Lp- PLA2酶法测定试剂盒的临床应用评价

目的 验证北京九强金斯尔脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)酶法测定试剂盒的性能指标，评价其是否符合临床需求。方法 根据WS/T492-2016《临床检测定量测定项目精密度与正确度性能验证》、CNAS-GL037:2019《临床化学定量检验程序性能验证指南》及WST402-2012《临床实验室检验项目参考区间的制定》等文件要求，对北京九强金斯尔Lp-PLA2酶法测定试剂盒的正确度、精密度、线性范围、可报告范围和生物参考区间等性能进行验证，并与上海润鸿Lp-PLA2测定试剂盒进行方法学比对。结果 正确度验证中，金斯尔Lp-PLA2酶法测定试剂盒测定厂家工作标准品偏差均小于8%;检测配套高低两水平质控品，每个水平检测的重复性和实验室内精密度的变异系数(CV)均在±2%范围内；在线性区间评价试验中，得到线性回归方程Y=1.0054X-3.3466,R²=0.9998。验证线性区间为58.53～1 181.07U/L,最大可稀释倍数为64倍，临床可报告上限水平为75 588.48U/L。厂家提供的生物参考区间男性：230～728U/L,女性：194～640U/L(18～...     

同一厂家两种胱抑素C检测试剂盒的性能验证及其 检测结果的一致性

目的 对同一厂家生产的胶体金增强免疫法（标为A）和胶乳免疫比浊法（标为B）胱抑素C测定试剂盒在日立7600全自动分析仪上的分析性能进行验证,并通过方法比对评估两试剂盒检测结果的一致性。方法 参照我国卫生行业标准WS/T420-2013对两试剂盒的精密度、正确度及线性范围进行验证,其结果与厂家声称的性能指标进行比较;并参照EP9-A2文件对两试剂盒进行方法比对,评估其检测结果的一致性。结果 两试剂盒的批内不精密度均≤3.15%,总不精密度均≤4.81%;5份室间质评样本的检测结果与靶值的偏倚≤10.07%;线性范围内其斜率（b）均在0.97~1.03范围内,截距（a）接近于0,相关系数R2均＞0.995,回收率均在理论值±10%的范围内;两试剂盒的以上性能指标均满足YY/T1230-2014行业标准及试剂厂家声明的性能和质量指标的要求。两试剂盒方法比对结果显示,回归方程为Y=1.03X+0.0181,相关系数R2为0.9956,不同医学决定水平处的预期偏倚均小于我国室间质评要求的1/5。结论 某公司生产的两种Cys-C检测试剂盒的分析性能均满意,且两方法间检测结果一致,均能满足临床实验室的要求。     

国家药监局对YY 0336—2020《一次性使用无菌阴道扩张器》等4项医疗器械行业标准进行修订

正2020年4月9日国家药监局发布YY 0336—2020《一次性使用无菌阴道扩张器》等4项医疗器械行业标准进行修订。具体内容如下。1 YY 0336—2020《一次性使用无菌阴道扩张器》(强制性)修订。替代YY 0336—2013。适用范围:本标准规定了一次性使用无菌阴道扩张器产品的结构型式与基本尺寸、要求、试验方法、检验规则、标志、包装和使用说明书、运输、贮存、灭菌失效期的要求。本标准适用于妇产科诊查和清洗阴道时使用的一次性使     

总蛋白双缩脲法单试剂盒与双试剂盒检测结果的一致性评估

目的 探讨总蛋白双缩脲法单试剂盒与双试剂盒检测结果的一致性。方法 参照美国临床和实验室标准协会（CLSI）EP9-A2文件的要求,以双试剂盒为参比方法、单试剂盒为待评方法,使用患者新鲜血浆标本进行方法比对及偏倚评估。结果 回归方程Y=1.0064X+0.2168,相关系数r=0.9984,不同医学决定水平处的偏倚均小于我国卫生行业标准《WS/T 403-2012 临床生物化学检验常规项目分析质量指标》所规定的总允许误差的1/2。结论 总蛋白双缩脲法单试剂盒与双试剂盒的检测结果具有良好的一致性,差异临床可接受,其检测报告可使用相同的参考区间,但仍建议临床实验室使用双试剂盒检测患者样本。     

