CD33单克隆抗体GO在白血病治疗中的应用

CD33抗原大量表达于急性髓细胞白血病（AML）细胞表面，但在其它类型的急性白血病中也有表达，可成为靶向免疫治疗的目标。GO（Gemtuzumab ozogamicin）是人源化抗CD33单克隆抗体与强效抗肿瘤抗生素-乙酰刺胞霉素偶联物，与白血病细胞表面CD33抗原结合，进入细胞后释放刺胞霉素，对白血病细胞有明显的杀灭作用，从而单独或联合其它化疗药物治疗白血病。GO的耐受性一般较好，但肝脏毒性及肝静脉阻塞综合症等毒副作用值得关注。     

系列特异性抗原与急性髓性白血病的相关性研究

目的：探讨细胞系列特异性抗原在急性髓性白血病（AML）中的表达及临床意义。方法采用CD45/SSC双参数设门流式细胞术检测120例A M L患者幼稚细胞表面及胞浆抗原表达。结果在A M L中细胞膜抗原CD13、CD33和CD117表达最常见，分别为95．0％、95．0％和79．2％， CD117特异性高于CD13和CD33（ P ＜0．01）；胞浆抗原cM PO敏感性和特异性与CD117、胞浆抗原CD19敏感性与cCD79a比较差异均无统计学意义（ P ＞20．05），但cCD79a的特异性高于CD19（ P ＜0．01）。结论多参数流式细胞数检测细胞系列特异性胞浆抗原表达是诊断急性髓性白血病的一项可靠技术。     

MRL-lpr狼疮小鼠B细胞表面FcγRⅡB的表达及其意义

目的：探讨MRL-lpr狼疮小鼠模型中B细胞表面Fcγ受体ⅡB（FcγRⅡB）的表达情况及其病理意义。方法：构建MRL-lpr狼疮小鼠模型,在4、8、12、20周龄时检测外周血总IgG、抗dsDNA抗体、抗ribosomal P0抗体、抗smRNP抗体含量,分析狼疮小鼠的疾病活动度;流式检测20周龄的MRL-lpr狼疮小鼠外周血及脾脏B细胞表面FcγRⅡB及CD69表达情况,分析FcγRⅡB的表达情况与B细胞活化的关系。结果：随着周龄的增加,MRL-lpr狼疮小鼠外周血总IgG及抗dsDNA抗体、抗ribosomal P0抗体、抗smRNP抗体含量逐渐升高;MRL-lpr狼疮小鼠外周血及脾脏B细胞表面FcγRⅡB表达丰度明显降低（均有P＜0.05）,CD69表达水平明显升高（P＜0.05）,且正常C57BL/6小鼠脾脏CD69+的活化B细胞FcγRⅡB表达上调,但MRL-lpr狼疮小鼠脾脏CD69+的活化B细胞FcγRⅡB表达无明显变化。结论：MRL-lpr狼疮小鼠B细胞表面FcγRⅡB的表达与B细胞的活化有关,FcγRⅡB的表达异常可能是MRL-lpr狼疮小鼠B细胞异常活化的分子机制之一。     

舟山地区94例急性白血病免疫分型分析

目的研究舟山海岛地区急性白血病表面抗原表达和免疫亚型分布情况。方法采用CD25侧散射（SSC）设门方法对94例白血病患者进行白血病细胞表面分化抗原分析。结果94例急性白血病分型可分为3型：急性淋巴细胞白血病（ALL）占31．91％（30例）,急性髓细胞白血病（AML）占65．96％（62例）,急性杂合型白血病占2．13％（2例）。在62例AML中CD13和/或CD33最常见,有20例表达淋系标记：30例ALL中CD3、CD19最常见,有15例表达髓系标记。结论免疫分型能提高急性白血病诊断的准确性,对急性白血病的治疗和判断预后有重要作用。     

