高效液相色谱-电喷雾质谱法测定人血浆克拉霉素浓度

目的 建立测定人血浆中克拉霉素浓度的高效液相色谱-电喷雾质谱(HPLC-MS/ESI)法。方法 血浆样本经处理后,直接在C₁₈色谱柱上用含甲酸的流动相洗脱,洗脱物通过ESI接口,以正离子模式电离,质谱仪以选择离子检测方式检测定量。结果 血浆克拉霉素浓度在18.0～4 000.0 ng·mL^-1之间线性关系良好,日内变异和日间变异在5.0%之内,回收率94.9%～104.3%。最低检测限18.0 ng·mL^-1。结论 该方法操作简便、快速、准确,适用于克拉霉素的人体药动学研究.     

HPLC-ESI-MS测定人血浆中多奈哌齐的浓度

目的 建立快速、灵敏的HPLC-MS检测方法测定人血浆中多奈哌齐浓度。方法 以马来酸氯苯那敏为内标,待测血浆经碱化处理后,经乙酸乙酯进行液-液萃取,采用Shim-pack ODS C₁₈柱(250 mm×2.0 mm,5 (m),以甲醇-0.1%醋酸溶液(60∶40)为流动相,流速0.2 mL·min^-1,柱温35 ℃。采用质谱电喷雾离子源正源(ESI⁺)将样品离子化,选择性离子监测(SIM)准分子离子峰。结果 多奈哌齐在0.1~16.0 ng·mL^-1内线性关系良好(r=0.999 8),最低定量限为0.1 ng·mL^-1。方法回收率为92.5%~105.3%,提取回收率均大于75%,批内与批间RSD均小于10%。结论 该方法简单,快速、灵敏度高、专属性强,适用于人血浆中多奈哌齐浓度的测定及药动学研究。     

HPLC-MS/MS测定人血浆阿奇霉素浓度及生物等效性研究

目的 建立人血浆中阿奇霉素的高效液相色谱/质谱/质谱(HPLC-MS/MS)测定法,测定受试者口服阿奇霉素颗粒后的血药浓度,并对受试制剂与参比制剂的生物等效性进行评价。方法 19名健康受试者采用随机双交叉试验设计,单剂量口服阿奇霉素颗粒受试制剂和参比药物各500 mg,用HPLC-MS/MS测定用药后不同时间血药浓度。血药浓度-时间数据经DAS 2.0统计软件处理,计算主要药动学参数,并进行两种制剂的生物等效性评价。结果 受试制剂和参比制剂的T_max分别为(2.5±1.1)h和(2.6±1.7)h,C_max分别为(574.6±209.2) ng·mL^-1和(594.5±229.9) ng·mL^-1,t_1/2分别为(44.7±15.2) h和(42.0±13.0) h,AUC_0-144分别为(5 319.6±2 507.8) h·ng·mL^-1和(5 710.7±2 710.1)h·ng·mL^-1,AUC^_0-∞分别为(5 704.2±2 858.7) h·ng·mL^-1和(6 010.0±2 808.1) h·ng·mL^-1, 以AUC_0-144计算,相对生物利用度为(94.2±15.7)%。两制剂的主要药动学参数无显著性差异。结论 受试制剂与参比药物生物等效。     

液相色谱-质谱-质谱联用法测定人血浆中氨氯地平

目的　建立测定人血浆中氨氯地平的液相色谱-质谱-质谱联用法。方法　血浆样品经液-液萃取后,以乙腈-水-甲酸(75∶35∶1)为流动相,采用ZorbaxC₈柱分离,通过电喷雾离子化四极串联质谱,以选择离子反应监测(SRM)方式进行检测。用于定量分析的二级碎片离子分别为m/z238(氨氯地平)和m/z116(内标4′-羟基普罗帕酮)。结果　线性范围为0.4-16.0ng·mL^-1,最低定量浓度为0.4ng·mL^-1,每个样品测试时间仅3.7min。在氨氯地平临床药物动力学研究项目中,应用此法可在两周内测试1500多个血浆样品。结论　该法灵敏度高,操作简便,快速、准确,适用于临床药物动力学研究。     

冰片对克林霉素透过小鼠血-脑脊液屏障的促进作用

目的 建立高效液相色谱-质谱联用（LC/MS）定量分析方法测定小鼠脑组织中的克林霉素,采用正交实验设计分析不同剂量冰片在不同时间促进克林霉素的跨血-脑脊液屏障作用. 方法 灌胃给予小鼠0,150,300,600 mg•kg^-1冰片溶液（PEG400溶解）,尾静脉注射克林霉素磷酸酯溶液40 mg•kg^-1,分别在15,30,45 min取样,脑组织匀浆样品经碱化醋酸乙酯提取后氮吹浓缩,采用双通道选择性离子抽提测定克林霉素和内标枸橼酸芬太尼,克林霉素和枸橼酸芬太尼的选择检测离子分别为m/z 425.20（［M+H］⁺）、m/z 337.30（［M+H］⁺）. 结果 该法可准确测定脑组织中克林霉素的浓度. 300 mg•kg^-1冰片灌胃在30 min时克林霉素在脑组织中的浓度较高与对照组比较差异有显著性. 结论 该分析方法准确、快速、专一性好. 冰片可以促进克林霉素进入脑组织.     

