1,25二羟维生素D3在小鼠下颌骨矿化作用机制研究

目的:探讨1,25二羟维生素D3(1,25(OH)ZD3)在小鼠下颌骨矿化中的作用机制.方法:利用组织学、免疫组织化学和实时定量RT-PCR比较分析了6周龄野生V和1a化酶基因敲除(1 a(OH)ase4-/-)小鼠下颌骨矿化的差异.结果:与野生型小鼠相比,1α(OH)ase-/-_小鼠的类骨质的比例明显增加,骨钙素(...     

1，25-二羟维生素D3在口腔医学领域的研究进展

1,25-二羟维生素D3[1,25-（OH）2D3]的生物学效应是调节钙磷代谢,其受体在人体组织中分布广泛,人体内硬组织的形成,如骨骼、牙齿等与钙磷代谢密切相关。本文就1,25-（OH）2D3的生物学特性、其受体在口腔组织中的分布及其在口腔医学领域的研究进展做一综述。     

1,25二羟维生素D3缺乏对小鼠继发性牙本质生成、矿化和龋损的影响

目的探讨1,25二羟维生素D3[1,25（OH）2D3]对小鼠继发性牙本质生成和矿化的作用。方法利用苏木精-伊红（HE）染色、免疫组织化学染色和碱性磷酸酶（ALP）组织化学染色方法,比较分析6周龄野生型和1α 羟化酶基因敲除小鼠[1α（OH）ase-/-小鼠]下颌骨矿化的差异。结果与野生型小鼠相比,1α（OH）ase-/-小鼠下颌第一磨牙龋损明显增加,面继发性牙本质面积明显减少,Ⅰ型胶原及OCN在继发性牙本质的阳性比例明显减少,Biglycan在继发性牙本质的阳性比例明显增加,ALP明显减少。结论1,25（OH）2D3缺乏会导致小鼠继发性牙本质生成、矿化减少和龋损增加。     

1,25-二羟维生素D3对MDPC-23细胞增殖和碱性磷酸酶活性的影响

目的:探讨1,25-二羟维生素D3(1,25-dihydroxyvitamin D3,1,25-(OH)2D3)对成牙本质细胞系MDPC-23细胞增殖和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性的影响.方法:细胞培养,MTT比色测定法和碱性磷酸酶活性测定法.结果:1,25-(OH)2D3明显抑制MDPC-23细胞增殖,而促进MDPC-23细胞内碱性磷酸酶活性,呈一定的剂量和时间依赖性.结论:1,25-(OH)2D3可调节成牙本质细胞增殖和ALP活性,在成牙本质细胞增殖和矿化过程中可能发挥重要的作用.     

1,25-二羟维生素D_3对MDPC-23细胞增殖和碱性磷酸酶活性的影响

目的 :探讨 1 ,2 5 二羟维生素D3 (1 ,2 5 dihydroxyvitaminD3 ,1 ,2 5 (OH) 2 D3 )对成牙本质细胞系MDPC 2 3细胞增殖和碱性磷酸酶 (alkalinephosphatase,ALP)活性的影响。方法 :细胞培养 ,MTT比色测定法和碱性磷酸酶活性测定法。结果 :1 ,2 5 (OH) 2 D3 明显抑制MDPC 2 3细胞增殖 ,而促进MDPC 2 3细胞内碱性磷酸酶活性 ,呈一定的剂量和时间依赖性。结论 :1 ,2 5 (OH) 2 D3 可调节成牙本质细胞增殖和ALP活性 ,在成牙本质细胞增殖和矿化过程中可能发挥重要的作用     

1,25-二羟维生素D3对骨髓破骨细胞形成和破骨细胞分化因子mRNA表达的影响

目的：观察不同浓度的1，25-(0H)2D3对骨髓单个核细胞诱导形成破骨细胞和对单个核细胞ODF mRNA表达的影响。进一步阐明骨吸收刺激因子在破骨细胞性骨吸收中的作用机制。方法：应用不同浓度的1，25-(0H)2D3(0、10^-10、10^-8、10^-6moL／L)诱导大鼠破骨细胞的形成，观察形成破骨细胞的数目，并采用原位杂交技术检测骨髓细胞ODF mRNA的表达。结果：随着l，25-(0H)：D，浓度的增加，多核细胞计数增多；ODF mRNA表达的阳性信号显著增强。结论：1，25-(0H)2D3通过调节骨髓细胞ODF mRNA的表达，影响破骨细胞的形成和功能，进而调节局部骨微环境内骨吸收与骨形成平衡的变化，影响骨组织改建。     

