环氧化酶2在急性冠脉综合征患者外周血单核细胞中的表达及意义

目的：检测急性冠脉综合征（ACS）患者外周血单核细胞中环氧化酶2（COX-2）mRNA的表达水平并探讨其意义。方法：选择典型急性冠脉综合征患者42例,分离和培养单核细胞,并采用不同浓度的选择性COX-2抑制药（塞来昔布）体外干预。采用RT-PCR法半定量COX-2 mRNA的表达,夹心酶联免疫吸附法（ELISA）测定培养上清液中IL-6和基质金属蛋白酶9(MMP-9)浓度。结果：ACS患者外周血单核细胞中COX-2 mRNA表达（0.61±0.17）较健康对照组（0.11±0.09）明显增强(P<0.05);ACS患者外周血单核细胞培养上清液中IL-6浓度［(97.24±11.21)ng/L］较健康对照组 ［(22.15±6.30)ng/L］显著升高(P<0.05),MMP-9浓度［(41.20±8.41)μg/L］较健康对照组 ［(11.76±4.23)μg/L］显著升高（P<0.05）;ACS患者外周血单核细胞经塞来昔布干预后, 塞来昔布以浓度依赖性方式降低培养上清液中IL-6和MMP-9浓度分别达48%和50%（均P<0.05）。结论：COX-2可能在急性冠脉综合征的炎症反应中起重要作用。     

软骨中硫化氢含量及其对白介素1β诱导的软骨细胞基质金属蛋白酶13表达的抑制作用

目的：研究关节液及关节软骨中硫化氢（hydrogen sulfide,H2S）及其合成酶的含量和变化,以及H2S对白介素1β（interlukin-1β,IL-1β）诱导的软骨细胞人基质金属蛋白酶-13（matrix metalloproteinase 13,MMP-13）表达的影响。方法：收集在北京大学第一医院行膝关节手术（关节镜手术或膝关节置换术）患者的关节液及废弃的关节软骨,用亚甲基蓝法检测关节液H2S的含量;从废弃的关节软骨中分离出相对正常的软骨细胞,用H2S分子探针方法检测软骨细胞中的内源性H2S,用免疫细胞化学方法检测软骨细胞中H2S合成酶胱硫醚-β-合成酶（cystathionine beta-synthase,CBS）、胱硫醚-γ-裂解酶（cystathionine gamma-lyase,CSE）、巯基丙酮酸硫转移酶（3-mercaptopyruvate sulfurtransferase,MPST）;用Western blot法检测H2S合成酶CBS、CSE、MPST在不同退变程度的软骨组织中的含量。培养相对正常的人软骨细胞至第三代,分为4组：（1）对照组：不加任何药物;（2）IL-β组：单加5 μg/L的IL-1β;（3）IL-1β+H2S组：提前0.5 h加200 μmol/L的NaHS,再加5 μg/L的IL-1β;（4）H2S组：单加200 μmol/L的NaHS。Western blot法检测各组细胞MMP-13蛋白、总核因子κB p65（nuclear factor κB p65,NF-κB p65）及磷酸化NF-κB p65蛋白的含量,Real-time PCR检测各组细胞MMP-13基因的转录情况。结果： 退变膝关节的关节液中H2S含量为(14.3±3.3) μmol/L,Outerbridge分级3级软骨组织中CSE表达量显著高于Outerbridge分级1级软骨组织中的表达量（1.67±0.09 vs. 1.26±0.11,P＜0.01）,而CBS与MPST的表达量差异无统计学意义（P＞0.05）。IL-1β组MMP-13的表达较正常对照组明显升高,且差异具有统计学意义（1.87±0.67 vs. 0.22±0.10,P＜0.05）, IL-1β+H2S组MMP-13的表达较IL-1β组明显降低,且差异具有统计学意义（0.55±0.11 vs. 1.87±0.67,P＜0.05）,H2S组MMP-13的表达较正常对照组差异无统计学意义。 Real-time PCR方法测量了药物干预实验中各组细胞MMP-13基因转录情况,结果显示IL-1β组MMP-13基因转录较正常对照组明显升高,且差异具有统计学意义（31.40±0.31 vs. 1.00±0.00,P＜0.05）, IL-1β+H2S组MMP-13基因转录较IL-1β组明显降低,且差异具有统计学意义（24.41±1.28 vs. 31.40±0.31,P＜0.05）, H2S组MMP-13基因转录较正常对照组无显著性变化。IL-1β组总p65含量较正常对照组明显升高,且差异具有统计学意义（2.13±0.08 vs. 0.73±0.08,P＜0.05）, IL-1β+H2S组总p65含量较IL-1β组明显降低,且差异具有统计学意义（1.24±0.13 vs. 2.13±0.08,P＜0.05）, H2S组总p65含量较正常对照组无显著性变化;IL-1β组磷酸化p65含量较正常对照组明显升高,且差异具有统计学意义（1.30±0.13 vs. 0.19±0.04,P＜0.05）, IL-1β+H2S组磷酸化p65含量较IL-1β组明显降低,且差异具有统计学意义（0.92±0.26 vs. 1.30±0.13,P＜0.05）,H2S组磷酸化p65含量较正常对照组无显著性变化。结论： H2S参与了软骨退变,起到部分抑制细胞外基质降解酶MMP-13的作用,从而实现对软骨细胞外基质的保护。     

