钙结合蛋白S100A6对Wnt/β-catenin信号途径的影响

目的研究钙结合蛋白S100A6对Wnt／β-catenin信号途径的影响及其机制。方法异丙基β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达、谷胱甘肽-琼脂糖球珠分离纯化融合蛋白GST-hS100A6；Westernblot和荧光素酶活性分析法检测S100A6对细胞内B—catenin水平和B—catenin／T细胞因子4（TCF4）活性的影响；GST-pulldown和Westernblot技术研究S100A6与该信号途径主要成员β-catenin、糖原合酶激酶-3β（GSK-3β）、Dvl和Axin之间的相互作用。结果S100A6可致MG63和HCT1 16细胞β—catenin水平升高，并可使HEK293细胞β—catenin／TCF4活性增强；S100A6与β—catenin、GSK-36和Dvl之间存在着直接的相互作用，而与Axin之间无相互作用。结论S100A6能够增强Wnt／β-catenin信号途径的活性，其机制可能涉及S100A6与该途径重要成员β—catenin、GSK-3β和Dvl之间存在着直接的相互作用有关。     

广西人肝细胞癌β—catenin基因突变及蛋白表达

目的研究广西地区人肝细胞癌发生、发展过程中β-catenin基因突变和蛋白表达状况。方法采用PCR联合基因直接测序法,检测108例肝细胞癌癌组织中β-catenin基因的突变;同时采用免疫组化方法检测β—catenin蛋白的表达状况。结果108例HCC癌组织中仅有12例发生β-catenin基因突变,突变率为11．1％。108例HCC癌组织中β—catenin蛋白阳性表达率为70．0％（75／108）,其中14．6％（11／75）为细胞核阳性;57．3％（43／75）为细胞质阳性;28．0％（21／75）为细胞膜阳性。β—catenin蛋白在12例有突变的样本中表达阳性率为100％。结论广西地区肝癌中β—catenin基因突变率比较低;β—catenin基因突变可能为导致β—catenin蛋白过表达的因素之一,并参与了肝癌癌变过程。     

Survivin蛋白及β-catenin蛋白在原发性肝癌组织中的表达及其临床意义

目的：研究肝癌组织中克隆细胞凋亡抑制蛋白（survivin蛋白）及β-连环素蛋白（β—catenin蛋白）的表达及其临床意义。方法：应用免疫组织化学染色法对47例原发性肝癌组织、10例肝硬化组织、4例正常肝组织中survivin蛋白及β-连环素蛋白（β—catenin蛋白）的表达情况进行检测，并结合原发性肝癌临床生物学特性进行分析。结果：在正常肝组织中survivin蛋白无表达、β-catenin蛋白无异常表达；在肝硬化组织中，survivin蛋白无表达、有2例（20％）β—catenin蛋白出现异常表达；在47例肝癌组织中有30例（63．8％）survivin蛋白表达阳性，31例（65．9％）β—catenin蛋白出现异常表达（P〈0．01）。Survivin蛋白、β—catenin蛋白表达与患者的年龄、性别、肿瘤大小无关。Survivin蛋白在原发性肝癌复发组的表达率为92．9％（26／28），无复发组的表达率为21．1％（4／19）；β—catenin蛋白在原发性肝癌复发组中的异常表达率为89．2％（25／28），在无复发组的表达率为31．6％（6／19）（P〈0．05）。在survivin蛋白表达阳性的30例原发性肝癌组织中有28例（93．3％）β-catenin蛋白出现异常表达，而在β—catenin蛋白出现异常表达的31例原发性肝癌组织中有28例（90．3％）survivin蛋白表达阳性，两种蛋白在原发性肝癌组织的表达具有一致性，且呈正相关（r=0．6324）。结论：Survivin蛋白与β-catenin蛋白与原发性肝细胞癌复发密切相关，它们可能成为预测肝癌术后有无复发的一项指标。Survivin蛋白与β-catenin蛋白的表达在原发性肝细胞性肝癌中具有密切的关系，且呈正相关。     