流式细胞术检测成人急性髓细胞白血病P糖蛋白表达的临床意义

应用P糖蛋白（Pgp）单抗UIC2及流式细胞术间接免疫荧光法检测75例初治成人急性髓细胞白血病（AML）Pgp表达，并探讨其临床意义。结果23例（30．7％）表达Pgp，19例（82．6％）Pgp AML共表达CD34．Pgp表达与初诊性别、年龄、肝脾肿大、外周血象等无明显相关性．M3中未见Pgp表达。伴t（8；21）及t（15；17）染色体异常的AMLPgp表达低。Pgp 及Pgp－AML之完全缓解率分别为26．1％及76．9％（P＜0．05）．CD34 与CD34－AML的CR率分别为42．9％及84．8％（P＜0．05），Pgp ／CD34 与Pgp-／CD34－AML的CR率分别为15．8％及86．2％（P＜0.05）。结果表明Pgp及CD34是成人AML预后差的重要原因。     

同源异型盒基因5在急性髓细胞性白血病中表达的研究

目的研究同源异型盒基因5（HOXA5）在急性髓细胞性白血病（AML）中表达情况。方法使用荧光定量聚合酶链式反应法检测108例 AML 中 HOXA5表达，分析 HOXA5表达与 AML 的相关性。结果 HOXA5在初诊 AML 与正常人群中，表达差异无统计学意义（P ＞0.05）；在原发性 AML 和继发性 AML 患者中，表达差异无统计学意义（P ＞0.05）；在初次诱导治疗完全缓解和未缓解患者中，表达差异有统计学意义（ P ＜0.05）；在年龄≥60岁和＜60岁患者中，差异无统计学意义（P ＞0.05）；男性与女性AML 患者相比，HOXA5表达差异有统计学意义（P ＜0.05）。HOXA5表达与 CD34、HLA-DR、CD33、WBC 计数、LDH 的无相关性（P ＞0.05），与骨髓原始细胞数有相关性（P ＜0.05）。结论 HOXA5高表达可造成 AML 较差的治疗反应。     

髓性白血病骨髓单个核细胞表面CD40、CD40L的表达及其意义

目的 研究共刺激分子CD40、CD40L在人急、慢性髓性白血病治疗前后骨髓单个核细胞表面的表达特点,探讨其与临床疗效的关系.方法 应用免疫荧光标记及流式细胞术（FACS）检测了37例急性髓性白血病及20例慢性髓性白血病患者治疗前后骨髓单个核细胞表面共刺激分子CD40、CD40L的表达.另取8例健康人骨髓作为正常对照组.结果 ①治疗前急性髓性白血病（AML）患者中,除急性早幼粒细胞白血病（M3）外,CD40表达均低于正常对照组（P＜0.05）;（②治疗后完全缓解（CR）和部分缓解（PR）患者CD40较其治疗前显著增高（P＜0.05）,CR患者接近对照者,两未缓解（NR）患者CD40的表达差异无统计学意义（P＞0.05）;③CD40在慢性粒细胞白血病骨髓单个核细胞上的表达与正常对照差异无统计学意义（P＞0.05）;④所有急、慢性髓性白血病患者及正常对照骨髓单个核细胞上的CD40L均存在表达缺陷,差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 CD40是参与急性髓性白血病（AML）发病和抗白血病免疫反应的重要共刺激分子,其表达与白血病分化程度及分型有关,CD40表达异常可能是AML发病机制之一,且与临床疗效密切相关;调节单个核细胞上CD40的表达,纠正AML白血病患者细胞免疫功能缺陷,可能是免疫基因治疗人类急性髓性白血病的重要手段之一,具有一定的临床应用价值.     