长期高蛋白饮食对营养性肥胖大鼠胰岛的影响

目的观察长期等热量高蛋白饮食对营养性肥胖大鼠胰岛形态功能的影响。方法利用高脂饲料建立营养性肥胖大鼠模型34只,分为高蛋白饲养组（HP组,n=12）、高脂饲养组（HF组,n=11）、普通饲养组（NC组,n=11）,正常等热量饲养24周后,观察体质量、内脏脂肪及空腹血浆GLP 1的改变,行静脉葡萄糖耐量试验（IVGTT）观察胰岛分泌功能,作胰岛素免疫组化染色进行胰岛形态学分析。结果与NC组相比,HP组体质量、内脏脂肪均显著降低［分别为（490.92±39.47)g vs（545.55±31.08）g,P＜0.01,（22.42±7.04）g vs（32.33±9.27）g,P＜0.05］,HF组则均明显增加［分别为（656.01±58.49 ）g  vs （545.55±31.08）g,（55.33±17.81）g vs（32.33±9.27）g,P均＜0.01］。IVGTT结果显示,各点血糖无差异,但HP组5、10?min血清胰岛素显著降低［(91.56±21.72)mIU/L vs （121.29±34.03）mIU/L,;（58.62±15.80）mIU/L vs （81.12±24.36）mIU/L,P均＜0.05］;而HF组0、10?min显著升高［(40.21±14/12) mIU/L vs (27.48±11.31) mIU/L,(98.15±27.58) mIU/L vs (81.12±24.36) mIU/L, P均＜0.05］。空腹血浆GLP 1水平HP组显著降低［（0.52±0.13）μg/L vs （0.71±0.19）μg/L,P＜0.05］,HF组则有增加趋势［（1.03±0.28）μg/L vs （0.71±0.19）μg/L,P=0.11］。免疫组化结果显示,与NC组相比,HP组胰岛形态无改变,但HF组已出现胰岛显著增大、胰岛染色面积比率明显降低及平均灰度升高（P＜0.05）。结论高脂饮食可造成胰岛形态功能受损,而长期等热量高蛋白饮食虽能降低营养性肥胖大鼠胰岛素的第一时相分泌,但尚未引起胰岛形态变化。该组胰岛素分泌减少可能与空腹GLP 1降低、体质量减轻有关。     

腹腔液基质金属蛋白酶-1,-2,-3,-9与子宫内膜异位症相关性研究

［摘要］ 目的 探讨腹腔液基质金属蛋白酶（Matrixmet-alloproteinase，MMP）－1、－2、－3、-9在不同分期子宫内膜异位症患者腹腔液中的表达。方法 收集61例在我院行腹腔镜检查及治疗患者的腹腔液，其中35例为无子宫内膜异位症的对照组，18例为子宫内膜异位症Ⅰ、Ⅱ期患者，8例为子宫内膜异位症Ⅲ、Ⅳ期患者。用LiquiChip液相蛋白芯片系统对腹腔液标本中MMP－1、－2、－3、-9含量进行定量检测。结果 腹腔液MMP－1在对照组，子宫内膜异位症Ⅰ、Ⅱ期组及子宫内膜异位症Ⅲ、Ⅳ期组分别为 13.38 、12.80 、20.84 ng/mL，MMP-2分别为19.42、19.54 、24.39 ng/mL，MMP-3分别为：118.47 、117.35、141.65 ng/mL，显示在前两组，腹腔液MMP-1、-2、-3表达接近，在子宫内膜异位症Ⅲ、Ⅳ期组高于前两组，但差异均无显著性 (均P≥0. 05)；以上3组腹腔液MMP-9分别为41.23 、23.06、30.85 ng/mL，以子宫内膜异位症I、Ⅱ期组最低，对照组最高，但3组差异无显著性（P>0.05）。结论 腹腔液MMP-1、-2、-3表达升高，MMP-9表达降低与重度子宫内膜异位症可能存在相关性。     

七种不同基质金属蛋白酶在抗结核药物性肝损伤小鼠模型中的表达与临床价值

目的 探讨7种不同基质金属蛋白酶（MMP）在抗结核药物性肝损伤小鼠模型中的表达与临床价值。 方法 选取120只雄性昆明小鼠,SPF级,6周龄,体重18～24 g,随机区组法分为6组,每组20只。一组设为对照组,五组感染结核分枝杆菌后分别灌胃异烟肼（INH）45 mg/（kg·d）（INH组）、利福平（RIF）90 mg/（kg·d）（RIF组）、乙胺丁醇（EB）135 mg/（kg·d）（EB组）、吡嗪酰胺（PZA）180 mg/（kg·d）（PZA组）、四联抗结核药（INH+RIF+EB+PZA）剂量同上（四联药组）,建立抗结核药物性肝损伤小鼠模型。通过酶联免疫吸附试验法检测药物灌胃后12 h及1、2、3周小鼠模型血清中MMP-1、2、3、7、9、13、14的表达水平,分析其与肝脏指数变化的相关性,探讨不同MMP在抗结核药物性肝损伤中的作用。 结果 给药12 h,与对照组比较,RIF组MMP-7表达上调,差异有统计学意义（P＜0.05）。各组MMP-1、2、3、9、13、14,肝脏指数比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。连续灌胃1周,与对照组比较,INH组、RIF组和四联药组小鼠MMP-2和MMP-7表达上调,肝脏指数升高,差异有统计学意义（P＜0.05）;各组MMP-1、3、9、13、14,肝脏指数,与对照组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。连续灌胃药物2、3周后,与对照组比较,RIF组、INH组、四联药组小鼠血清MMP-2、7、9表达上调,肝脏指数升高,差异有统计学意义（P＜0.05）;各组其他MMPs表达水平和肝脏指数与对照组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。INH组MMP-2、7、9与肝脏指数无相关性（P＞0.05）,四联药组MMP-2、7、9与肝脏指数无相关性（P＞0.05）。RIF组MMP-7与肝脏指数呈正相关（r=0.981,P＜0.05）。 结论 抗结核药物性肝损伤小鼠血清MMP-2、MMP-7和MMP-9明显升高,提示MMP-2、MMP-7和MMP-9介导的炎症反应与抗结核药物性肝损伤密切相关,其中MMP-7可用于预判抗结核药物性肝损伤严重程度。     

