共查询到20条相似文献,搜索用时 15 毫秒
1.
Ag43/FGFR-1嵌合蛋白疫苗抗小鼠纤维肉瘤血管生成的实验研究 总被引:2,自引:2,他引:0
目的:利用Antigen43(Ag43)/成纤维细胞生长因子I型受体(FGFR一1)重组嵌合蛋白作为疫苗,了解其是否具有抑制小鼠肿瘤生长的作用,并初步探讨其作用机理。方法:40只BALB/c雌性小鼠接种MethA细胞后第7天,随机分为Ag43/FGFR.1蛋白免疫组(AF组)、A酗3蛋白免疫组(Ag43组)、FGFR—1蛋白免疫组(FGFR一1组)和生理盐水对照组(NS组)4组,每组10只,观察免疫治疗后的荷瘤小鼠肿瘤体积和生存曲线,分别用免疫组织化学方法检测肿瘤组织微血管密度(MVD),免疫印迹(Western blot)方法检测抗自身FGFR—1的抗体,酶联免疫斑点试验(ELISPOT)检测分泌抗自身FGFR-1抗体的B淋巴细胞的数量。结果:Ag43/FGFR-1组与FGFR-1蛋白、A甜3蛋白、生理盐水对照组肿瘤组织MVD计数分别为11.9±2.3、59.6±3.8、60.6±1.2和61.9±3.4(P〈0.01);与对照组相比,Ag43/FGFR-1组肿瘤体积明显变小(P〈0.01),存活时间明显延长(P〈0.01),血清中发现含有抗自身FGFR-1的抗体且发现小鼠脾脏中分泌抗自身FGFR-1抗体的B淋巴细胞数目明显增多(P〈0.01)。结论:Ag43/FGFR-1蛋白质疫苗能够诱导荷瘤鼠产生特异性免疫反应,从而抑制肿瘤血管生成和肿瘤的生长。 相似文献
2.
Vaccination with a Recombinant Chicken FGFR-1 Bypasses Immunological Tolerance against Self-FGFR-1 in Mice 总被引:2,自引:1,他引:1
It has been generally believed that that the growth and metastasis of solid tumors depend on tumor angiogenesis, the generation of new blood vessels. At present, basic fibroblast growth factor (bFGF) has been shown to be one of the most important angiogenic growth factors for tumor angiogenesis. bFGF serves its biological functions through interaction with its high-affinity receptor, fibro- blast growth factor receptor-1(FGFR-1)[1–3]. FGFR-1 is a member of the receptor tyrosine kinase co… 相似文献
3.
To explore the anti-tumor effect of immunotherapy with recombinant protein vaccine based on FGFR-1 of chicken (cFR-1) in a mouse Meth A fibrosarcoma model, tumor volume and sur- vival rate of the mice were observed at a 3-day interval. Microvessel density (MVD) was detected by immunohistochemistry. Auto-antibodies against self-FGFR-1 were detected by Western blotting and ELISA, respectively. The anti-FGFR-1 antibody-producing B cells (APBCs) were detected by enzyme-linked immunospot (ELISPOT) assay. Eighteen days after inoculation of tumor cells, the tumor volume was significantly smaller in cFR-1-immunized group than in mouse FGFR-1 (mFR-1) immunized group and normal saline (NS) control group (P<0.05), and the survival time was signifi- cantly longer in cFR-1-immunized group than in the control groups (P<0.01). MVD was significantly lower in cFR-1-immunized group than in mFR-1-immunized group and NS group (16.8 ±5.6 vs 64.6±1.8 and 59.6±8.7, P<0.01). Antibodies against self-FGFR-1 were found in mFR-1-immunized group, the major antibody subclasses were IgG1 and IgG2b. Compared with the two control groups, the numbers of APBCs in cFR-1-immunized group were significantly increased (P<0.01) These re- sults demonstrated that the cFR-1-related anti-angiogenesis protein vaccine could induce the produc- tion of auto-antibodies against self-FGFR-1, which futher inhibit angiogenesis and growth of solid tumor. 相似文献
4.