奥曲肽对结肠癌SW480细胞Wnt通路β-catenin／TCF及下游靶基因表达的影响

目的研究不同浓度奥曲肽对结肠癌SW480细胞增殖以及对SW480细胞Wnt／β-catenin信号通路的影响,阐明其抗肿瘤的作用机制。方法采用MTT比色法测定不同浓度奥曲肽对SW480细胞增殖的抑制作用;应用Westernblot法分析不同浓度奥曲肽对SW480细胞核中β—catenin、TCF-4及Wnt信号通路下游靶分子C—myc、CyclinDl蛋白表达的影响。结果奥曲肽可抑制SW480细胞的增殖,并在10-10～10-8M浓度范围内呈剂量依赖性,在48h内呈时间依赖性,浓度为10-8M时抑制作用最强,浓度为10-11M以下对细胞增殖无抑制作用。浓度为10-6、10-8、10-10M的奥曲肽对β—catenin蛋白、TCF-4蛋白、C—myc蛋白及CyclinDl蛋白的表达有明显抑制作用,与未经奥曲肽处理的细胞比较有统计学意义（均P〈0．01）。结论奥曲肽对Wnt／β-catenin信号通路的抑制作用可能是通过减少β—catenin在细胞核内的聚集,抑制TCF-4的激活,从而抑制下游靶基因C—myc及CyclinDl。     

过表达Axin对胶质瘤细胞U87的生物学行为的影响及其作用机制

目的：观察Axin对胶质瘤U87细胞生物学行为的影响,并探讨其机制。方法：pCMV5-HA—Axin瞬时转染胶质瘤U87细胞,TUNEL法检测细胞的凋亡,流式细胞仪检测瘤细胞周期变化,Westernblot检测Axin及β—catenin蛋白质的表达。结果：Axin显著促进胶质瘤U87细胞的凋亡、抑制细胞的增殖;促进β-catenin蛋白在胞浆内的蓄积。结论：过表达Axin的胶质瘤U87细胞可能通过降低细胞核内β—catenin的蛋白表达量抑制Wnt信号通路,从而抑制细胞增殖并促使细胞凋亡。     

结直肠癌β-catenin 表达及临床意义

目的 研究结直肠癌中β—catenin表达及临床意义。方法 采用免疫组化法检测60例结直肠癌，20例结直肠腺瘤和20例正常结直肠组织中β—catenin的表达。结果 结直肠癌β—catenin膜表达阳性率(65％)显低于结直肠腺瘤(90％)和正常结直肠组织(100％)；结直肠癌β—catenin核表达阳性率(59％)显高于结直肠腺瘤(30％)和正常结直肠组织(0％)(P＜0．01)。Β—catenin膜表达阳性率与肿瘤细胞分化，淋巴结转移密切相关(P＜O．05)，而与肿瘤的浸润深度、Duke's分期、肿瘤部位无关(P＞0．05)。Β—catenin膜表达阴性提示预后较差。结论 β—catenin表达异常与结直肠癌的发生有关，β—catenin膜表达可反映肿瘤的侵袭、转移状态，可用为判断预后的指标之一。     

舒林酸对卵巢癌细胞系CP70顺铂耐药性的逆转作用

目的：研究舒林酸体外逆转卵巢癌细胞系CP70的顺铂耐药性，并探讨其与β—catenin表达的关系。方法：MTT法检测单独使用舒林酸或顺铂及两药联合使用时对CP70细胞的抑制作用，免疫细胞化学和Westernblot方法检测细胞内β—catenin表达水平。结果：两药联合处理细胞后顺铂耐药逆转倍数为6．01，联合处理组的细胞中β—catenin表达明显降低。结论：舒林酸能部分逆转CP70细胞对顺铂的耐药性，且此作用可能与下调细胞的β—catenin表达有关。     