系统性红斑狼疮患者Fas和CD40L表达的初步研究

目的探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者凋亡调节蛋白受体Fas及共刺激分子CD40L的表达情况及其相互之间的调节。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测SLE患者和正常人血清sFas和sCD40L的水平并分析两者之间的相关性;同时分离10例SLE患者和10例正常对照的外周血淋巴细胞：①将细胞培养48 h后,采用流式细胞仪检测T细胞亚群表面Fas及CD40L的表达情况;②在培养过程中分别加入抗FasL抗体阻断Fas信号及抗CD40L抗体阻断CD40L信号后,观察T细胞亚群表面CD40L及Fas的表达。结果①SLE患者血清sFas和sCD40L平均水平分别为4.18μg/L和5.87μg/L,显著高于正常对照组2.27μg/L和2.31μg/L,且SLE患者血清sFas活动期高于稳定期（P〈0.01或P〈0.05）;sFas、sCD40L水平与SLEDAI（疾病活动指数）之间存在一定的正相关性（r=0.688,r=0.253,P均〈0.05）,但sFas与sCD40L水平之间未显示明显相关（r=0.201,P〉0.05）。②经细胞培养后,SLE患者CD4（＋）和CD8（＋）T细胞表面Fas表达增加,与正常对照组比较,差异有显著性（P〈0.01或P〈0.05）;SLE患者CD4（＋）和CD8（＋）T细胞表面CD40L表达增加,与正常对照组比较,差异有显著性（P均〈0.05）。③SLE患者CD4（＋）及CD8（＋）T细胞上Fas与CD40L表达均呈正相关关系（r=0.311和r=0.517,P均〈0.05）。④加入抗FasL抗体阻断后,CD4（＋）和CD8（＋）T细胞表面CD40L表达下降,与阻断前比较,差异有显著性（P〈0.05）;加入抗CD40L抗体阻断后,CD4（＋）和CD8（＋）T细胞表面Fas表达与阻断前比较差异无显著性（P〉0.05）。结论SLE患者血清sFas和sCD40L水平升高且呈正相关关系;T细胞亚群表面Fas及CD40L高表达且呈正相关关系;T细胞上Fas的表达调控CD40L的表达。说明凋亡调节蛋白Fas及共刺激分子CD40L可能共同参与SLE的发病过程。     

急性髓细胞白血病与CD25表达的相关性探讨

目的：探讨CD25与急性髓细胞白血病（acute myeloid leukemia,AML）的常见免疫表型标记间的相关性,及CD25与 FLT3-ITD 基因的关系。方法通过流式细胞术检测 CD7、CD117、CD33、CD34、CD38、cyMPO、CD13、CD36、CD56、CD11b、CD19、CD16、CD14、CD64及白介素2三条受体链CD25（α链）、CD122（β链）、CD132（γ链）在36例AML患者骨髓表达,运用PCR技术检测本组患者FLT3-ITD基因的表达。结果36例AML患者中, CD25＋表达率为13.89%（5/36）,在AML-M2组为12.5%（1/8）、AML-M4组为18.18%（2/11）、AML-M5组为20%（2/10）, CD25＋表达率在各组间差别无统计学意义（P＞0.05）。表达CD7、CD117、CD33、CD34、CD38、cyMPO、CD13、CD36、CD56、CD11b、CD19、CD16、CD14、CD64、CD122、CD132单克隆抗体的骨髓原始细胞百分比在CD25＋AML-M2组和CD25-AML-M2组间、CD25＋AML-M4组和CD25-AML-M4组间、CD25＋AML-M5组和CD25-AML-M5组间无统计学差异（P＞0.05）。PCR结果显示,7例AML患者出现FLT3-ITD突变基因,5例CD25＋AML患者组中FLT3-ITD＋者为3例,CD25＋AML合并FLT3-ITD＋率为60%,高于CD25-AML组（P＜0.05）。结论（1）CD25在AML患者中可出现阳性表达,但阳性率较低,CD25与AML患者的FAB亚型和常见的髓系免疫表型标记无明显相关性;（2）CD25＋AML患者合并FLT3-ITD基因突变率较高,明确CD25与FLT3-ITD基因的相关性有一定临床意义。     