鸡成纤维细胞生长因子Ⅰ型受体胞外段原核表达载体的构建及表达鉴定 总被引:2,自引:0,他引:2
目的构建重组原核表达载体以获得鸡成纤维细胞生长因子Ⅰ型受体(FGFR-1)胞外段活性蛋白,为进一步研制FGFR-1蛋白质肿瘤疫苗打下基础。方法利用RT—PCR技术,从鸡胚肝中扩增出鸡的FGFR-1胞外段基因的cD—NA,用内切酶消化后插入原核表达质粒pQE30中。经过琼脂糖凝胶电泳和测序鉴定后,体外转化大肠埃希菌,用RT—PCR和免疫印迹方法鉴定是否能够正确表达,同时利用Ni—NTA琼脂柱层析法纯化复性重组蛋白。结果琼脂糖凝胶电泳和测序鉴定证实PCR扩增的cDNA及构建的重组原核表达质粒pQE30-FGFR-1正确,并在大肠埃希菌中正确表达。经纯化后,进行SDS-PAGE电泳显示得到1条分子量约40ku的蛋白质条带。结论成功构建鸡FGFR-1胞外段原核表达载体并获得重组活性蛋白。 相似文献
5.
目的:研究重组人碱性成纤维细胞生长因子(rhbFGF)对急性心肌梗死大鼠缺血心肌血管再生的作用,探讨通过心肌缺血区小血管再生治疗冠心病的新途径。 方法:制备急性心肌梗死大鼠模型,60只大鼠随机分为心肌梗死模型组、rhbFGF高剂量组(50 mg•L-1)、rhbFGF低剂量组(25 mg•L-1)和假手术组;造模前心肌内多点注射rhbFGF。24 h、2周和4周后利用形态学和组织学方法测定各组心肌梗死面积,并进行缺血心肌微血管密度和病理组织学检查。结果:大鼠急性心肌梗死24 h、2 和4周后,rhbFGF高、低剂量组心肌梗死面积缩小,与模型组比较差异有显著性(P<0.05);2和4周后,rhbFGF高、低剂量组血管生成增加,与模型组及假手术组比较差异有显著性(P<0.01或P<0.05);24 h、2和4周后,病理切片HE 染色,模型组显示梗死区心肌细胞水肿,心肌纤维断裂,部分心肌细胞溶解,炎细胞浸润;rhbFGF高、低剂量组梗死区亦出现心肌细胞水肿,少见心肌纤维断裂、心肌细胞溶解。结论: rhbFGF有促进缺血心肌血管再生,缩小急性心肌梗死大鼠心肌梗死面积的作用。 相似文献
6.
目的:探讨人脑膜瘤碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达与肿瘤血管生成和细胞增殖能力的关系.方法:应用免疫组织化学方法检测了38例脑膜瘤组织bFGF表达,分析其与肿瘤微血管形成及细胞增殖能力的关系.结果:bFGF阳性表达率和表达强度在良性、非典型和间变型脑膜瘤间均无明显差异(P>0.05).良性与非典型脑膜瘤微血管密度(MVD)值差异不显著,而间变型脑膜瘤MVD值明显高于前二者(P<0.01).bFGF表达阳性与表达阴性肿瘤的MVD值差异无显著意义.三类脑膜瘤bFGF表达分值与MVD值及与PCNA LI均不相关(P>0.05).结论:未发现脑膜瘤bFGF表达与血管生成存在明显的关系,在脑膜瘤血管生成和细胞增殖能力中bFGF的作用可能是不明显的. 相似文献
7.
The expression of basic fibroblast growth factor (bFGF) and fibroblast growth factor receptor-1 (FGFR-1) in human meningiomas and the relationships between their expression and the tumors‘ histological features and angiogenesis were investigated by means of immunohistochemical technique. The expression of bFGF and FGFR-1 was detected by antibody of bFGF or FGFR-1.The tumors‘ angiogenesis was evaluated by microvascular density (MVD) and, which was observed by use of CD34-antibody immunohistochemically. The results showed that there were varied degrees of the expression of bFGF and FGFR-1 proteins in meningiomas. The expression was correlated with the tumors‘ histological characters and angiogenesis. It was concluded that bFGF and FGFR-1 might play important roles in meningiomas‘ angiogenesis and proliferation. The expression positive rate of bFGF and FGFR-1 may provide an indication of evaluating the histological and malignant degree of the tumor. 相似文献
8.
