低剂量X射线全身照射诱导小鼠脾细胞蛋白分子变化

为了深入了解辐射对细胞蛋白质表达的影响，采用双向电泳技术检测低剂量Ｘ射线全身照射诱导小鼠脾细胞核及胞浆蛋白分子变化。结果表明，７５ｍＧｙＸ射线照射后４ｈ细胞核出现４个新蛋白点；２个增强蛋白点。照射后细胞浆出现６个新蛋白点；１个增强蛋白点和３个减弱蛋白点。正常细胞浆的３个蛋白点在照射后消失。正常细胞浆中的２个蛋白点在照射后分别减弱和消失，而在细胞核中增强和出现，提示低剂量辐射促进细胞核及细胞浆大分子物质的交换。     

低剂量X射线全身照射诱导小鼠脾细胞蛋白分子变化

为了深入了解辐射对细胞蛋白质表达的影响，采用双向电泳技术检测低剂量Ｘ射线全身照射诱导小鼠脾细胞核及胞浆蛋白分子变化。结果表明，７５ｍＧｙＸ射线照射后４ｈ细胞核出现４个新蛋白点；２个增强蛋白点。照射后细胞浆出现６个新蛋白点；１个增强蛋白点和３个减弱蛋白点。正常细胞浆的３个蛋白点在照射后消失。正常细胞浆中２个蛋白点在照射后分别减弱和消失，而在细胞核中增强和出现，提示低剂量辐射促进细胞核及细胞浆大分子物     

烧伤血清对腹腔巨噬细胞凋亡的影响

目的 探讨体外培养的腹腔巨噬细胞（Ｍ）经烧伤血清刺激后的凋亡情况。方法制作３０％体表总面积（ＴＢＳＡ）Ⅲ 度烧伤大鼠模型,分离其伤后２４ ｈ血清。流式细胞术检测体外培养的Ｍ经烧伤血清刺激后的凋亡情况并与正常大鼠 进行对照。结果烧伤大鼠血清诱导Ｍ凋亡明显增加,这种作用随刺激时间的延长和烧伤血清浓度的增加而加强,与 对照组比较有显著差异（Ｐ＜０．０１）。结论烧伤血清可能在烧伤后Ｍ功能失调中起重要作用。     

内毒素诱导小鼠腹腔巨噬细胞凋亡的机制探讨

细胞凋亡在形态学上表现为染色质浓缩,生长化学上则表现为核酸酶酶切ＤＮＡ。本研究试图探讨内毒素（脂多糖）诱导小鼠腹腔巨噬细胞凋亡的机制。结果显示,内毒素能诱导巨噬细胞凋亡,与对照组比,细胞吞噬机能显著下降（Ｐ〈０．０１）,腹腔灌洗液中ＮＯ２＾－／ＮＯ３＾－浓度显著升高。ＮＯ阻断剂ＡＧ和活性氧阻断剂ＰＤＴＣ均能部分抑制巨噬细胞凋亡,细胞吞噬机能也获得部分恢复。用ＬＰＳ和ＩＦＮ模拟在体情况,也能诱导培养     

脾切除对小鼠腹腔巨噬细胞数量和功能的影响

目的：研究脾切除对小鼠腹腔巨噬细胞数量和功能活性的影响。方法：术后4周获取腹腔常居巨噬细胞和炎症巨噬细胞,检测其数量、吞噬功能和一氧化氨水平。结果：与正常对照组和假手术组比较,脾切除组小鼠的2种巨噬细胞不仅数量明显减少,而且它们的吞噬功能和一氧化氮水平呈明显下降。结论：提示脾切除造成的单核吞噬细胞继发性炎症反应的捐伤和巨噬细胞功能活性的降低,可能是脾切除后(凶险性)感染的重要因素。     

不同剂量X射线照射对小鼠腹腔巨噬细胞NF-κB的影响

目的:观察不同剂量X射线照射对小鼠腹腔巨噬细胞转录因子NF-κB的影响.方法:用凝胶电泳迁移率变化分析法得到电泳带,用PhosphorImager扫描仪分析数据.结果:0.075 Gy X射线全身照射后4 h开始小鼠腹腔巨噬细胞NF-κB的DNA结合活性逐渐升高,48 h时基本恢复到假照水平,2.000 Gy X射线全身照射后小鼠腹腔巨噬细胞NF-κB的DNA结合活性从8 h开始上升,持续到48 h.结论:低剂量和较高剂量X射线均能诱导小鼠腹腔巨噬细胞中的转录因子NF-κB.     