Wnt信号通路关键蛋白与上皮性卵巢癌间的关系

目的：探讨正常卵巢组织,良性、交界性及恶性卵巢肿瘤组织中Wnt信号通路关键蛋白B—catenin及APC的表达及与临床病理特征间的相关性。方法：采用免疫组织化学SP法检测8例正常卵巢组织,15例卵巢良性上皮性肿瘤,14例卵巢交界性上皮肿瘤及69例上皮性卵巢癌中B—catenin和APC蛋白的表达情况。结果：B—catenin在细胞膜上的表达降低及在胞浆中的表达升高,与肿瘤的恶性程度、临床分期、病理学类型及分化相关,并在转移灶中细胞膜上的表达高于原发灶;APC蛋白的表达与肿瘤的恶性程度、临床分期相关。二者均与淋巴结、大网膜的转移、腹水的有无、腹水细胞学的阳性与否及预后无关,B—catenin与APC之间无统计学上的相关性。结论：B—catenin与APC在卵巢上皮性肿瘤的发生、发展过程中起重要作用。     

β catenin及其通路相关基因在大肠腺瘤癌变中的意义

大肠腺瘤是一种具有癌变潜能的良性病变 [1]. 近年来 , 随着大肠腺瘤癌变机理研究的不断深入 ,β catenin及 APC β catenin/Tef/Lef 通路在大肠腺瘤癌变中的作用引起有关学者的关注 , 并进行了不少研究工作 , 现将近年的有关研究做一综述 . 1 β catenin和β catenin基因 catenins(连环蛋白 )是一组与钙粘蛋白 ( cadherin) 在细胞膜内起作用的粘附蛋白 , 包括α、β、γ等几种 . 没有 catenins表达 , 单纯钙粘蛋白不具备粘附及信号传导功能 . β catenin 是原癌基因编码的蛋白质 , 分子量为 92 kDa, 在个体进化上具有高度保守性 . β catenin通过其氨基端与α catenin结合 , 后者又与肌动蛋白细胞骨架系统相连 , 而其结构保守的氨基酸重复序列可结合 APC蛋白或 E- 钙粘蛋白以及细胞转录因子 ( Tef) . β catenin 在细胞内有两种功能 : 一是连接 E- 钙粘蛋白形成 E cadherin β catenin功能复合体 , 调节细胞粘附系统 , 影响细胞的粘附性、运动性 , 进而影响组织结构和形态的发生 ;二是 Wnt信号过程中的重要成分 .     

X射线对肺腺癌细胞E-cadherin/β-catenin及其相关生物学特性的影响

目的：探讨X射线在抑制肺腺癌细胞侵袭和转移中的作用机制。方法：采用6MV不同剂量X射线照射肺腺癌细胞A549，软琼脂细胞集落形成实验检测细胞增殖抑制；采用RT—PCR和Western印迹法分别从mRNA和蛋白水平检测细胞中E—cadherin及其连环蛋白β—catenin的表达；Transwell小室检测细胞侵袭力。结果：X射线对A549细胞的增殖抑制作用呈剂量依赖性；照射后E-cadherin的总蛋白和mRNA的表达水平与对照组相比差异均有统计学意义（P〈0．05），其变化趋势是随照射剂量的增加其表达逐渐增加；但β—catenin在总蛋白和mRNA水平上的变化差异无统计学意义（P〉0．05）。随着照射剂量的增加，细胞侵袭力逐渐降低（P〈0．05）。结论：X射线可上调A549细胞上黏附分子E—cadherin和β—catenin在细胞中的表达，增加细胞间的黏附力，降低肿瘤细胞的侵袭力，这可能是X射线抑制肺腺癌细胞转移的作用机制之一。     