目的:探讨成纤维细胞生长因子Ⅰ型受体(FGFR1)在乳腺浸润性小叶癌中的表达情况和对血管及淋巴管生成的影响。方法:采用免疫组织化学染色检测FGFR1在45例乳腺浸润性小叶癌、40例乳腺浸润性导管癌中的表达,同时采用CD34和D2-40双标免疫组织化学染色分别标记血管和淋巴管,检测乳腺浸润性小叶癌的微血管密度和微淋巴管密度。结果:乳腺浸润性小叶癌的RGRR1表达阳性率比乳腺浸润性导管癌高,其染色强度也比乳腺浸润性导管癌强,差异均具有统计学意义(P〈0.05);FG—FR1在乳腺浸润性小叶癌中的阳性表达与微血管密度相关(P〈0.05),而与微淋巴管密度无关(P〉0.05)。结论:初步推测FGFR1的过表达与乳腺浸润性小叶癌的发生有关,FGFR1的过表达能促进癌组织中的血管生成。 相似文献
9.
成纤维细胞生长因子及受体在肾小管间质纤维化过程中的表达 总被引:1,自引:0,他引:1
徐曼 《重庆医科大学学报》1999,24(3):239-241
利用免疫组织化学及原位杂交技术观察30例肾间质纤维化模型大鼠,探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFG)及受体(FGFR-1)与肾小管间质纤维化的关系。结果显示大鼠模型中损伤的肾小管上皮过度表达bFGF、FGFR-1,且合成Ⅲ型胶元;肾间质细胞广泛表达bFGF和FGFR-1,而且此表达程度和间质细胞核增殖及小管间质Ⅲ型胶元沉积程度一致.本实验证实肾小管损伤刺激bFGF、FGFR-1的分泌,提示bFGF可能通过自分泌和(或)旁分泌机制促进肾小管上皮的再生修复、间质细胞的增殖及Ⅲ型胶元的合成,从而促进肾小管间质纤维化的形成。 相似文献
10.
目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor,bFGF)及成纤维生长因子受体1(fibroblast growth factor receptors,FGFR1)在肺鳞癌组织中的表达及临床意义,并分析bFGF与FGFR1两者表达之间的联系。方法用免疫组织化学方法( Ultra Sensitive SP法)检测136例肺鳞癌和115例正常肺组织中bFGF、FGFR1的表达。通过单因素分析对9项潜在的可能影响肺鳞癌组织中bFGF、FGFR1表达的临床病理因素进行统计学分析。结果 bFGF、FG_FR1在正常肺组织中均不表达;肺鳞癌组织中bFGF、FGFR1的阳性表达率分别为72.06%和80.15%,与正常肺组织比较差异有统计学意义(P〈0.05)。 bFGF、FGFR1两者共同阳性表达率为52.94%,其表达阳性程度呈显著正相关(P〈0.05)。 bFGF表达与肺癌分化程度、淋巴结癌转移、血管浸润和远处器官癌转移有关(P〈0.05),FGFR1表达与肺癌分化程度、淋巴结癌转移、TNM分期、血管浸润和远处器官癌转移有关(P〈0.05)。结论联合检测bFGF、FGFR1有助于肺癌病理分级、分期和预后判断。 bFGF、FGFR1可作为肺癌早期诊断、判定恶性程度和判断预后的新指标。 相似文献
11.