急性髓系白血病的免疫分型特点

目的：探讨急性髓系白血病（AML）免疫分型的特点。方法：采用流式细胞术对208例AML患者进行白血病免疫分型检测。结果：①表达率最高的AML抗原为CD33（99．5％）、CD117（98．6％）、CD123（97．6％）、CD13（92．3％）及MPO（90．9％）。②伴淋系抗原表达者以CD7（47．1％）最高,其次为：CD2（13．9％）、CD4（13．5％）及CD19（4．3％）。③AML微分化型（M0）和急性巨核细胞白血病（M7）表达2个以上的髓系抗原,AML其他各型均能表达3个以上的髓系抗原;CD19仅表达于急性粒细胞自血病部分分化型M2b型（M2b）;CD2和CD9仅表达于急性早幼粒细胞白血病（M3）;CD4和CD14仅表达于急性粒单核细胞白血病（M4）和急性单核细胞白血病（M5）。结论：①CD33、CD117、CD123、CD13及MPO为髓系最敏感的抗原。②CD2、CD4、CD9、CD14及CD19在AML诊断上具有重要意义。     

47例急性髓系白血病免疫分型特点分析

目的使用流式细胞术分析急性髓系白血病（AML）的特异性免疫表型。方法收集我院血液科2009年4月-2012年7月47例确诊的急性髓系白血病病例,使用流式细胞仪进行免疫分型,统计AML患者白血病细胞各免疫表型表达阳性率。结果在47例AML患者中,免疫表型以CD13、CD33、cMPO、CD117的表达最常见,表达率分别是91．49％、8085％、70．21％、63．83％。结论CD13、CD33、cMPO、CD117是急性髓系白血病特异性较高的免疫标记,有助于急性髓系白血病的诊断．     

CD33单克隆抗体GO在白血病治疗中的应用

CD33抗原大量表达于急性髓细胞白血病(AML)细胞表面,但在其它类型的急性白血病中也有表达,可成为靶向免疫治疗的目标。GO(Gemtuzumab ozogamicin)是人源化抗CD33单克隆抗体与强效抗肿瘤抗生素-乙酰刺胞霉素偶联物,与白血病细胞表面CD33抗原结合,进入细胞后释放刺胞霉素,对白血病细胞有明显的杀灭作用,从而单独或联合其它化疗药物治疗白血病。GO的耐受性一般较好,但肝脏毒性及肝静脉阻塞综合症等毒副作用值得关注。     

免疫表型及非髓系分化抗原表达分析： 对急性髓细胞白血病的诊断和预后判定有应用价值

目的 探讨急性髓细胞白血病（AML）免疫表型和非髓系分化抗原表达特征及其临床应用价值。方法 采用 BDFACSCalibur流式细胞仪对109例AML患者进行免疫表型检测,分析AML免疫表型、非髓系分化抗原表达的特点及与预后疗效完全缓解（CR）率的关系。结果 免疫表型显示AML细胞髓系分化抗原阳性率由高到低依次为CD13、CD117、CD33、MPO、CD15,其中CD117、CD13、CD33、MPO阳性率差异无统计学意义（P>0.05）,并且均高于CD15阳性率（P<0.05）;AML细胞非髓系分化抗原CD9、CD200、CD56、CD7阳性率依次降低,均高于CD25、CD19、CD2、CD10、CD4、CyCD79a、CyCD3阳性率（P<0.05）;109例AML中CD7、CD34、CD56、CD25呈阳性的患者CR率均低于阴性患者（P<0.05）;MPO、CD19呈阳性的患者CR率均高于阴性患者（P<0.05）;伴AML1-ETO阳性表达的15例AML-M2b患者中CD56阳性组1疗程CR率低于CD56阴性组,CD56阳性组1年内复发率高于CD56阴性组（P<0.05）。结论 免疫表型和非髓系分化抗原表达分析对AML的诊断及预后判定有重要临床意义,是AML诊疗的主要依据之一。     

T细胞亚群及共刺激分子表达与系统性红斑狼疮免疫病理的关系

目的：探讨T细胞亚群及共刺激分子表达与系统性红斑狼疮免疫病理的关系。方法；采用免疫荧光标记技术和流式细胞仪检测技术对系统性红斑狼疮（SLE）患者和正常人外周血T细胞亚群及外周血单个核细胞膜表面共刺激分子的表达进行分析。结果：（1）与正常人相比，SLE患者CD3^ ,CD4^ T细胞亚群显著减少，CD4／CD8比例失调，双标记CDr^ CD28^ ,CD8^ CD28^ T细胞亦显著减少；（2）患者共刺激分子CD28表达显著降低，4－1BB分子表达显著增高；（3）患者T细胞CD4／CD8与抗核抗体呈负相关，共刺激分子4－1BB与抗核抗体，尿蛋白呈正相关，而与CD4^ CD28^ T细胞亚群呈负相关。结论：T细胞亚群及共刺激分子表达异常在系统性斑狼疮发病机制中可能具有重要作用。     