不同剂量X射线照射对小鼠腹腔巨噬细胞NF-κB的影响

目的 :观察不同剂量 X射线照射对小鼠腹腔巨噬细胞转录因子 NF- κB的影响。方法 :用凝胶电泳迁移率变化分析法得到电泳带 ,用 Phosphor Imager扫描仪分析数据。结果 :0 .0 75 GyX射线全身照射后 4h开始小鼠腹腔巨噬细胞 NF- κB的 DNA结合活性逐渐升高 ,48h时基本恢复到假照水平 ,2 .0 0 0 Gy X射线全身照射后小鼠腹腔巨噬细胞 NF- κB的 DNA结合活性从 8h开始上升 ,持续到 48h。结论 :低剂量和较高剂量 X射线均能诱导小鼠腹腔巨噬细胞中的转录因子NF-κB。     

尼古丁对小鼠巨噬细胞凋亡的影响

目的：研究尼古丁对小鼠巨噬细胞（Ｍψ）凋亡的影响。方法：用不同浓度（１０＾－８￣１０＾－２ｍｏｌ／Ｌ）的尼古丁与小鼠腹腔Ｍψ体外共同培养,测定Ｍψ存活率;采用荧光和流式细胞术观察Ｍψ凋亡的发生情况。结果：一定浓度（１０＾－４￣１０＾－８ｍｏｌ／Ｌ）的尼古丁对Ｍψ凋亡具有抑制作用。结论：尼古丁可能通过抑制Ｍψ凋亡在肺气肿的发病中起重要作用。     

石胆酸对小鼠腹腔巨噬细胞内质网应激和凋亡的影响

目的 观察石胆酸(lithocholic acid, LCA)对小鼠腹腔巨噬细胞内质网应激和凋亡的影响。方法 分离原代小鼠腹腔巨噬细胞并培养,待细胞生长至70%融合时,饥饿处理细胞16～18 h,实验组给予不同浓度LCA(10,20,30μmol/L)或给予LCA 30μmol/L干预不同时间(1,2,3,4 h),对照组用LCA的溶剂二甲基亚砜(DMSO)干预。提取上述干预后细胞的蛋白,用Western blot检测内质网应激相关分子Chop、p-p38MAPK和凋亡关键分子Caspase-3、cleaved-Caspase-3、PARP、cleaved-PARP。另外,LCA(30μmol/L)干预巨噬细胞1 h, TUNEL检测细胞凋亡情况。结果 与对照相比,LCA可显著升高内质网应激相关蛋白Chop和p-p38MAPK的表达,并呈浓度和时间依赖性(P<0.05);与对照相比,LCA可显著升高凋亡相关蛋白cleaved-Caspase-3、cleaved-PARP的表达并呈浓度和时间依赖性(P<0.05),并可诱导巨噬细胞凋亡。结论 LCA能够诱导小鼠腹腔巨噬细胞发生...     

Effects of whole body irradiation with X—rays on the expression of TfR on lymphocytes in spleens of mice

目的:通过研究不同剂量X射线全身照射后小鼠脾淋巴细胞运铁蛋白(TfR)表达的变化,探讨电离辐射后TfR对免疫功能的作用.方法:应用直接免疫荧光抗体和流式细胞仪检测TfR表达的变化.结果:75 mGy X射线全身照射后24 h和72 h,脾脏中TfR阳性表达细胞数显著增加;但1～6 Gy X射线全身照射后24 h,脾脏中TfR阳性表达细胞数显著减少.同时检测的IL-2活性显示出平行变化.结论:低剂量电离辐射时TfR增强免疫功能,而在高剂量电离辐射时TfR则抑制免疫功能.TfR表达的变化可能是因为电离辐射使IL-2活性改变所致.     

不同剂量X射线诱导体内及体外小鼠巨噬细胞CD14的剂量效应关系

目的：观察不同剂量X射线照射在体内及体外对小鼠巨噬细胞CD14表达的影响。方法：采用流式细胞术检测巨噬细胞表面CD14阳性细胞数。体内实验选择16 h、体外实验选择4 h,低剂量为0.05～0.20 Gy、高剂量为0.5～6.0 Gy。 结果：整体照射时,低剂量X射线使CD14表达明显增强,而较高剂量X射线（大于2.0 Gy）明显抑制CD14表达;在体外照射时,0.075 Gy和2.000 Gy以内的较高剂量X射线也使CD14表达明显增强,而4.0~6.0 Gy 的剂量使J774A.1细胞的CD14表达明显受到抑制。 结论：低剂量X射线在体内及体外均能诱导小鼠巨噬细胞的CD14表达;小于2.0 Gy时也能增强CD14的表达,而剂量大于2.0 Gy时CD14的表达呈剂量依赖性下降,而且在体外的变化更明显。     