复发性阿弗他溃疡患者25羟维生素D水平的研究

目的 比较轻型复发性阿弗他溃疡患者与健康人血清25羟维生素D的水平,分析25羟维生素D与复发性阿弗他溃疡发病机制间可能存在的关系.方法 选取48名确诊为轻型复发性阿弗他溃疡的患者和50名健康人为研究对象.分别在患者发病期(A1组)和无症状期(A2组)抽取5ml空腹静脉血,以健康人空腹静脉血为对照组.采用酶联免疫法检测血清25羟维生素D水平.结果 A1组25羟维生素D水平最低(14.73±5.18)ng/ml,显著低于A2组(17.36±5.96)ng/ml差异有统计学意义(P<0.05).对照组25羟维生素D水平最高(19.87±5.94)ng/ml,与A1、A2组差异均有统计学意义(P<0.05).结论 维生素D可能在复发性阿弗他溃疡的发病机制中具有一定的作用.     

不同浓度1,25-二羟基维生素D3对大鼠正畸牙移动速度的影响

目的 研究牙周局部注射3种浓度的1,25-二羟基维生素D3[1,25-(OH)2D3]对大鼠正畸牙移动速度的影响.方法 成年健康雄性Wistar大鼠96只,随机分为对照组、A组、B组和C组,每组24只.在大鼠上颌左侧第一磨牙与上颌中切牙之间安放加力装置,每隔3 d注射药物10 μL.对照组注射生理盐水,A组注射10-10 mol/L的1,25-(OH)2D3,B组注射10-8 mol/L的1,25-(OH)2D3,C组注射10-6 mol/L的1,25-(OH)2D3,分别于加力后的第1、 3、 7和14天各组处死6只大鼠.制取标本后测量第一磨牙移动距离.结果 对照组、A组和C组大鼠在正畸牙移动过程中均存在明显的正畸牙移动减慢时期,B组大鼠观察到持续的牙移动而没有移动减慢时期.结论 在大鼠正畸牙移动过程中,应用一定浓度的1,25-(OH)2D3能促进正畸牙的移动. 10-8 mol/L的1,25-(OH)2D3能更有效地促进大鼠正畸牙的移动,避免正畸牙移动过程中缓慢时相的发生.     

吡咯并喹啉醌对Bmi-1基因敲除小鼠下颌骨及牙发育障碍的治疗作用及机制研究

目的 探讨吡咯并喹啉醌(pyrroloquinoline quinone,PQQ)对Bmi-1基因敲除(Bmi-1knock out,BKO)小鼠的下颌骨及牙发育障碍的治疗作用及其机制.方法 将同窝的Bmi-1+/-雌雄小鼠进行配对,取7周龄正常饮食WT小鼠(10只,WT组),正常饮食BKO小鼠(10只,BKO组),以及正常饮食添加PQQ的BKO小鼠(10只,BKO+PQQ组),利用X线和显微CT、HE染色、组织化学及免疫组织化学、流式细胞仪检测等方法对3组小鼠分别检测下颌骨及牙的大小和骨密度、下颌牙槽骨骨皮质厚度、下颌第一磨牙前期牙本质厚度、下颌骨成骨及破骨细胞数、股骨、胸腺和肝脏的活性氧类水平等指标,并对计量资料结果3组间的总体比较和两两比较分别行单因素方差分析和t检验.结果 WT组小鼠表型正常,BKO+PQQ组小鼠整体表型较BKO组小鼠部分改善、体质量增加、生存期明显延长;X线及显微CT结果均显示BKO+PQQ组小鼠下颌骨及牙的大小和骨密度增加;BKO+PQQ组小鼠下颌牙槽骨骨皮质厚度[(68.65±0.25) μm]与BKO组小鼠[(42.45±0.35) μm]相比差异有统计学意义(P＜0.01);BKO+PQQ组小鼠下颌第一磨牙前期牙本质厚度[(4.25±0.15)μm]与BKO组小鼠[(31.55±0.35) μm]相比差异有统计学意义(P＜0.001);PQQ组小鼠下颌骨成骨细胞数[(38.45±0.25)个/mm3]显著高于BKO组小鼠[(18.15±0.55)个/mm3] (P＜0.01);BKO+PQQ组小鼠下颌骨破骨细胞数[(9.45±0.25)个/mm3]显著低于BKO组小鼠[(14.25±0.35)个/mm3] (P＜0.01);与BKO组小鼠相比,BKO+PQQ组小鼠股骨、胸腺和肝脏的活性氧类水平均显著下降(P＜0.01).结论 PQQ通过促进成骨细胞骨形成、减少破骨细胞骨吸收、清除活性氧类、减少DNA损伤等综合作用发挥对BKO小鼠牙及下颌骨发育障碍的治疗作用.     