基质金属蛋白酶-9及其组织抑制物-1与子宫内膜异位症的相关性研究

目的研究基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及其组织抑制物-1（TIMP-1）与子宫内膜异位症（EMs）的相关性。方法将EMs 15例轻度和36例重度患者分别作为观察组,38例卵巢畸胎瘤患者作为对照组。通过ELISA法测定腹水中MMP-9及TIMP-1值,比较各组两者及其比值的差异。结果与对照组比较,EMs轻度组MMP-9、TIMP-1差异无统计学意义（P〉0．05）;EMs重度组MMP-9、TIMP-1差异有统计学意义（P〈0．05）;3组的MMP-9／TIMP-1差异均有统计学意义（P〈0．05）;EMs轻度组与重度组相比较,MMP-9差异有统计学意义（P〈0．05）,TIMP-1差异无统计学意义（P〉0．05）。结论随着疾病的加重,有MMP-9升高、TIMP-1降低、MMP-9／TIMP-1比值升高的趋势,MMP-9、TIMP-1与子宫内膜异位症发生、发展有相关性,特别是两者的比值,具有重要诊断价值。     

阿托伐他汀对血脂及基质金属蛋白酶的影响

目的 研究较大剂量阿托伐他汀与小剂量阿托伐他汀联合依折麦布对冠心病患者血脂及血清基质金属蛋白酶(MMP)水平的影响。方法 选取冠状动脉狭窄50%~70%的冠心病患者(未植入支架)42例,随机分为较大剂量阿托伐他汀单药治疗组（20、40 mg）（阿托伐他汀组,n=19）和小剂量阿托伐他汀（5、10 mg）＋依折麦布（10 mg）治疗组（联合治疗组,n=23),检测并分析12周内的血脂指标、肝肾功能、肌酸激酶及血清MMP-2、MMP-9和MMP组织抑制因子-1(TIMP-1)水平的变化。结果 ①12周时阿托伐他汀组的低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）为（1.94±0.49） mmol/L,较治疗前下降37.82％;联合治疗组的LDL-C为（1.92±0.54） mmol/L,较治疗前下降38.26％;两组间治疗前及治疗12周时LDL-C比较差异无统计学意义（P>0.05）。②阿托伐他汀组血清MMP-2和MMP-9水平在12周时均较治疗前明显降低,TIMP-1则明显升高。结论 单用较大剂量阿托伐他汀以及联合使用小剂量阿托伐他汀+依折麦布的降脂效果相似,但联合治疗未能降低血清MMP-2、MMP-9和TIMP-1的水平。     

人oxLDL自身免疫复合物的体外致动脉粥样硬化作用

目的：观察oxLDL自身免疫复合物对U937巨噬样细胞泡沫化和活化的影响,以探讨oxLDL免疫学反应致动脉粥样硬化的机制。方法：采用密度离心法从健康人血浆中提取低密度脂蛋白（LDL）,用铜离子氧化成oxLDL;用亲和层析法从136例住院患者血清中提取oxLDL自身抗体。在体外制成2种形式不同的免疫复合物：聚乙二醇沉淀的不溶性免疫复合物（PEG-IC）和RBC吸附的可溶性免疫复合物（RBC-IC）,把这2种免疫复合物加至U937巨噬样细胞的培养基中,以oxLDL作阳性对照,并用热聚合人γ球蛋白（HAGG）封闭Fcγ受体作阻断对照,检测干预后的各组U937巨噬样细胞内胆固醇和胆固醇酯及培养基中基质金属蛋白酶-1（MMP-1）的水平。结果：RBC-IC干预组与RBC吸附oxLDL（RBC-oxLDL）干预组比较,U937巨噬样细胞培养基中MMP-1蛋白表达［（0.769±0.030) ng/ml vs (0.513±0.034) ng/ml,P＜0.01］和细胞内胆固醇酯蓄积［（20.271±1.668) μg/mg vs (17.226±1.298) μg/mg,P＜0.05］明显升高;而在PEG-IC组这种作用则更为明显,且呈剂量依赖性。用10mg/ml的HAGG封闭Fcγ受体后,MMP-1的水平下降约71%,其对巨噬样细胞泡沫化和活化的作用都受到明显的抑制。结论：oxLDL自身免疫复合物能够促进巨噬细胞泡沫化和活化, 其参与动脉粥样硬化的过程可能是通过Fcγ受体途径来实现的。     