TORCH-IgM捕获法ELISA试剂盒的研制和应用

目的 为了发展TORCH近期感染的IgM酶免疫诊断技术。方法 以抗人IgM McAb包板，加待检血清、TORCH抗原，接着加酶标记的抗TORCH—McAb，最后加3，3’，5，5’-四甲基联苯胺(TNB)显色。用这种自制的捕获法ELISA(C—ELISA)试剂盒和HOPE公司的间接法ELISA(I—ELISA)试剂盒平行检测1196份孕妇血清TORCH-IgM。结果C—ELISA试剂盒检出阳性血清67份，并经其他试验证实为阳性。其中4份用I—ELISA试剂盒检测为阴性。由乳胶凝集试验诊断为类风湿因子(RF)阳性的2份血清，经I—ELISA试剂盒检测为阳性，但经C—ELISA试剂盒检测为阴性。结论 在检测孕妇TORCH—IgM方面，C—ELISA比I-ELISA有更强的敏感性和更高的特异性。C—ELISA试剂盒是诊断TORCH近期感染的良好工具。     

国家市场监督管理总局公布6项基因测序相关国家标准

<正>2019年8月30日,国家市场监督管理总局(国家标准化管理委员会)批准了501项国家标准。其中6项国家标准规定了包括核酸提取、核酸纯化、核酸检测、高通量测序、目标基因捕获等方法或试剂盒质量评价规范。这6项国家标准分别是核酸检测试剂盒质量评价技术规范(标准号:GB/T 37871—2019)、个体鉴定的高通量测序方法     

不同荧光定量PCR试剂盒在结核分枝杆菌检测中的应用

目的比较两种不同荧光定量PCR试剂盒在福尔马林固定石蜡包埋(formalin fixed and paraffin embedded,FFPE)组织结核分枝杆菌(mycobacterium tuberculosis,MTB)核酸检测中的应用。方法选取40例经临床确诊结核病患者的FFPE组织标本,运用凯杰MTB核酸PCR检测试剂盒、晶芯分枝杆菌核酸PCR检测试剂盒及抗酸染色法进行检测,分析不同方法的MTB检出率。结果凯杰PCR法、晶芯PCR法及抗酸染色法的MTB检出率分别为80%(32/40)、37. 5%(15/40)、50%(20/40),各组之间差异有统计学意义(P 0. 01);凯杰PCR法的MTB检出率明显高于晶芯PCR法和抗酸染色法(P 0. 01)。结论凯杰PCR试剂盒检测FFPE组织中MTB的灵敏度高于晶芯PCR试剂盒,但晶芯PCR试剂盒能够同时检测并区分MTB和非结核分枝杆菌。     

胶乳免疫比浊法tPSA、fPSA诊断试剂盒临床应用评价

目的 评估胶乳免疫比浊法总前列腺特异性抗原(total prostate specific antigen, tPSA)、游离前列腺特异性抗原(free PSA,fPSA)测定试剂盒的正确度、精密度、线性范围、抗干扰和方法一致性等性能指标,从而评价其临床应用价值。方法参照WST 420-2013《临床实验室对商品定量试剂盒分析性能的验证》、CNAS-GL037:2019《临床化学定量检验程序性能验证指南》以及NCCLS EP7-A2等文件,对北京九强金斯尔tPSA、fPSA测定试剂盒进行性能验证,并与对应罗氏电化学发光法进行方法学比对。结果 tPSA、fPSA诊断试剂盒测定其企业参考品的偏差均小于±7%;且tPSA、fPSA在原装配套质控品靶值附近的测量重复性精密度和中间精密度的变异系数(CV)均在±5%范围内;在线性范围验证试验中,tPSA、fPSA实测值与线性预期值的相对偏差均小于±10%,且线性回归分析提示其决定系数(R²)分别为0.9977、0.9994。抗干扰试验：当直接胆红素(DBIL)≤18.9mg/dL,血红蛋白(Hb)≤490mg/dL,三酰甘油...     