XAV939对肝癌细胞增殖及糖酵解的影响

目的：探讨 Wnt／β－catenin 信号通路特异性抑制剂 XAV939对肝癌细胞增殖及糖酵解过程的影响。方法：MTT 方法检测不同浓度 XAV939对肝癌细胞 Bel －7402、HCCLM3增殖能力的影响;Western blot 方法检测 XAV939对肝癌 Bel －7402、HCCLM3细胞 Wnt／β－catenin 信号通路关键基因和其下游靶基因表达的影响,以及对糖酵解过程中关键调控基因表达的影响。运用 SPSS 19．0统计软件分析各组间的差异。结果：MTT 结果表明不同浓度的 XAV939能够不同程度的抑制 Bel －7402、HCCLM3细胞增殖能力,XAV939对两种细胞的抑制率接近50％时,浓度分别为：30μmol／L、20μmol／L。Western blot 结果显示,XAV939可以显著抑制 Wnt／β－catenin 及其下游基因 c －myc、Cyclin D1的表达,有效抑制β－catenin 信号通路活性;同时,XAV939可以通过抑制 HK －2、LDHA 而非 Glut －1的蛋白表达水平来抑制肝癌细胞的糖酵解过程。结论：XAV939在体外能够有效抑制肝癌细胞 Wnt／β－catenin 信号通路及其依赖性细胞增殖和糖酵解过程。     

大肠腺瘤癌变过程中β-catenin、p53和增殖细胞核抗原表达的研究

目的 探讨β－catenin、p53和增朱（PCNA）在大肠腺瘤癌变中的可能作用。方法 以免疫组织化学方法检测77例大肠腺瘤（CRA）及癌变组织中β－catenin、p53蛋白及PCNA的表达情况。结果 CRA随上皮不典型增生程度的提高以及癌变的出现,β－catenin异常表达率逐渐增高（P＜0.05）。伴中、重度上皮不典型增生的CRA和CRA癌变的出现,β－catenin核表达阳性率均明显高于上皮轻度不典型增生的CRA（P＜0.01）。CRA伴轻度不典型增生和CRA伴中、重度不典型一及CAR癌变3组的p53蛋白和PCNA表达依次增高,其阳性率分别为10.3%、43.8%、75.0%和17.2%、62.5%、87.5%。在β－catenin核表达阳性者中,其PCNA的强阳性表达率明显高于β－catenin核表达阴性者（69.7%和36.4%,P＜0.05）;在p53蛋白表达阳性者中,其PCNA的强阳性表达率明显高于p53表达阳性者（72.4%和37.5%,P＜0.05）。在CRA癌变组中,有50.0%可见β－catenin和p53同时表达。结论 β－catenin、p53和PCNA在CRA癌变过程中可能发挥了重要作用。     

胃癌组织β-catenin基因的表达

目的探讨βcatenin基因的表达与胃癌浸润转移的关系。方法应用免疫组化方法检测48例胃癌及癌旁组织βcatenin的表达。结果胃癌组织βcatenin的表达明显高于癌旁组织(P<0.01);低分化癌组织βcatenin表达较高、中分化组织高(P<0.01);浸润越深βcatenin表达越高(P<0.01);有淋巴结转移组织比无淋巴结转移的高(P<0.01)。结论βcatenin和胃癌的浸润、转移关系密切,对胃癌的预后可能具有重要意义。     

结直肠癌肝转移发生的相关信号通路研究进展

摘 要：结直肠癌是一种常见的恶性肿瘤,而结直肠癌肝转移是导致患者死亡的主要原因之一,目前的治疗对结直肠癌肝转移仍十分有限。肿瘤转移是一个多基因、多步骤的过程,多种信号通路如Wnt/β?鄄catenin、HGF/c?鄄MET、PI3K/Akt/mTOR、RAS?鄄ERK、TGF?鄄β/SMAD等及相关基因均参与了结直肠癌肝转移的发生,靶向相关通路或基因的治疗可能可以减少患者的死亡率。已有研究证实,上皮—间充质转化是肿瘤发生转移的重要步骤之一,而上述多种信号通路均在此过程中发挥作用。全文就与结直肠癌肝转移相关的多种信号通路研究进展进行综述,以期为找到新型抗癌药物的潜在靶点提供依据。     