β淀粉样蛋白诱导大鼠小胶质细胞脂多糖受体CD14和肿瘤坏死因子-αmRNA的表达

目的：研究不同浓度的p淀粉样蛋白（Aβ1-42）诱导大鼠小胶质细胞脂多糖受体CD14和肿瘤坏死因子-αLmRNA表达的变化。方法：小胶质细胞株复苏培养后分为2组：Aβ1-42组和抗CD14加Aβ1-42组。抗CD14加Aβ1-42组使用抗CD14抗体拮抗CD14的表达，再分别用不同浓度的Aβ1-42（0、62．5nmol／L、125nmol／L、250nmol／L）进行干预，2组均在Aβ1-42干预2h后用RT—PCR法检测CD14及TNF—αmRNA表达的量。结果：不同浓度的Aβ1-42干预小胶质细胞2h后，62．5nmol／L与0nmol／L Aβ1-42组CD14mRNA的表达相比较，差异无统计学意义。当Aβ1-42浓度为125nmol／L和250nmol／L时，CD14mRNA的表达逐渐增加（P〈0．05）。使用CD14抗体后，抗CD14加Aβ1-42组中CD14mRNA的表达与Aβ1-42组比降低（P〈0．05）。Aβ1-42组TNF-αmRNA的表达随Aβ1-42的浓度增加而增加（P〈0．05），与Aβ1-42组相比，抗CD14加Aβ1-42组中TNF-αmRNA的表达在Aβ1-42浓度为125nmol／L开始明显受到抑制（P〈0．05）。结论：Aβ1-42诱导的小胶质细胞可通过脂多糖受体CD14使TNF-αmRNA的表达增加，且与Aβ1-42的作用浓度呈正相关。     

活动期狼疮肾炎外周血T、B淋巴细胞表面Fas及bcl-2表达的研究

目的：探讨活动期狼疮肾炎（lupus nephritis,LN)患者外周血中T、B淋巴细胞表面Fas及bcl-2表达的变化及其与T、B淋巴细胞凋亡变化的关系，淋巴细胞的凋亡改变对疾病活动度及肾功能的影响。方法：采用流式细胞仪对活动期LN患者外周血中T、B淋巴细胞表面Fas及bcl-2进行检测，同时测定T、B淋巴细胞的凋亡状态，分析其与LN肾功能变化，抗dsDNA疾病活动指标变化的相关性。结果：B淋巴细胞，CD8^ T细胞表面bcl-2表达明显高于正常对照组（P均＜0．01），CD4^ T细胞表面bcl-2表达降低（P＜0．05）。CD4^ ,CD8^ T细胞表面Fas表达高于正常对照组（P均＜0．05），B淋巴细胞表面Fas表达降低（P＜0．01）；B淋巴细胞凋亡百分率明显下降（P＜0．01），CD4^ T细胞百分率下降（P＜0．01），CD8^ T细胞百分率增加（P＜0．05）；LN肾功能的变化，体内抗dsDNA的增加与B淋巴细胞凋亡的减少，CD4^ T细胞的减少，CD8^ T细胞的增加均具有明显的相关性。结论：LN患者体内淋巴细胞凋亡的异常变化与淋巴细胞表面凋亡基因的异常表达相关，且在LN发生发展过程中具有重要作用。     