两种粒度紫河车粉的性状与放射免疫比较研究

目的 比较两种粒度的紫河车粉的性状及放射免疫指标。方法分别以常规粉碎及低温超细微粉碎法,得两种不同粒度的粉末,采用电镜扫描观测其特征,并采用放射免疫法测定两种粒度的紫河车粉中的人绒毛膜促性腺激素（HCG）、雌二醇（E₂）、孕酮（P）、睾丸酮（T）含量。结果两种粉末的电镜扫描结果有显著不同,免疫检测普通细粉中的激素含量分别为HCG：239.86 mU·mL^-1, E₂: 1 134 pg·mL^-1,P: 9.02 ng·mL^-1,T: 0.98 ng·mL^-1;超细粉的激素含量分别为HCG:375.18 mU·mL^-1,E₂: 1 721 pg·mL^-1,P: 21.07 ng·mL^-1,T: 1.27 ng·mL^-1。结论超细粉的电镜扫描其超细微的特征明显,各放射免疫指标明显高于普通细粉.     

HPLC–MS/MS测定赖诺普利血药浓度及其在药动学研究中的应用

目的 建立HPLC-MS/MS测定人血浆中赖诺普利的浓度并研究其药动学特征,为该药的临床应用提供依据。方法 20名健康受试者单剂量口服赖诺普利片20 mg后,采用HPLC-MS/MS测定其血药浓度,利用DAS软件对血药浓度-时间数据进行药动学模型拟合和参数计算,应用AIC法判别房室模型。结果 血浆中赖诺普利在2.0~200 ng·mL^-1内线性关系良好(r=0.997 5),平均回收率为88.8%,日内RSD≤6.62%,日间RSD≤13.0%。最佳房室模型为单室模型(Wi=1/C2, AIC=4.61),主要药动学参数t_1/2为(10.91±3.71)h,t_max为(6.65±1.50)h,C_max为(98.15±23.66)ng·mL^-1,Ka为(0.83±1.28)h^-1,Vd/F为(220.70±62.82)L,AUC_0-72为(1 437.41±399.68)ng·h·mL^-1,AUC_0-∞为(1 516.54±376.83)ng·h·mL^-1。结论 该分析方法专属性强、灵敏度高,适合大样本分析,满足临床血药浓度监测的要求并适用于药动学领域的研究。     

LC-MS/MS测定人血浆中哌甲酯

目的 建立LC-MS/MS测定人血浆中盐酸哌甲酯的浓度。方法 待测血浆1.0 mL,经1 mol·L^-1的氢氧化钠40 μL碱化后,用4 mL乙醚萃取处理,采用Eclipse XDB-C₁₈ (4.6 mm×150 mm,5 μm)色谱柱,以甲醇和水为流动相梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1。以电喷雾正离子源离子化,检测离子对盐酸哌甲酯为234.0/84.0,内标卡马西平为237.0/194.0。结果 血浆中内源性物质对测定无干扰,最低定量限为0.1 ng·mL^-1,在1~100 ng·mL^-1内盐酸哌甲酯线性关系良好(r=0.999 1),日内、日间RSD均小于8%,样品分析时间为10 min。结论 该法专属性强、灵敏度高,操作简便快速,测定结果可靠,适于进行盐酸哌甲酯血药浓度监测。     

高效液相色谱-质谱串联法测定人血浆特拉唑嗪的浓度

目的 建立一种简便、灵敏的测定人体血浆中特拉唑嗪浓度的高效液相色谱-质谱串联(HPLC-MS/MS)法. 方法 血浆样品采用叔丁基甲醚进行液相萃取后,进样分析. 采用Inertsil C₁₈色谱柱(2.1 mm×150 mm,3.0 μm),流动相:甲醇-水(2 mmol.L^-1醋酸铵)＝ 90:10,采用正离子、多反应监测方式测定样品浓度. 检测离子为m/z 388.4→m/z 247.4(特拉唑嗪)和m/z 384.2→m/z 231.3(哌唑嗪,内标). 结果 特拉唑嗪血浆样品在0.2～50.0 ng.mL^-1浓度范围线性关系良好(r＝0.997 3);最低定量浓度为 0.2 ng.mL^-1. 日内与日间相对标准偏差( RSD) 均<15%,回收率在 98.83%～100.67%,低、中、高绝对回收率分别为75.40%,70.28%,67.39%,符合生物样品分析要求. 结论 该方法简便快速、灵敏准确,适用于特拉唑嗪在人体内的药动学研究.     