可溶性gp130酶联检测试剂盒的研制及其运用

目的 :建立灵敏、特异、稳定和简便的人可溶性gp130 (sgp130 )酶标检测试剂盒。方法 :采用本室制备的鼠抗人gp130单抗T2作为包被单抗 ,另一株识别不同抗原位点的单抗T12经生物素 (biotin)标记后作为检测抗体 ,建立双单抗夹心的人sgp130酶标检测方法 ,并分别测定了 40例健康供血员、40例甲亢及 47例慢性肾炎患者血清中sgp130的含量。结果 :成功地研制了人sgp130酶联检测试剂盒 ,其灵敏度为 10ng/ml。该试剂盒 4℃放置 3个月 ,离散度 (CV) <± 7 6 %,回收率为95 %～ 111%,提示检测方法具有良好的灵敏度、稳定性和准确性。用该试剂盒测得的血清中sgp130含量的 95 %正常值范围为5 36 92～ 2 87 88(ng/ml) ,甲亢及慢性肾炎患者血清中sgp130的含量分别为 937 16± 2 17 5 9和 80 6 4 5± 138 4 7(ng/ml) ,明显高于正常对照者 (P <0 0 1)。结论 :建立的人sgp130酶标检测试剂盒 ,能够对血清中sgp130进行准确定量 ,可为临床gp130相关性疾病的辅助诊断、疗效估价和判断预后提供有价值的生物学参数 ,具有良好的运用前景。     

人类疾病中T细胞亚类的失调

人T细胞亚类可以直接用OKT单克隆抗体测定。本文用OKT3(测定总T细胞)、OKT4(测定辅助—诱导性T细胞)、OK-TS(测定抑制一杀伤性T细胞)三种单克隆抗体,使用间接免疫荧光法,检查了     

神经元特异性烯醇化酶光激化学发光免疫分析法的建立

研制检测人血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)的光激化学发光免疫分析(AlphaLISA)快速检测试剂盒。采用受体微球用一株NSE单克隆抗体包被,用生物素标记一株单克隆抗体,与链霉亲和素的供体微球共同组成检测试剂盒,优化反应体系并对试剂盒的各项性能指标进行评价。结果显示:自制NSE试剂盒灵敏度为0.149 ng/ml,线性范围为0.149~600ng/ml,分析内、分析间的精密度分别为3.7%~4.3%、3.9%~5.2%,与细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)、非神经元性烯醇化酶(NNE)均无交叉反应,154份临床血清样本用本试剂盒与罗氏化学发光试剂盒检测,其相关系数为0.979。发现自制NSE-AlphaLISA试剂盒的各项性能指标均能达到临床检测要求,可用于临床血清样本NSE浓度的测定。     

血清铁蛋白时间分辨荧光免疫分析试剂盒的研制

目的 血清铁蛋白(sFER)时间分辨荧光免疫(TRFIA)分析试剂盒的研制.方法 采用双抗体夹心法建立sFER-TRFIA试剂盒,并对试剂盒的各项指标进行评价.结果 试剂盒的线性测量范围为2.2～1 070 ng/mL,灵敏度为0.22 ng/mL,批内、批间的精密度分别为4.6%～7.2%、5.4%～8.9%,与癌胚抗原(CEA)、甲胎蛋白(AFP)和人白蛋白无交叉反应.86份血清样本用本试剂盒与国外其他试剂盒同时检测,其相关系数为0.994.结论 试剂盒各项指标均达到临床检测要求,可替代国外同类产品试剂盒.     

全自动荧光免疫分析仪GSP~(TM)检测新生儿血斑G6PD性能验证

目的对全自动荧光免疫分析仪GSPTM检测新生儿血斑G6PD的性能进行评估。方法参考《中华人民共和国卫生行业标准》WS/T 420-2013中临床实验室对商品定量试剂盒分析性能的验证,依据CLIA88要求,通过检测试剂盒自带标准品B/C/E三个浓度、试剂盒自带高水平质控品、低水平质控品和试剂盒自带的B-F五个浓度的标准品,分析GSPTM系统的精密度、正确度和线性范围。结果 GSPTM筛查系统检测B/C/E中G6PD批内变异系数为1.53%～1.76%,小于厂家声明的3.4%;批间变异系数为1.96%～2.15%,小于厂家声明的3.9%。GSPTM系统检测的低、高质控品浓度平均值分别为15.90U/dL和53.01U/dL,都在试剂盒声明的允许范围之内。线性标本的检测值和理论值的线性方程为y=1.0414x-1.4594,相关系数的平方R2=0.9993,符合厂家声明的线性范围(R2≥0.995)要求。结论 GSPTM检测系统参与验证的精密度、准确度及线性范围等主要性能在本实验室均达到了相关标准的要求,可用于新生儿血斑G6PD的检测。     