CD19、CD56、CD2在急性髓性白血病的表达

目的 探讨CD19、CD56、CD2在急性髓性白血病（AML）的表达情况及在微小残留病检测中的意义。方法 选择AML初发患者130例，采用三组四色荧光标记单克隆抗体组合（CD34/CD13/CD45/CD19、CD34/CD56/CD33/CD45和CD34/CD2/CD33/CD45），用多参数流式细胞术对初发AML病人骨髓细胞进行检测。结果 在AML中CD19阳性表达率为2.31%（3/130例），CD56为3.75%（3/80例），而CD2为1.25%（1/80例）；在急性早幼粒细胞白血病（M3）无表达。结论CD19、CD56、CD2在急性髓性白血病的表达率很低；CD56、CD2可作为AML微小残留病（MRD）检测的指标；CD19在AML微小残留病检测中无意义。     

急性髓细胞白血病患者CD96和CD123的表达及对预后的意义*

目的 检测CD96、CD123在急性髓细胞白血病（AML）患者中的表达，探讨其与AML疗效和预后的关系。方法 选取156例AML患者为观察对象，选取同期该院健康体检者150例作为对照组。采用流式细胞术检测CD96、CD123表达情况，并分析CD96、CD123表达与化疗疗效的关系。结果 AML患者CD96、CD123的阳性表达率与对照组比较，差异有统计学意义（P?<0.05）；AML患者中CD96、CD123阳性表达的缓解率均低于阴性表达者（P?<0.05）；AML患者中CD96、CD123阳性表达的生存率均低于阴性表达者（P?< 0.05）；AML患者中CD96、CD123阳性表达的化疗后感染、化疗后复发发生率均高于阴性表达者（P?<0.05）；AML患者中CD96、CD123阳性表达的中位生存期均低于阴性表达者（P?<0.05）。结论 CD96、CD123在AML中均有不同程度的表达，其阳性表达可能与原发耐药或复发进展有关，可作为判断AML患者预后的相关指标。     

FLT3-ITD 突变的急性髓系白血病免疫表型 及临床特征分析

目的 讨论FLT3-ITD 突变的急性髓系白血病（AML）的免疫表型及临床特征。方法 回顾性 分析2015 年6 月—2017 年6 月中国医科大学附属第四医院收治的FLT3-ITD+ 及FLT3-ITD- AML 组患者的 免疫表型、临床资料,并对两组患者化疗后临床结局及生存状况进行比较。结果 FLT3-ITD+ AML 组患者 CD56、CD33、CD11b 及CD7 表达高于FLT3-ITD- AML 组（P <0.05）,而CD34、CD117 表达低于FLT3- ITD- AML 组（P <0.05）。与FLT3-ITD- AML 组患者比较,FLT3-ITD+ AML 组患者外周血白细胞计数及骨 髓原始细胞比例升高（P <0.05）,而血红蛋白及血小板计数比较,差异无统计学意义（P >0.05）;FLT-ITD- AML 组患者总反应率高于FLT3-ITD+ AML 组（P <0.05）;FLT3-ITD- AML 组患者无病生存率和总生存率 高于FLT3-ITD+ AML 组（P <0.05）。FLT3-ITD+ AML 组患者完全缓解患者CD56、CD34、CD11b、CD7、 CD33 及CD117 的表达水平低于未缓解患者（P <0.05）。结论 FLT3-ITD+ AML 患者白血病细胞抗原表达 紊乱,外周血白细胞及骨髓原始细胞高,完全缓解率低,预后差,是AML 预后不良因素。AML 患者早期检测 FLT3-ITD 突变及免疫分型对于指导治疗、判断预后具有重要临床意义。     

CD44S和CD44V6在胃癌中的表达及意义

0引言CD44是细胞表面粘膜分子，可存在于人体多个部位，如造血细胞和上皮细胞等，主要参与细胞一细胞，细胞基质之间的粘附作用，可与透明质酸结合，可参与淋巴细胞归巢．最近研究表明，CD44可在多种肿瘤中有表达[1.2]，其多种变异体与肿瘤转移有关[3]．而CD44在胃良性病变（BGD）和胃癌（GC）中的变化，国内鲜见报道．采用免疫组织化学方法对BGD和GC组织中标准型CD44（CD44S）和变异体V6（CD44V6）的表达状况进行初步检测，旨在探讨CD44S及CD44V6在胃癌中的表达及其意义．1方法1．1标本BCD54例，其中浅表性胃炎（CSG）33例…