目的 分析血管内皮生长因子(VEGF)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、分化抑制因子1(Id1)在脑胶质瘤中的表达及与血管生成的相关性。方法 选取2018年4月—2020年5月湖北省中西医结合医院脑胶质瘤患者150例作为病例组。另选取该院因脑外伤后行颅内减压术的50例非肿瘤患者(正常脑组织)作为对照组。对比两组患者血清VEGF、MCP-1、Id1水平,绘制ROC曲线分析血清VEGF、MCP-1、Id1水平预测脑胶质瘤发生的价值;比较不同级别脑胶质瘤患者血清VEGF、MCP-1、Id1水平及肿瘤微血管密度(MVD)值,Pearson法分析血清VEGF、MCP-1、Id1水平与MVD值的相关性。结果 病例组血清VEGF、Id1水平较对照组高,MCP-1水平较对照组低(P <0.05)。ROC曲线结果显示,血清VEGF、MCP-1、Id1水平及3者联合预测胶质瘤发生的AUC分别为0.873(95%CI:0.823,0.923)、0.776(95%CI:0.699,0.853)、0.898(95%CI:0.850,0.946)、0.908(95%CI:0.851,0.978)。高级别组... 相似文献
12.
The purpose of this study was to evaluate the effect of bone marrow mesenchymal stem cells (MSCs) transfected with the basic fibroblast growth factor (bFGF)-expressing recombinant adeno-associated virus vector (rAAV2-bFGF), on early angiogenesis of calvarial defects in rats. The MSCs were cultured and transfected with rAAV2-bFGF after differential adherence isolation. The transfection efficiency was detected by RT-PCR and Western blotting. The transfected MSCs were compounded with poly-DL-lactide/hydroxyapa... 相似文献
13.
目的构建小鼠FGFR—1胞外段基因重组原核表达载体pQE30/FGFR—1,并在大肠杆菌JM109中表达。方法利用RT—PCR技术.从胚肝中扩增出小鼠的FGFR—1胞外段基因的cDNA,用内切酶消化后插入原核表达质粒pQE30中。经琼脂糖凝胶电泳和测序鉴定后,体外转化大肠杆菌,用RT—PCR和免疫印迹方法鉴定,同时利用Ni—NTA琼脂柱层析法纯化复性重组蛋白。结果琼脂糖凝胶电泳和测序鉴定证实PCR扩增的cDNA及构建的重组原核表达质粒pQE30一FGFR—1正确,并在大肠杆菌中正确表达。经纯化后,进行SDS—PAGE电泳显示得到1条分子量约40kDa的蛋白质条带。结论成功构建小鼠原核表达载体pQE30/FGFR—1并在大肠杆菌中有效表达,纯化后获得具有活性的重组蛋白质。 相似文献
14.
人参皂苷Rg1对急性心肌梗死大鼠血管新生的作用 总被引:3,自引:0,他引:3
目的:研究人参皂苷Rg1对急性心肌梗死(AMI)大鼠血管新生的影响及其机制。方法:建立Wistar大鼠急性心肌梗死模型,分假手术组、急性心肌梗死对照组、人参皂苷Rg1低剂量治疗组(1mg/kg)和高剂量治疗组(5mg/kg),于术后3,7,10,14d测定血清心肌酶、心肌梗死面积、梗死区微血管密度,RT-PCR法检测梗死区心肌组织血管内皮生长因子(VEGF)mRNA的表达。结果:心肌梗死组织中各时段假手术组的微血管密度、VEGFmRNA表达均低于手术各组(P<0.01);治疗组心肌酶及心肌梗死面积明显降低(P<0.05),梗死区血管生成数量稳定持续增加,与对照组有显著差异(P<0.01);心肌梗死后VEGFmRNA表达随缺血时间的延长(3,7,10d组)有增高趋势,治疗组明显升高(P<0.01),14d时VEGFmRNA的增长出现停止或下降。结论:严重缺血急性期可刺激心肌组织产生大量的VEGF起自我保护作用,人参皂苷Rg1增加其表达,并可刺激心肌梗死区的血管生成。 相似文献
15.