1，25－二羟维生素D3在口腔领域的研究现状

１，２５－二羟维生素Ｄ３在口腔领域的研究现状隋文综述肖明振审校西安市第四军医大学口腔医院（７１００３２）维生素Ｄ３是一些抗佝偻病物质的总称。维生素Ｄ活性代谢物主要包括２５－羟维生素Ｄ３、２４，２５－二羟维生素Ｄ３和１，２５－二羟维生素Ｄ３〔１，２５－...     

1,25（OH）2维生素D3诱导小鼠混合培养细胞白细胞介素1αmRNA …

本研究旨在探讨破骨细胞形成过程中１，２５（ＯＨ）２维生素Ｄ３「１，２５（ＯＨ）２Ｄ３」和白细胞介素１α两种生物因子间的相互作用关系，以期进一步了解正畸牙齿移动过程中牙周组织改建的生物学机理。     

1,25(OH)2VD3诱导培养兔骨髓细胞FOS蛋白产生的实验研究

目的观察1,25二羟维生素D3[1,25( OH)2VD3]对培养兔骨髓细胞产生立即早期基因c-fos的蛋白产物(FOS蛋白)的诱导作用 .方法在原代培养至第六代的兔骨髓细胞中加入含5×10-5M /L 1,25(OH)2VD3的培养液,继续培养3小时后,固定标本,进行FOS免疫组化反应.结果大部分细胞形态正常,胞核呈棕黄色,椭圆形,胞浆不着色,细胞轮廓清晰,表现为FOS免疫组织化学反应阳性.结论 1,25(OH) 2VD3能够诱导兔骨髓细胞表达FOS蛋白,提示它可能通过c-fos这条信号转导途径在骨组织改建过程中发挥作用.     

不同浓度1,25-二羟基维生素D3对体外培养破骨样细胞骨吸收作用的影响

目的:观察不同浓度的1,25-二羟基维生素D3对体外培养破骨样细胞骨吸收作用的影响.进一步阐述骨吸收刺激因子在正畸牙周组织改建中的作用.方法:应用不同浓度的1,25-二羟基维生素D3(0、10-10、10-8、10-6mol/L)诱导大鼠骨髓破骨样细胞的形成,观察细胞在牙本质片上形成骨吸收陷窝的数目以及陷窝面积的大小;并采用原位杂交技术检测大鼠骨髓细胞的ODF mRNA表达.结果:随着1,25-二羟基维生素D3浓度的增加,骨陷窝数明显增多,陷窝面积增大;ODF mRNA表达的阳性信号显著增强.结论:在体外,1,25-二羟基维生素D3可以调节大鼠骨髓破骨样细胞的形成及骨吸收活性.     

1,25（OH）2维生素D3矿化液对人牙髓干细胞成骨方向诱导作用的研究

目的研究维生素D3矿化液对人牙髓干细胞的成骨方向诱导是否有促进作用。方法从恒牙牙髓中分离培养成纤维样细胞并测试其间充质干细胞的特异性标记物Stro-1阳性率,用一定浓度的1,25（OH）2维生素D3、抗坏血酸、β-甘油磷酸钠的矿化液诱导牙髓干细胞,通过倒置相差显微镜、碱性磷酸酶染色、Vonkossa染色及骨钙素、Ⅰ型胶原基因表达观察和检测矿化液诱导后细胞形态变化及矿化基质分泌情况,以未诱导组为对照。结果维生素D3矿化液连续诱导21d后,诱导组的细胞碱性磷酸酶染色阳性、Ⅰ型胶原和骨钙素的基因表达阳性,并可见明显钙结节形成。结论维生素D3矿化液可以诱导人牙髓干细胞向成骨样细胞分化并促进其产生矿化基质。     

