丝胶对2型糖尿病大鼠肝脏胰岛素PI3K/Akt信号通路的调节作用及其机制

目的：观察丝胶对2型糖尿病大鼠肝脏胰岛素磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）信号通路中胰岛素受体（IR）、胰岛素受体底物1（IRS-1）、PI3K和Akt的调节作用,初步探讨丝胶降血糖的作用机制。方法：36只SPF级雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组和实验组,每组12只。模型组和实验组大鼠采用高脂高糖饲料喂养联合腹腔注射链脲佐菌素（STZ,35 mg·kg^-1·d^-1,连续2 d）的方法制备2型糖尿病模型,以STZ注射结束后72 h的空腹血糖≥ 11.1 mmol·L^-1作为成模标准。模型建立成功后,实验组大鼠给予2.4·kg^-1·d^-1丝胶灌胃,正常组和模型组大鼠给予等体积生理盐水灌胃,连续用药35d。取各组大鼠血液标本,采用葡萄糖氧化酶法检测空腹血糖;取各组大鼠肝组织,采用免疫组织化学法和Western blotting法检测各组大鼠肝组织中IR、IRS-1、PI3K和Akt蛋白的表达,采用过碘酸-Schiff染色法检测各组大鼠肝糖原含量。结果：模型组大鼠血糖水平明显高于正常组（P<0.05）,实验组大鼠血糖水平明显低于模型组（P<0.05）。正常组和实验组大鼠肝组织中IR、IRS-1、PI3K和Akt蛋白呈棕黄色和（或）棕褐色颗粒,小部分呈弥散状;模型组大鼠肝组织中IR、IRS-1、PI3K和Akt蛋白表达量明显减少,呈棕黄色和（或）棕褐色颗粒,其中IR、IRS-1和Akt蛋白主要位于肝细胞胞膜和胞质,PI3K蛋白主要位于肝细胞胞质。各组大鼠肝切片均可见肝糖原阳性染色的红色或紫红色颗粒,其中模型组大鼠肝糖原染色浅,面积较小。与正常组比较,模型组大鼠肝组织中IR、IRS-1、PI3K和Akt蛋白表达水平及肝糖原含量明显降低（P<0.05）;与模型组比较,实验组大鼠肝组织中IR、IRS-1、PI3K和Akt蛋白表达水平及肝糖原含量明显升高（P<0.05）。结论：丝胶可通过上调糖尿病大鼠肝组织中IR、IRS-1、PI3K和Akt的表达以增强肝脏胰岛素PI3K/Akt信号通路的转导效应,从而起到降低血糖的作用。     

大黄素介导IRS-2/PI3K/Akt通路干预大鼠非酒精性脂肪性肝炎的实验研究

目的探讨大黄素通过介导IRS-2/PI3 K/Akt通路对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的影响。方法随机选取25只雄性大鼠给予高脂饲料喂养12周制备NASH模型,12周后取5只大鼠进行检测,确定NASH模型制备成功,剩余20只大鼠数字表法随机分为模型组(10只)和大黄素组(10只),另取同龄10只雄性未造模大鼠作为正常对照组。大黄素组大鼠给予20 mg/kg的大黄素灌胃,正常对照组和模型组给予等量生理盐水,连续给予8周。对大鼠肝脏进行称重,计算肝指数;检测空腹血糖和空腹胰岛素,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),检测血生化指标。对肝组织进行HE染色,检测肝组织中IRS-2、p-IRS-2、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt蛋白相对表达量。结果模型组大鼠肝指数、空腹血糖、空腹胰岛素、HOMA-IR、ALT、AST、TG、TC和LDL-C水平较正常对照组增高,HDL-C水平较正常对照组降低(P<0.01);大黄素组大鼠肝指数、空腹血糖、空腹胰岛素、HOMA-IR、ALT、AST、TG、TC和LDL-C水平较模型组降低,HDL-C水平较模型组增高(P<0.05)病理检测发现,模型组出现大量脂肪变性,存在炎性细胞浸润和细胞气球样变性,大黄素组病灶明显较模型组减轻。模型组大鼠IRS-2、p-IRS-2、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt蛋白相对表达量较正常对照组降低(P<0.05),大黄素组大鼠IRS-2、p-IRS-2、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt蛋白相对表达量较模型组增高(P<0.05)。结论大黄素可以提高IRS-2/PI3K/Akt通路的活性,改善高脂诱导的NASH大鼠肝脏脂肪沉积及胰岛素抵抗。     