2,4-二羟基二苯甲酮对可卡因致小鼠肝毒性及神经毒性的保护作用

目的：探索2,4-二羟基二苯甲酮（2,4-dihydroxybenzophenone,BP 1）对可卡因所致肝毒性及神经毒性的保护作用,并对其作用机制进行初步探讨。方法：BP-1抗可卡因肝毒性实验采用雄性ICR小鼠,BP-1（100, 200, 400 mg/kg体重）灌胃预给药4 d,末次给药30 min后,皮下注射给予可卡因75 mg/kg,24 h后处死。全自动生化仪检测血清中丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase,ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase,AST）和乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）活性;制备肝匀浆, 改良Hission法测定肝中还原型谷胱甘肽（reduced glutathione,GSH）、氧化型谷胱甘肽（oxidized glutathione,GSSG）含量,硫代巴比妥酸（thibabituric acid ,TBA）法测定肝中丙二醛（malonaldehyde ,MDA）含量;HE染色处理肝组织切片,光学显微镜观察病理学改变。BP-1抗可卡因神经毒性实验采用雄性ICR小鼠,BP-1（100, 200, 400 mg/kg体重）灌胃预给药3 d,末次给药30 min后,皮下注射给予可卡因20 mg/kg,记录小鼠0~180 min的自主活动次数。结果：BP-1抗可卡因致肝毒性实验结果发现,与溶剂对照组比较,可卡因模型组小鼠血清中ALT ［（1 571±1 161）IU/L vs. （30±16） IU/L, P<0.05］、AST［（408±226） IU/L vs. (101±12) IU/L, P<0.05 ］和LDH ［(3 963±1 431） IU/L vs. (1 935±287) IU/L, P<0.05 ］活性升高,差异有统计学意义。肝组织中GSH/GSSG比值［（5.11±0.63）vs. (6.88±1.13), P<0.05］下降,MDA含量［（1.97±1.36） μmol/gvs. (0.07±0.06) μmol/g, P<0.01 ］增加,差异有统计学意义。肝小叶中心出现大量坏死细胞。与可卡因模型组比较,BP 1各剂量组血清ALT ［（112±96） IU/L,(54±20) IU/L,(35±15) IU/L,P<0.05］、AST［（130±33） IU/L,(107±5) IU/L,(99±9) IU/L, P<0.05］和LDH ［（1 667±564） IU/L,(1 507±365) IU/L,(1 249±349) IU/L, P<0.01］水平显著降低,差异具有统计学意义。肝组织中GSH/GSSG比值［（7.33±1.84）,(9.28±0.67),(10.5±1.20),P<0.05］升高,MDA［（1.82±1.19）μmol/g,（0.49±0.31）μmol/g,（0.35±0.30） μmol/g,P<0.05］含量下降,差异具有统计学意义。 肝小叶中心变性、坏死细胞减少,坏死区域缩小。BP-1抗可卡因神经毒性实验结果发现,BP-1预给药组小鼠自主活动量较模型组显著降低,自主活动量恢复正常的时间前移。结论：BP-1对可卡因致小鼠急性肝毒性及神经毒性具有拮抗作用。     

紫癜性肾炎患儿血清和尿液基质金属蛋白酶-9的水平及其临床意义

目的探讨基质金属蛋白酶-9（MMP-9）在儿童紫癜性肾炎（HSPN）中的作用及其与肾脏损害的关系,为防治HSPN提供理论依据。方法收集54例HSPN、54例过敏性紫癜（HSP）患儿以及30例健康对照组儿童的血清和尿液,用ELISA法检测血清、尿液MMP-9水平,以全自动生化分析仪检测HSPN组和HSP组患儿血清β2-MG,以双缩脲比色法检测24 h尿蛋白定量。结果（1）HSPN组血清MMP-9为（259.32±78.38）ng/ml,显著高于HSP组（134.09±49.93）ng/ml（P〈0.05）和对照组（46.25±12.87）ng/ml（P〈0.01）,HSPN组尿液MMP-9为（54.11±15.74）ng/ml显著高于HSP组（30.83±8.73）ng/ml（P〈0.05）和对照组（23.60±4.59）ng/ml（P〈0.01）;（2）根据24 h尿蛋白含量将HSPN组患儿分成三个亚组：A组（尿蛋白〈0.15 g/24 h）、B组（尿蛋白0.15-1.0 g/24 h）、C组（尿蛋白〉1.0 g/24 h）,C组患儿血清和尿液MMP-9含量显著高于A组（P〈0.01）和B组（P〈0.05）,A组与B组间差异无统计学意义（P〉0.05）;（3）HSPN组血清MMP-9与24 h尿蛋白定量、血β2-MG呈正相关（r=0.564,P=0.031;r=0.676,P=0.026）,尿液MMP-9与24 h尿蛋白定量、血β2-MG呈正相关（r=0.787,P=0.023;r=0.536,P=0.015）。结论HSPN患血清及尿液MMP-9增高,可能参与HSPN的发生发展过程。     