茶多酚对脂多糖刺激下成骨细胞增殖分化的影响

背景：研究表明,茶多酚在牙周炎等疾病的研究中能发挥抗炎、抗氧化作用。目的：探讨茶多酚在脂多糖刺激下对小鼠成骨细胞增殖分化及氧化应激的影响。方法：体外培养小鼠成骨细胞MC3T3-E1,分4组处理：对照组常规培养;脂多糖组加入10μg/mL脂多糖,茶多酚组加入1μg/mL茶多酚,联合组加入10μg/mL脂多糖+1μg/mL茶多酚。采用MTT法检测细胞增殖情况,碱性磷酸酶试剂盒检测细胞碱性磷酸酶活性,偶氮偶联法检测细胞碱性磷酸酶染色程度,钙检测试剂盒检测细胞钙沉积量,超氧化物试剂盒检测细胞超氧化物含量,丙二醛试剂盒检测细胞丙二醛含量。结果与结论：(1)与对照组相比,脂多糖组成骨细胞增殖活性、碱性磷酸酶活性、钙沉积量降低(P <0.05),碱性磷酸酶染色程度降低(P <0.01),超氧化物和丙二醛含量增加(P <0.05);茶多酚组成骨细胞增殖活性、碱性磷酸酶活性、钙沉积量升高(P <0.05),碱性磷酸酶染色程度提高(P <0.01),超氧化物和丙二醛含量减少(P <0.05);(2)与脂多糖组相比,联合组成骨细胞增殖活性、钙沉积量升高(P <0.0...     

先天性甲状腺机能低下新生儿筛查29520例结果初报

本文报道天津市儿童保健所自1989年7月—1990年9月间用自己制备的~(125)I—TSH纸片法放射免疫试剂盒,对天津市区及郊县29520例新生儿筛查的结果。市区筛查人数22800人,以测定足血TSH为主,复查率0.34％,郊县筛查人数6720人,均测定脐血TSH,复查率1.5％。通过15个月的筛查,共发现患儿4例,按市区(非缺碘地区)和郊县(缺碘地区)分别计算发病率,前者为1/7820,后者为1/2927。文中详细介绍了筛查的程序和存在的问题,并对足血、脐血标本在筛查中的利弊及以TSH或T作为筛查指标的可靠程度进行了讨论。     

非对称性二甲基精氨酸通过激活铁死亡促进小鼠早期肾损伤

目的：探讨内源性一氧化氮合酶(nitric oxide synthase, NOS)抑制物非对称性二甲基精氨酸(asymmetric dimethylarginine, ADMA)是否通过诱导细胞铁死亡促进小鼠早期肾损伤。方法：将16只8周龄SPF级C57BL/6小鼠随机分为对照组(n=8)和实验组(n=8)，实验组小鼠正常饮食，每天灌胃给予小鼠ADMA(60 mg·kg^-1·d^-1),对照组小鼠正常饮食，每天灌胃给予等体积的生理盐水，实验周期为16周。采用口服葡萄糖耐量和胰岛素耐受实验检测血糖代谢；总胆固醇(total cholesterol, TC)和甘油三酯(triglyceride, TG)测定试剂盒(COD-PAP法和GPO-PAP法)以及高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol, HDL-C)检测试剂盒(微板法)检测血清TC、TG和HDL-C水平；HE染色法观察肾组织的形态变化；ELISA法检测血清中ADMA及肾组织炎症因子白细胞介素6(interleukin-6, IL-6)和...     

云南省德宏州新报告HIV感染者治疗前病毒载量分布研究

目的了解云南省德宏州2015—2017年新报告HIV感染者的病毒载量基线及人口学特征, 为德宏地区HIV防治工作提供科学依据。方法收集云南省德宏州2015—2017年新报告HIV感染者的治疗前病毒载量、CD4+T细胞计数结果及人口学信息进行回顾性分析。结果 2015—2017年德宏州共计新报告HIV感染者1 157例, 1 057例进行治疗前病毒载量检测。在1 057例新报告HIV感染者中, 男性占64.9%(686/1 057)、25～49岁占59.5%(629/1 057)、已婚占51.9%(549/1 057)、少数民族占51.8%(548/1 057)、中学以上学历占48.2%(510/1 057)、异性传播占85%(898/1 057)。新报告感染者的病毒载量中位数为8 200 (四分位间距:1 900～44 000)拷贝/ml。病毒载量介于103～105拷贝/ml的感染者占比最高, 为65.7% (694/1 057)。55例HIV感染者病毒载量低于检测限, 其中24例CD4+T细胞数≥500个/μl。结论不同HIV感染者之间病毒载量基线水平存在差异。鉴于病毒载量基线对诊疗...     