脊髓损伤大鼠细胞凋亡、自噬程度的评估及阿魏酸的干预作用研究

目的:研究脊髓损伤大鼠细胞凋亡、自噬程度的评估及阿魏酸的干预作用。方法:选择成年雄性SD大鼠并分为假手术组(Sham组)、脊髓损伤组(SCI组)、阿魏酸干预组(FA组),通过动脉夹夹持的方法建立脊髓损伤模型,给予100mg/kg的阿魏酸灌胃、2次/日干预。干预后7、14d时,测定脊髓组织中凋亡分子、凋亡抑制分子、细胞自噬分子的表达量。结果:SCI组大鼠脊髓组织中PARP-1、AIF、ASK-1、mTOR、PI3K、Akt、Beclin1、LC3-Ⅱ的蛋白表达量显著高于Sham组,Survivin、NAIP、Bcl-2的蛋白表达量显著低于Sham组;FA组大鼠脊髓组织中PARP-1、AIF、ASK-1、mTOR、PI3K、Akt、Beclin1、LC3-Ⅱ的蛋白表达量显著低于SCI组,Survivin、NAIP、Bcl-2的蛋白表达量显著高于SCI组。结论:阿魏酸对脊髓损伤过程中的细胞凋亡、自噬具有抑制作用。     

老年胰岛素抵抗小鼠骨骼肌细胞磷脂酰肌醇-3激酶的表达

目的了解老年胰岛素抵抗小鼠胰岛素刺激的骨骼肌细胞磷脂酰肌醇-3激酶(PI3-K)表达和活性变化.方法18月龄雌性C57BL/SJ老年小鼠20只,随机平均分成两组:A组予喂养普通膳食,B组予喂养高脂肪膳食(58%脂肪,21%蛋白,21%碳水化合物),同时设立青年组(Y组).16周后提取各组小鼠完整的骨骼肌束,放于胰岛素浓度为10-7的缓冲液中孵育15 min.用Western blot方法检测各组大鼠骨骼肌细胞PI3-Kp85 α蛋白水平,免疫沉淀、激酶测定方法检测PI3-K活性.结果A组小鼠胰岛素刺激的PI3-K活化水平较Y组明显下降(P＜0.05),B组小鼠骨骼肌细胞PI3-Kp85α蛋白及PI3-K活化水平均较A组明显降低(P＜0.05).结论老龄及老年胰岛素抵抗与胰岛素信号传导中的PI3-K下调有关.     

益糖康对胰岛素抵抗脂肪细胞信号转导的影响

目的:探讨中药复方益糖康对胰岛素抵抗脂肪细胞的IGF-1R、PI3K、AKT、mTOR信号转导的影响。方法:将分化成熟3T3-L1脂肪细胞同步化12 h,分为正常组,其余细胞用地塞米松造模。将造模后的细胞分为模型组,益糖康组,分别给予不含药大鼠血清、益糖康48 h后,高浓度胰岛素刺激,用Western的方法,测定IGF-1R、PI3K、AKT、mTOR信号通路中各信号分子蛋白表达。结果:造模组与正常组比较,IGF-1R、PI3K、AKT、mTOR信号传导通路的蛋白表达下降。益糖康组与造模组比较,蛋白表达上升。结论:中药复方益糖康能上调胰岛素抵抗的脂肪细胞中IGF-1R、PI3K、AKT、mTOR蛋白的表达。     

芒硝外敷联合乌司他丁对胰腺炎大鼠肠屏障功能、胰腺细胞活性及PI3K/Akt/mTOR信号的影响

目的 探讨芒硝外敷联合乌司他丁对胰腺炎大鼠肠屏障功能、胰腺细胞活性及PI3K/Akt/mTOR信号的影响。方法 选取50只SPF级SD雄性大鼠,随机分为正常（N）组,模型（M）组,芒硝外敷（G）组,乌司他丁（U）组,芒硝外敷+乌司他丁（O）组,每组10只,对M组、G组、U组、O组采用开腹经胰胆管逆行性注射5%牛黄胆酸钠法建立胰腺炎模型,N组不建立该模型,建模成功后,对G组腹部给予芒硝外敷,对U组腹腔注射乌司他丁5万U/kg,对O组腹部给予芒硝外敷和腹腔注射乌司他丁5万U/kg,N组、M组同期给予腹腔注射同体积生理盐水,HE法检测胰腺组织病理形态,电镜检测肠屏障功能,TUNEL法检测胰腺细胞凋亡,免疫印迹法检测PI3K/Akt/mTOR信号相关蛋白表达。结果 与N组相比,M组可见胰腺组织明显病理变化及肠屏障功能损伤,与M组比较,G组、U组、O组病理形态及肠屏障功能明显改善,且O组改善最为明显;与N组相比,M组大鼠肠粘膜损伤程度、胰腺组织中PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达显著升高,胰腺细胞凋亡水平显著降低（均P<0.05）,与M组比较,G组、U组、O组大鼠肠粘膜损伤程度、胰腺组织中PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达显著降低（均P<0.05）,胰腺细胞凋亡水平显著升高（P<0.05）,且U组与 G组相比差异无统计学意义（P＞0.05）,O组比U组变化明显（P<0.05）。结论 芒硝外敷联合乌司他丁可显著改善胰腺炎大鼠肠屏障功能及胰腺细胞活性,并显著抑制PI3K/Akt/mTOR信号     

