对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗结局的影响。方法:回顾性分析2001.08-2003.08在本中心进行IVF-ET患者的临床资料。结果:胚胎移植周期共1301例,胚胎遗留后补插管30例,发生率2.3%。胚胎遗留组补插管后患者的临床妊娠率为33.33%,无胚胎遗留组患者的临床妊娠率为38.55%,两者差异无统计学意义。结论:胚胎遗留补插管可能不影响IVF-ET的治疗结局。     

雄激素不敏感综合征雄激素受体基因突变的研究现状

目前已报道的与雄激素不敏感综合征(AIS)有关的雄激素受体(AR)基因突变超过500个,95%的完全型AIS(CAIS)携带有AR突变基因。部分型AIS(PAIS)检测显示AR突变基因的比例占28%,同一基因型患者性别的养成和雄性化程度存在很大差异,辅助活化因子及第1外显子CAG重复数量差异被认为是造成表型差异的原因。轻型AIS(MAIS)相关的AR基因突变有44个,大部分患者出生时具有正常男性表型,仅仅表现为不育。第1外显子是MAIS突变热区,CAG重复数目超过正常可引起轻微的雄激素抵抗及生育力下降。本文就3种类型AIS相关的AR基因突变研究进展进行综述。     

开放式和封闭式玻璃化冷冻法对人类胚胎发育潜能的影响

目的:比较开放式与封闭式自制叶片玻璃化冷冻技术对人早期胚胎冷冻复苏的效果。方法:以自制开放式与封闭式的叶片为冷冻载体,用玻璃化冷冻方法冷冻体外受精-胚胎移植第3天移植后剩余的优质胚胎,观察胚胎复苏及临床妊娠情况。结果:开放式冻存组共复苏112个周期、288个胚胎,胚胎复苏率、复苏5h继续卵裂率、空泡出现率、胚胎丢失率、临床妊娠率、植入率及流产率分别为97.2%、30.7%、9.3%、1.7%、50.5%、23.6%、14.5%,相较于封闭式冻存组(共复苏93个周期、222个胚胎)的胚胎复苏率(96.4%)、复苏5h继续卵裂率(34.6%)、空泡出现率(7.9%)、胚胎丢失率(1.4%)、临床妊娠率(59.8%)、植入率(29.0%)、流产率(10.9%)均无统计学差异(P>0.05)。结论:封闭式玻璃化冷冻法能获得与开放式同样的冷冻效率,且能使胚胎与液氮完全隔离,能更好地保护胚胎避免潜在的病原微生物、病毒的污染,是冷冻人早期胚胎理想的方法。