目的 探讨成纤维细胞生长因子受体1(fibroblast growth factor receptor 1, FGFR1)与Klotho蛋白在慢性肾衰竭继发性甲状旁腺功能亢进症(secondary hyperparathyroidism, SHPT)患者甲状旁腺细胞不同增生类型中的表达水平及临床意义。方法 选取在苏州九龙医院肾内科住院行甲状旁腺全切术的SHPT患者25例为治疗组,以同期内该院体检中心的健康志愿者10例作为对照组。采用酶联免疫吸附技术测定对照组及治疗组患者手术前后血清磷、血清全段甲状旁腺激素(intact parathyroid hormone, iPTH)、成纤维细胞生长因子-23(fibroblast growth factor-23, FGF-23)和Klotho指标。治疗组病例依据手术切除甲状旁腺大小形态,对甲状旁腺增生参差明显的患者进行亚组分析,分为无明显增生组、弥漫性增生组和结节性增生组3个亚组,采用光镜及电镜观察其组织改变,并采用实时定量荧光Real-time PCR法检测各组甲状旁腺组织中的FGFR1和KLotho mRNA的表达,采用Western blot法检测其FGFR1和Klotho水平。结果 治疗组血清FGF-23及血磷水平明显高于对照组,血清Klotho水平明显低于对照组。切除甲状旁腺组织的总质量与iPTH呈正相关。术后48 h治疗组血清iPTH较术前明显下降,术后48 h治疗组血清FGF-23水平与术前相比无明显下降。亚组分析显示,无明显增生组的甲状旁腺组织中FGFR1和Klotho蛋白水平高于弥漫性增生组和结节性增生组;相对于弥漫性增生组,结节性增生组的甲状旁腺组织中FGFR1和Klotho蛋白水平更低;各亚组中FGFR1和Klotho mRNA表达差异无统计学意义。结论 尿毒症患者增生的甲状旁腺组织中FGFR1和Klotho 蛋白表达明显减少,可能在肾性继发性甲状旁腺功能亢进的发生、发展过程中起重要作用。 相似文献
16.
目的:研究猪endoglin胞外段重组蛋白(pEDG)作为异种蛋白疫苗是否能够诱导小鼠产生抗自身endoglin的免疫反应,从而抑制endoglin相关的肿瘤血管生成,进而抑制肿瘤的生长.方法:观察免疫治疗的荷瘤小鼠肿瘤体积和生存情况,用免疫组化方法(抗CD31)观察肿瘤组织血管生长并计算肿瘤微血管密度,用免疫荧光方法了解肿瘤血管自身抗体沉积,用Western blot和ELISA方法检测荷瘤小鼠免疫治疗后的血清是否含有抗自身endoglin的抗体和抗体亚型,用ELISPOT方法检测荷瘤小鼠脾脏中分泌抗endoglin抗体的B淋巴细胞.结果:与同种重组endoglin蛋白和非疫苗对照组二个对照组相比,重组pEDG蛋白疫苗主动免疫治疗可以明显抑制小鼠肿瘤的生长,小鼠生存时间明显延长,肿瘤组织中血管生成明显减少,肿瘤组织血管表面有自身抗体沉积,血清中含有抗自身endoglin的抗体,抗体亚型主要为IgG1和IgG2b.此外,免疫治疗组小鼠脾脏中还发现明显增多的分泌抗自身endoglin抗体的B淋巴细胞.结论:pEDG疫苗诱导抗自身endoglin抗体的产生,从而抑制肿瘤血管生成和肿瘤生长.这种主动免疫治疗的方法有望成为治疗肿瘤的新策略. 相似文献
17.
目的 构建人p43/AIMP1蛋白与谷胱甘肽转移酶(GST)重组的融合蛋白原核表达载体并进行表达纯化,通过GST-pull down方法验证其与神经中间丝轻链(NF-L)的体外直接相互作用.方法 以重组质粒pcDNA3.1-p43为模板,扩增p43/AIMP1基因,产物经纯化回收后与原核表达载体pGEX4T-1连接构建成新载体GST-p43/AIMP1,经鉴定完全正确后转化大肠埃希菌B.21(DE3),通过异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达,并纯化获得目的蛋白;将myc-NF-L体外转染HEK293T细胞,利用GST pull-down原理和方法验证人p43蛋白与神经中间丝轻链蛋白NF-L之间的相互作用.结果 酶切鉴定和测序结果显示,成功构建了GST-p43/AIMPI融合蛋白原核表达载体;考马斯亮蓝染色和Western blotting结果显示,成功获得有生物活性的GST-p43/AIMPI融合蛋白;GST pull-down实验结果证实,p43/AIMP1与NF-L存在直接相互作用.结论 获得有生物活性的GST-p43/AIMP1蛋白,并成功应用GST pull-down方法证实p43/AIMP1与NF-L在体外存在直接的相互作用. 相似文献
18.