胃癌患者血清可溶性B7 H4的检测及其临床意义

目的检测胃癌患者血清中可溶性B7 H4（sB7 H4）的水平并探讨其临床意义。方法应用酶联免疫吸附试验（ELISA）夹心法检测61例胃癌患者与51例正常人血清sB7 H4水平,分析其与病理类型、治疗前后、胃癌其他血清标志物的相关性。结果胃癌患者血清sB7 H4水平（49.14±16.16）μg/L明显高于正常人（32.67±12.28）μg/L,P＜0.01。低分化腺癌患者sB7 H4水平（64.51±20.67）μg/L高于高分化腺癌（36.78±13.39）μg/L、粘液腺癌（42.79±12.31）μg/L和印戒细胞癌（44.62±12.27）μg/L,P＜0.05。手术前胃癌患者血清sB7 H4水平（58.09±15.28）μg/L明显高于术后（38.58±9.49）μg/L,P＜0.01。胃癌患者血清sB7 H4水平与CEA、CA19 9水平呈正相关（P＜0.01）。结论胃癌患者血清中高水平的sB7 H4及其与病理类型、治疗情况、及其他肿瘤标志物相关,提示sB7 H4可能在胃癌的发生发展中有重要作用,可为胃癌的诊断和治疗提供一种新的靶位点。     

脂肪间充质干细胞对博来霉素诱导的硬皮病小鼠模型的治疗作用

目的：研究脂肪间充质干细胞（adipose tissue derived stem cells,ADSCs)对博来霉素（bleomycin,BLM）诱导的硬皮病小鼠的治疗效果及其可能的作用机制。方法： 选取 C57BL/6J 雌性小鼠 24 只,采用皮下注射 BLM ［2 mg/(kg·d)］建立硬皮病小鼠模型,随机分为正常对照组、BLM 组、ADSCs(皮下)组 和 ADSCs（静脉）组,每组6只,正常对照组给予生理盐水2 mL/(kg·d)皮下注射,其余3组分别给予BLM皮下注射,连续3周,然后,ADSCs皮下和尾静脉注射组分别给予皮下和尾静脉注射 ADSCs（2×105个细胞）治疗,每4天1次,共3次。流式细胞术检测小鼠脾细胞中的辅助T细胞17（T-helper 17,TH17）及 调节性T细胞（regulatory T cell ,Treg）,实时荧光定量聚合酶联反应（ polymerase chain reaction,PCR）法检测小鼠肺组织中相关细胞因子的表达水平,酶联免疫吸附法（enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA） 检测小鼠血清中白介素（interleukin,IL)-6、转化生长因子β（transforming growth factor-β,TGF-β） 的含量, 苏木精-伊红染色(hematoxylin eosin staining,HE ）观察小鼠的皮肤和肺组织病理学改变。结果： 流式细胞术结果显示,BLM 组较正常对照组小鼠脾细胞中 TH17 和 Treg所占比例升高(15.30%±1.29 % vs. 4.32%±0.79%;9.90%±1.95% vs. 5.18%±1.35%,P均<0.05),经 ADSCs 治疗后,TH17 所占比例降低(5.02%±0.83%,6.00%±0.82% vs.15.30%±1.29%, P均<0.05),而 Treg所占比例升高(14.32%±1.59%,11.09%±4.31%vs. 9.90%±1.95%, P均<0.05)。与正常对照组相比,BLM 组小鼠肺组织中 IL-17、IL-6、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的 mRNA 表达水平及血清中 IL-6 的含量均升高［3.54±0.30,10.65±0.66, 5.37±0.52 vs. 1.00±0.00; (21.2±1.74) ng/L vs. (16.87±1.09) ng/L, P均<0.05］,ADSCs 治疗后,其表达量下降［1.63±0.45,1.50±0.29 vs.3.54±0.30;3.11±0.85,2.98±0.76 vs.10.65±0.66;1.45±0.47,1.59±0.41 vs. 5.37±0.52; （17.87±1.45） ng/L, (17.61±1.16) ng/L vs. (21.2±1.74) ng/L, P均<0.05］,ADSCs(皮下)组和ADSCs（静脉）组比较差异无统计学意义（P>0.05)。BLM 组小鼠血清中 TGF-β 的含量较正常对照组升高［(33.95±2.49) ng/L vs. (28.8±2.29) ng/L, P<0.05］,但小鼠肺组织中 TGF-β mRNA 的表达水平与正常对照组之间差异无统计学意义( 1.17±0.11 vs.1.00±0.00, P>0.05),经 ADSCs 治疗后 TGF-β基因和蛋白的表达无明显变化［1.25±0.11,1.26±0.12 vs.1.17±0.11; (31.84±2.04) ng/L, (31.25±2.36) ng/L vs. (33.95±2.49) ng/L,P>0.05］。HE 染色结果显示,BLM组与正常对照组相比,肺组织有大量炎性细胞浸润,肺泡间隔断裂或消失;皮肤真皮层增厚,有大量的胶原纤维积聚,经ADSCs治疗后小鼠肺组织炎症有所改善,皮肤的真皮层变薄,胶原纤维积聚减少。结论： ADSCs 可以有效缓解硬皮病小鼠肺的炎症和皮肤的纤维化症状,其抗炎和抗纤维化作用与其免疫调节功能有关。     