Visfatin对SW872脂肪细胞胰岛素信号分子蛋白表达的影响

目的:观察visfatin对胰岛素抵抗状态下的SW872成熟脂肪细胞胰岛素信号分子胰岛素受体底物-1(IRS-1)、胰岛素受体底物-2(IRS-2)和磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)蛋白表达的影响。方法:体外培养SW872前脂肪细胞,诱导细胞分化成熟,建立胰岛素抵抗模型,用含有100nmol/L visfatin的无血清培养液孵育1h后收获细胞,采用Western印迹法检测visfatin刺激前后信号分子IRS-1、IRS-2和PI3K的蛋白表达水平。结果:在正常状态下(正常组内比较),visfatin促进脂肪细胞IRS-1、IRS-2和PI3K的蛋白表达,分别增加了51.65%(P<0.01)、44.74%(P<0.01)和61.38%(P<0.01)。在胰岛素抵抗状态下,visfatin刺激组的IRS-1、IRS-2和PI3K的蛋白表达水平,分别比基础状态组增加了26.98%(P<0.05)、35.59%(P<0.05)、27.61%(P<0.01)。结论:在胰岛素抵抗状态下,visfatin通过调节脂肪细胞胰岛素信号分子IRS-1、IRS-2和PI3K蛋白表达而发挥促进葡萄糖转运、改善胰岛素抵抗的生物学作用。     

BTBD10蛋白在大鼠胰岛和INS-1细胞株的表达

目的观察BTBD10蛋白在大鼠胰岛和INS-1细胞株的表达。方法利用构建好的BTBD10多克隆抗体,采用多重免疫荧光技术和激光共聚焦显微镜观察BTBD10在3月龄Fischer344大鼠的胰腺组织和大鼠胰岛β细胞株INS-1细胞中的表达。结果 BTBD10蛋白定位在大鼠胰腺组织的胰岛β细胞中,与胰岛素的定位重叠,而在胰腺的外分泌腺和胰岛α细胞中无表达,同时显示BTBD10定位在大鼠胰岛β株INS-1细胞的细胞浆中,表达量高。结论 BTBD10特异性表达于大鼠胰岛β细胞中,提示BTBD10可能与胰岛β细胞功能和胰岛素分泌有关。     

Homer1在糖尿病大鼠胰腺中的表达及意义

目的:观察Homer1在大鼠胰腺中的表达,探讨Homer蛋白的生理意义。方法:建立2型糖尿病大鼠模型,与正常大鼠比较,检测血胰岛素值。取胰腺组织,检测Homer1a、Homer1c和胰岛素表达情况。结果:Homer1a、Homer1c表达于大鼠胰腺组织中胰岛细胞,糖尿病大鼠胰腺组织与正常组大鼠比较,胰岛素表达明显减少(P<0.01),Homer1a表达减少(P<0.05),Homer1c表达增加(P<0.05)。结论:Homer蛋白表达于大鼠胰腺组织;且在糖尿病模型中,Homer1c的表达与Homer1a的表达方向相反,Homer1蛋白可能参与胰岛素分泌的调控机制。     