改良RP-HPLC测定全血中环孢素A的浓度

目的 建立一种简便的RP-HPLC法测定全血中环孢素A(CsA)的浓度,为临床合理应用CsA提供依据。方法 全血样品1 mL经乙醚提取,正己烷洗涤去干扰后,采用Zorbax SB-C₁₈ 柱 (4.6 mm×150 mm,3.5 μm) 分离,流动相为乙腈-甲醇-水-异丙醇(60∶10∶29∶1),流速1.5 mL·min^-1,柱温70 ℃,检测波长210 nm;环孢素D(CsD)为内标。结果 CsA全血浓度在25~1 600 ng·mL^-1内线性关系良好(r=0.999 8),平均方法回收率99.51%,日内、日间RSD均小于5%,最低检测限5 ng·mL^-1。结论 本法简便快速,灵敏度高,重复性好,线性范围广。用于患者全血中CsA浓度监测,效果良好。     

LC-MS/MS同时测定朱砂中掺假染料猩红808和玫瑰红B的含量

目的 建立液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法同时测定朱砂中的掺假染料猩红808和玫瑰红B的含量。方法 采用Agilent ZORBAX SB-C₁₈(2.1 mm×50 mm,1.8 μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.1%甲酸溶液,流速为0.3 mL·min^-1,柱温为30 ℃,离子化方式为ESI,检测模式为MRM,选择离子对：①猩红808 m/z 368.1→275.1,m/z 368.1→219.1,m/z 368.1→77.1;②玫瑰红B m/z 443.2→399.2,m/z 443.2→355.0。结果 该方法猩红808和玫瑰红B的线性范围为10~200 ng·mL^-1和9.69~193.8 ng·mL^-1;检测限分别为2 ng·mL^-1和1.9 ng·mL^-1;回收率(n=6)分别为97.86%和97.34%,RSD为0.70%和0.73%;精密度、稳定性和重复性的RSD均<4%。结论 该方法提取简单,测定方法定量准确,确证性极高、灵敏高,适用于朱砂中红色染料猩红808和玫瑰红B的含量测定,还可为其他红色中药的安全检测提供了借鉴依据。     

HPLC/MS/MS法测定人血浆中内源性尿嘧啶及二氢尿嘧啶

目的　为评价人体内二氢嘧啶脱氢酶的活性,建立高效液相色谱 串联质谱联用的分析方法,测定该酶的底物以及催化产物在血浆中的基础浓度。方法　血浆样品液 液萃取后,以纯水为流动相,以DiscoveryAmideC₁₆ 色谱柱初步分离,经气动辅助电喷雾离子源负离子化,在三级四极杆质量分析器上以多反应离子监测(MRM)方式检测尿嘧啶(MRM m/z 111.0→41.9)和二氢尿嘧啶(MRM m/z 113.0→42.0 )。结果　尿嘧啶和二氢尿嘧啶的最低定量浓度分别为0.5ng·mL^-1 和5ng·mL^-1 ;线性范围分别为0.5 - 100ng·mL^-1 和5 - 1000ng·mL^-1 ,精密度和准确度符合生物样品分析要求。结论　此法专属、灵敏、准确,适用于测定生物样本中内源性尿嘧啶和二氢尿嘧啶的基础浓度。     