p120ctn在肿瘤中的作用

引言p120连环蛋白(p120ctn)是Armadillo结构蛋白家族成员之一。它位于细胞间连接处和细胞核内,与钙粘蛋白高度保守的近膜区(JMD)相互作用,从而参与钙粘蛋白介导的信号转导和粘附过程。在多种恶性肿瘤中均发现p120ctn有异常表达,提示其在恶性肿瘤的浸润和转移中可能具有一定作用。本文就p120ctn分子机制的最新研究进展及它在肿瘤中的可能作用作一综述。1p120ctn的分子基础1.1p120ctn的分子结构p120ctn最初是作为Src癌蛋白的底物而被发现的,现被认为是一种与癌细胞浸润和转移有关的连环蛋白。连环蛋白(catenin)是粘附分子和细胞内信号分子,其家族成员包括α、β、γ连环蛋白和p120ctn。β、γcatenin以互斥的方式与钙粘蛋白的连环蛋白结合区域(CBD)紧密结合,而另一端则与αcatenin结合,后者又与肌动蛋白细胞骨架结合形成钙粘蛋白复合体。该复合体对维持细胞的正常信号转导和粘附功能都是必要的。而p120ctn的一端与E cadherin的近膜区结合,另一端并不与αcate nin结合,这说明p120ctn在钙粘蛋白复合体中具有特殊的功能。p120ctn的基因克隆揭示...     

KAI1、E-cadherin、β-catenin在宫颈癌中的表达

[目的]探讨KAI1、E-cadherin、β-catenin在宫颈癌组织中的表达及其与宫颈癌恶变程度的相关性。[方法]采用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）法和免疫组化（SP）法检测了100例宫颈癌组织、50例宫颈正常上皮组织、60例宫颈上皮内瘤变组织中的KAI1、E-cadherin和β-catenin的表达,并分析其与宫颈癌临床病理学参数间的关系。[结果]KAI1 mRNA、E-cadherinmRNA、β—cateninmRNA在宫颈癌组中的相对表达量,明显低于宫颈正常上皮组（P值均〈0．05）;蛋白表达率亦明显低于宫颈正常上皮组（P值均〈0．01）。E-cadherin与β-catenin蛋白表达之间正相关（r=-0．834,P〈0．05）,与KAI1蛋白表达呈正相关性（r=-0．604,P〈0．05）,而KAI1与β—catenin蛋白表达之间无相关性（P〉0．05）。[结论]宫颈癌中KAI1、E-cadherin和β—catenin的表达与宫颈癌的恶变程度有关．联合检测这些指标有助于判断宫颈癌的转移潜能。     

香加皮杠柳苷通过抑制Wnt／β-catenin信号通路诱导结肠癌细胞SW480凋亡

背景与目的：Wnt／β-catenin信号通路在人类肿瘤尤其在大肠癌的发生发展中起着重要作用。本研究分析了香加皮杠柳苷（periplocin extracted fromcortex periplocae,CPP）对人结肠癌细胞SW480增殖的抑制作用,及对Wnt／β-catenin信号通路的调控作用。方法：MTT法检测CPP对SW480细胞增殖的影响,流式细胞技术检测细胞周期的变化和凋亡。Western blot法检测CPP处理组与对照组细胞总蛋白、细胞浆蛋白及细胞核蛋白中β-catenin表达变化,电泳迁移率改变法分析CPP作用后SW480细胞核TCF复合物与其特异性DNA结合序列结合能力变化。半定量RT—PCR法检测CPP作用后细胞中β-catenin、survivin、c—myc和cyclin D1mRNA的表达。结果：CPP明显抑制SW480细胞增殖（P〈0．01）,并呈时间和浓度依赖性;0．5μg／mLCPP可将SW480细胞阻滞于G0／G1期,并诱导细胞凋亡（P〈0．05）。CPP作用后SW480细胞总蛋白、胞浆蛋白及细胞核蛋白中的B—catenin表达均明显降低（P〈0．01）,细胞核中TCF复合物与其特异性DNA结合序列结合能力受到抑制,其下游靶基因mRNA表达水平下降（P〈0．01）,而β-cateninmRNA表达未见明显改变。结论：CPP可明显抑制SW480细胞增殖并诱导细胞凋亡,其作用机制与抑制细胞Wnt／β-catenin信号转导通路有关。     