运动锻炼联合膳食控制对2型糖尿病大鼠糖代谢、胰岛素抵抗形成和血脂代谢的影响

目的：研究运动锻炼联合膳食控制对2型糖尿病大鼠糖代谢、胰岛素抵抗和血脂代谢的影响。方法：35只Wistar大鼠随机取10只作为正常对照组,其余25只建立2型糖尿病模型,选择建模成功的20只大鼠随机分为模型对照组和运动联合膳食干预组。正常对照组大鼠自由活动、给予标准饲料;模型对照组大鼠自由活动、给予高脂高糖饲料;运动联合膳食干预组大鼠给予游泳训练、给予标准饲料。3组大鼠的干预期均为8周。分别于试验开始前、造模后运动锻炼前、运动4周和运动8周测定各组大鼠体质量和每日摄食量。分别于运动锻炼前及运动锻炼8周测定各组大鼠空腹血糖（fastbloodglocuse,FBG）、血清胰岛素（fastinsulin,FINS）、甘油三酯（triglycerides,TG）、胆固醇（cholesterol,TC）和低密度脂蛋白-胆固醇（lowdensitylipoproteincholesterol,LDL-C）,进行葡萄糖耐量实验（glucosetolerancetest,GTT）及胰岛素耐量实验（insulintolerancetest,ITT）评估胰岛素抵抗情况。运动锻炼结束后取胰腺组织测定葡萄糖激酶（glucosekinase,GK）及三磷酸腺苷（adenosinetriphosphate,ATP）酶活性,采用实时聚合酶链反应定量（RT-PCR）检测胰腺组织IRS-1、PI3K、PKB和mTORmRNA的表达,采用Westernblot测定胰腺组织IRS-1、p-IRS-1、PI3K、PKB、p-PKB、mTOR和p-mTOR的蛋白表达。结果：①干预4周和8周时膳食运动干预组大鼠体质量较模型对照组明显增加、每日摄食量差异显著（P＜0.05）。②8周干预后运动膳食干预组大鼠FBG、FINS、HOMA-IR、AUCGTT和AUCITT均较模型对照组大鼠明显降低（P＜0.05）。③8周干预后运动膳食干预组大鼠TG、TC和LDL-C均较模型对照组大鼠明显降低（P<0.05）。④经过8周干预后运动膳食干预组大鼠胰腺组织GK和ATP酶活性均较模型对照组大鼠明显增加（P<0.05）。⑤经过8周干预后运动膳食干预组大鼠胰腺组织IRS-1、PI3K、PKBmRNA均较模型对照组大鼠明显增加,mTORmRNA较模型对照组明显降低（P<0.05）。⑥经过8周干预后运动膳食干预组大鼠胰腺组织IRS-1、p-IRS-1、PI3K、PKB和p-PKB蛋白均较模型对照组大鼠明显增加,mTOR和p-mTOR蛋白较模型对照组明显降低（P<0.05）。结论：运动锻炼联合膳食控制可控制2型糖尿病大鼠的血糖,改善胰岛素抵抗,调节血脂紊乱,增加胰腺组织GK和ATP酶活性,并且对IRS/PI3K-Akt信号通路具有调节作用。     

小儿耳鼻喉手术麻醉的新进展

因小儿耳鼻喉手术刺激强,时间短,且常与气道相关,故麻醉的控制有一定难度,现对国内外现阶段小儿耳鼻喉手术麻醉的改良方法及新观点进行评述,以期对临床工作有较好的指导意义。     

2001年我国医药研究的若干进展

随着国内外生命科学和生物技术等的飞速发展,我国医药技术在2001年取得了长足的进步。提前完成了我国所承担的人类基因组汁划中的1％测序任务,到2000年,中国科学家在功能基因研究和基因组多样性领域共完成研究论文1850篇,遍及医药各领域,研究手段和水平可于国际先进水平媲美,中国完全有条件在“后基因时代”成为主角之一。     

成都市属医院1，175例儿童支气管肺炎住院费用分析

为探讨成都市不同级别医疗机构儿童支气管肺炎单病种费用水平以及不同收费项目占总费用的比例特点及控制医疗费用的有效途径,为患者自主选择就诊医疗机构提供参考指导,对成都市卫生局所属不同级别医院儿童支气管肺炎住院医疗费用分析如下。1资料与方法1.1资料来自成都市卫生局2     

Malaria in children in Birmingham in the 1970s

Thirty-two children with malaria were admitted to Dudley Road Hospital, Birmingham, in the 1970s. None was admitted before 1974 and there was a rapid increase after that. All the infections were due to Plasmodium vivax and occurred in children of Asian immigrant families who had been born in or had visited India or Pakistan apart from one infant born in England who acquired the disease transplacentally. All presented within 12 months of entering or re-entering the United Kingdom. The clinical features of the 32 patients have been analysed and it is suggested that more effort should be made to educate travellers about the need for anti-malarial chemoprophylaxis and the necessity to continue it for one month after return.     

2005年广西流动人口疟疾监测结果分析

目的了解广西流动人员疟疾流行现状,进而提出针对性防治措施。方法收集全区网络直报疫情资料和各级疾病预防控制机构疟疾监测数据进行分析。结果2005年广西流动人口发热病人平均疟原虫阳性率为0·33%。80·62%的病人为本地居民外出到疟疾流行区务工感染所致。以从事护林/砍伐比例最高,占44·19%。结论加强返乡流动人口疟疾监测是巩固广西疟疾防治的关键所在。