反义硫代修饰寡核苷酸体外抗呼吸道合胞病毒感染的研究

目的：在感染呼吸道合胞病毒(RSV)的9HTE细胞中观察与RSVNS1基因和M2基因互补的反义硫代寡核苷酸的抗病毒活性。方法：直接观察RSV的致细胞病变作用，用MTT方法测定细胞存活率。结果：1．RSV感染复数（moi)在0.1以上时，培养5天后RSV感染的9HTE细胞全部死亡。2．我们设计的反义核酸能够提高感染细胞的存活率，且呈量效依赖关系。结论：反义硫代寡核苷酸具有较明显的抗病毒活性，为进一步研究新型抗RSV药物奠定了基础。     

木芙蓉叶提取物抗病毒作用实验研究

目的:观察木芙蓉叶提取物体内、体外抗病毒的药理作用.方法:通过使用呼吸道合胞病毒(RSV)、甲型流感病毒(Flu A)和副流感病毒(HPIVs)致细胞病变的体外感染模型,以治疗指数(TI)为指标,观察木芙蓉叶提取物体外抗病毒作用;通过使用呼吸道合胞病毒(RSV)感染小鼠模型,以对小鼠病毒感染肺指数的抑制率为体内抗病毒活性指标,观察木芙蓉叶提取物体内抗病毒作用.结果:体外试验表明,木芙蓉叶提取物对呼吸道合胞病毒(RSV)、甲型流感病毒(Flu A)和副流感病毒(HPIVs)这3种病毒均有不同程度的抑制作用;体内试验表明,木芙蓉叶提取物表现出一定的体内抗病毒活性,在一定浓度范围内,抗病毒活性随剂量的增大而增强.结论:木芙蓉叶提取物具有显著的抗病毒药理活性.     

盐酸阿比朵尔抗呼吸道合胞病毒机制初探

目的:明确盐酸阿比朵尔抗吸道合胞病毒(RSV)Long株的活性并探讨其抗病毒机制。方法:通过细胞病变效应(CPE)、噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性,观察盐酸阿比朵尔抗RSV的作用。结果:盐酸阿比朵尔的半数毒性浓度(TD50)为85.39 mg/L,当该药浓度为25 mg/L时,药物抗病毒生物合成组、药物直接作用组、药物抗吸附4 h组、药物抗病毒吸附8 h组的病毒抑制率分别能达到81.61%,79.57%,40.39%和78.60%。4组相应的药物半数有效浓度(ED50)为11.52,8.74,25.36和10.40 mg/L。结论:盐酸阿比朵尔在体外能明显抑制RSV引起的CPE效应,病毒抑制率随药物浓度的增加而增高,盐酸阿比朵尔能通过多种途径发挥抗RSV的作用。     

木芙蓉叶提取物体外抗RSV作用机制研究

目的:研究木芙蓉叶提取物的体外抗呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial viruses, RSV)作用机制。方法:以利巴韦林为对照药物,检测木芙蓉叶提取物抗RSV的活性。通过观察木芙蓉叶提取物不同给药方式的抗病毒作用,对木芙蓉叶提取物抗RSV的作用机制进行初探。结果:木芙蓉叶提取物能有效抑制RSV引起的细胞病变,具有显著的抗病毒作用,治疗指数(therapeutic index, TI)为86.24。木芙蓉叶提取物对病毒的直接灭活作用,同时具有预防和治疗的作用。结论:木芙蓉叶提取物在体外具有显著的抗RSV作用,且其抗病毒作用发生在病毒穿入细胞后的阶段。     

抗病毒Ⅰ号中药有效部位体外抗呼吸道合胞病毒作用

目的　了解抗病毒Ⅰ号中药有效部位 (AD1)对呼吸道合胞病毒 (RSV)的抑制作用。方法　采用细胞培养技术 ,以病毒唑为阳性对照药 ,比较观察AD1对RSV的抑制作用。结果　AD1的半数中毒浓度 (TC50 )为 2 5 .98mg/ml,抗RSV的半数有效浓度 (EC50 )为 0 .75 8mg/ml,治疗指数 (TI)为 34.2 9,且对RSV抑制作用存在明显的量效反应关系 (P <0 0 1)。感染RSV 2h、6h、12h后加药均可抑制RSV活性 (P <0 .0 1)。结论　AD1在Hela细胞中对RSV有明显抑制作用     