目的 探讨慢病毒介导成纤维生长因子受体1(FGFR1)沉默对肺癌细胞增殖和凋亡的影响。
方法 构建慢病毒表达载体LV-shFGFR1,对其进行包装和病毒颗粒制备。将A549 肺癌细胞分为干扰组、
空载体组及对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应和Western blotting 检测各组细胞FGFR1 mRNA 和蛋白
相对表达量,MTT 比色法检测细胞增殖情况,流式细胞术和Hoechest 染色检测细胞凋亡情况。结果 ① 3 株
肺癌细胞中,A549 细胞的FGFR1 mRNA 相对表达量高于H3255 和A-427 细胞(P <0.05)。② 3 组A549 细
胞中FGFR1 mRNA 和蛋白的相对表达量比较,差异有统计学意义(P <0.05);空载体组与对照组比较,差异
无统计学意义(P >0.05);干扰组低于对照组(P <0.05)。③干扰组、空载体组、对照组0、12、24、48 和
72 h 的A549 细胞增殖情况比较,不同时间点、各组间、随时间变化趋势均有差异(P <0.05)。④ 3 组A549
细胞凋亡率比较,差异有统计学意义(P <0.05);空载体组与对照组比较,差异无统计学意义(P >0.05);干
扰组高于对照组(P <0.05)。结论 慢病毒介导FGFR1 沉默抑制A549 肺癌细胞增殖,同时促进肺癌细胞凋亡,
提示FGFR1 可能参与肺癌细胞的发生、发展过程。 相似文献
19.
目的 构建小鼠成纤维细胞生长因子受体1/巨噬细胞炎性蛋白3a-Fc融合基因(FGFR1/MIP3a-Fc)的真核表达质粒,并在293T细胞中的表达。方法 设计合成FGFR1/MIP3a融合基因引物,用PCR方法扩增获得FGFR1/MIP3a基因片段,用内切酶消化后插入pc DNA3.1(+)/Fc(Mouse Ig G2a)质粒中,构建FGFR1/MIP3a-Fc融合基因表达质粒;经PCR鉴定、酶切鉴定以及测序鉴定后,将该融合基因表达质粒瞬时转染293T细胞,用ELISA法检测其在293T细胞的表达。结果 经PCR、酶切鉴定以及测序证实,FGFR1/MIP3a-Fc融合基因表达质粒构建成功;ELISA检测FGFR1/MIP3a-Fc融合基因表达质粒能够在293T细胞中表达。结论 FGFR1/MIP3a-Fc融合基因表达质粒构建成功,该质粒能够在293T细胞中表达。 相似文献
20.
目的 探讨血管内皮生长因子受体-1(Flt-1)、血小板衍生生长因子受体(PDGFR)、碱性成纤维生长因子受体(bFGFR)和环氧合酶-2(COX-2)与胃癌生物学行为的关系以及受体与COX -2的相关性.方法 选择80例手术切除的胃癌标本为观察组,40例慢性非萎缩性胃炎组织为对照组,应用免疫组织化学方法检测上述组织中Flt-1、PDGFR、bFGFR及COX-2的蛋白表达情况.结果 Flt-1、PDGFR、bFGFR及COX-2在胃癌患者中的阳性率分别为52.5%、48.8%、50.7%和52.5%.对照组的阳性率分别为7.5%、2.5%、5.0%和0%,差异均有统计学意义(P<0.01),它们的表达与肿瘤的分期、浸润、淋巴及血道转移呈正相关(P<0.05),与肿瘤的大小、分化程度无关(P>0.05).3种受体与COX-2的表达成正相关(P<0.01).4种指标均阳性和4种指标均阴性者与淋巴结及远处转移差异有统计学意义(P<0.01).结论 胃癌组织中Flt-1、PDGFR、bFGFR和COX-2的阳性表达可作为胃癌生长、转移及预后的重要判定指标,它们在胃癌的发生、浸润、转移中可能存在相互诱导,相互协同或叠加作用. 相似文献