利多卡因对脓毒症大鼠肾组织高迁移率族蛋白表达的影响

目的 观察利多卡因对盲肠结扎穿孔(CLP)脓毒症大鼠肾组织高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达的影响,探讨利多卡因脓毒症急性肾损伤的保护机制。方法 雄性 Wistar大鼠随机分5组：假手术组(S组,n=15)、生理盐水组(NS组,n=20)、利多卡因5mg/kg组(n=15)、利多卡因10mg/kg组(n=15)、利多卡因20mg/kg组(n=15)。CLP术后0、1、2h S组和NS组分别腹腔内注射生理盐水0.5mL,利多卡因各组分别注射利多卡因5、10和20mg/kg。24h后留取血液和器官标本。实时PCR测定肾组织HMGB1 mRNA表达,生化分析测定血肌酐(Cr)浓度,光镜检查组织病理变化,免疫组化测定器官核转录因子(NF κB)活化。结果 ① 与S组比较,其他4组肾脏HMGB1 mRNA表达增加(P<0.05)。利多卡因各组HMGB1 mRNA水平较NS组降低(P<0.05),呈明显剂量依赖性;② 利多卡因5、10、20mg/kg组大鼠血Cr水平［(44.80±3.70)μmol/L, (34.80±4.44)μmol/L, (27.40±2.30)μmol/L］较NS组［(51.00±5.00)μmol/L］降低(P<0.05);③ 利多卡因处理可明显减轻组织损伤和炎症细胞浸润;④ 利多卡因可抑制CLP诱导的肾组织NF κB活化。结论 利多卡因脓毒症急性肾损伤保护作用可能与其抑制组织HMGB1的过表达有关。     

显微镜下多血管炎合并自身免疫性溶血性贫血的临床特点及治疗转归

目的：探讨合并自身免疫性溶血性贫血（autoimmune hemolytic anemia,AIHA）的显微镜下多血管炎（microscopic polyangiitis,MPA）患者的临床表现、实验室指标特点、治疗和预后情况,以提高对本病的认识及诊疗水平。方法：收集2006年10月至2013年11月在北京大学人民医院住院的MPA患者的临床资料,回顾性分析合并AIHA的MPA患者临床特点、治疗转归及预后。结果：（1）在63例MPA患者中,12.7%（8/63）合并AIHA。（2）合并AIHA的MPA患者与单纯MPA患者比较,发热、乏力、血尿、新发高血压的发生率明显增高（87.5 % vs. 29.1%; 100% vs. 49.1%; 100% vs. 60%; 75% vs. 20%, P均<0.05）;实验室指标中血红细胞、血红蛋白、血清白蛋白、补体C3指标明显减低 ［分别为（2.3±0.5 ）×10¹²/L vs.（3.0±0.7）×10¹²/L; （66.2±13.1） g/L vs. (90.0±20.3) g/L; (26.1±4.4) g/L vs. (33.5±6.4) g/L; (0.7±0.2) g/L vs. （0.9±0.3） g/L, P均<0.05］;红细胞沉降率、IgG及伯明翰血管炎评分明显增高［（102.1±25.7) mm/1h vs. (76.5±31.1) mm/1h; (20.9±6.1) g/L vs.（14.5±6.0） g/L; ( 23.7 ±5.7) vs. (17.3 ± 4.1),P均<0.05］,提示患者更易并发多系统损害。（3）8例合并AIHA的MPA患者中,6例使用糖皮质激素冲击联合免疫制剂,2例使用小剂量糖皮质激素治疗;1例治疗过程中死亡,7例贫血症状缓解,伯明翰血管炎评分减低。（4）随访4年,7例合并AIHA患者中2例死亡,2例因贫血、肾功能指标异常反复住院,3例病情缓解。结论： MPA合并AIHA在临床中可能并不少见,患者更易并发多系统损害;糖皮质激素冲击联合免疫抑制剂治疗短期疗效较好。     

血清淀粉样蛋白A (SAA)升高的大动脉炎(TA)患者免疫炎症状态

 目的  对伴有血清淀粉样蛋白A(serum amyloid A, SAA)升高的大动脉炎(Takayasu's arteritis, TA)患者的临床特征、免疫炎症状态和疾病活动性进行分析。方法  收集TA患者80例,比较SAA升高组和正常组患者一般资料、病情活动、炎症指标、细胞因子及用药情况差异,采用t检验、秩和检验和Spearman's相关系数分析进行统计学分析。结果  与SAA正常组相比,SAA升高组有更多患者Kerr评分≥2(86.44% vs.61.9%, P=0.036),红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate,ESR)［(47.84±34.60) mg/L vs. (18.86±15.87) mg/L, P＜0.001］、超敏C反应蛋白(high-sensitivity C-reactive protein, hs-CRP)［17.42(5.20~36.90)mg/L vs.1.80(0.75~4.05)mg/L, P＜0.001］、血小板数［(295.00±95.60)×109/L vs.(240.85±75.78)×109/L,P=0.025］、血清球蛋白水平［(29.05±6.49)g/L vs. (24.98±4.33)g/L, P=0.002］、IgG［(13.37±4.52)g/L vs.(11.63±2.63)g/L, P=0.048］、补体C3［(1.26±0.26) g/L vs. (1.03±0.20) g/L,P=0.002］、C4［0.25(0.21~0.29)g/L vs. 0.20(0.14~0.23)g/L,P=0.008］及IL-6水平［(10.64±8.93) pg/mL vs. (3.88±2.72) pg/mL, P=0.001］显著高于SAA正常组。结论  SAA升高的TA患者炎症指标和疾病活动性更高,SAA检测有助于了解炎症和疾病状况。     