同源异型盒基因Msx—1在小鼠牙齿发育生物矿化过程中的表达研究

目的：研究同源异型盒基因Msx-1在牙齿硬组织形成过程中的表达和意义。方法：采用原位杂交技术检测Msx-1mRNA在出生后1天、7天和14天昆明小鼠磨牙和切牙牙轴质和牙本质形成 的表达。结果：磨牙中,Msx-1mRNA主要表达于生后1天到7天正在极化的前成轴细胞和前成牙本质细胞,处于分泌期的成釉细胞和成牙本质细胞,7天时信号最强;随后其表达随细胞分化的成熟和牙釉质、牙本质基质形成的进展而逐渐下降。切牙中,牙冠部细胞中的表达与磨牙基本相似;但根部分唇则未分化的颈环上皮和外胚间充质细胞始终呈Msx-1阳性表达,结论同源异型盒基因Msx-1转录主要发生于硬组织形成早期阶段,即成釉细胞和成牙本质细胞的极化和分泌阶段,提示Msx-1可能与了小鼠牙胚硬组织形成过程中细胞分化和生物矿化。     

Cyclin D1 及P21~(cip1/waf1)基因在下颌骨髁状突软骨中的表达及其意义

目的：探讨ｃｙｃｌｉｎＤ１及Ｐ２１ｃｉｐ１／ｗａｆ１基因表达变化对颞下颌关节发育中髁状突软骨细胞周期活动的影响。方法：用免疫组织化学染色及原位杂交检测ｍＲＮＡ技术,分别对胚胎及生后一周ＳＤ大鼠颞下颌关节不同发育时期ｃｙｃｌｉｎＤ１蛋白及Ｐ２１ｃｉｐ１／ｗａｆ１ｍＲＮＡ在髁状突软骨中的表达进行观察。结果：ｃｙｃｌｉｎＤ１在各发育时期的髁状突软骨增殖层及浅层肥厚层中均有表达,而且从增殖层至浅层肥厚层阳性细胞数无明显变化。Ｐ２１ｃｉｐ１／ｗａｆ１ｍＲＮＡ阳性细胞主要分布于髁状突软骨表面未分化间充质细胞层向增殖层过渡的区域及增殖层深部向浅层肥厚层过渡的区域。结论：Ｐ２１ｃｉｐ１／ｗａｆ１在髁状突软骨的特征性分布提示Ｐ２１ｃｉｐ１／ｗａｆ１参与软骨细胞周期的调节,Ｐ２１ｃｉｐ１／ｗａｆ１表达强弱的变化可能是启动髁状突软骨细胞分化的主要因素之一。     

2，3，7，8-四氯二苯并二 英诱发小鼠腭裂的作用及其机制研究

目的:探索2,3,7,8-四氯二苯并二 英（2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin,TCDD）诱发小鼠腭裂的作用及机制。 方法:将84只孕鼠根据体质量按随机数字表随机分为TCDD组和对照组（每组42只）,在孕期第10天（gestation day 10,GD10）上...     

1，25（OH）2D3对培养人牙乳头细胞Calbindin—D28K表达和矿化能力的影响

目的：研究1,25（OH）2D3对培养人牙乳头细胞Calbindin-D28K（CaB）表达和矿化能力的影响。方法：用10^-8mol/L1,25(OH)2D3矿化液处理长期培养的第28天细胞24h,用放射免疫和免疫组化方法,观察CaB表达和碱性磷酸酶（ALP）、骨钙蛋白（OC）的变化。同位素示踪方法观察1,25(OH)2D3对胞外基质^45Ca^2 的影响。结果：加入1,25(OH)2D3后ALP活性约为对照组的4倍;OC含量约为对照组的1.5倍。CaB在培养28d牙乳头细胞及其胞外基质中表达,而在培养14d牙乳头细胞中CaB免疫反应阴性。1,25(OH)2D3可加强CaB表达,并使胞外基质对^45Ca^2 摄取量增加1.5倍。结论：1,25（OH）2D3有促进人牙乳头细胞矿化作用,表现在不仅能刺激OC、ALP的活性,而且可刺激具有分化表型的牙乳头细胞中CaB的合成,增加基质对Ca^2 的摄取。证实促进牙乳头细胞的钙转导是CaB在矿化过程中的作用之一,推测CaB被“俘获”在基质中时有诱导Ca^2 聚集和直接贮存的作用。