左炔诺孕酮分散片在健康人体中的药动学和生物等效性

目的 研究左炔诺孕酮分散片在人体内药动学和生物等效性。方法 采用双周期交叉试验设计,20名健康女性受试者随机交叉单剂量口服1.5 mg左炔诺孕酮试验制剂和参比制剂,以高效液相色谱-质谱联用法测定人血浆中左炔诺孕酮经-时血药浓度,用DAS Ver2.0软件计算药动学参数,评价两制剂的生物等效性。结果 左炔诺孕酮试验制剂和参比制剂的主要药动学参数C_max分别为(29.28(6.15) ng·mL^-1和(30.63(6.44) ng·mL^-1;T_max 分别为(1.71(0.24) h和(1.75(0.23) h;t_1/2分别为(17.56(6.07) h和(17.77(6.22) h;CL/F分别为(5.00(1.99) L·h^-1和(4.76(1.83) L·h^-1;AUC_0-t分别为(316.56(94.25) ng·h·mL^-1和(334.32(109.64) ng·h·mL^-1,AUC_0-t分别为(332.53(93.58) ng·h·mL^-1和(351.35(108.11) ng·h·mL^-1;试验制剂的AUC_0-t,AUC_0-∞,C_max的90%置信区间分别为参比制剂相应参数的89.1%～102.1%、89.0%～101.5%和91.8%～100.0%。以AUC_0-t计算试验制剂中左炔诺孕酮对参比制剂的相对生物利用度F为(96.85(18.23)%。结论 经方差分析及双单侧t检验结果显示, 试验制剂和参比制剂具有生物等效性。     

HPLC/MS法研究左旋黄皮酰胺及其代谢物在Beagle犬血浆中的药代动力学HPLC/MS法研究左旋黄皮酰胺及其代谢物在Beagle犬血浆中的药代动力学

目的用HPLC/MS法研究左旋黄皮酰胺［(-)-clau］及其代谢物6-羟基-黄皮酰胺(6-OH-clau)在Beagle犬血浆中的药代动力学过程。方法Beagle犬灌胃左旋黄皮酰胺30 mg·kg^-1，采集静脉血样，血浆经乙酸乙酯萃取分离后，用HPLC/MS选择性正离子检测内标(格列吡嗪，［M+H］⁺，m/z 446)法测定左旋黄皮酰胺(［M+H］⁺，m/z 298)及6-羟基-黄皮酰胺(［M+H-H₂O］⁺，m/z 296)的浓度，以甲醇-水-冰醋酸(60∶40∶0.8)为流动相，流速1.0 mL·min^-1。用3P97软件计算药代动力学参数。结果左旋黄皮酰胺和6-羟基-黄皮酰胺分别在1.0～200 ng·mL^-1和0.2～40.0 ng·mL^-1线性关系良好(r>0.999)，萃取回收率均大于85%。原药及其代谢物的体内过程均符合二室模型；左旋黄皮酰胺及6-羟基-黄皮酰胺的C_max分别为(21±10) ng·mL^-1和(3.9±2.2) ng·mL^-1；T_max分别为(0.8±0.5) h和(1.3±0.5) h；T_1/2α分别为(0.9±0.6) h和(1.4±0.6) h；T_1/2β分别为(19±23) h和(13±12) h；AUC_{0-24 h}分别为(69±14) h·ng·mL^-1和(12±7) h·ng·mL^-1。结论Beagle犬灌胃左旋黄皮酰胺后迅速吸收，血药浓度一相消除很快，但末端消除较慢；其代谢物6-羟基-黄皮酰胺血药浓度经时过程与左旋黄皮酰胺相似，但血药浓度相对较小。     

高效液相色谱法测定人血浆多柔比星浓度

目的建立测定人血浆多柔比星浓度的高效液相色谱法。方法固定相：Hypersil ODS C18分析柱（5 μm，46 mm×250 mm）；流动相：乙腈∶甲醇∶纯化水（32∶50∶18）；流速：1.0 mL·min^-1；荧光检测器激发波长：480 nm；发射波长：560 nm；以柔红霉素为内标，采用沉淀蛋白 脱水法提取样品。结果多柔比星、内标与人血浆中其他成分分离良好，在10～1 000 ng·mL^-1的范围内线性关系良好，相关系数r＝0.999 4（n＝5），回收率为 101.89%，日内及日间RSD均＜10%，最低检测限为3 ng·mL^-1。结论该法取样量小，操作简便快速，适用于临床多柔比星的血药浓度监测和药动学研究。     

LC-ESI-MS/MS快速测定人血浆中匹伐他汀浓度

目的 建立一种快速灵敏测定人体血浆中匹伐他汀浓度的高效液相色谱串联质谱检测方法。方法 以Agilent C18柱(4.6 mm×150 mm,3.5 μm)为色谱柱,流动相为甲醇-0.005 mol·L^-1甲酸铵水溶液-乙腈-1%甲酸水溶液(7.5∶2.5∶70∶20);流速：0.5 mL·min^-1,柱温：40 ℃。采用选择反应监测(SRM)对匹伐他汀(m/z 422.2→290.2)和内标瑞舒伐他汀(m/z 482.2→258.2)进行测定。结果 匹伐他汀高(80 μg·L^-1)、中(50 μg·L^-1)、低(0.25 μg·L^-1)3个浓度的平均回收率RSD均小于15%;线性范围为：0.1~100 μg·L^-1,回归方程为Y=1.222 6X-1.056 1×10^-4,r=0.996 0。结论 该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于匹伐他汀临床血药浓度监测和药动学研究。     