MIF对耐ADM人乳腺癌细胞MCF-7/ADM 体内外耐药逆转作用

目的：采用动物体内外结合方法探讨米非司酮（mifepristone, MIF）对耐阿霉素（adriamycin,ADM）人乳腺癌细胞MCF-7/ADM耐药逆转作用。方法：四甲基偶氮唑蓝法检测5 μmol/L MIF对 MCF-7/ADM体外耐药逆转作用。MCF-7/ADM接种裸鼠皮下构建裸鼠移植瘤模型,空白对照组（NS组）为0.2 mL生理盐水腹腔注射+0.5 mL食用油灌胃;ADM组为5 mg/kg ADM腹腔注射+0.5 mL食用油灌胃;MIF组为30 mg/kg MIF灌胃+0.2 mL生理盐水腹腔注射;ADM+MIF组为5 mg/kg ADM腹腔注射+30 mg/kg MIF灌胃。观察各组裸鼠移植瘤情况。结果：（1）5 μmol/L MIF对MCF-7/ADM细胞的抑制率小于5%,与未用MIF组的抑制率比较差异无统计学意义（P>0.05）。（2）ADM对MCF-7/ADM细胞的半抑制率为17.21 mg/L,而对非耐药乳腺癌细胞MCF-7细胞的半抑制率为0.42 mg/L,ADM对MCF-7/ADM细胞的半抑制率明显高于MCF-7的半抑制率（P＜0.05）。（3）5 μmol/L MIF与ADM联合处理MCF-7/ADM细胞后,MCF-7/ADM半抑制率为1.96 mg/L,明显低于单用ADM组的半抑制率（P＜0.05）。逆转ADM耐药倍数为8.78。（4）ADM+MIF组瘤体积［（232.5149±309.2377）mm3］均低于NS组的瘤体积［（962.2309±261.1313 ）mm3］（均P＜0.05）,也低于MIF组的瘤体积［（778.2846±42.6919）mm3］,还低于ADM组的瘤体积［（508.9648±16.2609） mm3］（均P＜0.05）。MIF+ADM组的瘤质量抑制率为78.0%。结论：MIF对耐阿霉素的人乳腺癌细胞MCF-7/ADM体内外均有逆转耐药性的作用。     

联合应用基质细胞衍生因子1、辛伐他汀及骨胶原支架进行体内异位成骨

目的：探讨使用小鼠基质细胞衍生因子1（murine stromal cell-derived factor 1, mSDF-1）结合辛伐他汀（simvastatin,SIM）以及骨胶原支架（Bio-Oss^®）构建无外加种子细胞的组织工程化骨的可行性,并检验其体内异位成骨的效果。方法：将32只ICR小鼠随机分为4组,每组8只,于小鼠颅部做皮肤切口,各组小鼠分别植入：(1)1 ∶50（体积比）的二甲基亚砜（dimethyl sulfoxide,DMSO）/磷酸盐缓冲液（phosphate buffered saline,PBS）混合液+骨胶原支架（空白对照组）;(2)10^-3 mol/L SIM溶液+骨胶原支架（SIM组）;(3)200 mg/L mSDF-1溶液+骨胶原支架（mSDF-1组）;(4)10^-3 mol/L SIM+200 mg/L mSDF-1溶液+骨胶原支架（SIM+mSDF-1组）。植入1周后,连续2 d,每天分别在支架局部注射上述各组相应的溶液50 μL。饲养6周后,取出支架及其周围组织,通过软X射线投射成像及灰度测定、HE染色、免疫组织化学染色的方法,定性及定量观察其成骨效果。结果：SIM+mSDF-1组软X射线灰度值［（421 836.5±65 425.7）像素］明显高于空白对照组［（153 345.6±45 222.2）像素,P<0.01］、SIM组［（158 119.2±100 284.2）像素,P<0.01］以及mSDF-1组［（255 529.5±152 142.4）像素,P<0.05］;在SIM+mSDF-1组内可见明显的骨桥蛋白和骨钙素的表达;SIM+mSDF-1组血管丛密度［（46±8）条/mm²］明显高于空白对照组［（23±7）条/mm², P<0.01］和SIM组［（24±6）条/mm², P<0.01］。结论：使用mSDF-1结合SIM以及骨胶原支架构建的无外加种子细胞的组织工程化骨可于小鼠颅部皮下异位成骨。     