VEGF-TrFIA及其在结直肠癌中的应用

目的:研制VEGF时间分辨荧光免疫分析(TrFIA)试剂盒。方法:采用双抗体夹心法建立VEGF-TrFIA试剂盒,并对试剂盒的各项指标进行评价。结果:试剂盒的线性范围为1pg/m l~400pg/m l,灵敏度为0.21pg/m l,准确度高,批内和批间变异系数分别为1.1%~8.4%,2.97%~11.7%。与CA199,CA215,AFP,CEA和白蛋白无交叉反应。收集30例结直肠癌患者和37例健康人血清,用本试剂盒测得结直肠癌患者血清VEGF浓度(357.3±22.1)pg/m l显著高于健康人(71.5±9.1)pg/m l(P<0.0001)。本试剂盒检测结果与商用ELISA试剂盒检测结果相关系数为0.993。结论:试剂盒各项指标达到规定的要求,可用于临床血清VEGF检测。     

慢性重型肝炎患者血中LPS、sCD14变化的临床意义

我们检测 2 4例慢性重型肝炎 (慢重肝 )患者血中内毒素(ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ,ＬＰＳ)及可溶性ＣＤ14(ｓＣＤ14)的水平 ,现将结果报告如下。1　材料和方法1 1　检测对象　临床确诊慢重肝患者 2 4例 (分期例数见表1) ,健康献血员对照组 10例。慢性乙型肝炎 (慢乙肝 )患者16例。1 2　检查方法　内毒素的测定采用基质显色法 ,试剂盒购自上海伊华临床医学科技公司 ,血浆内毒素浓度≥ 5 0ｐｇ/ｍｌ定为内毒素血症 (ＥＴＭ)。ｓＣＤ14和肿瘤坏死因子 (ＴＮＦ α)的测定应用ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法 ,试剂盒均由深圳晶美生物工程有…     

《整形手术用交联透明质酸钠凝胶》行业标准中交联剂含量的检测方法研究

目的 改进和优化YY/T 0962—2014《整形手术用交联透明质酸钠凝胶》行业标准中交联剂1,4-丁二醇二缩水甘油醚(1,4-butanediol diglycidyl ether,BDDE)含量的标准检测方法,为该标准的修订提供技术依据.方法 在气相色谱法中,为使BDDE更好地从凝胶内部释放出来,在测定之前增加样品的酶解处理步骤,并用乙酸乙酯对BDDE进行萃取.此外,在酶标仪检测法中研究透明质酸酶的影响,将透明质酸酶添加到标准溶液中,从而去除透明质酸酶对测定结果的影响.最后委托M、Q、X三家实验室对该方法进行验证,对同一批次样品进行BDDE含量测定,对数据结果进行双因子方差分析,以检验该方法是否具有可行性.结果 气相法专属性、精密度以及重复性良好,平均回收率为105.02％,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为9.15％(n=6).酶标仪检测法精密度、重复性良好,BDDE浓度0.5～8μg/mL范围内,BDDE浓度和荧光强度有良好的线性关系,线性方程为y=36.89x+2.135(r=0.9989),检出限为0.106μg/mL,平均回收率为97.43％,RSD为8.22％;采用双因子方差分析,对M、Q和本课题组(Z)三家实验室的验证结果进行统计(P>0.05),认为不同实验室采用同一方法对同批次样品的交联剂含量测定结果不存在显著性差异.结论 对于整形手术用交联透明质酸钠凝胶中交联剂BDDE含量的测定,气相法操作简单快捷,可作为BDDE的日常测定方法;酶标仪检测法特异性更高,数据更为真实精确,可作为整形手术用交联透明质酸钠凝胶产品中交联剂含量的仲裁方法.