龙胆抗病毒有效部位RG3-1体外抑制呼吸道合胞病毒作用的研究

目的 探讨龙胆抗病毒有效部位(RG3-1)体外抑制呼吸道合胞病毒(RSV)的作用.方法 采用煎煮法、二氯甲烷萃取法和柱层析法分离提取RG3-1.以病毒唑为阳性对照药物,采用细胞病变抑制试验观察RG3-1对RSV的抑制作用.结果 RG3-1半数中毒浓度(TC50)为5.29mg/mL,抑制RSV的半数有效浓度EC50为262.95μg/mL,治疗指数(TI)为20.12;RG3-1对RSV的抑制存在量效关系;RG3-1具有直接灭活RSV的作用;在感染后至少10h以内给药,RG3-1能够有效的抑制RSV复制.结论 RG3-1在HeLa细胞中对RSV有明显的抑制作用.     

呼吸道合胞病毒感染的研究现状

<正> 呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytialvirus,RSV)是婴幼儿下呼吸道感染的主要病原体。婴幼儿RSV感染通常引起严重的毛细支气管炎和肺炎。近年来,人们对RSV感染进行了广泛深入的研究,在许多方面都取得了较大的进展。本文就RSV抗原特性、流行病学、抗病毒免疫、实验室诊断和防治现状综述如下。 1 RSV的抗原特性 RSV属副粘液病毒科肺炎病毒属的单链     

连花清瘟颗粒抗呼吸道合胞病毒感染BALB/c小鼠的药效作用研究

【目的】观察连花清瘟颗粒体内抗呼吸道合胞病毒(RSV)感染的药效作用。【方法】采用BALB/c小鼠RSV感染模型,通过观察小鼠体质量变化、肺病毒滴度、肺内炎症因子m RNA表达及肺组织病理变化评价药物的体内抗病毒药效。【结果】连花清瘟颗粒高剂量组可显著降低RSV感染小鼠肺内病毒滴度(P0.05)。连花清瘟高、低剂量组可显著降低RSV感染小鼠肺内炎症因子白细胞介素IL-6,IL-1βm RNA的表达量(P0.01);肺组织病理检查结果显示:连花清瘟颗粒高、低各剂量组均可以缓解病毒所致肺组织病理性炎症。【结论】连花清瘟颗粒可有效抑制RSV感染小鼠肺内病毒滴度,对小鼠病毒性肺炎具有一定的改善作用。     

病毒唑滴鼻治疗小儿急性呼吸道感染

病毒对人类健康的危害已越来越引起重视。据统计,95％的急性上呼吸道疾病和大部分下呼吸道疾病,是由细菌以外的感染源引起的,其中以病毒最常见。目前有效的抗病毒药物很少,三氮唑核苷(病毒唑,Rinbavirin,Vivazole)为核苷类药,有广泛的抗病毒活性,美国多用吸入法(即吸入病毒唑微粒子气雾剂)治疗婴儿合胞病毒(RSV)的急性呼吸道感染(ART),我国基层医师多以静脉或肌肉注射给药,确切疗效难以评价。据姚龙报道,将病毒唑静滴治疗病毒性ART,与对照组(对症疗法组)及中     

空心莲子草有效成分抗呼吸道合胞病毒作用的实验研究

目的 利用呼吸道合胞病毒(RSV)感染的小白鼠模型,观察空心莲子草对小白鼠感染RSV的保护作用.方法 空心莲子草经口服治疗RSV感染的BALB/C鼠,药物剂量为2.5、4.5和6.5 g/(kg·d),疗程5 d,同时以病毒唑作为标准阳性对照,观察动物的发病情况,血液和肺组织内病毒滴度和病毒检出率作为考核药物的疗效指标.结果 空心莲子草4.5g/(kg·d)和6.5 g/(kg·d)剂量作用下的小白鼠其病死率与未经治疗的病毒对照比较,有显著差异;空心莲子草6.5 g/(kg·d)剂量作用后动物血液中病毒检出率为31.3%,肺组织病毒检出率为37.5%,与病毒对照比较有显著性差异,4.5 g/(kg·d)剂量作用后动物肺组织病毒检出率为43.8%,与病毒对照比较有显著性差异;空心莲子草3个不同剂量作用下小鼠的肺指数与病毒对照比较均有显著性差异.结论 空心莲子草有望成为治疗RSV感染的有效药物.这亦为中草药抗病毒作用的研究开辟了新的途径.     