评估呼出气一氧化氮(FeNO)在支气管哮喘管理中的作用

 目的  评估呼出气一氧化氮(fractional exhaled nitric oxide,FeNO)在支气管哮喘管理中的作用。方法  选取未规范使用控制药物的哮喘患者25例,给予为期12周的布地奈德(200 μg,bid)吸入治疗,检测治疗前后的FeNO水平、肺功能、ACT评分、血常规、血清总IgE以及诱导痰。同期选取25例健康受试者,给予检测FeNO水平。结果   哮喘组患者吸入布地奈德治疗后的FeNO水平(体积分数)较治疗前显著降低［(49.98±25.98)×10-9 vs. (109.18±65.23)×10-9,P=0.000］。治疗前的FeNO水平明显高于健康对照组［(109.18±65.23)×10-9 vs. (12.44±4.31)×10-9,P=0.000］,治疗后的FeNO水平也明显高于健康对照组［(49.98±25.98)×10-9 vs.(12.44±4.31)×10-9,P=0.000)］。治疗后的FEV1/pred较治疗前显著改善［(83.40%±15.74%) vs. (72.45%±7.48%),P=0.002］;治疗后的ACT评分显著高于治疗前(22.88±1.81 vs.14.88±4.21,P=0.000);治疗后的血嗜酸性粒细胞百分比 (Eos%)明显低于治疗前 ［(4.33%±1.89%) vs. (5.70%±1.85%),P=0.004］;治疗后的血清总IgE显著低于治疗前［(231.35±200.59) ng/mL vs. (284.81±231.12) ng/mL,P=0.004］;治疗后的诱导痰Eos%明显低于治疗前［(6.58%±3.66%)vs.(10.00%±4.75%),P=0.004］。治疗前的FeNO水平与ACT评分呈显著负相关(r=-0.425,P=0.034),与诱导痰Eos%呈显著正相关(r=0.657,P=0.020)。结论   FeNO水平是一种用于评估气道嗜酸粒细胞性炎症的可行性指标,其有助于评估哮喘的控制情况。     

自发性高血压大鼠Klotho与MMP-9, TIMP-1和 PAI-1基因的表达及福辛普利和缬沙坦对其的干预作用

目的：观察自发性高血压大鼠（spontaneously hypertensive rats,SHR）肾脏组织中Klotho、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1（tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1）和纤溶酶原激活物抑制剂-1（plasminogen activator inhibitor,PAI-1）基因的表达状况,探讨其在高血压肾间质纤维化中的作用及福辛普利和缬沙坦的肾保护作用机制。 方法：22周龄雄性SHR 20只随机分为4组（每组5只）：高血压组（SHR组）、fosinopril组［Fos组,10 mg/( kg·d)灌胃］,Valsartan组［Val组,50 mg/( kg·d)灌胃］和fosinopril+valsartan组［Fos＋Val组,fosinopril 10 mg/( kg·d)+valsartan 50 mg/( kg·d)灌胃］。22周龄雄性Wistar Kyoto大鼠（WKY组）5只作为对照组。用药物干预连续喂养8周,分别用RT-PCR和Western 印迹检测肾脏组织中Klotho,MMP-9,TIMP-1和PAI-1 mRNA和蛋白的表达水平。 结果：SHR组肾脏组织Klotho mRNA和蛋白表达较WKY组明显下调(P＜0.01),而MMP-9,TIMP-1和PAI-1mRNA和蛋白的表达较WKY组均明显上调(P＜0.01);用fosinopril和/或valsartan干预后,可上调Klotho mRNA在Fos,Fos＋Val组(P＜0.01）和Val组(P＜0.05）的表达,上调Klotho 蛋白在Val,Fos＋Val组(P＜0.01）和Fos组(P＜0.05）的表达。同时下调MMP-9,TIMP-1,PAI-1 mRNA和蛋白在Fos,Val,Fos＋Val组的表达(P＜0.01）。相关分析表明：Klotho mRNA和蛋白的表达与MMP-9,TIMP-1,PAI-1 mRNA (r值分别为-0.864,-0.725和-0.785,P＜0.01)和蛋白（r值分别为-0. 614,-0.579和-0.552,P＜0.05）的表达均呈负相关。 结论：高血压肾损害与抗衰老基因Klotho和基质降解相关基因MMP-9,TIMP-1,PAI-1关系密切;Klotho基因与MMP-9,TIMP-1和PAI-1基因的表达呈负相关。上调抗衰老基因Klotho表达的药物fosinopril 和/或valsartan可改善Klotho-MMPs/TIMPs-PAI-1的表达,这可能是其抗肾纤维化的重要机制。     

VEGF、MMP-2和MMP-9检测在子宫内膜异位症诊断中的应用价值

目的：检测子宫内膜异位症(EMs)患者血清及腹腔液中血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的浓度,并探讨其与EMs的诊断及分期的意义。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)定量测定2012年1月至2014年12月于我院妇科住院的64例EMs患者血清和腹腔液中VEGF、MMP-2和MMP-9浓度,并与30例子宫肌瘤患者(非EMs组)进行比较分析。结果 EMs组患者血清中VEGF、MMP-2和MMP-9浓度分别为(235.7±61.2) ng/L、(196.3±51.8)μg/L和(231.6±44.0)μg/L,腹腔液中VEGF、MMP-2和MMP-9浓度分别为(856.2±260.5) ng/L、(45.1±13.6)μg/L和(53.4±19.0)μg/L。EMs组患者血清及腹腔液中VEGF、MMP-2和MMP-9浓度显著高于非EMs组,Ⅲ~Ⅳ期浓度显著高于Ⅰ~Ⅱ期和非EMs组(P<0.01);Ⅰ~Ⅱ期中VEGF浓度显著高于非EMs组(P<0.01)。结论在EMs患者血清及腹腔液中高浓度的VEGF、MMP-2和MMP-9与EMs的发生和发展相关,检测VEGF、MMP-2和MMP-9浓度有助于EMs的诊断与分期评估。