电离辐射对小鼠腹腔巨噬细胞TLR4和转接蛋白MyD88表达的影响

目的：观察电离辐射对小鼠腹腔巨噬细胞TLRs介导的信号传导通路中TLR4和转接蛋白MyD88表达的影响,探讨低剂量辐射诱导机体免疫效应的机制。方法：昆明系雄性小鼠160只。时间-效应实验60只,随机分为假照组、照射后4、8、16、24和48 h实验组,每组10只;剂量-效应实验100只,随机分为假照组、0.050、0.075、0.100、0.200、0.500、1.000、2.000、4.000和6.000 Gy照射组,每组10只;X 线全身照射 (WBI) 后,采用流式细胞术检测小鼠腹腔巨噬细胞中TLR4和MyD88阳性细胞百分率。结果：时间-效应实验表明,与假照组比较,0.075 Gy 照射后TLR4和MyD88表达率在4 h后开始增高,分别在16 h和4 h达高峰（P<0.05或P<0.01,）;2.000 Gy 照射后,TLR4和MyD88表达率在4 h后开始增高, 16 h达高峰（P<0.01）。剂量-效应实验表明,与假照组比较,各剂量照射组 TLR4和MyD88表达率均随照射剂的增加递增,在0.075 Gy 开始明显增加（P<0.05）,在2.000 Gy 照射后达高峰（P<0.01）。结论：电离辐射使小鼠腹腔巨噬细胞TLR4和转接蛋白MyD88表达增高,促进小鼠的免疫反应,启动固有免疫及适应性免疫。     

低剂量电离辐射对小鼠脾脏细胞凋亡的影响

目的：研究不同剂量 Ｘ 射线全身照射对小鼠脾脏细胞凋亡的影响。方法：采用透射电镜术定性及原位末端标记（ Ｔ Ｕ Ｎ Ｅ Ｌ）术半定量地观察了电离辐射对小鼠脾脏细胞凋亡影响的时程变化及量效关系。结果：透射电镜观察到２ Ｇｙ Ｘ 射线全身照射后脾脏出现较多典型的凋亡的淋巴细胞,００７５ Ｇｙ 照射后细胞超微结构无显著变化。 Ｔ Ｕ Ｎ Ｅ Ｌ 法观察到高剂量电离辐射使脾细胞凋亡增多,而低剂量电离辐射则使脾细胞凋亡减少,剂量效应关系曲线呈“ Ｊ”型。结论：不同剂量电离辐射对脾细胞凋亡的影响不同;低剂量电离辐射使脾脏细胞凋亡减少为辐射兴奋效应的一种表现。     

自噬在电离辐射诱导的小鼠精母细胞GC-2凋亡过程中的作用

目的 探讨自噬在电离辐射诱导小鼠精母细胞GC-2凋亡过程中的作用.方法 将小鼠精母细胞GC-2分为空白对照组和不同剂量(2、4和8 Gy)60Co辐射处理组.采用原位末端转移酶标记法(TUNEL法)和流式细胞术检测细胞凋亡情况,通过蛋白质印迹实验观察自噬相关蛋白LC3(LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ)和Beclin1表达水平的改变,使用荧光显微镜观察C,C-2细胞内自噬小体的变化.用5mmol/L自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)处理GC-2细胞2h再给予60Co辐射处理,观察自噬抑制剂联合电离辐射对细胞凋亡率的影响以及自噬相关蛋白表达水平的改变.结果 与空白对照组相比,GC-2细胞经60Co辐射处理后细胞凋亡率升高(P＜0.05),荧光显微镜下可见细胞自噬体明显增多,自噬相关蛋白LC3-Ⅱ以及Beclin1蛋白表达水平增加(P＜0.05).预先用5mmol/L 3-MA处理GC-2细胞2h再给予60Co辐射处理,自噬相关蛋白LC3-Ⅱ以及Beclin1蛋白表达水平与未经3-MA处理组相比降低(P＜0.05),细胞凋亡率升高(P＜0.05).结论 电离辐射可以诱导精母细胞发生自噬,抑制细胞自噬后可增强电离辐射对精母细胞的杀伤作用.     