中成药贯黄感冒颗粒抗人呼吸道合胞体病毒活性的研究

目的：研究治疗感冒用中药贯黄感冒颗粒体外抗人呼吸道合胞体病毒(human respiratory syncytial virus,RSV)活性。方法：将中药贯黄感冒颗粒溶解于纯水,经0.22微米滤器过滤后制成贯黄感冒颗粒水溶液。以环盐酸吗甲吡嗪酸(cyclopiazonic acid,CPA)为阳性对照药物,利用CCK-8法测定贯黄感冒颗粒水溶液对Hep-2细胞的细胞毒性。在对细胞最大无毒的浓度下,测定贯黄感冒颗粒对RSV的抗病毒效果。结果：贯黄感冒颗粒的半数致死浓度(TC₅₀)为0.647 mg/mL,半数有效浓度(EC₅₀)为0.014 mg/mL,治疗指数(TI)为46.21。贯黄感冒颗粒在RSV感染Hep-2细胞后0、2、4、6、8 h给药,结果表明贯黄感冒颗粒具有显著的抗RSV效果。结论：贯黄颗粒在体外培养细胞体系检测下对RSV具有明显的抑制作用。     

呼吸道合胞病毒感染BALB/c鼠活化Toll样受体7介导的抗病毒作用研究

目的探讨呼吸道合胞病毒(RSV)感染BALB/c鼠后,肺内Toll样受体7(TLR7)的水平变化及其介导所产生的I型干扰素(IFN)抗病毒作用。方法 48只BALB/c鼠,随机分为正常对照组、RSV感染组、咪喹莫特干预组。以RSV活病毒滴鼻感染BALB/c鼠,诱导急性肺炎模型,并预先给予TLR7特异性激动剂咪喹莫特处理,分别于感染后4、8、12和24 h不同时间点,用半定量RT-PCR法检测鼠肺TLR7、IFN-α/β、RSV融合蛋白(RSV F蛋白)的mRNA表达,HE染色观察肺的病理学改变。结果①RSV感染早期,TLR7、IFN-α/β、RSV F蛋白的mRNA表达均升高,并与RSV感染之间存在时间依赖性关系;肺的炎性细胞浸润及肺泡结构破坏程度与RSV感染时间相关;②咪喹莫特干预组预先给予TLR7激动剂咪喹莫特处理后,再行相同RSV感染,TLR7、IFN-α/β的mRNA表达量进一步升高,但RSV F蛋白的mR-NA表达下降;肺的炎性细胞浸润程度及肺泡结构破坏较RSV感染组明显减轻。结论 RSV感染可活化上调BALB/c鼠肺组织中TLR7表达,其表达量与感染之间存在时间依赖关系;其介导产生的Ⅰ型IFN起着抗病毒作用,在一定程度上可抑制病毒的增殖水平,使肺部炎症减轻。     

The antiviral role of Toll-like receptor 7 in BALB/c mice infected with respiratory syncytial virus

目的 探讨呼吸道合胞病毒(RSV) 感染BALB/c鼠后,肺内Toll样受体7(TLR7)的水平变化及其介导所产生的I型干扰素(IFN)抗病毒作用.方法 48只BALB/c鼠,随机分为正常对照组、RSV感染组、咪喹莫特干预组.以RSV活病毒滴鼻感染BALB/c鼠,诱导急性肺炎模型,并预先给予TLR7特异性激动剂咪喹莫特处理,分别于感染后4、8、12和24 h不同时间点,用半定量RT-PCR法检测鼠肺TLR7、IFN-α/β、RSV融合蛋白 (RSV F蛋白)的mRNA表达,HE染色观察肺的病理学改变.结果 ① RSV感染早期,TLR7、IFN-α/β、RSV F蛋白的mRNA表达均升高,并与RSV感染之间存在时间依赖性关系;肺的炎性细胞浸润及肺泡结构破坏程度与RSV感染时间相关;② 咪喹莫特干预组预先给予TLR7激动剂咪喹莫特处理后,再行相同RSV感染,TLR7、IFN-α/β的mRNA表达量进一步升高,但RSV F蛋白的mRNA表达下降;肺的炎性细胞浸润程度及肺泡结构破坏较RSV感染组明显减轻.结论 RSV感染可活化上调BALB/c鼠肺组织中TLR7表达,其表达量与感染之间存在时间依赖关系;其介导产生的Ⅰ型IFN起着抗病毒作用,在一定程度上可抑制病毒的增殖水平,使肺部炎症减轻.     