Wnt信号传导与癌症

Wnt途径是一种对控制胚胎发育起重要作用的信号传导途径，而其不恰当地活化参与多种人类癌症的发病过程，因此近来颇受关注。全文对其各种分子成分及它们的结构和功能逐一介绍，并指出其信号传导取决于细菌内β－连环蛋白（β－catenin,简写为β-cat）的水平。已发现在多种人类癌症中，Win途径的有些成分突变，如APC、Axin及β-cat等，这些突变使细胞失去调节β-cat水平的能力，以致特殊的靶基因不恰当地活化，最终导致细胞增生失控而致癌。     

14-3-3β通过β- catenin 调控胶质瘤细胞的生长和增殖

目的：研究14-3-3β基因在胶质瘤细胞生长和增殖中的调控作用。方法：构建14-3-3β基因过表达质粒并设计14-3-3β基因和β- catenin 基因 siRNAs,分组转染人体正常神经星形胶质细胞系 SVGp12和胶质瘤细胞系 U87,噻唑蓝（MTT）法观察14-3-3β基因过表达/沉默和β- catenin 基因沉默对细胞生长和增殖的影响,并利用 qRT - PCR 定量分析受调控原癌基因的表达变化。结果：14-3-3β基因过表达的星形胶质细胞生长能力显著高于对照组（P ﹤0.05）,而β- catenin 基因沉默的星形胶质细胞生长受到明显抑制（P ﹤0.05）。观察到14-3-3β基因或β- catenin 基因沉默的胶质瘤细胞生长能力也显著低于对照组细胞（P ﹤0.05）。结论：胶质瘤细胞的生长和增殖受到14-3-3β基因的调控并且其调控是通过β- catenin 基因来进行的,但其具体的信号调控机制需要进一步探讨。     

SFRP1基因表达与大肠肿瘤发生的关系研究

目的：探讨SFRP1与大肠癌发生的关系。方法：运用半定量RT—PCR方法及免疫组化方法检测SFRP1、β—catenin、E—cad在正常大肠粘膜、大肠腺瘤以度大肠腺癌中的表达。结果：大肠腺癌、腺瘤组织的β—catenin、E—cad胞膜表达不同程度缺失，β—catenin呈胞质和胞核异位表达，腺瘤β—eatenin的异位表达率为87．5％．低于大肠腺癌（100％，P〈0．05）。大肠腺瘤β—eatenin、E—cad胞膜表达缺失率分别为37。5％、37．5％，低于大肠腺癌（58．8％、76.4％，P均〈0．05）。半定量RT—PCR显示，SFRP1基因在大肠腺瘤、大肠腺癌组织中的表达水平均明显低于大肠正常组织的对照组，且大肠腺癌组织中SFRP1基因的表达水平低于大肠腺瘤（P〈0．05）。结论：SFRP1基因下调使其抬抗Wnt途径的功能削弱，导致Wnt的持续存在，其下游基因β—eatenin、E—cad异常表达，从而导致大肠粘膜细胞获得恶变潜能。故SFRP1可能为预防大肠肿瘤的发生、大肠肿瘤的早期诊断提供新思路，并为防治大肠肿瘤提供新靶标和实验依据。