HPLC-MS法测定人血浆中克拉霉素含量的方法学研究

目的:建立人血浆中克拉霉素测定的 HPLC-MS 法。方法:血浆经1mol·L~(-1)氢氧化钠溶液碱化后,用乙醚提取。采用 Zorbax SB-C_(18)(150mm×2.1 mm,5μm)分析柱,以乙腈-水-冰醋酸(60:40:0.05)为流动相,流速为0.4 mL·min~(-1);用HPLC-ESI~+-MS 法,选择性离子检测方法。质谱检测参数如下:干燥气流速13 L·min~(-1),干燥气温度350℃,雾化气压207kPa,毛细管电压3000 V,碎片电压150 V。选择检测的离子为 m/z 748.5(克拉霉素),m/z 837.5(罗红霉素)。结果:血浆中克拉霉素检测方法的线性范围为0.01～10μg·mL~(-1),最低检测限可达1.1 ng·mL~(-1)。血浆中克拉霉素的方法回收率为92.7%～99.4%,日内 RSD<5.1%,日间 RSD<3.6%。结论:本法灵敏,准确,可用于克拉霉素的药代动力学研究。     

利伐沙班在老年非瓣膜性房颤患者中的药动学研究

目的 建立LC-MS/MS测定人血浆中利伐沙班的浓度并进行药动学研究。方法 人血浆样品用乙腈沉淀蛋白后,选用ZORBAX Eclipse XDB C₁₈色谱柱(2.1 mm×100 mm,3.5 mm),以乙腈-10 mmol醋酸铵溶液(含0.1%甲酸)为流动相梯度洗脱,流速为0.30 mL·min^-1,采用电喷雾离子化源,正离子方式,多反应监测扫描方式进行监测,用于定量分析的离子反应分别为m/z 436.2→m/z 145.2(利伐沙班)和m/z 256.1→m/z 165.2(内标苯海拉明)。结果 血浆中利伐沙班的线性范围为5.0~1 000 ng·mL^-1(r=0.995 8),定量下限为5.0 ng·mL^-1;方法回收率为94.1%~106.7%;日内、日间RSD均<15%;提取回收率为84.4%~91.3%,无明显基质效应。结论 该方法快速、灵敏、准确、专属性强、重复性好,适用于人血浆中利伐沙班的血药浓度检测和药动学研究。     

液相色谱-串联质谱法测定大鼠血浆中的汉黄芩素

目的建立测定大鼠血浆中汉黄芩素浓度的液相色谱-串联质谱法。方法血浆样品经液-液萃取后,进行色谱分离,采用三重四极杆串联质谱检测,使用大气压化学电离源(APCI),在正离子条件下选择反应监测(SRM)方式进行扫描,用于定量分析的离子分别为m/z 284.8→m/z 269.5(汉黄芩素)和m/z 254.7→m/z 198.5(葛根黄豆苷元,内标)。结果线性范围为0.25～20 ng·mL^-1,最低定量浓度为0.25 ng·mL^-1。以质控样品(QC)计算,在各浓度水平下,此法的批内精密度(RSD)为2.2%～13.1%,批间精密度为5.9%～7.3%;准确度(RE)为-0.3%～1.3%。结论 此法灵敏、快速、准确,可用于大鼠血浆中汉黄芩素浓度测定及临床前药动学研究。     

HPLC-MS法测定血浆中克林霉素的浓度

目的 建立快速测定人体血浆中克林霉素浓度的高效液相色谱-质谱测定法。方法 血浆样品以甲醇沉淀蛋白,直接将上清液酸化后进行HPLC-MS分析,色谱柱为Lichrospher C₁₈柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为40 mmol·L^-1乙酸铵缓冲液(pH 4.1)-甲醇(30∶70,V/V);内标为林可霉素;检测离子(m/z):425.2(克林霉素[M+H]⁺)、407.3(内标林可霉素[M+H]⁺)。结果 血浆标准曲线线性范围为0.01007 mg·L^-1～10.07 mg·L^-1,高、中、低3种浓度的批内和批间精密度均小于10.0%,提取回收率为87.0%～92.4%。20名健康受试者随机交叉口服受试制剂和参比制剂各300 mg后,用HPLC-MS法测定血浆中克林霉素血药浓度,用面积法估算的受试制剂的相对生物利用度为(100.3±10.5)%。结论 建立的HPLC-MS分析方法快速、灵敏、准确、简便,适用于临床药代动力学研究。