荔枝核提取物体外抗病毒活性及其机制研究

目的:研究荔枝核提取物(LSE)的体外抗病毒活性,并初步研究其抗病毒的作用机制.方法:采用细胞病变效应(CPE)减少法和MTY法检测LSE对柯萨奇B3病毒(Cox B3)、呼吸道合胞病毒(RSV)以及单纯疱疹病毒1型和2型(HSV-1和HSV-2)的体外抗病毒活性,并通过观察直接杀病毒作用、对宿主细胞的保护作用、抑制病毒吸附作用以及在病毒感染后不同时间加入实验,对LSE抑制HSV-1的作用机制进行探讨.结果:LSE有一定的细胞毒性,它不能抑制Cox B3在宿主细胞内的增殖,但对RSV、HSV-1和HSV-2表现出明显的浓度依赖性抗病毒活性,其IC<,50>值分别为32.3,27.9和20.4μg/mL.该提取物预培养Vero细胞后不能保护细胞免受HSV-1感染,但它对HSV-1有直接的灭活作用.LSE可影响HSV-1对Vero细胞的吸附,当浓度为31.3μg/mL时对病毒吸附的抑制率为51%.ISE对HSV-1在细胞内的增殖表现出很强的抑制活性.结论:LSE具有较强的体外抗RSV和HSV活性,它对HSV的抑制作用可能通过多种方式和途径实现.     

呼吸道合胞病毒感染诱发婴幼儿喘息的临床诊治进展

目的 探讨呼吸道合胞病毒感染诱发婴幼儿喘息临床发病特征.方法 选择2009年1月～2010年1月笔者所在科收治的56例呼吸道合胞病毒(RSV)感染诱发婴幼儿喘息患儿,并以同期入院的非呼吸道合胞病毒感染诱发婴幼儿喘息患儿40例为对照组,对两组患儿的临床特点、喘息特征、辅助检查特点及对止喘药物的疗效进行综合分析.结果 呼吸道合胞病毒感染诱发婴幼儿喘息年龄以6月～2岁多发(60%),RSV感染诱发婴幼儿喘息患儿发热、喘息、对止喘药的反应、咳喘持续时间、住院时间及并发症的发生率与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).呼吸道合胞病毒感染组应用平喘药联合抗病毒治疗收到良好疗效.结论 呼吸道合胞病毒(RSV)具有自己的特征,平喘药联合抗病毒治疗有效.     

呼吸道合胞病毒感染大鼠脊髓背根节信号转录因子的研究

目的：研究反复呼吸道合胞病毒（RSV）感染大鼠脊髓背根节感觉神经细胞转录因子的活化状态变化。 方法：1～2周龄 SD大鼠幼鼠共80只,区组随机分为对照组和RSV感染组,每组40只。 RSV感染组采用每周1次RSV(浓度5 ×105 U/mL)滴鼻法制作RSV慢性感染模型,对照组采用无病毒培养上清液滴鼻。8周后每组取5只大鼠进行气道反应性测定。原位杂交检测肺组织RSV RNA以证明呼吸道合胞病毒感染模型的可靠性。用TranSignal蛋白质/DNA活性芯片筛选C7~T5脊髓背根节组织中活性改变的转录因子。Western印迹对筛选结果中改变最明显的因子进行验证。结果：RSV感染组气道阻力增幅显著大于对照组(P＜0.05)。原位杂交显示RSV感染组肺组织有大量呼吸道合胞病毒存在,HE染色示肺部存在明显炎症细胞浸润,说明呼吸道合胞病毒感染模型建立成功。TranSignal蛋白/DNA组合芯片检测筛选：RSV反复感染大鼠背根节55个转录因子活性上调(RSV感染组/对照组>2),43个活性下调(RSV感染组/对照组<0.5)。Western印迹验证结果与芯片结果一致,并进一步明确蛋白/DNA组合芯片筛选的IRF转录因子是IRF-1,而不是IRF-2。结论：反复RSV感染可引起气道反应性增高和脊髓背根节感觉神经细胞内多种转录因子活性发生改变,可能与气道反应性增高的神经调控异常有关。     