电离辐射对小鼠胸腺bcl-2蛋白表达及细胞凋亡的作用机制

目的:研究不同剂量X射线照射对小鼠胸腺bcl-2 蛋白表达及细胞凋亡的作用机制.方法:用免疫组织化学、图像分析技术及透射电镜技术分别检测小鼠胸腺bcl-2蛋白表达及细胞凋亡.结果:假照组胸腺实质内bcl-2蛋白表达主要分布于髓质,胸腺皮质内可有少量凋亡的胸腺细胞.2 Gy照射后4、8和12 h胸腺髓质内bcl-2表达减少,皮质内出现许多典型的凋亡细胞;0.075 Gy照射后bcl-2蛋白表达增多,皮质内凋亡细胞减少,且可见较多的细胞分裂像.结论:不同剂量电离辐射对胸腺细胞凋亡的影响与胸腺髓质内bcl-2蛋白表达水平有关.     

X射线全身照射对胸腺CD3_＋细胞的影响

本实验采用流式细胞术研究了不同剂量Ｘ射线全身照射对小鼠胸腺细胞亚组的影响。结果表明，胸腺细胞在成熟分化的不同阶段，具有不同的辐射敏感性，ＣＤ３＋细胞（即成熟的胸腺细胞）具有相对的辐射抗性。０．５、１．０、２．０Ｇｙ照射后２４小时，ＣＤ３＋细胞的相对比例呈剂量依赖性增高，但在４．０Ｇｙ照射后２４小时未进一步上升。     

低剂量X线照射诱导小鼠胸腺细胞凋亡适应性反应的相关凋亡基因p53、Bcl-2和Bax蛋白表达

目的：探讨低剂量辐射诱导胸腺细胞凋亡适应性反应的相关基因蛋白调控机制。方法：用X射线全身照射Kunming系雄性小鼠,其诱导剂量（D1）为25、50、75、100和200 mGy（剂量率12.5 mGy•min^-1）,攻击剂量（D2）为1.5 Gy（剂量率287 mGy•min^-1）,D1和D2间隔6 h。通过流式细胞仪检测胸腺细胞凋亡相关基因p53、Bcl-2和Bax蛋白表达水平。 结果：D2组与假照射组比较,其胸腺细胞Bcl-2蛋白阳性百分率明显降低（P<0.05）,Bax蛋白明显增加（P<0.05）,而Bcl-2/Bax比值非常明显降低（P<0.001）;p53蛋白非常明显增加（P<0.001）。D1+D2组与D2组比较,D1在25～75 mGy时,Bcl-2蛋白阳性百分率不同程度增加,Bax蛋白不同程度降低,而Bcl-2/Bax比值非常明显增高（P<0.01）;p53蛋白明显降低（P<0.001或P<0.05）。 结论：在25～75 mGy低剂量辐射诱导小鼠胸腺细胞凋亡的适应性反应中,其相关凋亡基因蛋白Bcl-2表达增加,Bax降低,Bcl-2/Bax比值增高,p53降低,导致凋亡的胸腺细胞减少。     

褪黑素对电离辐射诱导离体小鼠淋巴细胞凋亡的影响

目的：探讨褪黑素（melatonin,MLT）对电离辐射诱导的离体小鼠淋巴细胞凋亡的影响及其机制。 方法：采用流式细胞术（FCM）和荧光分光光度法分别检测小鼠胸腺和脾淋巴细胞凋亡小体百分率和DNA裂解率。 结果：电离辐射可诱导离体小鼠胸腺、脾淋巴细胞凋亡,在0.5~6.0 Gy范围内凋亡呈剂量依赖性增加。照射前预先加入2 mmol•L^-1MLT,细胞凋亡小体百分率和DNA裂解率与单纯照射组比较均显著降低,胸腺、脾淋巴细胞凋亡小体百分率分别降低为单纯照射组的86.25%和89.22%,DNA裂解率分别降低为单纯照射组的87.23%和89.16%。 结论：MLT在体外可减轻电离辐射诱导的小鼠淋巴细胞凋亡,对淋巴细胞损伤有防护作用。     

吸烟对肺泡巨噬细胞凋亡的影响

目的：观察吸烟或不吸烟者肺泡巨噬细胞凋亡的变化。方法：对吸烟或不吸烟者肺泡巨噬细胞进行染色观察及流式细胞仪ＤＮＡ分析。结果：吸烟者肺泡巨噬细胞生存时间延长,吸烟组存活率为（７６．３±１２．５）％,不吸烟组为（５５．４±１１．６）％,两者差异显著（Ｐ＜０．０５）。荧光染色吸烟组凋亡细胞百分率为（３８．６±１１．５）％,不吸烟组凋亡细胞百分率为（５９．４±１２．１）％。流式细胞仪观察凋亡细胞百分率吸烟组为（１１．５±１０．４）％,不吸烟组为（２９．１±８．６）％。吸烟组巨噬细胞凋亡较不吸烟者明显减少。结论：烟雾中某些成分可能通过抑制巨噬细胞凋亡,在肺气肿的发病中起重要作用。