呼吸道合胞病毒感染的防治药物研究进展

呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus,RSV）是一种单股负链RNA病毒,是全球范围内婴幼儿下呼吸道感染最主要的病原体之一。RSV感染初期通常是轻微的上呼吸道感染症状,但若不及时控制感染,疾病将迅速进展为严重下呼吸道感染,同时还可能会引发后续的毛细支气管炎和哮喘。特别是在早产儿和患有其他慢性病的儿童中,RSV感染的发病率及死亡率会更高。因此有效的预防和治疗是控制RSV感染的关键。目前为止,全球尚无专门针对RSV的有效治疗方法,主要以对症支持疗法为主。近年国内外研究人员针对RSV新型预防治疗药物进行了大量研究,但只有帕利珠单抗（Palivizumab）被批准在美国高危婴幼儿群体中预防使用,单克隆抗体、融合抑制剂、免疫球蛋白、核蛋白抑制剂、病毒聚合酶抑制剂、小分子抑制剂等仍处于开发及临床实验阶段。本篇综述重点讨论了国内外RSV防治药物的研究进展。     

赤芍不同提取物抗病毒活性研究

目的:研究赤芍不同提取物的抗病毒活性。方法:采用细胞体外抗病毒实验法,结合CPE法及CCK-8试剂盒,以TI值(治疗指数)为研究指标,以利巴韦林为阳性对照药,研究赤芍不同提取物对呼吸道合胞病毒(RSV)、柯萨奇病毒(COX-B5)、手足口病毒(EV71)的抑制作用。结果:甲醇超声提取物具有抗RSV、COX-B5的效果,且抗COX-B5效果较好,对COX-B5的TI值为12.042。结论:赤芍不同提取物具有体外抗RSV、COX-B5的活性。     

呼吸道合胞病毒对上皮细胞TLR3/4和SOCS1/3表达的影响

目的:探讨呼吸道合胞病毒(RSV)感染上皮细胞中抗病毒信号激活以及细胞因子负调节系统对细胞因子分泌的影响。方法:应用ELISA法检测RSV感染人喉癌上皮细胞(Hep2)培养上清中0,1,2,4,8,12,24 h干扰素α(IFNα-)的浓度;RT-PCR检测病毒感染后各时段上皮细胞内细胞因子信号传导抑制因子(SOCS)1,3和Toll样受体(TLR)3,4的mRNA表达水平。结果:RSV感染上调Hep2细胞SOCS3 mRNA的表达(P<0.05),SOCS1的表达先增高后减低,但无统计学意义;TLR3,TLR4 mRNA的表达增高表现为时间依赖性(P<0.05);IFNβ-的表达在RSV感染后短暂升高而后迅速降低并低于基础表达量(P<0.05)。结论:RSV感染Hep2细胞后上调TLR3,TLR4和SOCS3 mRNA的表达,抑制IFN-α的分泌,提示病毒复制可能通过上调SOCS3而拮抗TLR途径激活的宿主抗病毒免疫应答。     

空心莲子草微乳体外抗RSV作用的实验研究

目的 用空心莲子草微乳进行细胞内抗呼吸道合胞病毒(RSV)的研究,以扩大该药新的抗病毒谱.方法 采用细胞病变效应法(CPE)、逆转录-PCR,观察检测空心莲子草微乳对Hep-2细胞的细胞毒性作用和抗RSV作用.结果 除320mg/ml组外,各药物浓度组处理的细胞均未见细胞的毒性反应.药物对RSV增殖的抑制作用随着药物浓度升高,细胞病变数减少,其半数有效浓度(IC50)为160 ug/ml.虽然各药物浓度组中均可检出RSV-RNA,但在药物对RSV抑制作用组,病毒滴度则随着药物浓度的增加而减少.结论 空心莲子草微乳对细胞的毒性作用低.该药虽不能直接杀灭RSV使细胞免受病毒的攻击,但对进入细胞内的病毒有抑制作用.